安捷倫(agilent1260)高效液相色譜儀操作規(guī)程.

1、1.目的：規(guī)范Agilent 1260高效液相色譜儀維修、保養(yǎng)、校正操作。2.適用范圍：本公司化驗室Agilent 1260高效液相色譜儀的維修、保養(yǎng)。3.有關責任：化驗室精密儀器室4.引用標準：儀器說明書及Agilent化學工作者現(xiàn)場操作培訓教材5.規(guī)程內容：5.1開機前準備5.根據實驗要求配制流動相，須m濾膜過濾，之后再進行脫氣處理，使用前必須用超聲波振蕩l0-15min，按無機相和有機相分開別裝入溶劑瓶A（裝有洗鹽裝置，最好固定盛放無機鹽水相）m濾膜過濾。5.若流動相中含有緩沖鹽,則必須以每分鐘23滴的速度虹吸10%的異丙醇水沖洗seal-wash，以防有鹽結晶在泵頭產生而損壞泵頭。5.

2、5.打開計算機,進入 Windows 系統(tǒng), 從上到下依次打開各模塊電源。5.待各模塊自檢完成后，雙擊桌面上的“儀器1聯(lián)機”圖標，將自動進入化學工作站畫面。5.從“視圖”菜單中選擇“方法和運行控制”畫面,也可單擊工作站畫面左側的“方法和運行控制”項，進入方法和運行控制窗口。5.打開Purge閥（逆時針），右擊“泵”圖標出現(xiàn)參數(shù)設定菜單單擊“設定泵”選項進入泵編輯畫面。5.設“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道設到100%，單擊“確定”。 5.單擊“泵”圖標，出現(xiàn)參數(shù)設定菜單，單擊“泵控制“選項選中“開”單擊“確定”則系統(tǒng)開始Purge，直到管路內由溶劑瓶A到泵入口無氣泡為止；切換B通

3、道(B通道設到100%)繼續(xù)Purge直到所有通道管路內均無氣泡為止。(查看柱前壓力，若大于10Bar，則應更換排氣閥內濾芯/過濾白頭。) 5.將泵的流量設到0.5ml/min，若使用雙泵則應設定溶劑配比，如A=80%，B=20%；關閉排氣閥（順時針）；再將流量設到0.8ml/min，2分鐘后設定至方法所需流速，沖洗色譜柱20-30min。5.單擊泵下面的瓶圖標，輸入溶劑瓶A、B內流動相的實際體積（為保護泵和色譜柱，請按實際體積輸入）和停泵的體積單擊“確定”，如果各溶劑瓶溶劑體積小于停泵體積，泵將自動停止。 5.把緩沖液（用于柱子過渡的，與流動相等比例的乙腈/水、甲醇/水或10%的水溶液）換成

4、流動相，排氣后，逐步增加至所需流速，待柱壓基本穩(wěn)定后，打開檢測器等，觀察基線情況。5.采集方法編輯.1編輯完整方法：從“方法”菜單中選擇“編輯完整方法”項，選中除“數(shù)據分析”外的三項，單擊“確定”進入下一畫面。5.3.1.2方法信息：在“方法注釋”欄中加入（如方法的用途等），單擊“確定”進入下一畫面。5.3.1.3泵參數(shù)設定：在“流速”處輸入方法所需流量（如1ml/min）；默認為A為100%，如需二元高壓，在“溶劑B”處輸入所需比例,則溶劑A=100-B ，也可“插入”一行“時間表”編輯二元梯度；在“壓力限”處輸入柱子的最大耐高壓（建議設定200bar）以保護柱子 ,單擊“確定”進入下一畫面

5、 。5.3.1.4 VWD檢測器參數(shù)設定：在“波長”下方的空白處輸入所需的檢測波長，如254nm；在“峰寬(響應時間)”下方點擊下拉式三角框,選擇合適的響應時間（如>0.1min (2s)）；如有特殊要求，也可在“時間表”中可以“插入”一行輸入隨時間切換的波長（如1min 波長=300nm），點擊“確定”。5.3.1.5在“運行時選項表”中選中“數(shù)據采集”選項，單擊“確定”。5.3.1.6單擊“方法”菜單選中“方法另存為”輸入方法名，單擊“確定”。5.3.1.7從“視圖”菜單中選中“在線信號”,選中“信號窗口1”,然后單擊“改變”鈕,將所要查看的信號移到右邊框中,單擊“確定”。5.3.1

6、.8進樣器參數(shù)設定：在進樣模式中輸入“進樣量”xxl，默認為20l?！皹藴蔬M針”只能輸入進樣體積，此方式無洗針功能?！搬樓逑春筮M樣”可以輸入進樣體積和洗瓶位置為xx，此方式針從樣品瓶抽完樣品后會在洗瓶中洗針。進樣器進樣程序參數(shù)設定：選中使用進樣程序，在“函數(shù)”中添加相應函數(shù)即可按程序進樣。5.3.1.9 TCC檢測器參數(shù)設定：在“溫度”左側下面的方框內輸入所需溫度，并選中它，右側選中“與左側相同”使柱溫箱的溫度左右一致。運行方法.1單針進樣選擇“單針進樣”圖標。點擊畫面中的“開始”運行方法，中間停止采樣點“結束”。.2 序列進樣“序列”下“序列參數(shù)”，設置同單針進樣，樣品位置不填?！靶蛄小毕逻x

7、擇“序列表”，在表格中可進行“插入”、“剪切”“復制”“粘貼”“追加行”等操作，表格中必須填寫“樣品瓶”“樣品名稱”“方法名稱”“進樣次數(shù)”“數(shù)據文件”“進樣量”等信息，其他信息可選擇編輯。編輯完成后，單擊“確定”。在“序列菜單中選擇“序列模板另存為”為新建序列命名。在“儀器”菜單中選擇“運行序列”運行當前序列。停止采集數(shù)據選擇“儀器”菜單中“停止運行/進樣/序列”。或者同單針進樣的方法。5.4.數(shù)據分析方法編輯 5. 從“視圖”菜單中單擊“數(shù)據分析”進入數(shù)據分析畫面。5.從“文件”菜單選擇“調用信號”選中所做的數(shù)據文件，單擊“確定”，也可直接雙擊打開。5.做譜圖優(yōu)化：從“圖形”菜單中選擇“信

8、號選項”，再從“范圍”中選擇“自動量程”及合適的顯示時間單擊“確定”或選擇“自定義量程”調整,反復進行直到圖的比例合適為止。5.積分優(yōu)化 5.1從“積分”中選擇“自動積分”, 若積分結果不理想,再從菜單中選“積分事件”選項，選擇合適的“斜率靈敏度”、“峰寬”、“最小峰面積”、“最小峰高”。5.2從“積分”菜單中選擇“積分”選項，則數(shù)據被積分。5.3如積分結果還不理想，則修改相應的積分參數(shù)直到滿意為止。 5.4單擊左邊“保存并退出”圖標將積分參數(shù)存入當前方法中。 5.5打印報告5.從“報告”菜單中選擇“設定報告”選項。5.單擊“定量結果”框中“定量”右側的黑三角選中所采用的報告方法（如面積外標法等），單擊“確定”。 5.從“報告”菜單中選擇“打印”則報告打印結果將顯示在屏幕上，如想輸出到打印機，則單擊“報告”底部的“打印”鈕即可。5.6關機5.0ml/min，再用100%有機溶劑沖0.5小時，然后關閉系統(tǒng)。5.退出化學工作站，及其它窗口，關閉計算機（用shutdown