2010.12-SPF雞(胚)行業(yè)分析報(bào)告

1、spf雞（胚）分析報(bào)告第一章spf雞（胚）概述一、基本定義spf( specific pathoge free) 雞即無(wú)特定病原雞，一般指飼養(yǎng)于可控環(huán)境中，不能檢出國(guó)際、國(guó)內(nèi) ( 尤其是國(guó)內(nèi) )流行的雞主要傳染病的病原，具有良好的生活力和繁殖性能的雞群。其所產(chǎn)的受精卵即為spf 雞胚。spf 雞及 spf 雞胚因其微生物學(xué)上的相對(duì)純凈性而成為病毒學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、病理學(xué)研究及生物制品生產(chǎn)、檢驗(yàn)中不可缺少的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)材料。二、 spf 雞（胚）的起源及發(fā)展實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在科研、疾病診斷、 疫苗、 血清制品及輸液和其它藥品的管理方面是一項(xiàng)基礎(chǔ)的工作，是科學(xué)研究的支撐平臺(tái)和活的試劑。spf 雞如同其它種

2、等級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一樣，也是由不斷發(fā)展的需求催生出來(lái)的。1911年，rous和murphy首次將雞胚應(yīng)用于病毒研究，但早期的研究者并沒(méi)有意識(shí)到雞胚可能攜帶不需要的病原微生物，而這些感染的病原微生物可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，直到woodrut和goodpasture 在研究禽痘病毒時(shí)，才開(kāi)始意識(shí)到雞胚中隱性病毒的危害。1899年m schottelines首先嘗試培育無(wú)菌雞。1908年m cobendy， 1 935年 kimura， naito和kobayashi ，1943年i a reynievs 和pctrexier等先后獲得了無(wú)菌雞；1948年，loband小組飼養(yǎng)的無(wú)菌雞產(chǎn)卵，并孵化成功。

3、不同于哺乳實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通過(guò)剖腹產(chǎn)的方法獲得無(wú)菌動(dòng)物，最早的無(wú)菌雞是由高齡健康母雞傳代獲得的。這些雞盡管所產(chǎn)種蛋有較高的母源抗體，但幾乎不攜帶致病微生物，孵化后放入隔離器中，經(jīng)不斷選育、檢測(cè)，最終獲得了無(wú)菌雞。從上世紀(jì)初到60年代，由于美國(guó)家禽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展和禽病研究的需要，人們?cè)絹?lái)越認(rèn)識(shí)到雞胚中可能攜帶垂直傳播的病原和獲得清除了這些病原的雞和雞胚的必要性。由于無(wú)菌雞的飼養(yǎng)和維持非常昂貴，不利于大規(guī)模應(yīng)用，而通過(guò)無(wú)菌雞選育培養(yǎng)得到的spf 雞即經(jīng)濟(jì)又健康，同時(shí)知其微生物狀態(tài)，隨著二十世紀(jì)七十年代以后,空氣凈化等技術(shù)的發(fā)展, 為spf 動(dòng)物的飼養(yǎng)提供了可靠的技術(shù)保證， 飼養(yǎng)量迅速增加， 利用 spf 雞

4、胚和 spf 雞來(lái)生產(chǎn)生物制品就成為必然。1959年，美國(guó)農(nóng)業(yè)部地區(qū)家禽研究所建立了實(shí)驗(yàn)性的spf 雞群。 1961年， spafas 公司成為了世界上第一家商業(yè)性spf 雞生產(chǎn)企業(yè)，1965年開(kāi)始向市場(chǎng)出售spf 種蛋。從那時(shí)起，spf雞和種蛋獲得了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。我國(guó)spf 雞群的飼養(yǎng) , 開(kāi)始于 20 世紀(jì) 80 年代。山東家禽研究所朱果等設(shè)計(jì)建設(shè)了一組凈化實(shí)驗(yàn)室, 飼養(yǎng) spf 雞群獲得成功。 從此 , 中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所、 北京市獸醫(yī)生物藥品廠、北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心等單位先后建成了生產(chǎn)規(guī)模的spf 雞群, 并將 spf 雞群應(yīng)用于疫苗生產(chǎn)。此后, spf 種蛋在科研和疫苗生產(chǎn)中的應(yīng)用逐

5、步擴(kuò)大，目前我國(guó)約有 20家左右的 spf 種蛋生產(chǎn)單位。第二章spf雞（胚）的生產(chǎn)及應(yīng)用一、 spf 雞的生產(chǎn)1、優(yōu)質(zhì)的 spf 雞種源目前我國(guó)spf雞種源主要依靠國(guó)外引進(jìn)，不僅耗費(fèi)大量外匯， 而且由于商業(yè)壟斷因素，種源很難提供，引進(jìn)的種蛋遺傳背景資料不清，近交程度不確切，生產(chǎn)性能不高，而且由于質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的不同，存在潛在的外源病毒風(fēng)險(xiǎn)。這不僅嚴(yán)重影響生物制品生產(chǎn)和科研的重復(fù)性和穩(wěn)定性，而且是對(duì)昂貴設(shè)施的巨大浪費(fèi)。因此， 培育優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的spf雞種雞群成為一項(xiàng)迫切的任務(wù)。欣慰的是， 哈爾濱獸醫(yī)研究所、 山東省家禽研究所等單位在spf種雞群的培育方面已經(jīng)作了大量的基礎(chǔ)工作，或加以政策的支持和引導(dǎo)

6、，必能為我國(guó)spf雞產(chǎn)業(yè)的持續(xù)發(fā)展起到有力的促進(jìn)作用。2 spf雞的生長(zhǎng)環(huán)境spf 雞的環(huán)境包括氣候因素、物理、化學(xué)因素和居住因素、營(yíng)養(yǎng)因素和生物因素在下面分項(xiàng)單獨(dú)敘述。21 居住因素目前 spf 雞的飼養(yǎng)設(shè)施有兩種：一是隔離系統(tǒng)，也就是通常所說(shuō)的隔離器，材質(zhì)有玻璃鋼、不銹鋼等； 二是屏障系統(tǒng)， 以一定建筑圍護(hù)結(jié)構(gòu)配以?xún)艋L(fēng)系統(tǒng)等設(shè)備以便大規(guī)模飼養(yǎng)的設(shè)施，材料有彩鋼板、玻璃鋼、不銹鋼和磚混等。隔離系統(tǒng)由于人與動(dòng)物不直接接觸，可長(zhǎng)時(shí)間保持雞群的微生物學(xué)狀態(tài)，最適于保種， 但其空間狹小， 單位造價(jià)昂貴，不適合大規(guī)模飼養(yǎng)。屏障系統(tǒng)單位造價(jià)較低，空間可擴(kuò)展性高，適于大規(guī)模飼養(yǎng)，可有效降低成本。但由于

7、動(dòng)物與人直接接觸，不利于保持雞群的微生物學(xué)狀態(tài)，一定時(shí)間后必須重新引種，更換種群。但不管哪種設(shè)施，都要求圍護(hù)結(jié)構(gòu)有良好的氣密性，耐腐蝕、耐沖擊、耐消毒，不易產(chǎn)塵和無(wú)眩光。屏障系統(tǒng)以籠具飼養(yǎng)spf 雞，鐵質(zhì)的居多( 冷拔鋼絲網(wǎng)片鍍鋅或鍍塑) ，也有不銹鋼制的，但因造價(jià)高極少應(yīng)用。因不同階段可分為育雛籠、育成籠、成雞籠等；食槽多工程塑料制，耐沖洗、耐腐蝕；飲水設(shè)備一般為乳頭式飲水器。22 氣候因素和物理、化學(xué)因素在spf 雞的日常飼養(yǎng)中，這兩種因素是最主要的，尤其是換氣次數(shù)、凈化級(jí)別和落下菌數(shù)。只有有效控制了這些環(huán)境因素，spf 雞才有可能健康生長(zhǎng)、生產(chǎn)和繁殖。 spf 雞環(huán)境及設(shè)施指標(biāo)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(

8、gbl4925 2001, 見(jiàn)附件 1) 。3 spf雞的飼料與飲水31 spf雞的營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)目前，發(fā)達(dá)國(guó)家都有自己的spf 雞標(biāo)準(zhǔn)的飼料配方，但國(guó)際上還沒(méi)有通用的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，只有參考標(biāo)準(zhǔn)，國(guó)內(nèi)外差異并不大。國(guó)內(nèi)外的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)附件 2。32 spf雞飼料的滅菌spf 雞的飼料不允許在其中添加抗菌素類(lèi)藥物，都需要經(jīng)滅菌才能飼喂spf 雞。滅菌一般有二種：鈷 60輻照法和高壓蒸氣滅菌法。321 鈷60輻照滅菌時(shí)先將飼料用真空包裝機(jī)抽空打包，一般根據(jù)雞舍的每日需要量確定單包重量，然后以鉆60輻照，吸收劑量一般為250萬(wàn)拉德。這種方法營(yíng)養(yǎng)損失較少，飼料儲(chǔ)存期長(zhǎng)，但造價(jià)較高，且受鉆60源分布地點(diǎn)影響。322

9、采用高壓蒸汽滅菌法時(shí)，先將飼料分裝小包，包裝材質(zhì)應(yīng)透氣、耐高溫、高壓，重量以平鋪于網(wǎng)柵時(shí)厚度不超過(guò)3 cm為宜，一般以 12120分鐘即可達(dá)到滅菌目的，更高溫度短時(shí)間滅菌也可以達(dá)到效果。這種方法營(yíng)養(yǎng)損失較多，飼料儲(chǔ)存期短， 但造價(jià)較低， 且方便、快捷。323 滅菌后的飼料必須進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查，陰性者方可飼喂。另外要定期檢查滅菌飼料的營(yíng)養(yǎng)成份，營(yíng)養(yǎng)缺失部分要及時(shí)補(bǔ)充。33 spf雞飲水的消毒spf 雞飲水的消毒方法有很多，如煮沸，反滲過(guò)濾法，臭氧發(fā)生器消毒法，鹽酸酸化法等，其中以鹽酸酸化法應(yīng)用最為廣泛。一般將飲水置一容器中，按體積以1：1 000比例加入濃鹽酸，以 ph 試紙測(cè)定 ph值在 20左

10、右， 作用 1小時(shí)后即可達(dá)到良好的滅菌效果，可以使用。spf 雞飲水一般比照普通雞不同階段的需求量，根據(jù)實(shí)際需要保證供給。4 嚴(yán)格的 sop 體系建立sop 即標(biāo)準(zhǔn)操作程序(standard operation procedure)，就是將某一事件的標(biāo)準(zhǔn)操作步驟和要求以統(tǒng)一的格式描述出來(lái)，用來(lái)指導(dǎo)和規(guī)范日常的工作。針對(duì) spf 雞的生產(chǎn)管理，制定各種規(guī)章制度，以及生產(chǎn)中的各種操作規(guī)范，就是將生產(chǎn)程序中的關(guān)鍵控制點(diǎn)進(jìn)行細(xì)化和量化。嚴(yán)格、 科學(xué)的 spf 雞群群飼養(yǎng)管理制度是培育、生產(chǎn)出高質(zhì)量雞群的必要條件。為此，必須應(yīng)用 sop 控制所有人流、物流和動(dòng)物流，規(guī)范人員的進(jìn)出和操作。使得人員操作規(guī)范

11、統(tǒng)一，保證了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)的各個(gè)環(huán)節(jié)一致，減少人為操作帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)。5 可靠的 spf 雞群質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)定期對(duì)spf雞群進(jìn)行抽樣檢查，是了解雞群健康狀況，判斷spf雞群是否保持spf狀態(tài)的必要手段。嚴(yán)格而準(zhǔn)確的微生物監(jiān)測(cè)是進(jìn)行spf 雞正常生產(chǎn)的關(guān)鍵措施。國(guó)際上spf 雞群的微生物控制標(biāo)準(zhǔn)不同，但有共識(shí)。主要的包括美國(guó)農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)科技備忘錄（800.65） 、歐洲藥典規(guī)程和中華人民共和國(guó)國(guó)標(biāo)gb/t17999.1-2008 ，我國(guó)企業(yè)的質(zhì)量控制依照 gb/t17999.1-2008 規(guī)定。二、 spf 雞的國(guó)家質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)與監(jiān)測(cè)方法檢測(cè)的病原種類(lèi)由不同的國(guó)家和機(jī)構(gòu)制定標(biāo)準(zhǔn)，主要標(biāo)準(zhǔn)包括美國(guó)農(nóng)業(yè)部（u

12、sda）標(biāo)準(zhǔn)、歐洲藥典、中華人民共和國(guó)國(guó)標(biāo)gb/t17999.1-2008等。由于人們對(duì)疫病的認(rèn)識(shí)有一個(gè)不斷深化的過(guò)程， 因此特定病原的含義也在不斷的發(fā)展和完善。一般來(lái)說(shuō)， 國(guó)際上控制的雞傳染病仍以 16 種傳染病為主, 即1種細(xì)菌病 （ 雞白痢 ， sp）， 2種霉形體病 （ 雞毒霉形體 mg，滑液囊霉形體ms） 和 13 種病毒病 （ 雞痘 fp、雞新城疫 nd、禽白血病 al、禽腦脊髓炎ae、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥re、雞馬立克病 md、傳染性喉氣管炎ilt、傳染性法氏囊炎ibd、禽呼腸孤病毒 aro 、禽腺病毒 aa、產(chǎn)蛋下降綜合癥eds76 、禽流感 ai和傳染性支氣管炎ib) , 這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)

13、是國(guó)際統(tǒng)一的。在這16種傳染病當(dāng)中 ， 著重控制 4 種經(jīng)卵垂直傳染的傳染?。?雞白痢、雞毒霉形體病、滑液囊霉形體病和禽白血病。各國(guó)根據(jù)不同國(guó)情， 不同疫病流行狀況， 在此基礎(chǔ)上又增加或減少了一些控制項(xiàng)目， 我國(guó)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（gb/t17999.1-2008，見(jiàn)附件 3）中增加了副雞嗜血桿菌（hp ）、多殺性巴氏桿菌（ pm ）、雞傳染性貧血病毒的檢測(cè)，相應(yīng)減少了產(chǎn)蛋下降綜合癥的檢測(cè)。這些疫病的檢測(cè)方法主要有: 瓊脂擴(kuò)散法 ( agp) 、血清平板凝集實(shí)驗(yàn)( spa) 、血凝抑制實(shí)驗(yàn) ( hi) 和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)( elisa) 等。各生產(chǎn) spf 種蛋的公司 , 根據(jù)供應(yīng) spf 種蛋的不同

14、用途, 確定不同的標(biāo)準(zhǔn), 采用不同的檢測(cè)項(xiàng)目和檢測(cè)方法。標(biāo)準(zhǔn)越高, 被檢測(cè)的項(xiàng)目越多, 方法越復(fù)雜 , spf 種蛋的價(jià)格就越貴。一般來(lái)說(shuō) , 供傳代或研究用的spf 種蛋較貴 , 做疫苗生產(chǎn)的spf 種蛋便宜一些。需要指出的是 , 藥廠在簽定 spf 種蛋供應(yīng)合同時(shí), 一定要將種蛋的標(biāo)準(zhǔn)、檢測(cè)項(xiàng)目、檢測(cè)方法、抽檢比例、間隔時(shí)間以及發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后的處理等項(xiàng)內(nèi)容列出, 以確保合同雙方的利益。大多數(shù)檢測(cè)樣品為血清和種蛋，特殊情況下可檢測(cè)羽髓(mdv)或進(jìn)行細(xì)菌分離。采集方式為隨機(jī)，應(yīng)盡量擴(kuò)大監(jiān)測(cè)范圍，增加代表性，檢測(cè)種蛋有兩種目的：一是檢測(cè)種蛋中是否含 alv 群特異性抗原(p27蛋白 ) ；二是評(píng)價(jià)

15、雞胚對(duì)aev 的敏感性?，F(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的監(jiān)測(cè)周期是根據(jù)經(jīng)濟(jì)成本，病原微生物感染擴(kuò)散所需時(shí)間，易檢出最佳時(shí)間，該微生物在spf 雞微生物控制中的重要性等諸方面因素綜合確定的。我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定： 開(kāi)產(chǎn)前， 100抽樣， 檢測(cè) alv、 mg 、 ms 和sp 產(chǎn)蛋期，每隔 68周，按515采樣，檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的所有項(xiàng)目。種蛋采集應(yīng)新鮮。alv 的檢查，每群送檢200枚蛋 ( 少于200只的雞群全群取樣) ，每只取蛋 1枚。 aev 雞胚敏感試驗(yàn)，每群50枚( 少于 50只的雞群全群取樣 ) ，每只取蛋 1枚，其它病原微生物感染檢測(cè)時(shí)，產(chǎn)蛋雞按5抽樣，少于 200只的雞群按10 15抽樣。三、 spf

16、 雞（胚）的應(yīng)用價(jià)值1、為禽病研究提供優(yōu)良的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用spf雞作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，可排除非研究病原體的干擾作用。作為實(shí)驗(yàn)感染， 有利于對(duì)疾病發(fā)生、變化進(jìn)行分析。試驗(yàn)結(jié)果可為防治措施的制定提供可靠科學(xué)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)是醫(yī)學(xué)、生物學(xué)發(fā)展的重要基礎(chǔ)。按微生物控制程度對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行分類(lèi), 共分成 5個(gè)不同級(jí)別 , 即普通動(dòng)物、清潔動(dòng)物、無(wú)特定病原( spf) 動(dòng)物、悉生動(dòng)物和無(wú)菌動(dòng)物, 不同的科學(xué)實(shí)驗(yàn)需要不同級(jí)別的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。普通動(dòng)物和清潔動(dòng)物由于在普通環(huán)境下飼養(yǎng), 暴露在微生物的環(huán)境中, 可能帶有不同抗體, 會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果, 應(yīng)用受到一定限制。悉生動(dòng)物和無(wú)菌動(dòng)物由于培育和飼養(yǎng)都相當(dāng)困難, 價(jià)格昂貴 , 因

17、此僅在發(fā)病機(jī)理等基礎(chǔ)理論的研究中應(yīng)用。而 spf 動(dòng)物界于二者之間, 雖在屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng), 卻僅排除了各種已知傳染病的干擾, 對(duì)維持動(dòng)物正常生理活動(dòng)的有益細(xì)菌未加限制, 保證了動(dòng)物的正常生理需要, 降低了飼養(yǎng)難度和飼養(yǎng)成本。這些有益細(xì)菌又不會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,所以 spf 動(dòng)物可以滿(mǎn)足很多試驗(yàn)的要求 , 得到了極為廣泛的應(yīng)用。由于 spf 動(dòng)物不攜帶特定病原, 因此世界衛(wèi)生組織向世界各國(guó)推薦 , 要把 spf 動(dòng)物作為人用和獸用疫苗的動(dòng)物性原材料。要證明一個(gè)生物學(xué)規(guī)律, 必須有合乎標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)必須統(tǒng)一, 才能進(jìn)行交流, 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的比較。 一個(gè)生物學(xué)試驗(yàn), 不論設(shè)計(jì)多么合理, 實(shí)驗(yàn)多

18、么精細(xì), 只要實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不符合要求, 就不會(huì)被國(guó)際學(xué)術(shù)界承認(rèn)。毫不夸張地說(shuō), 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的水平, 標(biāo)志著一個(gè)國(guó)家的科學(xué)水平。要發(fā)展獸醫(yī)科學(xué), 必須高度重視實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。在沒(méi)有使用 spf 動(dòng)物之前 , 有時(shí)可以見(jiàn)到這樣的報(bào)道: 某種病毒的雞胚最小致死量為若干毫升病毒原液, 但其他人幾乎不可能重復(fù)這個(gè)實(shí)驗(yàn)。或報(bào)道: 某兩種病毒在同一個(gè)雞胚里可以共同生長(zhǎng), 且有明顯的共生促進(jìn)作用, 而其他人的實(shí)驗(yàn)卻往往得出完全不同的結(jié)論。原因之一就是使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不標(biāo)準(zhǔn), 使人們無(wú)法探詢(xún)科學(xué)的真正規(guī)律。在疫苗生產(chǎn)中使用不標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物得到的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),就可能造成產(chǎn)品報(bào)廢或更嚴(yán)重的后果。使用 spf 動(dòng)物以后 ,

19、大家有了共同的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ), 提高了實(shí)驗(yàn)研究的水平, 促進(jìn)了科學(xué)交流。所以 , spf 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有極其重要的作用。2、繁殖種毒、病毒學(xué)研究進(jìn)行雞胚培養(yǎng)； 提供細(xì)胞制備原材料；用于種毒傳代； 制備高免血清。 可保持毒種純凈、血清的特異性和高效價(jià)。3、人、畜、禽多種活疫苗的制造和疫苗質(zhì)量鑒定雞胚廣泛應(yīng)用生物制品中，應(yīng)用spf 雞胚能 提高產(chǎn)品純度以及效價(jià)。who 規(guī)定，人用活疫苗如小兒麻疹，黃熱病，狂犬病等活疫苗的生產(chǎn)，必須使用spf雞胚。國(guó)外如日、美、荷等國(guó)已把利用spf 種 蛋制備疫苗列入生產(chǎn)規(guī)程，并制定了法律，必須嚴(yán)格遵守。利用spf 雞胚制苗，半成品污染率大大降低，雞胚利用

20、率明顯提高，節(jié)省人力物力，在檢驗(yàn)過(guò)程中，spf 雞胚能正確及時(shí)地反映產(chǎn)品質(zhì)量，減少?gòu)?fù)檢，縮短了產(chǎn)品檢驗(yàn)周期，具有較高的經(jīng)濟(jì)效益。研究表明：用spf雞胚制備新城疫、法式囊、傳染性支氣管炎等病毒活疫苗，不僅質(zhì)量大大提高，生物制品效價(jià)也獲得提高。此外，spf 雞胚還廣泛應(yīng)用于疫苗鑒定。因?yàn)?spf 雞胚不攜帶垂直傳染的病毒, 用其制苗杜絕了由于雞胚帶毒可能造成的疫苗污染 , 使用 spf 雞胚制苗 , 可使疫苗的質(zhì)量明顯提高。要衡量病毒的多少, 往往使用雞胚半數(shù)感染量這一概念。雞胚標(biāo)準(zhǔn)不統(tǒng)一, 測(cè)出的結(jié)果也不會(huì)一致。spf 雞群的建立 , 以及 spf 雞胚在疫苗生產(chǎn)中的廣泛應(yīng)用, 對(duì)疫苗生產(chǎn)產(chǎn)生了

21、重大影響。 應(yīng)用 spf 雞胚 , 建立了檢測(cè)基礎(chǔ), 統(tǒng)一了病毒的度量單位, 測(cè)出的結(jié)果基本一致。這樣 , 獸藥廠可以按病毒滴度組織生產(chǎn), 安排配苗 , 并控制產(chǎn)品出廠的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。盡管細(xì)胞法培育病毒的技術(shù)有了巨大進(jìn)步, 但細(xì)胞培養(yǎng)的病毒液不經(jīng)濃縮, 往往達(dá)不到雞胚法培養(yǎng)的病毒滴度, 二者至少相差1 個(gè)滴度以上。 由于雞胚法制苗具有材料易得、方法簡(jiǎn)便的特點(diǎn) , 因此被世界各國(guó)廣泛采用。利用spf 雞胚培育病毒可以獲得比普通雞胚培育高得多的病毒滴度, 這種方法受到各生物制品廠家的高度重視。在使用普通雞胚的條件下, 可能存在多種抗體的干擾, 病毒的復(fù)制速度和復(fù)制程度很難確認(rèn)。應(yīng)用 spf 雞胚制苗

22、, 可以杜絕母源抗體的干擾, 有助于研究人員從本質(zhì)上認(rèn)識(shí)病毒的復(fù)制規(guī)律。例如,新城疫病毒可以在spf 雞胚中大量復(fù)制, 獲得在普通雞胚中達(dá)不到的高水平復(fù)制。正是由于病毒在雞胚中的高度復(fù)制, 為疫苗生產(chǎn)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)效益。通常1個(gè)spf 種蛋所能生產(chǎn)的病毒量, 至少相當(dāng)于 10個(gè)普通種蛋的病毒產(chǎn)量。正是由于這樣的高產(chǎn)量, 在雞胚自動(dòng)接種機(jī)和收獲機(jī)廣泛使用的今天, 發(fā)達(dá)國(guó)家不少獸用生物藥廠仍在利用spf 雞胚手工方法生產(chǎn)弱毒活疫苗。4、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)研究第三章監(jiān)管體制與主要政策法規(guī)一、主管部門(mén)科技部負(fù)責(zé)制定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的管理法規(guī)，目前我國(guó)已經(jīng)初步形成了以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例為核心 ,以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)

23、量管理辦法及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證管理辦法等相關(guān)的行政規(guī)章為基干的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理法律體系。農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局是生物制品質(zhì)量管理的主管部門(mén)，負(fù)責(zé)對(duì)全國(guó)獸用生物制品的研制、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、 進(jìn)出口和使用等環(huán)節(jié)進(jìn)行監(jiān)督管理，中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所是國(guó)家級(jí)生物制品的評(píng)審檢驗(yàn)監(jiān)督機(jī)構(gòu)，省級(jí)獸醫(yī)藥品監(jiān)察機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)轄區(qū)內(nèi)獸用生物制品的質(zhì)量監(jiān)督，各生物制品生產(chǎn)企業(yè)設(shè)立質(zhì)量管理機(jī)構(gòu)，以確保生產(chǎn)過(guò)程中的質(zhì)量管理。國(guó)家為加強(qiáng)對(duì)獸用生物制品的監(jiān)督管理，對(duì)獸用生物制品實(shí)行批簽發(fā)制度，企業(yè)每批產(chǎn)品的樣品和檢驗(yàn)報(bào)告必須報(bào)送中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，經(jīng)審核（必要時(shí)對(duì)樣品進(jìn)行檢驗(yàn)）合格后，企業(yè)方可銷(xiāo)售。生產(chǎn)企業(yè)必須建立批生產(chǎn)記錄、批檢驗(yàn)記錄、批銷(xiāo)售記錄，嚴(yán)格

24、對(duì)照獸藥gmp 規(guī)范要求，對(duì)生產(chǎn)原材料、生產(chǎn)過(guò)程、產(chǎn)品檢驗(yàn)、銷(xiāo)售過(guò)程進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制。產(chǎn)品檢驗(yàn)報(bào)告實(shí)行質(zhì)量負(fù)責(zé)人、技術(shù)負(fù)責(zé)人和法人三級(jí)審核制。二、行業(yè)主要法律法規(guī)法規(guī)名稱(chēng)實(shí)施時(shí)間主要內(nèi)容實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例1988.11.14 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)管理、檢疫和傳染病控制、應(yīng)用、 進(jìn)出口管理等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量管理辦法1997.12.11 國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種子中心、生產(chǎn)和使用許可證、檢測(cè)機(jī)構(gòu)等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證管理辦法2002.1.1 許可證申請(qǐng)、審批和發(fā)放、管理和監(jiān)督獸藥生產(chǎn)、檢驗(yàn)用spf 雞( 蛋)定點(diǎn)生產(chǎn)企業(yè)管理辦法2005.1.1 申報(bào)與審查、現(xiàn)場(chǎng)檢查、審批與公示、檢查員管理、監(jiān)督管理等獸藥管理?xiàng)l例2004.

25、11.1 獸藥的研制、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、進(jìn)出口、使用和監(jiān)督管理獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范 （ 獸藥gmp 規(guī)范 ）2002.6.19 獸藥生產(chǎn)和質(zhì)量管理的基本準(zhǔn)則，適用于獸藥制劑生產(chǎn)的全過(guò)程、原料藥生產(chǎn)中影響成品質(zhì)量的關(guān)鍵工序。獸用生物制品規(guī)程2002.1.1 對(duì)禽用生物制品制造和檢驗(yàn)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提出了明確要求，規(guī)定禽類(lèi)制品毒種的制備與鑒定、活毒制品的制造和外源病毒的檢驗(yàn)所用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物( 雞、雞胚 ) 應(yīng)符合三級(jí) (spf)標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)業(yè)部關(guān)于加強(qiáng)獸用生物制品生產(chǎn)檢驗(yàn)原料監(jiān)督管理的通知2008.1.1 農(nóng)業(yè)部將對(duì) gmp 疫苗生產(chǎn)企業(yè)疫苗菌( 毒)種制備與鑒定、活疫苗生產(chǎn)，以及疫苗檢驗(yàn)使用無(wú)特定病原體(spf級(jí))

26、雞、雞胚情況進(jìn)行全面監(jiān)督檢查， 對(duì)達(dá)不到標(biāo)準(zhǔn)要求的， 將根據(jù)獸藥管理?xiàng)l例規(guī)定進(jìn)行處理獸用生物制品經(jīng)營(yíng)管理辦法2007.5.1 對(duì)獸用生物制品的分發(fā)、經(jīng)營(yíng)和監(jiān)督管理進(jìn)行規(guī)范三、 spf雞的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)我國(guó)的 spf雞的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局制定，最新的gb/t17999.1-2008 標(biāo)準(zhǔn)以及檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)等，規(guī)定了19 種微生物控制項(xiàng)目，以及各種試驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。19 種微生物控制項(xiàng)目包括雞白痢sp、 雞毒霉形體mg， 滑液囊霉形體ms、雞痘fp、雞新城疫 nd 、禽白血病al、禽腦脊髓炎ae、網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥re、雞馬立克病md、傳染性喉氣管炎ilt、傳染性法氏囊炎ibd、禽呼腸孤病毒aro 、禽

27、腺病毒aa、禽流感ai 和傳染性支氣管炎ib、 副雞嗜血桿菌（hp）、多殺性巴氏桿菌（pm ）、雞傳染性貧血病毒檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)包括瓊脂擴(kuò)散法( agp) 、血清平板凝集實(shí)驗(yàn)( spa) 、血凝抑制實(shí)驗(yàn) ( hi) 和酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)( elisa) 等。第四章國(guó)際 spf雞產(chǎn)業(yè)發(fā)展?fàn)顩rwho 規(guī)定，人用活疫苗如小兒麻疹，黃熱病，狂犬病等活疫苗的生產(chǎn)，必須使用spf雞胚。國(guó)外如日、美、荷等國(guó)已把利用spf 種 蛋制備疫苗列入生產(chǎn)規(guī)程，并制定了法律，必須嚴(yán)格遵守。1950 年首個(gè)商業(yè)性spf雞群在美國(guó)sunrise農(nóng)場(chǎng)建立； 1959 年，美國(guó)農(nóng)業(yè)部地區(qū)家禽研究所根據(jù)研究需要建立供實(shí)驗(yàn)室研究用spf

28、雞群；1960 年美國(guó) spafas 公司成立， 1993年被 charles river公司收購(gòu)，是目前全球最大的spf種蛋及相關(guān)產(chǎn)品供應(yīng)商；1965 年德國(guó) lohmann公司成功建立了“valo”品牌的 spf雞群；在整個(gè)60 年代中，一些國(guó)家的疫苗廠建立了自己的spf雞群； 1973 年英國(guó) wickham實(shí)驗(yàn)室建立spf雞群，并于80 年代在墨西哥、 巴西、 印度等國(guó)建立授權(quán)生產(chǎn)場(chǎng)；1986 年美國(guó) hy-vac 公司建立，spf蛋產(chǎn)量與sunrise農(nóng)場(chǎng)大致相同,1994 年被德國(guó)lohmann畜禽育種公司買(mǎi)下；澳大利亞于1974 年由 csiro建立 spf雞群。綜觀目前國(guó)際市場(chǎng)

29、，spf雞產(chǎn)業(yè)已被美國(guó)charles river公司、德國(guó)lohmann公司和美國(guó) sunrise 農(nóng)場(chǎng)三大公司壟斷，其生產(chǎn)量和銷(xiāo)售量約占全球的80%以上。其中charles river是目前全球最大的spf雞及相關(guān)產(chǎn)品專(zhuān)營(yíng)企業(yè)，相關(guān)產(chǎn)品近千種，其產(chǎn)品領(lǐng)域涉及：spf種蛋、禽病診斷試劑、人及畜禽生物制品、各種實(shí)驗(yàn)試劑和與生命科學(xué)研究有關(guān)的產(chǎn)品等， 范圍廣， 規(guī)模大。 到 2010 年，該公司已擁有11 個(gè) spf雞生產(chǎn)場(chǎng)， 36 幢產(chǎn)蛋雞舍 （每幢雞舍存養(yǎng)產(chǎn)蛋母雞40008000 只） ，其年產(chǎn) spf種蛋高可達(dá)3660 萬(wàn)枚。除滿(mǎn)足其本國(guó)市場(chǎng)的需求外，目前正在積極開(kāi)拓包括中國(guó)在內(nèi)的國(guó)際市場(chǎng)，

30、必將對(duì)一些中、小型spf雞生產(chǎn)場(chǎng)家形成巨大的挑戰(zhàn)。第五章我國(guó) spf雞產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀我國(guó) spf雞相關(guān)產(chǎn)業(yè)起步較晚。1979 年，哈爾濱獸醫(yī)研究所承擔(dān)農(nóng)業(yè)部下達(dá)的spf雞培育及相關(guān)微生物監(jiān)測(cè)技術(shù)的研究任務(wù)。1983 年，北京生物制品研究所利用小型隔離器，用美、德兩國(guó)的spf種蛋進(jìn)行了小規(guī)模實(shí)驗(yàn)。山東省農(nóng)科院家禽所自1982 年起開(kāi)始進(jìn)行spf雞的研究，并于1985 年，首次成功地培育出我國(guó)第一個(gè)spf雞群，被列為國(guó)家火炬項(xiàng)目，1991 年又成功地建成了當(dāng)時(shí)亞洲規(guī)模最大的spf雞場(chǎng)。 1987 年中國(guó)獸藥監(jiān)察所、1988年北京市獸醫(yī)生物制品廠、1991 年哈爾濱獸醫(yī)研究所、1992 年北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

31、中心、1996年濟(jì)南 spafas 、 1997 年南京藥械廠的spf雞場(chǎng)相繼建成投產(chǎn)。2007 年開(kāi)始，哈爾濱獸醫(yī)研究所等單位均建立新的spf 雞場(chǎng)。 經(jīng)山東家禽所、 濟(jì)南斯帕法斯等為代表的傳統(tǒng)企業(yè)也紛紛擴(kuò)大規(guī)模。 截止 2010 年 2 月，我國(guó)取得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證的spf雞飼養(yǎng)場(chǎng)為18 個(gè)，年產(chǎn)能達(dá)到近4000 萬(wàn)枚。第六章我國(guó) spf雞市場(chǎng)供求狀況一、供需情況據(jù)中國(guó)獸藥監(jiān)察所2006年統(tǒng)計(jì)，國(guó)內(nèi)spf 雞胚需要量約為2100萬(wàn)枚，之后農(nóng)業(yè)部又審批通過(guò)了 13種新的禽用活疫苗的注冊(cè)，這在一定程度上增加了對(duì)spf 雞胚的需求，而且根據(jù)農(nóng)業(yè)部 2006年683號(hào)公告，新獸藥的研究和檢定要使用spf 雞和 spf 雞胚，這又在一定程度上加大的 spf 雞胚的需求， 2009年增至 37