葉下珠薄層鑒別方法研究

1、    葉下珠薄層鑒別方法研究    陳舒憶 李美位 唐藝【摘 要】目的：采用薄層色譜法，建立葉下珠的薄層鑒別方法，為其質(zhì)量控制提供依據(jù)。方法：以甲醇為提取溶劑，葉下珠為對照藥材，沒食子酸為對照品，醋酸為展開劑在聚酰胺薄膜上展開，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液顯色，對葉下珠進行薄層色譜鑒別研究。結(jié)果： 供試品溶液在與對照藥材和對照品相應(yīng)位置上顯相同顏色的清晰斑點。結(jié)論：本方法簡便、快捷，重現(xiàn)性好，檢出斑點清晰，可作為葉下珠的薄層鑒別方法?！娟P(guān)鍵詞】葉下珠;薄層鑒別;質(zhì)量標準： r284.1 ： a： 2095-2457（2019）03-0035-002doi：

2、10.19694/ki.issn2095-2457.2019.03.011thin layer chromatography identification of phyllanthus urinaria linnaeuschen shu-yi li mei-wei tang yi*（guiyang inspection center for food and drug，guiyang guizhou 550081，china）【abstract】objective to establish a thin layer chromatography identification method of

3、 phyllanthus urinaria linnaeus，and to provide experimental basis for quality control standard. method methanol was used as extracting solvent. phyllanthi urinariae herba was used as contrast material， gallic acid was used as the reference material. phyllanthus urinaria linnaeus was identified with a

4、cetic acid as mobile phase， polyamide film as stationary phase and chloride ferric （1%） as color developing reagent. result the test solution showed clear spots of the same color at the corresponding positions with the contrast material and the reference material. conclusion the method was simple， r

5、apid， and reproducible， the spots were clear and easy to be identified. it can be used for tlc identification of phyllanthus urinaria linnaeus.【key words】phyllanthus urinaria linnaeus; tlc; quality standard葉下珠為大戟科植物葉下珠 phyllanthus urinaria linnaeus 的干燥全草，為民間習用中藥材，全草藥用，有瀉火明目、清熱，利濕，解毒，消腫等功效，在臨床上用于慢性乙型

6、病毒性肝炎的治療1。葉下珠的活性成分中，沒食子酸含量最高，有抗病毒作用2。葉下珠已被多省收載為中藥材地方標準，但薄層鑒別的研究較少。薄層鑒別是快速、靈敏、高效地鑒別中藥材真?zhèn)蔚姆椒?，故本文對葉下珠的薄層鑒別方法進行了研究，進一步完善了葉下珠的質(zhì)量標準。1 儀器與材料賽多利斯bsa224s電子天平;超聲波清洗器;微量毛細管;聚酰胺薄膜（國藥集團化學試劑有限公司）;硅膠g薄層板（青島海洋化工廠）;雙槽玻璃層析缸。葉下珠對照藥材（批號：121374-201802，中國食品藥品檢定研究院），沒食子酸對照品（批號：110831-201605，中國食品藥品檢定研究院）。甲醇、乙醇、醋酸、丙酮、三氯化鐵、乙

7、醚、石油醚、氯仿、硫酸、乙酸乙酯、甲酸均為分析純。樣品采至于貴州各個縣市及周邊省份。樣品來源有銅仁思南、凱里麻江、凱里平茶、畢節(jié)威寧、四川瀘州、福建泉州、四川成都、云南昭通、廣西欽州、廣東梅州。2 方法與結(jié)果稱取葉下珠0.5g，加甲醇5ml，超聲處理10分鐘，振搖10分鐘，離心，取上清液，濃縮至1ml，作為供試品溶液。稱取葉下珠對照藥材0.5g，按供試品制備方法制得對照藥材溶液。另取沒食子酸對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作為對照品溶液。參照中國藥典（2015年版）薄層色譜法，分別吸取供試品、對照藥材溶液3l，點樣于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開劑展開，晾干后噴以1%三氯化鐵乙醇溶液顯

8、色，日光下檢視。結(jié)果見圖1。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。3 討論本文考察了不同的提取方法、展開體系、點樣量、環(huán)境條件等因素對薄層色譜結(jié)果的影響。3.1 不同提取方法的比較試驗比較了4種溶劑提取方法，（1）取樣品加50%甲醇超聲提取，離心，上清液濃縮作為供試品溶液3-4。（2）取樣品加甲醇超聲提取，離心，上清液濃縮作為供試品溶液。（3）取樣品加乙醇振搖提取，濾過，濾液濃縮，加硅膠裝柱，棄去乙醚洗脫液，收集乙醇洗脫液，濃縮作為供試品溶液5。（4）取樣品加無水乙醇超聲提取，離心，上清液蒸干，石油醚浸泡后棄去，殘渣加乙醇作為供試品溶液6。綜合考慮提取效果及操作便捷等因素

9、，在相同薄層條件下，選取方法（2）作為葉下珠薄層鑒別的提取方法。3.2 不同展開體系比較綜合文獻研究，本文實驗考察了（1）聚酰胺薄膜為載體，醋酸為展開劑，1%三氯化鐵乙醇溶液顯色的展開體系3;（2）硅膠g薄層板為載體，氯仿-甲醇（7.51）為展開劑，10%硫酸乙醇溶液加熱顯色的展開體系5;（3）硅膠g薄層板為載體，正己烷-乙酸乙酯（2：1）為展開劑，10%硫酸乙醇溶液加熱顯色，紫外光燈365nm下檢視的展開體系;（4）聚酰胺薄膜為載體，乙醇為展開劑，1%三氯化鐵乙醇溶液顯色的展開體系6;（5）硅膠g薄層板為載體，氯仿-乙酸乙酯-甲酸（641）為展開劑，2%三氯化鐵乙醇加熱顯色的展開體系4等。結(jié)

10、果表明，以聚酰胺薄膜為載體，醋酸為展開劑，1%三氯化鐵乙醇溶液顯色的展開體系分離效果最好，斑點清晰，重現(xiàn)性好。3.3 不同點樣量的比較試驗分別對1l、2l、3l、5l點樣量進行了考察。結(jié)果表明，當點樣量過小時，沒食子酸檢出斑點不清晰，選擇3l為最佳點樣量。3.3 不同環(huán)境條件的比較分別考察不同溫度和濕度對薄層鑒別結(jié)果的影響。溫度考察40，25，10;濕度考察80%，60%，40%。結(jié)果顯示，不同的溫濕度條件對結(jié)果影響很小，斑點穩(wěn)定性和重現(xiàn)性強。薄層色譜作為一種專屬性高、便捷高效的鑒別方法，在中藥分析中應(yīng)用非常廣泛。綜上，本文研究建立了葉下珠的薄層鑒別方法，為葉下珠的定性鑒別提供參考，對葉下珠標準的完善和提高具有一定的指導意義?！緟⒖嘉墨I】1劉亞梅.葉下珠復方聯(lián)合拉米夫定治療拉米夫定耐藥性乙型肝炎20例j.陜西中醫(yī)，2010，31（1）：15-17.2楊琳媛，趙燕，呂卓.hplc法測定不同產(chǎn)地葉下珠中沒食子酸的含量j.陜西中醫(yī).2014，35（10）：1416-1417.3冀德富，郭東艷，裴妙榮，崔春利.葉下珠的薄層鑒別及其多酚類成分的含量測定j.中國實驗方劑學雜志.2009，15（11）：14-