農(nóng)業(yè)養(yǎng)殖方法論研究

1、農(nóng)業(yè)養(yǎng)殖方法論研究論牛蛙養(yǎng)殖菌感染實(shí)驗(yàn)及防治方法摘 要：近年來(lái)，很多牛蛙養(yǎng)殖場(chǎng)經(jīng)常發(fā)生和流行愛(ài)德華氏菌病、紅腿病和腐 皮病，患病蛙大量死亡，經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重，牛蛙在人工養(yǎng)殖過(guò) 程中，細(xì)菌性疾病危害嚴(yán)重，但傳染來(lái)源往往不明，難于有 效控制，因此，探明這些疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律和有效防治方 法。關(guān)鍵詞：牛蛙；試驗(yàn)方法；菌感染防治我國(guó)廣大牛蛙養(yǎng) 殖地區(qū)，牛蛙養(yǎng)殖池中不時(shí)有青蛙竄人，有的養(yǎng)殖場(chǎng)則用野 生蛙和蝌蚪飼喂牛蛙。青蛙究竟有哪些疾病，它們對(duì)牛蛙傳 染性疾病的敏感性如何，是否會(huì)將疾病傳染給牛蛙？國(guó)內(nèi)外對(duì)此均少見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)采用牛蛙愛(ài)德華氏菌病、紅腿病和 腐皮病的病原菌分別感染青蛙和牛蛙，旨在了解牛蛙常見(jiàn)病

2、 原菌對(duì)青蛙的致病力。為探討青蛙在牛蛙傳染病發(fā)生發(fā)展中 的作用和制定有效防治措施提供科學(xué)依據(jù)。1青蛙與牛蛙試驗(yàn)方法試驗(yàn)材料青蛙和牛蛙青蛙購(gòu)于市場(chǎng)，牛蛙購(gòu)于養(yǎng) 殖場(chǎng)。所有供試蛙均為健康蛙，在水族箱內(nèi)馴養(yǎng)3d后用于試驗(yàn)。將供試病原菌分別接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，置28 C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 2022h,用生理鹽水洗下菌苔，麥?zhǔn)媳?濁法測(cè)定菌數(shù)，然后分別取菌液按相關(guān)方法接種牛蛙和青 蛙。克氏耶爾森氏菌和奇異變形菌采用皮下注射和浸泡兩種 途徑接種：皮下接種菌敷為X108/只；浸泡感染是先將蛙體消毒，用滅菌針頭在大腿處劃痕，再將蛙在含x108個(gè)/mL病原菌的水體中浸泡 24h，然后置清水中飼養(yǎng)觀察，不動(dòng) 桿

3、菌采用肌肉注射和口服兩種途徑接種，肌肉注射的菌數(shù)為 x 108個(gè)/只，口服菌數(shù)為x 108個(gè)/只。愛(ài)德華氏菌亦采 用皮下注射和口服兩種途徑接種，皮下注射茵數(shù)為1 x 108個(gè)/只，口服菌數(shù)為3X 108個(gè)/只?？诜腥緯r(shí)，均是先將適量膨化餌辯塞人蛙食道，再將菌液注人餌料上，以防止 菌液流失。各組均設(shè)相應(yīng)的對(duì)照組（甩無(wú)菌生理鹽水代替菌 液）。試驗(yàn)組和對(duì)照組隔離飼養(yǎng)，水溫控制在（28 士 3） C,定時(shí)觀察、記錄發(fā)病和死亡情況，并對(duì)病死蛙逐個(gè)作病理剖 檢。2克氏耶爾森氏菌和奇異變形菌的感染試驗(yàn)結(jié)果“#”腹部嚴(yán)重積水膨脹，口腔內(nèi)有粘液，注射部位和劃痕處嚴(yán)重 出血或潰爛，“ +”腹部膨脹，注射部位或劃

4、痕處充血發(fā) 炎；“ +”腹部輕度臌脹，注射部位和劃痕處輕度發(fā)炎。備 組蛙體重均為2040g（2） “ #”注射部位或劃裹處嚴(yán)重潰爛或 嚴(yán)重發(fā)紅，“ #”注射部位或劃痕處皮膚輕度潰爛；“+”注射部位或劃痕處皮膚輕度發(fā)炎，用不動(dòng)桿菌和愛(ài)德華氏菌感 染的青蛙和牛蛙一般在接種后23d開(kāi)始發(fā)病死亡，除口服愛(ài)德華氏菌的1只青蛙在接種后第4d表現(xiàn)輕教癥狀康復(fù)外， 所有感染蛙最終全部死亡（表3、4），而各對(duì)照蛙均無(wú)異常。 各組蛙體重均為2040g;（2）“ +”注射部位或劃腹部、后 肢大腿腹面嚴(yán)重發(fā)紅，全身腫脹，內(nèi)臟器官有紅腿病病變;“ # ”注射部位、腹部、后肢大腿腹面中度發(fā)紅，全身腫脹， 內(nèi)臟器官有紅腿病

5、病變“ +”注射部位、腹部、后肢大腿腹 面輕度發(fā)紅和全身輕度腫脹，內(nèi)臟器官有紅腿病病變；“+”注射部位發(fā)紅、腫脹，全身癥狀不明顯。備組蛙體重均為20 40g; (2) “#”腹部嚴(yán)重臌脹?？谇挥嘘粢海共炕蛲炔砍?血或出血，肝腫大、出血或有壞死灶，腎充血或出血，胃腸 充血或出血、有粘液“ +”腹部膨脹，體表或肢部輕度發(fā) 紅，肝和腎腫大、充血或出血。胃腸中度充血或出血“+ “腹部臌脹，肝、腎腫大，胃腸充血或出血?！?”腹部輕度膨脹，胃腸有粘液。3結(jié) 論本試驗(yàn)表明，采用愛(ài)德華氏菌、不動(dòng)桿菌、克 氏耶爾森氏菌和奇異變形菌4種牛蛙病原菌感染青蛙和牛蛙，均能使之發(fā)病死亡。病青蛙具有牛蛙愛(ài)德華氏菌病、紅

6、腿病和腐皮病的典型癥狀與病變，而且在相同條件下，青蛙 與牛蛙所表現(xiàn)的癥狀和病程經(jīng)過(guò)也極為相似，由此證實(shí)，青 蛙與牛蛙一樣，對(duì)上述疾病具有高度易感性。這一結(jié)果在牛 蛙傳染病的流行病學(xué)調(diào)查和綜合防治中必須予以高度重視， 密切注意和防止青蛙在自然條件下將疾病傳染給牛蛙。事實(shí) 上，筆者在以往進(jìn)行的牛蛙病流行病學(xué)的調(diào)查研究中曾發(fā) 現(xiàn)，牛蛙養(yǎng)殖池中有患紅腿病的青蛙，池中的牛蛙也同時(shí)存 在該病，這就意味著青蛙在自然條件下也可能發(fā)生與牛蛙相同的傳染性疾病，并將對(duì)人工養(yǎng)殖牛蛙構(gòu)成威脅，成為牛蛙 病的一個(gè)重要傳染來(lái)源。為此，在牛蛙養(yǎng)殖過(guò)程中，除了應(yīng) 防止病牛蛙將疾病傳染給健康牛蛙以外，還應(yīng)在牛蛙池周圍 搭設(shè)屏障以阻止青蛙竄人，而且不要用青蛙及其蝌蚪飼喂牛 蛙，以杜絕各種可能的傳染來(lái)源。同樣，為了保護(hù)野生青蛙，養(yǎng)殖者也應(yīng)避免亂扔病死牛蛙，以改善和保護(hù)農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán) 境。在感染試驗(yàn)中，所有皮下注射和肌肉注射感染的蛙發(fā)病 和死亡時(shí)間比口服和浸泡感染的要快，這是因?yàn)樽⑸浣臃N的 致病菌免于突破皮膚這一天然屏障所致，而浸泡和口服