《氨基酸的薄層層析》ppt課件

1、如何分別鑒定氨基酸混合液？如何分別鑒定氨基酸混合液？生物化學與分子生物學實驗教學中心生物化學與分子生物學實驗教學中心氨基酸的薄層層析氨基酸的薄層層析(Thin layer chromatography of amino acids)生物化學與分子生物學實驗教學中心生物化學與分子生物學實驗教學中心實驗目的實驗目的l掌握薄層層析法的普通原理。掌握薄層層析法的普通原理。l掌握氨基酸薄層層析法的根本操作技術。掌握氨基酸薄層層析法的根本操作技術。l掌握如何根據(jù)挪動速率掌握如何根據(jù)挪動速率Rf值來鑒定被分別值來鑒定被分別的物質即氨基酸混合液。的物質即氨基酸混合液。層析技術層析技術l概念：是利用化合物中各組

2、分的物理性質的差概念：是利用化合物中各組分的物理性質的差別如溶解度、吸附才干、分子外形和大小、別如溶解度、吸附才干、分子外形和大小、分子極性等使各組分在兩相中的分布不同，分子極性等使各組分在兩相中的分布不同，從而使各組分以不同速度隨流動相向前挪動而從而使各組分以不同速度隨流動相向前挪動而到達分別的目的。到達分別的目的。l特點：分別效率高，能分別各種性質相類似的特點：分別效率高，能分別各種性質相類似的物質。不僅可用于少量物質的分別純分，也可物質。不僅可用于少量物質的分別純分，也可用于大量物質的分別純化和制備。用于大量物質的分別純化和制備。層析法的分類層析法的分類l氣相層析以氣體為流動相的層析法氣

3、相層析以氣體為流動相的層析法l液相層析以液體為流動相的層析法，此為生液相層析以液體為流動相的層析法，此為生物化學領域里常用的方法物化學領域里常用的方法l 1.吸附層析：薄層吸附層析、吸附柱層析吸附層析：薄層吸附層析、吸附柱層析l 2.分配層析：紙層析、柱層析、薄層層析分配層析：紙層析、柱層析、薄層層析l 3.離子交換層析離子交換層析l 4.凝膠層析：柱層析、薄膜層析凝膠層析：柱層析、薄膜層析l 5.親和層析親和層析l 實驗原理實驗原理實驗原理實驗原理實驗原理實驗原理實驗資料實驗資料l吸附劑：硅膠吸附劑：硅膠l粘合劑：粘合劑： 0.5%的羧甲基纖維素鈉的羧甲基纖維素鈉l氨基酸的異丙醇溶液氨基酸的

4、異丙醇溶液l 丙氨酸、精氨酸、甘氨酸丙氨酸、精氨酸、甘氨酸l展開展開-顯色劑正丁醇、乙酸、茚三酮溶液顯色劑正丁醇、乙酸、茚三酮溶液l分析樣品：氨基酸混合液分析樣品：氨基酸混合液器材器材l層析板、尺子、鉛筆層析板、尺子、鉛筆l燒杯、量筒燒杯、量筒l噴霧器、吹風機噴霧器、吹風機l毛細管、層析缸毛細管、層析缸l藥匙藥匙l烘烤箱烘烤箱2cm1cm Ala Arg Gly MixAla Arg Gly MixRf =斑點至原點間隔斑點至原點間隔溶劑前緣至原點間隔溶劑前緣至原點間隔結果計算結果計算 小心量出斑點中心至原點中心間隔，小心量出斑點中心至原點中心間隔，再量出原點中心至溶劑前沿的間隔，計算再量出原點中心至溶劑前沿的間隔，計算出它們的出它們的 值。值。 根據(jù)值，鑒定出混合樣品中氨基根據(jù)值，鑒定出混合樣品中氨基酸的種類，并繪出層析圖譜。酸的種類，并繪出層析圖譜。本卷須知本卷須知復習思索題復習思索題l硅膠的吸附力與含水量的問題硅膠的吸附力與含水量的問題l吸附實驗中吸附劑的選擇根據(jù)吸附