生物期末復(fù)習(xí)選修32

1、判斷判斷1.1.將目的基因整合到受體細胞染色體將目的基因整合到受體細胞染色體dnadna上的過程上的過程屬于基因重組屬于基因重組2.2.若能在植物細胞中檢測到抗性基因，則說明該若能在植物細胞中檢測到抗性基因，則說明該基因工程成功了基因工程成功了3.3.體細胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆體細胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體抗體4.4.動物可通過細胞融合技術(shù)培養(yǎng)出新品種動物可通過細胞融合技術(shù)培養(yǎng)出新品種 5.5.一種基因探針能檢測水體中的各種病毒一種基因探針能檢測水體中的各種病毒 6.6.人工種子相比天然種子可隨意改變植物的遺傳性狀人工種子相比天然種子可隨意改變植物的遺傳性狀10.1

2、0.一種限制酶只能識別一種特定核苷酸序列一種限制酶只能識別一種特定核苷酸序列11.11.生產(chǎn)單克隆抗體時，在培養(yǎng)液中加入某種試劑能夠篩生產(chǎn)單克隆抗體時，在培養(yǎng)液中加入某種試劑能夠篩選出雜交瘤細胞，因為該試劑能選擇性地抑制骨髓瘤細胞選出雜交瘤細胞，因為該試劑能選擇性地抑制骨髓瘤細胞的的dnadna復(fù)制。復(fù)制。7.7.同一株綠色開花植物不同部位的細胞經(jīng)組織培養(yǎng)獲得的同一株綠色開花植物不同部位的細胞經(jīng)組織培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因相同。愈傷組織基因相同。8.8.將人的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌細胞內(nèi)，使大腸桿菌生將人的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌細胞內(nèi)，使大腸桿菌生產(chǎn)人的胰島素技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程。產(chǎn)人的胰島素技術(shù)

3、屬于蛋白質(zhì)工程。9.9.利用利用pcrpcr技術(shù)擴增目的基因，在技術(shù)擴增目的基因，在pcrpcr合成儀中應(yīng)加入的物合成儀中應(yīng)加入的物質(zhì)不應(yīng)該有解旋酶。質(zhì)不應(yīng)該有解旋酶。 12.12.小鼠骨髓瘤細胞和小鼠骨髓瘤細胞和b b淋巴細胞融合可制備單克隆抗體。淋巴細胞融合可制備單克隆抗體。1313. .人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原無生物活性無生物活性1414. .在植物細胞組織培養(yǎng)中胚不能作為組織培養(yǎng)的在植物細胞組織培養(yǎng)中胚不能作為組織培養(yǎng)的材料材料16.16.植物體細胞雜交過程就是原生質(zhì)體融合的過程植物體細胞雜交過程就是原生質(zhì)體融合的過程17.17.

4、將目的基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后讓其感染將目的基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后讓其感染 并轉(zhuǎn)入某植物細胞中并轉(zhuǎn)入某植物細胞中15.15.對胚胎進行性別鑒定時可取囊胚的滋養(yǎng)層細對胚胎進行性別鑒定時可取囊胚的滋養(yǎng)層細胞胞 做做dnadna分析。分析。18.18.外源外源dnadna必須位于重組質(zhì)粒的啟動子和終止子必須位于重組質(zhì)粒的啟動子和終止子 之間才能進行復(fù)制之間才能進行復(fù)制 19.19.重組質(zhì)粒與探針能進行分子雜交是因為重組質(zhì)粒與探針能進行分子雜交是因為dnadna分分 子脫氧核糖和磷酸交替連接子脫氧核糖和磷酸交替連接20.20.無論動物細胞的原代培養(yǎng)，還是傳代培養(yǎng)過程無論動物細胞的原代培養(yǎng)，還是傳

5、代培養(yǎng)過程中都會發(fā)生細胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象。中都會發(fā)生細胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象。21.21.目的基因是否被整合到受體細胞目的基因是否被整合到受體細胞dnadna上，檢測上，檢測 方法是用同位素標(biāo)記的目的基因做探針，進行方法是用同位素標(biāo)記的目的基因做探針，進行 dnadna分子雜交實驗。分子雜交實驗。22.22.排卵是指卵子從卵泡中排出排卵是指卵子從卵泡中排出1.dna1.dna重組技術(shù)的重組技術(shù)的工具酶工具酶： 限制酶限制酶 、dnadna連接酶連接酶 2.dna 2.dna重組技術(shù)的重組技術(shù)的工具工具：限制酶限制酶 、dnadna連接酶、運載體連接酶、運載體( (載體）載體）3.3.在基因

6、工程中使用的在基因工程中使用的載體載體：質(zhì)粒、質(zhì)粒、噬菌體衍生物、動植物病毒噬菌體衍生物、動植物病毒4.4.天然質(zhì)粒是否能直接用做載體？天然質(zhì)粒是否能直接用做載體？不能不能5.5.不同生物的不同生物的dnadna分子（或基因）能重組的原因分子（或基因）能重組的原因是：是：結(jié)構(gòu)和基本單位相同結(jié)構(gòu)和基本單位相同基因工程基因工程6.6.基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序第一步、獲取目的基因第一步、獲取目的基因第二步、構(gòu)建表達載體第二步、構(gòu)建表達載體第三步、將目的基因?qū)胧荏w細胞第三步、將目的基因?qū)胧荏w細胞第四步、目的基因的檢測與鑒定第四步、目的基因的檢測與鑒定（核心）（核心）7.7.目的

7、基因的獲取途徑目的基因的獲取途徑基因文庫、基因文庫、pcrpcr技術(shù)擴增、人工合成技術(shù)擴增、人工合成8.pcr8.pcr技術(shù)擴增目的基因技術(shù)擴增目的基因dnadna雙鏈復(fù)制雙鏈復(fù)制(1)(1)原理：原理：(2)(2)前提：前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列(3)(3)互補鏈延伸時所用酶：互補鏈延伸時所用酶：taqtaq酶（熱穩(wěn)定性酶（熱穩(wěn)定性dnadna聚合酶）聚合酶）9.9.基因表達載體的組成基因表達載體的組成(1)(1)目的基因目的基因(2)(2)啟動子啟動子(3)(3)終止子終止子(4)(4)標(biāo)記基因標(biāo)記基因( (抗性基因或熒光蛋白基因抗性基因或熒光蛋

8、白基因）10.10.將目的基因?qū)胫参锛毎麑⒛康幕驅(qū)胫参锛毎? 1）采用最多的方法：）采用最多的方法： 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（2 2）農(nóng)桿菌）農(nóng)桿菌titi質(zhì)粒上有可轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒上有可轉(zhuǎn)移的 t-dna11.11.將目的基因?qū)雱游锛毎麑⒛康幕驅(qū)雱游锛毎? 2）常用的受體細胞）常用的受體細胞 受精卵受精卵（1 1）采用最多、最有效方法）采用最多、最有效方法顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)12.12.將目的基因?qū)胛⑸锛毎麑⒛康幕驅(qū)胛⑸锛毎?常用處理方法常用處理方法caca2+2+ 處理處理使細胞呈感受態(tài)使細胞呈感受態(tài)13.13.目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定n（1 1）

9、檢測）檢測: : 分子水平分子水平是否插入目的基因是否插入目的基因（關(guān)鍵）：（關(guān)鍵）：是否轉(zhuǎn)錄：是否轉(zhuǎn)錄：是否翻譯：是否翻譯：（2 2）鑒定）鑒定: :個體水平個體水平做接種實驗做接種實驗分子雜交分子雜交分子雜交分子雜交抗原抗原抗體雜交抗體雜交探針：探針： 用同位素標(biāo)記的目的基因的片段用同位素標(biāo)記的目的基因的片段14.14.將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等重組在將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等重組在一起得到的轉(zhuǎn)基因動物，稱為一起得到的轉(zhuǎn)基因動物，稱為乳腺（乳房）生物反應(yīng)器乳腺（乳房）生物反應(yīng)器15.15.治療遺傳病的最有效手段是：治療遺傳病的最有效手段是：基因治療基因治療16.16

10、.蛋白質(zhì)工程直接操作對象是：蛋白質(zhì)工程直接操作對象是：基因基因是否遵循中心法則？是否遵循中心法則？ 遵循遵循是否需要基因工程中的工具酶？是否需要基因工程中的工具酶？ 需要需要被喻為：被喻為： 第二代基因工程第二代基因工程1.1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù) 脫分化脫分化營養(yǎng)、營養(yǎng)、激素激素再分化再分化光照光照胚狀體或叢芽胚狀體或叢芽離體離體植物組植物組織、器官、織、器官、細胞細胞( (外植外植體）體）試管苗試管苗(1)(1)當(dāng)生長素含量高于細胞分裂素時，主要誘導(dǎo)植物組織當(dāng)生長素含量高于細胞分裂素時，主要誘導(dǎo)植物組織脫分化和根原基形成脫分化和根原基形成(2)(2)反之則誘導(dǎo)反之則誘導(dǎo)再分化和

11、芽原基形成再分化和芽原基形成愈傷組織愈傷組織細胞工程細胞工程2.2.植物體細胞雜交技術(shù)植物體細胞雜交技術(shù)(1)(1)去壁的常用方法：去壁的常用方法：酶解法（纖維素酶和果膠酶）酶解法（纖維素酶和果膠酶）(2)(2)原生質(zhì)體融合方法原生質(zhì)體融合方法：物理法：離心、振動、電激等物理法：離心、振動、電激等 化學(xué)法：聚乙二醇（化學(xué)法：聚乙二醇（pegpeg） (3)(3)細胞融合的原理：細胞融合的原理： 細胞膜的流動性細胞膜的流動性(4)(4)意義意義: : 克服了遠緣雜交不親和的障礙克服了遠緣雜交不親和的障礙3.3.動物細胞培養(yǎng)的條件動物細胞培養(yǎng)的條件(1)(1)無菌、無菌、無毒的環(huán)境無毒的環(huán)境(2)

12、(2)營養(yǎng)營養(yǎng)(3)(3)溫度和溫度和phph(4)(4)氣體環(huán)境氣體環(huán)境對對 和培養(yǎng)用具進行無菌處理；和培養(yǎng)用具進行無菌處理；在培養(yǎng)液中添加一定量的在培養(yǎng)液中添加一定量的 ; ;定期更換定期更換 ；合成培養(yǎng)基：合成培養(yǎng)基：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、葡萄糖、氨基酸、無機鹽、 、微量元素等、微量元素等還需要加還需要加 等天然成分。等天然成分。 溫度溫度 0.50.5度，度，ph7.2ph7.27.47.495%95%空氣加空氣加 的混合氣體。的混合氣體。 o o2 2是是 所必需的所必需的; ;coco2 2是是培養(yǎng)液培養(yǎng)液抗生素抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)液促生長因子促生長因子動物血清、血漿動物血清、血漿3

13、6.55%co2細胞代謝細胞代謝維持培養(yǎng)液維持培養(yǎng)液phm中期卵母細胞中期卵母細胞4.體細胞核移植的受體細胞通常為體細胞核移植的受體細胞通常為5.雜交瘤細胞的特點：雜交瘤細胞的特點：即能迅速大量繁殖、又能產(chǎn)生專一抗體即能迅速大量繁殖、又能產(chǎn)生專一抗體特異性強、靈敏度高、可大量制特異性強、靈敏度高、可大量制備備6.6.單克隆抗體的主要優(yōu)點單克隆抗體的主要優(yōu)點7.7.利用單克隆抗體可制作利用單克隆抗體可制作“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”，其作用為：，其作用為：導(dǎo)向作用導(dǎo)向作用(特異性）特異性）8.8.制備單克隆抗體是，選擇制備單克隆抗體是，選擇b b淋巴細胞的原因是淋巴細胞的原因是每個每個b淋巴細胞只產(chǎn)生一

14、種特異性抗體淋巴細胞只產(chǎn)生一種特異性抗體9.9.誘導(dǎo)動物細胞間融合的方法與植物細胞不同的是：誘導(dǎo)動物細胞間融合的方法與植物細胞不同的是：用滅活的病毒用滅活的病毒10.10.目前使用的或冷凍保存的正常細胞為：目前使用的或冷凍保存的正常細胞為：1010代以內(nèi)，以保持代以內(nèi)，以保持正常正常二倍體核型二倍體核型11.11.當(dāng)當(dāng) 培養(yǎng)時，少部分細胞克服自然壽命極限，培養(yǎng)時，少部分細胞克服自然壽命極限，已經(jīng)發(fā)生了已經(jīng)發(fā)生了 ，并朝向，并朝向 方向發(fā)展。方向發(fā)展。傳代傳代突變突變癌細胞癌細胞接觸抑制接觸抑制12.12.無論原代還是傳代培養(yǎng)，細胞都會出現(xiàn)的現(xiàn)象：無論原代還是傳代培養(yǎng)，細胞都會出現(xiàn)的現(xiàn)象：貼壁生

15、長貼壁生長13.13.精子細胞變形中的主要變化：精子細胞變形中的主要變化：1)1)細胞核細胞核2)2)高爾基體高爾基體3)3)中心體中心體4)4)線粒體線粒體5)5)細胞內(nèi)其他物質(zhì)細胞內(nèi)其他物質(zhì)精子頭的主要部分精子頭的主要部分頭部的頂體頭部的頂體精子的尾精子的尾線粒體鞘線粒體鞘 原生質(zhì)滴原生質(zhì)滴 14.14.卵子受精的重要標(biāo)志：卵子受精的重要標(biāo)志： 在卵細胞膜和透明帶間隙觀察到兩個極體在卵細胞膜和透明帶間隙觀察到兩個極體15.15.獲能的精子和卵子相遇時，依次會發(fā)生什么獲能的精子和卵子相遇時，依次會發(fā)生什么現(xiàn)象？（防止多精入卵的兩個屏障是什么？）現(xiàn)象？（防止多精入卵的兩個屏障是什么？）透明帶反

16、應(yīng)透明帶反應(yīng)卵細胞膜反應(yīng)卵細胞膜反應(yīng)16.16.哺乳動物的受精過程主要包括：哺乳動物的受精過程主要包括： 頂體反應(yīng)頂體反應(yīng)卵細胞膜反應(yīng)）卵細胞膜反應(yīng)）（透明帶反應(yīng)（透明帶反應(yīng)精子穿越放射冠和透明帶，進入卵細胞膜，精子穿越放射冠和透明帶，進入卵細胞膜，原核的形成和融合。原核的形成和融合。17.17.卵子的發(fā)生卵子的發(fā)生n(1)(1)發(fā)生部位：發(fā)生部位：n(2)(2)時間：時間：n減數(shù)第一次分裂是在雌性動物減數(shù)第一次分裂是在雌性動物 完成；完成；減數(shù)第二次分裂是在減數(shù)第二次分裂是在 的過程完成的。的過程完成的。卵巢卵巢始于胚胎時期性別分化后始于胚胎時期性別分化后排卵前后排卵前后精卵結(jié)合精卵結(jié)合18

17、.18.胚胎發(fā)育胚胎發(fā)育卵裂期：卵裂期：在透明帶內(nèi)進行在透明帶內(nèi)進行 ，細胞數(shù)量不斷增加，但，細胞數(shù)量不斷增加，但胚胎胚胎 并不增加，或略有減少。并不增加，或略有減少。有絲分裂有絲分裂總體積總體積桑椹胚：桑椹胚：由具有由具有 構(gòu)成，細胞數(shù)在構(gòu)成，細胞數(shù)在3232個左右。個左右。全能性細胞全能性細胞囊胚：囊胚：細胞開始出現(xiàn)了細胞開始出現(xiàn)了 。分化分化內(nèi)細胞團：內(nèi)細胞團：滋養(yǎng)層：滋養(yǎng)層：發(fā)育成胎兒各組織發(fā)育成胎兒各組織發(fā)育成胎膜和胎盤發(fā)育成胎膜和胎盤19.19.試管動物技術(shù)是指通過試管動物技術(shù)是指通過 使卵使卵子和精子在子和精子在 下成熟和受精，并下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為通過培養(yǎng)發(fā)育為 后，

18、再經(jīng)移植后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。產(chǎn)生后代的技術(shù)。人工操作人工操作體外條件體外條件早期胚胎早期胚胎20.20.對實驗小鼠用對實驗小鼠用 處理，使其排出更處理，使其排出更多的卵子，然后，從多的卵子，然后，從 中沖取卵子，中沖取卵子， 與獲能的精子在體外受精。與獲能的精子在體外受精。 促性腺激素促性腺激素輸卵管輸卵管直接直接21.21.通常采用的對精子獲能處理的方法有：通常采用的對精子獲能處理的方法有：培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法 （肝素或鈣離子載體（肝素或鈣離子載體a23187溶液）溶液）22.22.胚胎移植的實質(zhì)是：胚胎移植的實質(zhì)是：早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移早期胚胎

19、在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移23.23.精子和卵子在體外受精后，應(yīng)將受精卵移入精子和卵子在體外受精后，應(yīng)將受精卵移入 中繼續(xù)培養(yǎng)，其成分有中繼續(xù)培養(yǎng)，其成分有發(fā)育培養(yǎng)液發(fā)育培養(yǎng)液無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等。無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等。24.24.沖卵是指沖卵是指: :從子宮內(nèi)沖洗出胚胎從子宮內(nèi)沖洗出胚胎25.25.將將 均等分割，否則影響分割后胚胎均等分割，否則影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。的恢復(fù)和進一步發(fā)育。內(nèi)細胞團內(nèi)細胞團26.26.胚胎分割的份數(shù)越多，操作的難度會越大，胚胎分割的份數(shù)越多，操作的難度會越大，移植的成功率也移植的成功率也 。越低越低27.27.胚胎分割可以看做動物胚胎分割可以看做動物 的的方法之一方法之一無性繁殖或克隆無性繁殖或克隆來源：來源：28.28.胚胎干細胞胚胎干細胞早期胚胎