茶多酚的含量測定

1、茶 多 酚 的 含 量 測 定高錳酸鉀直接滴定法目的：掌握高錳酸鉀直接滴定法測定茶葉中茶多酚含量的原理及操作原理茶葉中茶多酚易溶于熱水，在用靛紅作指示劑的情況下，樣液中能被高錳酸鉀氧化的物質根本上都屬于茶多酚物質。根據(jù)消耗1mL0.318g/mL 的高錳酸鉀相當于5.82mg 茶多酚的換算系數(shù)，可計算茶多酚的含量。儀器與試劑儀器：分析天平、電動磁力攪拌器、電熱水浴鍋、500mL白瓷皿。試劑：1、 0.1%靛紅溶液：稱取靛紅 1g參加少量水攪勻后，再慢慢參加相對密度為1.84 的濃硫酸50mL，冷卻后用蒸餾水定容至1000mL ，如果靛紅不純，可下法磺化處理是：稱取靛紅1g，加濃硫酸50mL，在

2、80 'C烘箱或水浴中加熱磺化 46h，用蒸餾水定容至1000mL ，過濾后貯于棕色瓶中。2、 0.630%草酸溶液：準確稱取草酸 6.3034g，用蒸餾水溶解后定容至1000mL3、 高錳酸鉀標準溶液：稱取 AR的高錳酸鉀1.27g，用蒸餾水溶解后定容至1000mL 準確吸取0.630%草酸溶液10mL放入250ml錐形瓶中平行3份，參加蒸餾水50mL 再參加相對密度為1.84的濃硫酸10mL搖勻，在7080C水浴中保溫5分鐘，取出 后用高錳酸鉀進行滴定。開始慢滴，待紅色消失后再滴第二滴，以后可逐漸加快，邊滴邊搖，待溶液出現(xiàn)淡紅色保持1分鐘不變即為終點。計算高錳酸鉀溶液的百分比濃度。

3、測定步驟1、供測試液的準備：準確稱取茶葉磨碎樣品 1g，放在250mL錐形瓶中，參加沸蒸餾 水80mL在沸水浴中浸提30分鐘，然后抽濾、洗滌，濾液倒入100mL容量瓶中，冷 至室溫，最后用蒸餾水定容至 100mL搖勻。2、測定：取200ml蒸餾水放入白瓷皿 中，參加0.1%靛紅溶液5mL，再參加供測試液5mL開動磁力攪拌器，用已標定的高錳酸鉀溶液邊攪拌邊滴定，滴定速度以1滴/S為宜，接近終點時應慢滴。直到溶液由深藍色轉變?yōu)榱咙S色為止，記下消耗的高錳酸鉀毫升數(shù)。同時做空白測定。 五、結果計算式中：X茶多酚的含量，% B空白消耗的高錳酸鉀毫升數(shù)， mL/樣品消耗的高 錳酸鉀毫升數(shù)，mG -高錳酸鉀

4、的濃度，% m樣品的質量g, V1測定用供測試液 的體積， mL， V2- 供測試液的體積， mL酒石酸鐵比色法原理：茶葉中多酚類物質占茶嫩梢干重的 20%35%，由約30種以上的酚類物質所組成，通稱茶多酚。按其化學結構分為四類： 1兒茶素類，屬黃烷醇類； 2黃酮及黃 酮醇類；3花白素及花青素，即羥基 -4-黃烷醇及其鉀鹽；4醋酸及縮酚酸 類。其中以黃烷醇類化合物最重要占多酚的 80%左右。純兒茶素一般為白色無定 形粉末，在空氣中極易氧化成棕色物，能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等 有機溶劑中。茶多酚能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。對熱、酸較穩(wěn)定， 2%勺溶液加熱至120

5、C并保 持 30min，無明顯變化。在堿性條件下易氧化變質。酒石酸鐵能與茶多 酚 生成 紫褐色絡合物 ， 絡合物 溶液 顏色的 深淺與茶多 酚 的 含 量 成 正 比。因此可以用比色方法測定。該法可防止高錳酸鉀滴定法所產生的人為視 咅沖¥覺誤差。茶多酚的測定方法有高錳酸鉀直接滴定法和酒石酸鐵比色法，由于高錳酸鉀直接滴 定法操作比擬復雜，且靠肉眼觀察顏色判斷終點，如果樣品溶液顏色較深時，可能 影響測定結果。本實驗將應用酒石酸鐵比色法測定茶多酚的含量。儀器與試劑儀器：分光光度計試劑：(1)酒石酸鐵溶液：稱取 FeS04 7H201.000g含4個結晶水的酒石酸鉀鈉 5.000g，加蒸餾水

6、溶解后，用蒸餾水稀釋至1000mL(2) pH7.5的磷酸緩沖液：60.2gNa2HPO4 12H2Q 5.00gNaH2RD4 2H2Q加蒸餾水溶解后.用蒸餾水稀釋至 1000mL步驟(l )樣品溶液的制備方法：準確稱取茶葉磨碎樣品 1g于200mL三角燒瓶中，參加 沸水80mL在沸水浴中浸提30min,然后過濾、洗滌，濾液倒人 100mL容量瓶中， 冷至室溫，最后用蒸餾水定容至刻度，搖勻，備用。搖勻,再參加 pH7.5 磷酸緩沖液稀釋至刻度。以蒸餾水代替樣品溶液參加同樣的試 劑作空白。選擇540nm波長和1cm的比色杯測定吸光度。計算式中：3茶多酚的含量，% A樣品溶液的吸光度值，T樣品溶

7、液的總體積，mLV 測定用樣品溶液的量，mL m-樣品質量，g3.913 用1cm比色杯，當吸光度為1.0 時,試液中茶多酚的濃度為 3.913mg/mL說明及考前須知1、磷酸鹽緩沖液在常溫下容易生長霉菌,放冰箱中保存或臨用時現(xiàn)配。2、樣品溶液制備中的考前須知：( 1)較透明的樣液,如果味茶飲料,將樣液充分搖勻后,直接取樣測定(2)較渾濁的樣液，如果汁茶飲料、奶茶飲料等，稱取充分混勻的樣液25mL于 50mL容量瓶中，加95%勺乙醇15mL充分混勻，放置15min,用水定容至刻度，過濾(3)含有碳酸氣的樣液，如農夫汽茶，量取充分混勻的樣液 100mL于250mL的燒杯 中，稱取其總量，于電爐上加熱至沸，在微沸狀態(tài)下加熱10min,以將二氧化碳排除， 放冷,用水補足原來的質量,搖勻,備用。測定準確吸取試液1ml，注人25mL的容量瓶中，加水4ml和酒石酸亞鐵溶液5ml，充分 混合，再加pH7.5磷酸鹽緩沖液至刻度，用10mm：匕色杯，在波長540nm處，以試劑 空白溶液作參比,測定吸光度 (A)高效液相色譜采用高效液相色譜法測定綠茶中茶多酚的含量。 在色譜柱為