雙歧桿菌耐藥性與質粒

1、雙歧桿菌耐藥性與質粒雙歧桿菌耐藥性與質粒 隨著微生態(tài)學理論與實踐的 不斷發(fā)展，人們對維持正常菌群的生態(tài)平衡的重要性的認識 越來越深刻 1。根據(jù)微生態(tài)學的有關理論，多種活菌制劑 已經(jīng)被開發(fā)出來，在臨床被用于恢復人體的正常菌群，用來 治療各種因素導致的腸道菌群失調 2?，F(xiàn)就與雙歧桿菌活 菌制劑研制和臨床應用密切相關的藥物敏感性以及雙歧桿 菌的質粒進行綜述。 1 雙歧桿菌對抗生素的藥物敏感性 由于雙歧桿菌屬于生理性細菌，研究雙歧桿菌對抗生素的藥 物敏感性的主要是為探索抗生素對腸道菌群改變，同時雙歧 桿菌藥物敏感性的研究也是開發(fā)活菌制劑的基礎。 1.1 雙歧桿菌敏感的抗生素 由于雙歧桿菌是一種革蘭氏陽

2、性 桿菌，同時又是一種厭氧菌，所以對雙歧桿菌反應敏感的抗 生素是一些有革蘭氏陽性抗菌譜和一些對厭氧菌有效的抗 生素。 1.1.1 青霉素 G(Penicillin G) 青霉素類抗生素是 一種殺菌性抗生素，具有廣譜高效等特點，對革蘭氏陽性桿 菌具有抗菌作用。 雙歧桿菌對青霉素 G 非常敏感， 絕大多數(shù) 的實驗菌株的 MIC v 5U/ml :3o 1.1.2 大環(huán)內酯類抗 生素 (Macrolide) 紅霉素 (Erythromycin) 是大環(huán)內酯類抗生 素的代表，是由鏈霉菌產(chǎn)生的一類弱堿性抗生素，其抗菌譜 與青霉素相近，但為抑菌而非殺菌作用，對革蘭氏陽性菌有強的抑制作用，絕大多數(shù)雙歧桿菌對

3、紅霉素的MIC V 2卩g/ml 。但 Lim K.S. 發(fā)現(xiàn)一株短型雙歧 (B.breve) 對紅霉素的 MIC為3.2卩g/ml，這可能由于實驗菌株的來源或實驗方法 的不同所致。此外雙歧桿菌對交沙霉素(Josamycin) 和克拉霉素(Clarithromycin)也十分敏感3、4。1.1.3 萬古霉素(Vancomycin) 萬古霉素是一種由東方鏈霉素產(chǎn)生的，為一 無定形糖肽類抗生素，可抑制細胞壁的合成，是一種對厭氧 菌有效的抗生素，所有的實驗者一致發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌對萬古霉 素非常敏感。其MIC為(0.250.85卩g/ml : 3、41.1.4林可霉素、氯林可霉素 (Lincomycin)

4、 林可霉素可從鏈霉菌 S.lincolnensis 變種的發(fā)酵濾液中獲得，可抑制細菌的蛋白質 合成，對革蘭氏陽性菌和厭氧菌均有效，克林霉素是由林可 霉素的 7 位羥基被氯原子取代而得到的一種半合成的抗生 素，主要用于厭氧菌的感染，對革蘭氏陽性菌亦有效。發(fā)現(xiàn) 人源的雙歧桿菌對這兩種抗生素非常敏感， MIC 為(0.09 0.89)卩 g/ml 3、4。1.1.5 桿菌肽(Bacitracin) 桿菌肽是一類主要含噻唑環(huán)的多肽化合物，可抑制細胞壁糖肽的合 成，并可損傷細胞膜，改變細胞膜的通透性。桿菌肽對革蘭 氏陽性菌有高度的抗菌活性。雙歧桿菌對本品十分敏感，其MIC 通常V 1.6 卩 g/ml

5、: 3。1.1.6 氯霉素(Chloramphenicol) 氯霉素最初是由委內瑞拉鏈霉菌產(chǎn)生 的，現(xiàn)用合成法制造?？梢种萍毦牡鞍踪|合成。對厭氧菌有效，雙歧桿菌對本品表現(xiàn)為敏感，其MIC v 10卩g/ml :3、4。雙歧桿菌對阿齊霉素(Azithromycin)、伊米替能(Imipeme)和乳鐵蛋白也比較敏感3、4。 雙歧桿菌對 上述六大類抗生素表現(xiàn)出敏感。這些抗生素的抗菌譜主要是 以革蘭氏陽性菌或厭氧菌為主，這與雙歧桿菌為一種革蘭氏 陽性厭氧桿菌的特征是一致的。1.2對雙歧桿菌無效的抗生素 1.2.1 氨基糖苷類抗生素(Aminolglycoside) 氨 基糖苷類抗生素是由微生物產(chǎn)生或

6、由半合成制取的一類易 溶于水的堿性抗生素。主要作用于細菌的蛋白質合成過程， 其主要抗菌譜是革蘭氏陰性桿菌，對厭氧菌無效。雙歧桿菌 不在其抗菌譜中，通?？傻挚惯@一類抗生素的作用，對這一 大類抗生素的 MIC通常100卩g/ml 3。MatteuzziD等還 發(fā)現(xiàn)短型雙歧(B.breve)和豬雙歧桿菌(B.suis)對卡那霉素 (Kanamycin)的抗性尤強壤6。此外雙歧桿菌對巴龍霉素 (Paromomycin)也不敏感。但并非所有的雙歧桿菌對這一大類 抗生素都有不敏感，例如LimKS發(fā)現(xiàn)活菌制劑中的嬰兒雙歧 桿菌(B.infantis)就對鏈霉素(Streptomycin)較為敏感，MIC為

7、1.5卩g/ml-3卩g/ml。MatteuzziD也發(fā)現(xiàn)嬰兒雙歧桿菌 (B.infantis)對氨基糖苷類抗生素敏感的現(xiàn)象6。1.2.2多粘菌素(Polymyxin)多粘菌素系由多粘芽胞桿菌產(chǎn)生的一種多肽類抗生素，主要對革蘭氏陰性桿菌和某些弧菌有 效，但對革蘭氏陽性菌和專性厭氧菌無效。雙歧桿菌對這類抗生素有抗性，其 MIC通常100卩g/ml : 3、6。123甲硝唑 (Metronidazole) 甲硝唑為一類合成抗原蟲藥物， 1962 年發(fā)現(xiàn)本品對厭氧菌具有強大的殺菌作用， 而開始廣泛 用于厭氧菌感染的治療。 但是，雙歧桿菌雖然是一種厭氧菌， 卻對甲硝唑有抗性。其MIC通常500卩g/m

8、l : 4、6 由于厭氧菌的硝基還原酶在敏感性細菌的能量代謝中起重要作 用，能使甲硝唑的硝基還原成為氨，后者具有細胞毒作用， 能抑制敏感菌的 DNA 代謝，耐藥菌往往缺乏硝基還原酶 7。 雙歧桿菌對甲硝唑的抗性是否由述因素引起還不清楚。 此外，雙歧桿菌對萘啶酸類 (Nalidixiaxid) 抗生素也不敏感 3。這些抗生素大部分是以革蘭氏陰性菌為主要抗菌譜。雙歧桿菌對上述抗生素的不敏感性是天然的而非獲得性 的8。1.3 雙歧桿菌對廣譜抗生素的敏感性這一類抗生素主要包括B -內酰胺類抗生素中的頭孢菌素 (Cephalosporin)，四環(huán)素類(Tetracycline)抗生素以及呋喃妥因 (Ni

9、trofurantin) 。雙歧桿菌對這幾大類抗生素表現(xiàn)為不同程度 的敏感性，MIC變化范圍較大3、4、6 VeraL.等報導雙 歧桿菌對四環(huán)素類中的脫氧土霉素 (Doxycyclin) 和二甲胺四 環(huán)素 (Minocycline) 比較敏感 4。 從上述資料我們可以 發(fā)現(xiàn)作為革蘭氏陽性厭氧菌的雙歧桿菌對抗生素的藥物敏 感性比較復雜。既有革蘭氏陽性菌的特點，又同時具有厭氧 菌的基本特征。但例外的是，雙歧桿菌對被普遍認為對厭氧菌感染十分有效的甲硝唑卻存在抗性。隨著有關雙歧桿菌對 抗生素的藥物敏感性的資料的不斷積累，其中的規(guī)律將越來 越明顯。有關雙歧桿菌的藥物敏感性的研究也將促進雙歧桿 菌活菌制劑

10、的研制與開發(fā)。 2 雙歧桿菌質粒 質粒幾乎 存在于所有種屬的細菌當中，并且對細菌的遺傳進化起著重 要作用。質粒也決定細菌的表型特征：如：抗生素抗性、重 金屬抗性、產(chǎn)生細菌素。同時也與細菌的毒力及碳水化合物 代謝等有關 9。有關雙歧桿菌質粒的研究是近些年來逐步 開展的。 現(xiàn)就雙歧桿菌質粒進行綜述。 2.1 雙歧桿菌質 粒提取特點 由于雙歧桿菌是一種革蘭氏陽性細菌，細胞壁 含有較多的糖肽和磷壁酸，這兩種成分使細胞壁的機械性大 大加強 10。正是因為這種原因，在提取雙歧桿菌質粒時 必須預先對細胞壁進行處理，大多使用較高濃度的溶菌酶來 消化其細胞壁。 在裂解細胞時， 使用 SDS 的濃度也較通常高， 同時還采用水浴