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文檔簡介

1、第一章 血細(xì)胞形態(tài)(示教)概念:是指血細(xì)胞經(jīng)瑞氏染色后在光學(xué)顯微鏡下的形態(tài)特征。第一節(jié) 血細(xì)胞多媒體示教 2學(xué)時了解:初步認(rèn)識各種血細(xì)胞外形及核的形態(tài)、胞漿著色情況、核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的不同點。第二節(jié) 正常血細(xì)胞形態(tài)(顯微鏡下示教) 4學(xué)時了解:初步認(rèn)識粒細(xì)胞系、紅細(xì)胞系、淋巴細(xì)胞系、單核細(xì)胞系、漿細(xì)胞系、巨核細(xì)胞系的各階段細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征,并畫出每一臺顯微鏡下的細(xì)胞圖像。(一)粒細(xì)胞系統(tǒng)1. 原始粒細(xì)胞(myeloblast):1018m,胞體圓或類圓形,核占細(xì)胞的2/3以上,居中或略偏位,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀排列均勻,核仁25個、較小、清楚;胞漿量少,染天藍(lán)色,有透明感,無顆粒。2. 早幼粒細(xì)胞(p

2、romyelocyte):1220m,較原粒細(xì)胞大,核染色質(zhì)較原粒細(xì)胞粗糙,染色質(zhì)顆粒開始有聚集,核仁可見或消失;胞漿染淡藍(lán)色、藍(lán)色或深藍(lán)色,含大小不等、形態(tài)不一的紫紅色顆粒(即非特異性顆粒)。3.中幼粒細(xì)胞(myelocyte)中性中幼粒(neutrophilic myelocyte):1018m,胞核橢圓形或一側(cè)開始扁平,可有凹陷,其凹陷處約占細(xì)胞的2/31/2,核染色質(zhì)聚集呈索塊狀,核仁隱約可見或消失;胞漿量多,染淡紅或少數(shù)區(qū)域略偏藍(lán),含大小一致的紅色顆粒、即特異性顆粒(致少有一個區(qū)域)。嗜酸性中幼粒(eosinophilic):1520m:核與中性中幼粒相似;胞漿內(nèi)充滿粗大而均勻、排列

3、緊密的橘紅色特異性嗜酸性顆粒。嗜堿性中幼粒(basphilic):1015m,核圓形或橢圓形、但常常輪廓不清,核染色質(zhì)較模糊;胞漿內(nèi)及核上含有排列零亂、大小不等數(shù)量不多的紫黑色嗜堿性顆粒。4、晚幼粒細(xì)胞(metamyelocyte)中性晚幼粒(neutropilic metamyelocyte):1016m,核明顯凹陷呈腎形,馬蹄形,半月形,但其核凹陷程度不超過假設(shè)直徑的一半,核染色質(zhì)粗糙,排列更緊密,無核仁;胞漿量多,淺紅色,充滿中性特異性顆粒。嗜酸性晚幼粒(eosinophilic metamyelocyte):1016m,核形及結(jié)構(gòu)與中性晚幼粒相似;胞漿內(nèi)充滿橘紅色的、大小一致的嗜酸性特

4、異性顆粒。嗜堿性晚幼粒(basophilic metamyelocyte):1014m,核固縮呈腎形,輪廓模糊;胞漿內(nèi)及核上分布有少量嗜堿性非特異顆粒。5. 桿狀核粒細(xì)胞(stab granulocyte)中性桿狀核粒細(xì)胞(neutrophilic stab granulocyte):1015m,核凹陷程度超過假設(shè)直徑的一半,核徑最窄處大于最寬處1/3以上,呈帶狀彎曲,核染色質(zhì)粗糙呈塊狀;胞漿充滿中性顆粒。嗜酸性桿狀核粒細(xì)胞(eosinophilic stab granulocyte):1116m,核與中性桿狀相似;漿內(nèi)充滿嗜酸性顆粒。嗜堿性桿狀核粒細(xì)胞(basophilic stab gra

5、nulocyte):1012m,核呈模糊桿狀;胞漿內(nèi)及核上分布有少量嗜堿性顆粒。6. 分葉核粒細(xì)胞(segmented granulocyte)中性分葉核粒細(xì)胞(neutrophilic segmented granulocyte):1014m,核呈分葉狀,葉與葉之間有細(xì)絲相連或全斷開,常分25葉,核染色質(zhì)已濃集呈粗的小塊狀,染深紫紅色;胞漿豐富,內(nèi)含淡紅色均勻細(xì)小顆粒。嗜酸性分葉核粒細(xì)胞(eosinophilic segmented granulocyte):1116m,核多分2葉,核染色質(zhì)結(jié)構(gòu)與中性分葉核相似;胞漿內(nèi)充滿粗大均勻一致的橘紅色嗜酸性顆粒。嗜堿性分葉核粒細(xì)胞(basophili

6、c segmented granulocyte):1012m,核可分34葉或分葉不明顯;胞漿分布有少量大小不等的紫黑色嗜堿性顆粒。(二)紅細(xì)胞系統(tǒng)原始紅細(xì)胞(pronormoblast):1520m,呈圓形或橢圓形,邊緣常呈鈍角狀或瘤狀突起,核呈圓形,居中或偏位,約占細(xì)胞體的4/5左右,核染色質(zhì)呈顆粒狀較原粒細(xì)胞粗而密集,核仁13個不等,且大小不一,形狀不規(guī)則,呈淺藍(lán)色或暗藍(lán)色;胞漿量少,染深藍(lán)色、不透明,有油畫藍(lán)感,無顆粒。早幼紅細(xì)胞(earlynormoblast):1018m,核圓形或橢圓形,約占細(xì)胞的2/3以上,核染色質(zhì)顆粒有濃集現(xiàn)象,較原紅細(xì)胞粗糙,核仁模糊或消失;胞漿量增多,染不透

7、明藍(lán)色或深藍(lán)色,邊緣可見瘤狀突起。中幼紅細(xì)胞(polychromatic normoblast):815m,核圓形,約占細(xì)胞的1/2,核染色質(zhì)凝聚呈條索狀或塊狀,中間有明顯空隙,如壓碎餅干樣或打碎墨硯感,無核仁;胞漿量相對較多,漿內(nèi)由于已合成不等量的血紅蛋白,可染呈不同程度的嗜多色性。晚幼紅細(xì)胞(orthochromatic normoblast):710m,核圓形居中或偏位,占細(xì)胞的1/2以下,核染色質(zhì)致密聚集成結(jié)構(gòu)不清的紫黑色團塊狀,無核仁;胞漿量較多,因已合成大量血紅蛋白,常染淺灰紅色或淺紅色。網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticulocyte):7.27.5m,為晚幼紅細(xì)胞剛脫核而成,是尚未完全成熟

8、的紅細(xì)胞,瑞氏染色為多嗜性紅細(xì)胞,用煌焦油藍(lán)活體染色后在細(xì)胞內(nèi)可見藍(lán)色細(xì)顆?;虺示€狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。紅細(xì)胞(erythrocyte):正常紅細(xì)胞平均為7.2m,呈雙面微凹之圓盤狀,中央較薄,染色淺,邊緣較厚,染色深,呈粉紅色,無核。(三)單核細(xì)胞系統(tǒng)原始單核細(xì)胞(monoblast):1520m,胞體圓形或橢圓形,核較大圓形或類圓形,核染色質(zhì)纖細(xì),呈疏松網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),核仁13個;胞漿量較其它原始細(xì)胞豐富,灰藍(lán)色,不透明,邊緣不規(guī)則或有偽足狀突起。幼稚單核細(xì)胞(promonocyte):1525m,核圓形或不規(guī)則形,易見扭曲、凹陷、切跡等改變,核染色質(zhì)較原始單核細(xì)胞粗糙疏松,核仁可有可無;胞漿淺灰藍(lán)色,

9、不透明,可見細(xì)小顆粒。單核細(xì)胞(monocyte):1220m,核形態(tài)常不規(guī)則,有腎形,馬蹄形,“S”形,分葉狀,筆架形等,核染色質(zhì)疏松呈絲網(wǎng)狀或條紋狀結(jié)構(gòu),無核仁;胞漿量較多,染不透明的灰藍(lán)色,可見細(xì)小紅色顆粒。(四)淋巴細(xì)胞系統(tǒng)1原始淋巴細(xì)胞(lymphoblast):1018m,胞體圓形或橢圓形,核呈圓形或橢圓形,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,核仁12個;胞漿量少,呈淡藍(lán)色,透明,無顆粒。2幼稚淋巴細(xì)胞(prolymphocyte):1016m,核圓形或橢圓形,核染色質(zhì)仍較細(xì)致,核仁可有可無;胞漿量較少,淡藍(lán)色,偶見有少許紅色顆粒。3淋巴細(xì)胞(lymphocyte)大淋巴細(xì)胞:1215m,核圓形稍

10、偏于一側(cè),核染色質(zhì)排列緊密均勻,深紫紅色;胞漿量相對較多,染透明淡藍(lán)色,可有少量大小不等的紅色嗜天青顆粒。小淋巴細(xì)胞:69m,核相對較小,呈圓形,核染色質(zhì)緊密呈大塊狀,結(jié)構(gòu)不清楚,染深紫紅色;胞漿極少,似裸核樣,如可見則呈淡藍(lán)色,一般無顆粒。(五)漿細(xì)胞系統(tǒng)1. 原始漿細(xì)胞(plasmablast):1418m,胞體圓形或橢圓形,核圓形,占細(xì)胞的2/3以上,居中或偏位,核染色質(zhì)呈粗顆粒網(wǎng)狀,染紫紅色,核仁25個;胞漿量多,染深藍(lán)色,不透明,無顆粒。2. 幼稚漿細(xì)胞(proplasmacyte):1216m,胞體多呈橢圓形,核圓形或橢圓形,占細(xì)胞的1/2,居中或偏位,核染色質(zhì)較原漿細(xì)胞粗糙緊密,

11、開始聚集,染深紫紅色,核仁模糊或消失;胞漿量多,深藍(lán)色或紫藍(lán)色或呈藍(lán)色火焰狀,不透明,有時可有空泡及少數(shù)嗜天青顆粒。3. 漿細(xì)胞(plasmacyte):815m,核明顯縮小,圓形,占細(xì)胞的1/3以下,偏于一側(cè),核染色質(zhì)濃集成塊狀,常排列呈車輪狀,無核仁;胞漿量豐富,染藍(lán)色或紫藍(lán)色,不透明,有時有泡沫感,漿內(nèi)可含有小空泡及/或少量嗜天青顆粒,偶見胞漿中有較大的紅色或淡藍(lán)色透明的球狀物,稱Russell小體,是球蛋白聚集而成。(六)巨核細(xì)胞系統(tǒng)1原始巨核細(xì)胞(megakaryoblast):1530m,胞體圓形或不規(guī)則形,核大,呈圓形或不規(guī)則形,核染色質(zhì)較其他原始細(xì)胞粗,呈粗網(wǎng)狀或細(xì)條索狀結(jié)構(gòu),

12、染深紫紅色,核仁23個,淡藍(lán)色,不清晰,不規(guī)則;胞漿量較少,不均勻,不規(guī)則,染深藍(lán)色,無顆粒。2幼稚巨核細(xì)胞(promegkaryocyte):3050m,外形不規(guī)則,核亦不規(guī)則,有重疊,可扭轉(zhuǎn)呈腎形或分葉狀,核染色質(zhì)呈粗顆?;虼志W(wǎng)狀或局部濃集呈小塊狀,排列緊密,核仁可有可無;胞漿量增多,常有偽足狀突出,染藍(lán)色或淺藍(lán)色,在近核處出現(xiàn)或多或少的很細(xì)小紅色嗜天青顆粒。3巨核細(xì)胞(megakarycyte)顆粒型巨核細(xì)胞:4070m,可達100m,外形不規(guī)則,核較大,形態(tài)不規(guī)則,多呈分葉狀,核染色質(zhì)較粗糙,排列緊密呈團塊狀,紫紅色,無核仁;胞漿量豐富,染粉紅色,夾雜有藍(lán)色,內(nèi)含大量細(xì)小紅色顆粒,常聚

13、集呈簇,但無血小板形成。產(chǎn)板型巨核細(xì)胞:4070m,可達100m,形態(tài)大致與顆粒型巨核細(xì)胞相似,唯有不同的一點是胞漿內(nèi)充滿細(xì)小的紅色顆粒及數(shù)量不等的血小板。裸核型巨核細(xì)胞:是產(chǎn)板型 巨核細(xì)胞的胞漿解體后,釋放出大量血小板,僅剩一個細(xì)胞核,稱之為裸核。4. 血小板(platelet):胞體很小,24m,呈圓形、橢圓形,逗點狀,不規(guī)則形,中心部位有細(xì)小紫紅色顆粒,無細(xì)胞核,涂片上血小板常三五成群堆集出現(xiàn)。(七)其他細(xì)胞1組織嗜細(xì)胞(tissue basophilic cell):又稱肥大細(xì)胞(mast cell),1220m,呈圓形,橢圓形,梭形,三角形等,核小,呈圓形或橢圓形,居中或偏位,核染色

14、質(zhì)模糊,結(jié)構(gòu)不清;胞漿充滿圓形、大小一致的深紫色嗜堿性顆粒。2內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial cell):822m,形態(tài)極不規(guī)則,多呈梭形,核呈圓形或橢圓形,核染色質(zhì)呈網(wǎng)狀,多無核仁;胞漿量少,染淡藍(lán)色,邊緣常模糊不清,常沿核長軸的兩側(cè)或一端呈尾狀伸出,可有細(xì)小紫紅色顆粒。3纖維細(xì)胞(fibrocyte):胞體較大,不規(guī)則,多為長尾形,核圓形或橢圓形(1數(shù)個),核染色質(zhì)呈或細(xì)或粗的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),核仁12個,不清晰,成熟者無核仁;胞漿豐富,多在細(xì)胞兩端,染淡藍(lán)色,邊界模糊,內(nèi)含纖維網(wǎng)狀物及少許嗜天青顆粒。4成骨細(xì)胞(osteoblast):胞體較大,2040m,長橢圓形或不規(guī)則形,單個或多個成群分

15、布,核圓形或橢圓形,常偏于細(xì)胞一側(cè),核染色質(zhì)排列呈粗網(wǎng)狀,染深紫紅色,核仁可有13個;胞漿豐富,染深藍(lán)色或灰藍(lán)色,邊緣常呈模糊云霧狀。5破骨細(xì)胞(osteoclast):胞體巨大,60100m,形態(tài)不規(guī)則,頗象巨核細(xì)胞,核小、數(shù)量較多,3100個不等,圓形或橢圓形,大小大致相等,邊緣清晰,彼此獨立,無核絲相連,隨意排列,核染色質(zhì)呈粗網(wǎng)狀,幾乎每個核都有一個藍(lán)色核仁;胞漿豐富,染淡藍(lán)色或淺紅色,含大小不等的紫紅細(xì)小顆粒。6脂肪細(xì)胞(fatty cell):3050m,胞體圓形或橢圓形,核較小,形狀不規(guī)則,常被擠壓在一邊,核染色質(zhì)呈細(xì)致密網(wǎng)狀,無核仁;胞漿內(nèi)充滿大量空泡。7組織細(xì)胞(histioc

16、yte):胞體較大,2050m,形態(tài)多樣,一般呈圓形或橢圓形及不規(guī)則形,核可有圓形,橢圓形,腎形,核染色質(zhì)呈疏松網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),核仁24個不等;胞漿多少不一,染色也常不一致,有深藍(lán),淡藍(lán),灰藍(lán)色等,邊緣多不規(guī)則或不清楚,無顆?;蚝猩倭炕蚣?xì)或粗或粗細(xì)不一的嗜天青顆粒,可有空泡或含異物等。8吞噬細(xì)胞(phagocyte):不是一種獨立的細(xì)胞,而是胞漿內(nèi)含有吞噬物質(zhì)的一組細(xì)胞的總稱。具有吞噬功能的細(xì)胞有單核細(xì)胞、組織細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞,纖維細(xì)胞等。吞噬細(xì)胞的形態(tài)極不一致,由吞噬物的類型及吞噬物的多少而定。其胞核圓形、橢圓形或不規(guī)則形,常一個核,有時為雙核,核常被擠壓至一側(cè),核染色質(zhì)較疏松,核仁可有可無。

17、胞漿多少不一,淡藍(lán)色或淡紅色,常有空泡,并有數(shù)量不等的吞噬物,吞噬物有空泡、色素、顆粒、有核細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板、碳核、細(xì)菌等。有時吞噬細(xì)胞成堆存在。第二節(jié) 異常血細(xì)胞形態(tài)學(xué)(4學(xué)時)了解:初步認(rèn)識各種異常血細(xì)胞形態(tài),并畫出每一臺顯微鏡下的細(xì)胞圖像。血細(xì)胞形態(tài)在病理情況下,可在胞體、胞核、胞漿等方面發(fā)生異常改變。(一)粒細(xì)胞系統(tǒng)形態(tài)異常1白血病時粒細(xì)胞改變胞體:大小不等、畸形。胞漿:Auer小體,顆粒粗大、增多。Auer小體:是在細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)結(jié)構(gòu)均勻一致的紅色細(xì)棒狀小體。產(chǎn)生原因是嗜天青顆粒融合而成。常見于急性非淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞漿內(nèi)。胞核:畸形、切跡、折疊、凹陷、扭曲、分葉等。如急淋時核易

18、破碎,核分裂象增多。核漿比:增大、發(fā)育不平衡(M2b)。核仁:大、數(shù)量增多、亦可不清楚。2巨大粒細(xì)胞:可見于中、晚、桿、分階段。常見巨晚幼、巨桿狀。形態(tài)特征:與同期相比,胞體大、核大、核染色質(zhì)較同階段細(xì)胞細(xì)致。形成原因:核酸代謝障礙。常見疾?。壕抻棕殹6、MDS、M2b、抗葉酸類藥物治療后。3中性粒細(xì)胞分葉過多:分5葉以上,常見于巨幼貧、嚴(yán)重感染恢復(fù)期。4粒細(xì)胞中毒變性改變中毒顆粒:胞漿顆粒大小不等、分布不均、染紫黑色或深紫紅色。見于嚴(yán)重感染、大面積燒傷等。空泡:漿或核內(nèi)空泡。見于嚴(yán)重感染。杜勒小體(Dohle):藍(lán)斑,在細(xì)胞漿內(nèi)直徑約12m的藍(lán)色區(qū)域。見于嚴(yán)重感染,肝硬化等。核變性:核固縮

19、、核腫脹、核碎裂、核溶解。見于嚴(yán)重感染。(二)紅細(xì)胞系形態(tài)異常1巨幼紅細(xì)胞形態(tài)特征:與同期細(xì)胞相比,胞體大、核大、核染色質(zhì)細(xì)致、排列疏松“幼核老漿”。產(chǎn)生原因:核酸代謝障礙。常見疾?。壕抻棕?、M6、MDS、抗葉酸治療后等。2低色素性紅細(xì)胞形態(tài)特征:與同期細(xì)胞相比,漿量少、嗜堿性、著色偏藍(lán),核染色質(zhì)無明顯異常改變“幼漿老核”。成熟紅細(xì)胞中心淡染區(qū)明顯擴大。產(chǎn)生原因:Hb合成障礙(不能說缺鐵)。常見疾?。篒DA、Hb病、慢性感染性貧血等。3紅細(xì)胞大小不等、形態(tài)不整:見于各種增生性貧血。4球形紅細(xì)胞:6.4m,中心淡染區(qū)明顯縮小或消失。見于遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。5橢圓形紅細(xì)胞:橫徑/長徑0.78。

20、見于遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥。6靶形紅細(xì)胞:見于低色素性貧血、地貧等。7嗜多色性紅細(xì)胞:成熟紅細(xì)胞染灰藍(lán)色或淺灰色。多表示骨髓造血功能活躍,多見于溶貧、失血性貧血等。8嗜堿性點彩紅細(xì)胞:瑞氏染色后在紅細(xì)胞漿中有藍(lán)黑色細(xì)小顆粒存在。表示骨髓再生加速。鉛中毒時多見。9裂紅細(xì)胞:即紅細(xì)胞碎片??梢娪谖⒀懿⌒匀茇?、DIC及損傷性。10紅細(xì)胞中出現(xiàn)異常結(jié)構(gòu)豪-周小體(Howoll-Jolly,s):屬核殘余物。可見于巨幼貧、溶貧、脾切除后、鉛中毒等。卡波環(huán)(Cabot,s ring):可見于鉛中毒、巨幼貧等。(三)淋巴細(xì)胞形態(tài)異常1異型淋巴細(xì)胞:分漿細(xì)胞型 、單核細(xì)胞、幼稚型??梢娪诔鲅獰?、傳單及其它

21、病毒感染。2原、幼淋巴細(xì)胞:淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤等。(四)單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)形態(tài)異常1惡組:多形性、多核異組。2急單、類單核細(xì)胞白血病反應(yīng)等。3戈謝細(xì)胞(Gaucher):戈謝病。4尼曼-皮克細(xì)胞(Niemann-pick):尼曼-皮克病。(五)巨核細(xì)胞系統(tǒng)形態(tài)異常1幼巨產(chǎn)板:ITP。2小巨核:大小與成熟淋巴細(xì)胞相似,形態(tài)不規(guī)則,有偽足突起,核染色質(zhì)濃集,無明核仁??梢娪诎籽?、MDS等。3巨大血小板:見于巨大血小板綜合癥。第二章 檢驗的基本方法第一節(jié) 制片方法(1學(xué)時)掌握:制片及染色的基本方法。了解:染液及緩沖液的配制方法。一、骨髓制片1 第一次骨髓穿刺患者,骨髓涂片8張以上或?qū)⑺楣撬?/p>

22、液全部涂完,同時涂外周血片4張。2 復(fù)查病人,骨髓涂片4張,同時涂外周血片2張。二、脫落細(xì)胞制片1 一般包塊穿刺,涂片12張。2 胸腹水及尿液標(biāo)本,取50ml以上離心(3000r/分)10分鐘,取沉淀物涂片2張。3 腦脊液標(biāo)本,將全部送檢物離心(3000r/分)沉淀,取沉淀物涂片1張。4 痰液標(biāo)本,取可疑部分涂片35張。第二節(jié) 血細(xì)胞及脫落細(xì)胞瑞氏-姬姆薩染色(1學(xué)時)一、試劑1. 瑞氏染色液: 稱1克瑞氏染粉,加入1瓶甲醇(分析純,約500ml)中混勻,室溫放置3個月后應(yīng)用或每天混勻1次,放置室溫連續(xù)7天后應(yīng)用。2. 姬姆薩染色液: 稱0.5克姬姆薩(吉氏)染粉,加入33ml丙三醇(甘油,分

23、析純)中混勻,放56水浴箱中3小時以上,中間混勻35次,取出冷確至室溫,再加入33ml甲醇(分析純)中,混勻即可應(yīng)用。3. 磷酸鹽緩沖液(PH=6.46.8):磷酸二氫鉀 (無水,分析純) 5克磷酸氫二鈉(含12.H2O,分析純) 5克 蒸餾水 10000ml 溶解混勻備用4. 姬姆薩染色液磷酸鹽緩沖液混合比例:姬姆薩染色液約23ml,加磷酸鹽緩沖液約3040ml混勻即可應(yīng)用。每天上下午各新鮮配制1次。二、染色方法 1 血或骨髓涂片在瑞氏染色液中固定58秒鐘。2 放入姬姆薩染色液磷酸鹽緩沖液混合液中染色1520分鐘,慢性粒細(xì)胞白血病患者涂片染色30分鐘,取出涼干或用濾紙吸干即作鏡下觀察。第三、

24、四節(jié) 血象及骨髓象檢驗分析步驟(2學(xué)時)掌握:血象檢驗結(jié)果及骨髓象檢驗結(jié)果的正常值,正常骨髓象的正常形態(tài)特征。 熟悉:常見血液病的臨床表現(xiàn)及血象、骨髓象的形態(tài)學(xué)改變特征。了解:其他系細(xì)胞的正常形態(tài)及異常形態(tài)。(一)血象檢驗1在做骨髓穿刺的同時須做血象檢驗BRC、RC、WBC、PLT計數(shù)。涂片染色觀察。紅細(xì)胞形態(tài)有無異常。白細(xì)胞形態(tài)有無異常。血小板形態(tài)及數(shù)量有無異常。有無寄生蟲及其他異常細(xì)胞。2、作用提供思路一系減少:Hb、WBC及PLT正常單純貧血。 WBC、Hb及PLT正常粒細(xì)胞減少或缺乏。 PLTHb及WBC正常ITP。二系減少:Hb及PLTWBC正常ITP、急白、MDS、巨幼貧。三系減少

25、:Hb、PLT及WBC均AA、急白、巨幼貧。提供診斷依據(jù)骨髓象相似,血象有區(qū)別如:球形RBC癥 骨髓紅系、血象有核紅、球形RBC。 IDA 骨髓紅系、血象無有核紅、RBC中心淡染區(qū)擴大。血象相似,骨髓象不同如:AA 血象三系、骨髓巨核細(xì)胞及無白血病細(xì)胞。 非白血病性白血病 血象三系、骨髓有白血病細(xì)胞。 MA 血象三系,骨髓粒系、紅系、巨核系均有巨幼變。血象有明顯變化、骨髓無變化如:傳單 血象淋巴細(xì)胞、異淋(10%)、骨髓無變化。 傳淋 血象淋巴細(xì)胞、異淋、骨髓無變化。骨髓有變化、血象無明顯變化如:戈謝病 骨髓有戈謝細(xì)胞、血象無明顯變化。 尼曼-皮克病 骨髓有尼曼-皮克細(xì)胞、血象無明顯變化。(二

26、)骨髓象檢查凡疑有血液系統(tǒng)或并發(fā)血液系統(tǒng)疾病均應(yīng)作骨髓穿刺檢查1、適應(yīng)癥檢查血常規(guī)有問題:血象增高、減少。臨床體征有不明原因貧血、出血、發(fā)熱、骨痛、肝脾淋巴結(jié)腫大。2、禁忌癥由于凝血因子缺陷引起的出血性疾病,如血友病。晚期妊娠作骨穿檢查要慎重。小兒及不合作患者不宜作胸骨穿刺術(shù)。3、標(biāo)本采集:一般由臨床醫(yī)生作。采集部位:胸骨、脊突、髂骨、脛骨粗?。?歲以下小兒)。采集質(zhì)量保證無菌、嚴(yán)防感染。死亡病例應(yīng)在30分鐘內(nèi)完成。量不能多,一般不超過0.2ml,否則導(dǎo)致血?。ɑ煅绊懪卸ㄔ\斷。對某些疾病采取多部位穿刺可提高診斷率。如轉(zhuǎn)移癌、骨髓瘤等在病變或骨痛部位穿刺其陽性率較高;如AA多部位穿刺有利確

27、診。涂片質(zhì)量保證推片時角度太大、太快都使涂片厚,反之則薄。先涂血片、后涂骨髓片。骨髓抽太多,制片人應(yīng)將剩骨髓液的玻片斜立,用棉花在斜面的底部吸去部分血液,再行涂片,底片不能丟。作好標(biāo)識:姓名、血片(B)、骨髓(M)。涂片中前3張涂片,對估計PLT量較好。判定骨髓取材滿意的幾項指標(biāo)抽吸骨髓時病人有特殊的痛感。骨髓液及涂片均可見骨髓小粒(骨髓渣)和脂肪滴。顯微鏡觀察涂片可發(fā)現(xiàn)骨髓特有細(xì)胞。含有大量幼粒幼紅細(xì)胞,粒細(xì)胞桿狀核與分葉核的比值大于血片中的比值。干抽的概念:是指非技術(shù)錯誤或穿刺位置不當(dāng)而抽不出骨髓液或只得到少量血液。其常見疾病有:原發(fā)性或繼發(fā)性骨髓纖維化。骨髓增生極度活躍,細(xì)胞過于濃集。如

28、:白血病、真紅。骨髓增生減低:AA。腫瘤骨髓浸潤:惡淋、MM、轉(zhuǎn)移癌等。4、檢驗的方法及步驟(1)低倍鏡觀察取材、涂片、染色情況:采用“良好”、“尚可”、“欠佳”等標(biāo)準(zhǔn)進行評價。判定骨髓有核細(xì)胞增生程度:有核細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞之比,分五級:增生極度活躍:平均約 1:1增生明顯活躍:平均約 1:10增生活躍: 平均約 1:20增生減低: 平均約 1:50增生極度減低:平均約 1:200觀察涂片尾部及邊緣有無大的或成群(團)的異常細(xì)胞,同時計數(shù)全片巨核細(xì)胞。(2)油鏡觀察選擇部位:在涂片體、尾交界處,選擇細(xì)胞分布比較均勻處。有核細(xì)胞分類計數(shù):可根據(jù)增生程度確定分類總數(shù)增生減低及極度減低: 分100或

29、200個細(xì)胞。增生活躍: 分200或500個細(xì)胞。增生明顯活躍及極度活躍: 分500個細(xì)胞。觀察細(xì)胞形態(tài)粒系:中毒顆粒、空泡、有無巨幼變粒細(xì)胞、Aure小體等。紅系:幼紅細(xì)胞及成熟紅細(xì)胞有無異常變化。巨核系:小巨核、幼巨產(chǎn)板、巨大血小板、估計血小板量。注意有無寄生蟲。判定低倍鏡下觀察到的異常細(xì)胞性質(zhì)。(3)計算結(jié)果根據(jù)分類結(jié)果計算出各系統(tǒng)及各階段細(xì)胞的百分率。計算粒紅比值:粒細(xì)胞系總和/紅細(xì)胞系總和。(4)填寫報告根據(jù)骨髓象分類結(jié)果,按報告單要求逐項進行填寫。做好骨髓象所見的形態(tài)特征描述。(5)骨髓報告分析及意見取材、涂片、染色情況:良好、尚可、欠佳。骨髓增生程度,粒:紅=? : ?。粒系:紅

30、系:淋巴系或單核系:全片巨核細(xì)胞數(shù),根據(jù)血小板分布估計其量是多、正常、少。有無寄生蟲。血片分類及所見進行描述。寫出診斷意見:根據(jù)血象、骨髓象和細(xì)胞化學(xué)染色所見,結(jié)合臨床資料,提出具體診斷意見或供參考的意見。診斷意見分為以下幾種:肯定性診斷:骨髓有特異性變化,臨床表現(xiàn)又典型者,如各種白血病、MA、MM、轉(zhuǎn)移癌、戈謝病、尼曼-皮克病等。支持性診斷:血象、骨髓象有形態(tài)改變,可解釋臨床表現(xiàn),如IDA、AA、溶貧等??梢尚栽\斷:骨髓象有部分變化或出現(xiàn)少量異常細(xì)胞,臨床表現(xiàn)又不典型,可能為某種疾病的早期或前期或不典型病例者,如難治性貧血等,要結(jié)合臨床、作相應(yīng)的檢查,并動態(tài)觀察其變化。排除性診斷:如臨床上懷

31、疑ITP的患者,其骨髓中血小板易見(不少),巨核細(xì)胞無成熟障礙,即可排除ITP的可能性。形態(tài)學(xué)描寫:骨髓有些改變,但提不出上述性質(zhì)診斷意見,可簡述其形態(tài)學(xué)變化的主要特點,并建議作動態(tài)觀察,盡可能提出進一步檢查的建議。填寫報告日期并簽名。5、骨髓象檢查的注意事項由于細(xì)胞形態(tài)變化多種多樣,故觀察細(xì)胞時不能根據(jù)某一、二個特點就輕易作出肯定性診斷或否定性診斷,要全面觀察細(xì)胞的形態(tài)變化,結(jié)合臨床綜合分析作出判斷。同一病人的骨髓涂片,可因制作涂片不佳(太厚、太薄)、染色不好、選擇分類或觀察的部位不當(dāng)均易導(dǎo)致判斷錯誤。觀察細(xì)胞形態(tài)要認(rèn)識到血細(xì)胞的發(fā)育是一個連續(xù)不斷的過程,對各系細(xì)胞劃分為若干階段是人為劃分的

32、,在實際觀察中常會遇到一些細(xì)胞既有上一階段的某些特征,又有下一階段的某些特點,由于血細(xì)胞是向成熟方向發(fā)育,故一般遇此情況歸入下一階段。對于個別介于兩系統(tǒng)之間的細(xì)胞難以判斷時,可采用大數(shù)歸類法(即將此類難以判斷的細(xì)胞歸入細(xì)胞多的細(xì)胞系)。如在紅系較多的骨髓片中,將介于漿細(xì)胞與幼紅細(xì)胞之間的細(xì)胞歸入紅系細(xì)胞;介于原粒細(xì)胞與原淋巴細(xì)胞之間的細(xì)胞,一般情況原粒細(xì)胞較原淋巴細(xì)胞易見,故應(yīng)歸入原粒;如為急性淋巴細(xì)胞白血病的病人,應(yīng)歸入原淋巴細(xì)胞。切忌在急性白血病骨髓象中分出多種原始細(xì)胞(如原粒、原單、原淋都有)的現(xiàn)象。急性白血病時,各系統(tǒng)原始細(xì)胞在理論上雖各有特征,但有時及為相似,很難鑒別,這時應(yīng)注意觀察

33、伴隨出現(xiàn)的幼稚細(xì)胞、成熟細(xì)胞,并與其比較,同時要結(jié)合細(xì)胞化學(xué)染色、血象細(xì)胞形態(tài)等綜合考慮,推測原始細(xì)胞的歸屬。有時可見到難以識別的細(xì)胞,可參考涂片上其他細(xì)胞后作出判斷,如仍不能確定可歸入“分類不明細(xì)胞”,但不宜太多,若有一定數(shù)量,則應(yīng)通過細(xì)胞化學(xué)染色、集體閱片或會診等方法弄清類別。骨髓涂中巨核細(xì)胞減少或血小板減,而外周血象中血小板數(shù)正常時,則往往是由穿刺凝固或涂片凝固所致。作骨髓細(xì)胞學(xué)檢查時,應(yīng)同時作血象細(xì)胞學(xué)檢查,這有助于疾病的診斷及化療后療效判斷。(三)判定骨髓計數(shù)值的高低根據(jù)骨髓各系統(tǒng)各階段細(xì)胞的計數(shù)值與其相應(yīng)的X±SD的離散程度進行判斷。計數(shù)值:在X±1SD以內(nèi) 視

34、為正常 在X1SD以下 視為減低 在X1SD2SD之間 視為增高 在X2SD以上 視為明顯增高 從第五節(jié)起以下的實驗課均讓學(xué)生自已動手做,教師輔導(dǎo)。 第五節(jié) 大致正常骨髓象(4學(xué)時)掌握:血象檢驗結(jié)果及骨髓象檢驗結(jié)果的正常值,骨髓各系統(tǒng)各階段細(xì)胞的正常形態(tài)特征,正常骨髓象報告的書寫方法。熟悉:其他系細(xì)胞的正常形態(tài)。一般符合列情況者,可視為大致正常骨髓象。1骨髓有核細(xì)胞增生活躍。2粒紅比值:24:1。3各系統(tǒng)各階段細(xì)胞比值在正常范圍,形態(tài)無明顯異常。粒系:約占4060%,其中原粒2%,早幼粒5%,中性中幼粒8%12%,中性晚幼粒10%15%,中性桿狀核15%20%,中性分葉核12%20%,且桿狀

35、分葉,嗜酸5%,嗜堿1%。紅系:約占20%25%,原紅1%,早幼紅5%,以中、晚幼紅細(xì)胞為主、各約占10%,形態(tài)無異常。淋巴細(xì)胞系:約占1525%,均為成熟淋巴細(xì)胞,原幼淋巴細(xì)胞小兒偶見。單核及漿細(xì)胞系:各4%。無原幼單及原幼漿細(xì)胞。巨核系:通常在1.5×3cm的涂片膜 上,可見735個巨核細(xì)胞。其中原巨0或罕見,幼巨05%,顆粒巨1027%,產(chǎn)板巨44%60%,裸核030%。血小板易見,呈堆存在。其它細(xì)胞:可見少量非造血細(xì)胞,如組織細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、肥大細(xì)胞、破骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等。核分裂象少。無異常細(xì)胞及寄生蟲。各系細(xì)胞形態(tài)正常。第六節(jié) 臨床血液生化和血細(xì)胞化學(xué)一、細(xì)胞化學(xué)

36、染色(4學(xué)時)掌握:NAP染色、鐵粒染色、POX染色方法、結(jié)果判定、正常值及臨床意義。熟悉:NAP染色、鐵粒染色、POX染色方法的試劑配制。了解:NAP染色、鐵粒染色、POX染色方法的。(一)堿性磷酸酶染色(NAP) 鈣鈷法 1.原理 細(xì)胞內(nèi)的堿性磷酸酶在PH9.29.8時,將底物-甘油磷酸鈉水解,產(chǎn)生磷酸根,后者與其質(zhì)液中的鈣離子作用形成磷酸鈣,再與硝酸鈷起反應(yīng),形成磷酸鈷,最后與硫化銨作用形成硫化鈷黑色沉淀定位于胞漿中。2.試劑(1)備用試劑:95%乙醇 2%CaCl2 2%硝酸鈷 1%硫化銨 -甘油磷酸鈉 Tris-HCl緩沖液(PH9.5):Tris6g溶于400ml水中,加0.1MH

37、Cl80ml, 調(diào)PH9.5, 加水至500ml(2)孵育液(每次必須新鮮配制):Tris緩沖液20ml,2%CaCl220ml,甘油磷酸鈉200mg。3.方法(1)新鮮血片用95%乙醇固定10min,取出,自然干燥。(2)將孵育液放入45水浴箱中先預(yù)溫5min后,再放入涂片孵育30min, 取出涂片(不沖洗)立即放入2%硝酸鈷中5min,取出用自來水充分沖洗干凈。(3)放入1%硫化銨溶液(每次必須新鮮配制)中2min,用自來水沖洗干凈,用核固紅復(fù)染30min。4. 結(jié)果 陽性:中性粒細(xì)胞胞漿內(nèi)有棕黑色沉淀。 陰性:中性粒細(xì)胞胞漿內(nèi)無棕黑色沉淀。5. 正常參考值 成人:積分 80分左右。 兒童

38、:因年齡而異。6. 臨床意義(1)細(xì)菌:積分球菌>GN桿菌,病毒減低或無變化。但NAP積分正常 / ,不能除外細(xì)菌感染。(2)慢粒,類白。(3)ALL,ANLL。(4)AA,PNH正常 / 。(5)惡組,反應(yīng)性組織細(xì)胞增多。(6)增性紅細(xì)胞增多癥,繼發(fā)性紅細(xì)胞增多正常 。(7)激素治療后NAP。(8)妊娠期NAP。7. 質(zhì)量保證(1)孵育液、1%硫化銨每次實驗必須新鮮配制。(2)Tris-HCl緩沖液的PH應(yīng)控制在9.29.8之間。(3)溫度應(yīng)嚴(yán)格控制在45左右(上下不超過1)。(4)涂片在孵育液中準(zhǔn)確溫育30分鐘。(5)涂片從孵育液中取出時不能沖洗,應(yīng)直接放入硝酸鈷,否則實驗失敗。(6

39、)涂片從硝酸鈷中取出時應(yīng)用自來水沖洗3分鐘,否則涂片太臟,結(jié)果不好觀察。(7)每次染色必須作對照。(二)鐵染色1.原理 骨髓小粒中的含鐵血黃素稱細(xì)胞外鐵,其中的三價鐵與分子中的蛋白質(zhì)結(jié)合不牢固,經(jīng)稀鹽酸處理后而游離,并能在酸性亞鐵氰化鉀溶液中產(chǎn)生普魯士藍(lán)反應(yīng)。細(xì)胞內(nèi)鐵也可用此法顯示。根據(jù)反應(yīng)的強弱了解骨髓中鐵的含量。2.試劑(1) 酸性亞鐵氰化鉀溶液 200g/L亞鐵氰化鉀溶液 5份濃鹽酸 1份取200g/L亞鐵氰化鉀溶液置于試管中,緩緩滴加濃鹽酸,邊滴邊搖勻,至出現(xiàn)白色沉淀,再滴加200g/L亞鐵氰化鉀溶液,亦邊滴邊搖勻,至白色沉淀消失為止,備用。(2)2g/L核固紅硫酸鋁溶液取硫酸鋁2g溶

40、于100ml蒸餾水中,再加入核固紅0.2g,置37水浴中1小時,并隨時振搖,使溶解,過濾后使用。3.方法(1) 選髓粒豐富的骨髓片,用甲醇固定10分鐘。(2) 髓片上滴滿酸性亞鐵氰化鉀溶液,染色30分鐘。(3) 用蒸餾水沖洗后,用核固紅復(fù)染20分鐘。4.結(jié)果判斷 幼紅細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)藍(lán)綠色顆粒為陽性。5. 正常參考值 正常:細(xì)胞內(nèi)鐵>20%,細(xì)胞外鐵+。 IDA:細(xì)胞內(nèi)鐵<15%,細(xì)胞外鐵陰性。6. 質(zhì)量保證(1) 需觀察外鐵時玻片最好作去鐵處理,取材涂片后應(yīng)盡量減少污染鐵,最好立即進行染色。(2) 亞鐵氰化鉀溶液少量配制,如與鹽酸混合后出現(xiàn)藍(lán)色必須重配。(3) 酸性亞鐵氰化鉀溶液必須新

41、鮮配制。(4) 選擇髓粒豐富的骨髓涂片。(5) 胞外鐵較規(guī)則,呈圓或橢圓,與細(xì)胞存在于同一平面,污染鐵與細(xì)胞不在同一平面。(6) 瑞氏染色后的骨髓片,用甲醇脫色后仍可作鐵染色。(7) 作陽性對照。7.臨床意義(1) 細(xì)胞內(nèi)、外鐵“”、吞噬細(xì)胞內(nèi)無貯存鐵,可診斷為IDA。(2) 細(xì)胞內(nèi)鐵“”、外鐵“”、吞噬細(xì)胞內(nèi)有貯存鐵,可診斷為ACD。(3) 細(xì)胞內(nèi)鐵“”、外鐵“/N”、紅細(xì)胞形態(tài)小、低色素,提示可能為Hb病。(4) 細(xì)胞內(nèi)鐵“”、外鐵“/N”、環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞15%,可考慮為環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞性貧血(RAS)。(5)MDS、AA:細(xì)胞內(nèi)、外鐵均“”。(三)過氧化物酶染色法(POX)1.原理 細(xì)胞

42、內(nèi)的過氧化物酶(peroxidase)能將底物的過氧化氫分解,產(chǎn)生新生態(tài)氧。后者將試劑中的聯(lián)苯胺氧化為聯(lián)苯胺藍(lán),它是一種不穩(wěn)定的中間產(chǎn)物,無需酶的作用進而變成棕色化合物沉淀于酶的所在部位。2試劑(1)第一液聯(lián)苯胺 0.3g360g/L亞硝基鐵氧化鈉飽和液 1ml95%乙醇 加至100ml貯存于棕色瓶中,可保存一年。小瓶分裝備用。(2)第二液(稀過氧化氫液,新鮮配制)3%過氧化氫 0.3ml蒸餾水 25ml3方法(1)于新鮮干燥血涂片或骨髓涂片上, 滴加第一液58滴,使蓋滿整個血膜,作用12分鐘。(2)滴加等量的第二液,混勻,染48分鐘。(3)勿傾去染液,直接用水沖洗。(4)干燥后再用瑞氏染液復(fù)

43、染。4結(jié)果 陰性:無藍(lán)色或藍(lán)棕色顆粒。 弱陽性:藍(lán)色或藍(lán)棕色顆粒小,分布較稀疏。 陽性:藍(lán)色或藍(lán)棕色顆粒略粗,分布較密集。強陽性:藍(lán)色或藍(lán)棕色顆粒粗大。5. 質(zhì)量保證(1) 聯(lián)苯胺配制在85%88%的乙醇溶液中染色效果較好,勿用90%95%的乙醇,否則細(xì)胞表面蛋白質(zhì)很快凝固,妨礙試劑向內(nèi)滲入而作用減弱。(2) 過氧化氫需新鮮配制,其濃度與加入量勿隨意更改。6.臨床意義(1) 白血病類型:原始及幼稚細(xì)胞 陽性強:AML 陽性率3%:ANLL 弱陽性:AMOL 陽性率3%:ALL(2) 成熟中性粒細(xì)胞過氧化物酶變化(3) 活性:ALL、CLL、感染、AA等?;钚裕篈ML、AMOL。(4) 惡組細(xì)胞

44、:()二、血液生化試驗(選做4學(xué)時)掌握:Coombs試驗、蔗糖溶血試驗、Hb電泳及HbF等試驗的操作方法,結(jié)果判定,正常值及臨床意義。熟悉:Coombs試驗、蔗糖溶血試驗、Hb電泳及HbF等試驗的原理。了解:Coombs試驗、蔗糖溶血試驗、Hb電泳等試驗的試劑配制方法。(一)抗人球蛋白試驗(Coombs試驗,直接法)1.原理 抗人球蛋白試驗(Coombs試驗)是用于檢驗不完全抗體的試驗。用正常人血清、血漿或血漿球蛋白注射免疫家兔,使兔體內(nèi)產(chǎn)生抗人球蛋白抗體(溫反應(yīng)抗體)。其方法有直接試驗和間接試驗兩種。直接試驗的目的是檢查病人紅細(xì)胞表面的不完全抗體、即經(jīng)鹽水洗滌后的致敏紅細(xì)胞懸液中加入抗人球

45、蛋白血清,觀察是否發(fā)生凝集,發(fā)生凝集者為Coombs直接試驗陽性。2. 試劑 抗人球蛋白血清,生理鹽水。3. 方法(1) 取受檢者脫纖維紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次。然后配成20%紅細(xì)胞生理鹽水懸液。(2) 將抗人球蛋白血清按1:2、1:4、1:8、1:16的比例稀釋。(3) 取一塊白瓷板,將上述各稀釋度抗血清各1滴,然后分別加20%紅細(xì)胞1滴,混勻,5分鐘后觀查結(jié)果。4. 結(jié)果 不凝集為陰性,凝集為陽性。按效價報告。5. 正常參考值 正常紅細(xì)胞Coombs試驗直接反應(yīng)呈陰性。6. 質(zhì)量保證(1) 標(biāo)本應(yīng)新鮮。當(dāng)天進行試驗,否則反應(yīng)減弱甚至呈陰性。(2) 紅細(xì)胞應(yīng)充分冼滌,除去吸附的血漿球蛋白,以

46、免中和抗人球蛋白而出現(xiàn)假陰性。(3) 冷凝集素很高的血標(biāo)本,試驗前應(yīng)保持在37,并用溫?zé)猁}水冼滌。(4) 抗凝劑對強抗體無明顯影響,但可能對弱抗體或補體有影響。因此以脫纖維蛋白血為好。7.臨床意義(1) 自身免疫性溶血性貧血時Coombs直接試驗常為陽性。(2) 部分慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤、傳染性單核增多癥、巨球蛋白血癥、g-重鏈病、SLE、Evan綜合征(ITP伴自免溶貧)可出現(xiàn)Coombs直接試驗陽性。(二)糖水試驗1.原理 低離子濃度的庶糖溶液在37溫育條件下,可促進補體成分與紅細(xì)胞膜的結(jié)合,使補體敏感的紅細(xì)胞形成小孔,庶糖水溶液進入紅細(xì)胞內(nèi)引起紅細(xì)胞膜破裂,發(fā)生溶血現(xiàn)象。 2試劑1

47、00g/L蔗糖溶液,38g/L枸櫞酸鈉溶液。3方法(1)取患者枸櫞酸鈉抗凝血0.5ml,放于4.5ml100g/L蔗糖溶液中。(2)混合后置37水浴中30分鐘。(3)低速離心,觀察上清液有無溶血。4結(jié)果陰性:無溶血;陽性:有溶血。5. 質(zhì)量保證器皿必須清潔干燥,以免溶血。每次實驗時作正常對照。6.臨床意義(1) PNH患者常呈陽性,AA-PNH綜合征患者亦可陽性。(2) 部分自身免疫性溶血性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥患者可呈陽性。(3) 健康人呈陰性反應(yīng)。(三)酸溶血試驗(Hams試驗)1.原理 陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)病人的紅細(xì)胞由于膜有缺陷,對補體溶血效應(yīng)的敏感性增加,在酸化的正常血清中(PH6.66.8),經(jīng)37孵育,易破壞溶血。2試劑(1)25mol HCl溶液。(2)8.5g/LnaCl溶液。3方法(1) 取患者血4ml于有小玻璃珠的三角燒瓶內(nèi),輕搖使脫纖維,將此去纖維血用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞3次, 配成50%紅細(xì)胞懸液。(2) 取患者血4ml(不抗凝),待凝固后分離血清。(3) 按(1)、(2)方法取與患者同型或AB型正常對照的血制備紅細(xì)胞懸液和血清。(4) 取2支小試管,按下表操作。實驗操作步驟反應(yīng)物 待測管

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