第八章 抗生素

1、第八章第八章 抗生素類藥物的分析抗生素類藥物的分析（Antibiotics）整理課件2第一節(jié)：概述第一節(jié)：概述1、定義：抗生素是某些微生物的代謝產(chǎn)物或合成、定義：抗生素是某些微生物的代謝產(chǎn)物或合成的類似物，在小劑量的情況下能抑制微生物的生長(zhǎng)的類似物，在小劑量的情況下能抑制微生物的生長(zhǎng)和存活，而對(duì)宿主不會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的毒性。和存活，而對(duì)宿主不會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的毒性。2、特點(diǎn)：由生物體產(chǎn)生或人工合成、特點(diǎn)：由生物體產(chǎn)生或人工合成 化學(xué)純度低化學(xué)純度低 結(jié)構(gòu)、組成復(fù)雜結(jié)構(gòu)、組成復(fù)雜 對(duì)他種生物體有抑制作用對(duì)他種生物體有抑制作用3、名稱演變：抗生素、名稱演變：抗生素抗菌素抗菌素抗生素抗生素 60-70年年 80

2、年后年后整理課件3l一、抗生素類藥物一般檢查項(xiàng)目：一、抗生素類藥物一般檢查項(xiàng)目： 鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn): 用化學(xué)法、物理化學(xué)法以及生物學(xué)法用化學(xué)法、物理化學(xué)法以及生物學(xué)法來確認(rèn)是哪種抗生素來確認(rèn)是哪種抗生素 毒性試驗(yàn)毒性試驗(yàn): 控制藥品中的毒性物質(zhì)控制藥品中的毒性物質(zhì) 無菌試驗(yàn)無菌試驗(yàn): 檢查藥品中有無雜菌污染檢查藥品中有無雜菌污染 熱源試驗(yàn)熱源試驗(yàn): 控制藥品中的致熱物質(zhì)控制藥品中的致熱物質(zhì)整理課件4 水分測(cè)定水分測(cè)定: 控制水分含量控制水分含量 溶液澄明度檢查溶液澄明度檢查: 檢查不溶性物質(zhì)檢查不溶性物質(zhì) 溶液溶液pH試驗(yàn)試驗(yàn): 測(cè)定測(cè)定pH 降壓試驗(yàn)降壓試驗(yàn): 檢查有降壓作用的雜質(zhì)檢查有降壓

3、作用的雜質(zhì) 效價(jià)測(cè)定效價(jià)測(cè)定: 有效成分測(cè)定有效成分測(cè)定整理課件5物理方法物理方法: :旋光法、紫外、紅外、色譜等旋光法、紫外、紅外、色譜等化學(xué)方法（專屬性不強(qiáng)）：功能團(tuán)反應(yīng)，化學(xué)方法（專屬性不強(qiáng)）：功能團(tuán)反應(yīng)，鑒別和含量的測(cè)定。容量分析法：酸堿鑒別和含量的測(cè)定。容量分析法：酸堿滴定（青霉素含量測(cè)定）和碘量法。滴定（青霉素含量測(cè)定）和碘量法。生物學(xué)方法：酶反應(yīng)、微生物法測(cè)定效價(jià)生物學(xué)方法：酶反應(yīng)、微生物法測(cè)定效價(jià)整理課件6NoImage鑒別方法：鑒別方法：理化方法理化方法生物學(xué)法：生物學(xué)法：微生物法微生物法 官能團(tuán)顯色：官能團(tuán)顯色： 內(nèi)酰胺環(huán)內(nèi)酰胺環(huán)光譜法：光譜法：UVUV、IRIR色譜法色譜

4、法:TLC:TLC、HPLCHPLC整理課件7根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)分類：l內(nèi)酰胺類抗生素：青霉素、頭孢菌素內(nèi)酰胺類抗生素：青霉素、頭孢菌素l氨基糖苷類：鏈霉素、慶大霉素氨基糖苷類：鏈霉素、慶大霉素l四環(huán)素類：四環(huán)素、金霉素四環(huán)素類：四環(huán)素、金霉素l大環(huán)內(nèi)酯類：紅霉素、麥迪霉素大環(huán)內(nèi)酯類：紅霉素、麥迪霉素l多稀大環(huán)類：兩性霉素多稀大環(huán)類：兩性霉素l多肽類：多粘菌素多肽類：多粘菌素l苯烴胺類：氯霉素苯烴胺類：氯霉素l蒽環(huán)類：阿霉素蒽環(huán)類：阿霉素l其他其他： 抗生素類藥物的分類抗生素類藥物的分類 整理課件8整理課件9指分子中含有由四個(gè)原子組成指分子中含有由四個(gè)原子組成-內(nèi)酰胺環(huán)內(nèi)酰胺環(huán)是該類抗生素發(fā)揮生物活

5、性的必需基團(tuán)是該類抗生素發(fā)揮生物活性的必需基團(tuán)和細(xì)菌作用時(shí)，內(nèi)酰胺環(huán)開環(huán)與細(xì)菌發(fā)生?；饔煤图?xì)菌作用時(shí)，內(nèi)酰胺環(huán)開環(huán)與細(xì)菌發(fā)生?；饔?抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。因因-內(nèi)酰胺由四個(gè)原子組成，分子張力較大，化學(xué)內(nèi)酰胺由四個(gè)原子組成，分子張力較大，化學(xué) 性質(zhì)不穩(wěn)定易發(fā)生開環(huán)導(dǎo)致失活。性質(zhì)不穩(wěn)定易發(fā)生開環(huán)導(dǎo)致失活。NHONH2CH2CH2CO O H整理課件10二、分類：經(jīng)典結(jié)構(gòu)藥物二、分類：經(jīng)典結(jié)構(gòu)藥物ORCH2CON HHHNSCOOH青霉素類青霉素類(Penicillins)頭孢菌素頭孢菌素(Cephalosporins)NSHXACOOHRCONHOCephalosporinsX =

6、H- or CH3COO-34567812整理課件11NO1234M o n o b actamNOO1234567OxypenamNO1234567CarbapenemNSO1234567Penem亞胺培南（泰能）亞胺培南（泰能）克拉維酸克拉維酸氨曲南氨曲南分類：非典型結(jié)構(gòu)藥物分類：非典型結(jié)構(gòu)藥物整理課件12l分子中游離羧基具有相當(dāng)強(qiáng)的酸性，能與無機(jī)堿或某些有機(jī)堿形成鹽。l其堿金屬鹽易溶于水，而有機(jī)堿鹽難溶于水，易溶于甲醇等有機(jī)溶劑。NSOHNCOOKCH3CH3OCCH2C2H52NCH2CH2OOCNSOHNCOOHCH3CH3OCCH2NH2整理課件13l青霉素族分子中含有三個(gè)手性碳原

7、子，頭孢菌素族含有兩個(gè)手性碳原子，故都具有旋光性。l根據(jù)此性質(zhì)，可用于定性和定量分析。NSO123456787654321NOS整理課件14 性質(zhì)3 ：紫外吸收特性NSO2 2、頭孢菌素類頭孢菌素類 母核母核有共軛體系有共軛體系 1 1、青霉素青霉素類類 母核無明顯母核無明顯UVUV 多數(shù)有多數(shù)有苯環(huán)取代基苯環(huán)取代基 NOS整理課件15l 干燥干燥條件下青霉素鹽條件下青霉素鹽穩(wěn)定穩(wěn)定。青霉素。青霉素水溶液在水溶液在lpH6-6.8pH6-6.8時(shí)較穩(wěn)定時(shí)較穩(wěn)定。 l - -內(nèi)酰胺環(huán)內(nèi)酰胺環(huán)是該類抗生素結(jié)構(gòu)最不穩(wěn)定的部分。是該類抗生素結(jié)構(gòu)最不穩(wěn)定的部分。四元環(huán)張力大四元環(huán)張力大 酰胺鍵易水解酰胺

8、鍵易水解不穩(wěn)定不穩(wěn)定性因素性因素（某些金屬離子）（某些金屬離子）（溫度）（溫度）失失效效降降解解青青霉霉素素類類酸酸、堿堿、青青霉霉素素酶酶某些氧化劑某些氧化劑、羥胺、羥胺整理課件16例例青霉素的降解反應(yīng)青霉素的降解反應(yīng)青青霉霉素素青霉噻唑酸青霉噻唑酸H2O/OH青霉素酶青霉素酶青霉酸青霉酸H2OpH2100青霉噻唑酰基青霉噻唑?；u胺酸羥胺酸NH2OH青霉烯酸青霉烯酸pH4青霉胺青霉胺CO2青霉醛青霉醛HgCl2例例整理課件17（一）色譜法（一）色譜法1 1、TLCTLC法法對(duì)照品對(duì)照法對(duì)照品對(duì)照法2 2、HPLCHPLC法法和斑點(diǎn)顏色和斑點(diǎn)顏色比較比較供試品供試品對(duì)照品對(duì)照品相同條件相同條

9、件fRRt比較比較供試品供試品對(duì)照品對(duì)照品相同條件相同條件整理課件18 頭孢氨芐頭孢氨芐 maxmax = 262nm = 262nm青霉素青霉素V V鈉鈉 A A280nm280nm/A/A264nm264nm = 1.30= 1.301.501.50A A, ,E Emin ,min ,max max , , ,%cmcm1 11 1光譜圖光譜圖2紫外分光光度法紫外分光光度法(UV)（二）光譜法（二）光譜法1 1、IRIR法法整理課件19整理課件202、IR法法3180cm-1酰胺酰胺 N-H1780cm-1內(nèi)酰胺內(nèi)酰胺 C=O3470cm-1酚羥基酚羥基 O-H1690cm-1仲酰胺仲酰

10、胺 C=O1250cm-1酚羥基酚羥基 C-O以阿莫西林為例以阿莫西林為例整理課件21- -內(nèi)酰胺環(huán)內(nèi)酰胺環(huán)酰胺酰胺115251680- -= =cm、VOC117501800- -= =cmVOCNHV= =13300- -cmCOOHV- -114101600- -cm、羧基羧基整理課件22l某些具有某些具有-氨基氨基的本類藥物，如氨芐西的本類藥物，如氨芐西林，遇林，遇茚三酮茚三酮即顯即顯藍(lán)紫色藍(lán)紫色。 NH2CONSOHNCOOHCH3CH3CH2藍(lán)藍(lán)紫紫色色氨氨基基茚茚三三酮酮- - 整理課件23-氨基、伯胺氨基、伯胺某些羥基胺類某些羥基胺類酮式酮式烯醇式烯醇式茚三酮茚三酮茚三酮茚三酮

11、縮合縮合藍(lán)紫色藍(lán)紫色+H2OCNCH2RC OH2RCHH2NCOOH2OHCCOCOCOHNH2CCOCOCOCOHCNCCOCOCOCOHCHRNCCOCOCO整理課件24l 青霉素族、頭孢菌素族藥品中，許青霉素族、頭孢菌素族藥品中，許多制成多制成鉀鹽或鈉鹽鉀鹽或鈉鹽供臨床使用，因而可供臨床使用，因而可利用其利用其火焰反應(yīng)火焰反應(yīng)進(jìn)行鑒別。進(jìn)行鑒別。整理課件25三、特殊雜質(zhì)的檢查三、特殊雜質(zhì)的檢查 本類抗生素的特殊雜質(zhì)主要有本類抗生素的特殊雜質(zhì)主要有高分子聚合高分子聚合物、有關(guān)物質(zhì)、異構(gòu)體物、有關(guān)物質(zhì)、異構(gòu)體等，一般采用等，一般采用HPLCHPLC法法控制其限量，也有采用測(cè)定控制其限量，也

12、有采用測(cè)定雜質(zhì)的吸收度雜質(zhì)的吸收度來來控制雜質(zhì)量的?？刂齐s質(zhì)量的。整理課件26 （二）有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體（二）有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體 例：頭孢氨芐中有關(guān)物質(zhì)的檢查（反相例：頭孢氨芐中有關(guān)物質(zhì)的檢查（反相HPLCHPLC法）法） 取本品，流動(dòng)相，成取本品，流動(dòng)相，成0.4mg/ml0.4mg/ml，得供試液，得供試液 供試液，流動(dòng)相，成供試液，流動(dòng)相，成4ug/ml4ug/ml，得對(duì)照液，得對(duì)照液 對(duì)照品，流動(dòng)相，成對(duì)照品，流動(dòng)相，成4ug/ml4ug/ml，得雜質(zhì)對(duì)照液，得雜質(zhì)對(duì)照液 雜質(zhì)雜質(zhì) ，外標(biāo)法。，外標(biāo)法。 其他雜質(zhì)，主成分自身對(duì)照法。其他雜質(zhì)，主成分自身對(duì)照法。 頭孢氨芐以青霉素鉀為原料，經(jīng)

13、氧化、擴(kuò)環(huán)、裂解得頭孢氨芐以青霉素鉀為原料，經(jīng)氧化、擴(kuò)環(huán)、裂解得7-7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（7-ADCA7-ADCA），再與側(cè)鏈），再與側(cè)鏈a-a-苯甘苯甘氨酸縮合而成。這兩種原料有可能成為主要雜質(zhì)。氨酸縮合而成。這兩種原料有可能成為主要雜質(zhì)。整理課件27 （三）雜質(zhì)吸收度的檢查（三）雜質(zhì)吸收度的檢查例：青霉素鈉（鉀）例：青霉素鈉（鉀） 取本品，加水，成取本品，加水，成1.80mg/ml1.80mg/ml。A A280nm 280nm 控制雜質(zhì)控制雜質(zhì) 不得大于不得大于0.100.10， A A264nm264nm 控制青霉素鈉（鉀）的含量控制青霉素鈉（鉀）的含量

14、應(yīng)為應(yīng)為0.80-0.80-0.88 0.88 。整理課件28l氨芐西林鈉：氨芐西林鈉：CHCH2 2ClCl2 2 GC GCl頭孢哌酮：丙酮頭孢哌酮：丙酮 GCGCl頭孢他啶：吡啶頭孢他啶：吡啶 HPLCHPLCl 整理課件29l青霉族和頭孢菌素族的含量測(cè)定青霉族和頭孢菌素族的含量測(cè)定大多大多采用采用理化測(cè)定方法中的理化測(cè)定方法中的HPLCHPLC法法內(nèi)標(biāo)法校正因子內(nèi)標(biāo)法校正因子外標(biāo)法外標(biāo)法特點(diǎn)特點(diǎn) 快速、高效、靈敏快速、高效、靈敏 專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好 一法多用（鑒別、檢查、含測(cè)）一法多用（鑒別、檢查、含測(cè)）整理課件30哌拉西寧哌拉西寧 原料藥原料藥 含量測(cè)定含量測(cè)定色譜

15、條件色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇甲醇0.20.2mol/Lmol/L磷酸二氫鈉溶液磷酸二氫鈉溶液1010氫氧化四乙氫氧化四乙基銨溶液基銨溶液水（水（40040050503 3547547）用磷酸調(diào)節(jié)）用磷酸調(diào)節(jié)pHpH值至值至5.55.5為流動(dòng)相。檢測(cè)波長(zhǎng)為為流動(dòng)相。檢測(cè)波長(zhǎng)為254254nmnm。整理課件31二二 氨基糖苷類抗生素氨基糖苷類抗生素苷苷苷苷元元糖糖縮縮合合 氨基糖苷氨基糖苷苷元苷元氨基糖氨基糖縮合縮合 鏈霉素鏈霉素 雙氫鏈霉素雙氫鏈霉素新霉素新霉素 卡那霉素卡那霉素慶大霉素慶大霉素 巴龍霉素巴龍霉素整理課件32鏈霉素鏈霉素鏈

16、霉胍鏈霉胍 + 鏈霉糖鏈霉糖 + N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺 苷元苷元鏈霉雙糖胺鏈霉雙糖胺NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3鏈霉糖鏈霉糖N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺鏈霉胍鏈霉胍整理課件33慶大霉素慶大霉素 糖糖 苷元苷元絳紅糖胺絳紅糖胺 + 脫氧鏈霉胺脫氧鏈霉胺 + 加洛糖胺加洛糖胺 糖糖 ROC R1R2HNNH2OOHH2NNH2OOOHNHCH3OHCH3絳紅糖胺絳紅糖胺紫素胺紫素胺2-脫氧鏈霉胺脫氧鏈霉胺加洛糖胺加洛糖胺N-甲基甲基-3-去氧去氧-4-甲基戊糖胺甲基戊糖胺整理課件34慶大霉素慶大霉素C復(fù)合物復(fù)

17、合物 慶大霉素慶大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 慶大霉素慶大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 慶大霉素慶大霉素C1a R、R1、R2=H 慶大霉素慶大霉素C2a R=CH3 R1= R2=H 慶大霉素慶大霉素C2b R=R1=H R2=CH3整理課件35一、一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)多與硫酸成鹽多與硫酸成鹽鏈霉素鏈霉素 3個(gè)個(gè)慶大霉素慶大霉素 5個(gè)個(gè)堿性中心堿性中心（一）堿性（一）堿性水溶性水溶性（二）溶解性（二）溶解性（三）（三） UV（四）苷的水解與穩(wěn)定性（四）苷的水解與穩(wěn)定性鏈霉素鏈霉素 pH57.5慶大霉素慶大霉素 pH212 穩(wěn)定穩(wěn)定鏈霉素在鏈霉素在230nm處有吸收，處有

18、吸收，慶大霉素、奈替米星無慶大霉素、奈替米星無整理課件36NH CNHNH2HOOHOHNHCH2NNHOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHCH3坂口反應(yīng)坂口反應(yīng)N-甲基葡萄甲基葡萄糖胺反應(yīng)糖胺反應(yīng)麥芽酚反應(yīng)麥芽酚反應(yīng)整理課件37二、二、 鑒別鑒別 茚三酮反應(yīng)茚三酮反應(yīng)（一）（一）藍(lán)藍(lán)紫紫色色慶慶大大霉霉素素鏈鏈霉霉素素茚茚三三酮酮羥基胺結(jié)構(gòu)羥基胺結(jié)構(gòu)硫酸慶大霉素鑒別硫酸慶大霉素鑒別(1)取本品約取本品約5mg ，加水，加水1ml 溶解后，加溶解后，加0.1 茚三酮茚三酮的水的水飽和飽和正丁醇正丁醇溶液溶液1ml 與與吡啶吡啶 0.5ml，在水浴中加熱，在水浴中加熱5 分分鐘，即顯鐘

19、，即顯紫藍(lán)色紫藍(lán)色。 整理課件38l 具具五碳或六碳糖的氨基糖苷類五碳或六碳糖的氨基糖苷類抗生素經(jīng)抗生素經(jīng)酸酸水解后，水解后，在鹽酸（或硫酸）作用下脫水生成糠醛或羥甲基在鹽酸（或硫酸）作用下脫水生成糠醛或羥甲基糠糠醛醛。這些產(chǎn)物遇。這些產(chǎn)物遇-萘酚或蒽酮萘酚或蒽酮呈色。呈色。OHOH2CCHOOHOHOH2CCHOHOH紅紫色紅紫色整理課件39OHOH2CCHOOOCHCH2OO蒽酮呈色原理：藍(lán)紫色藍(lán)紫色阿米卡星鑒別(1) 取本品約10mg，加水1ml 溶解后，加0.1 蒽酮的硫酸溶液4ml ，即顯藍(lán)紫色。 整理課件40N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)甲基葡萄糖胺反應(yīng)（三（三）甲甲基基葡葡萄萄糖糖胺胺慶慶

20、大大霉霉素素鏈鏈霉霉素素水水解解- - N乙酰丙酮乙酰丙酮OH-吡咯衍生物吡咯衍生物對(duì)二甲氨基苯甲醛對(duì)二甲氨基苯甲醛H+紅色紅色（Elson-Morgan反應(yīng)）反應(yīng)）H+整理課件41 麥芽酚反應(yīng)麥芽酚反應(yīng)（四）（四） 鏈霉糖特有反應(yīng)鏈霉糖特有反應(yīng)鏈鏈霉霉糖糖鏈鏈霉霉素素- -OH麥麥芽芽酚酚紫紫紅紅色色 3FeH+分子重排擴(kuò)環(huán)分子重排擴(kuò)環(huán)整理課件42NH C NH2HOOHOHNHCH2NOOCH3OHCHOOOCH2OHOHOHNHNHNHCH3H2O NaOHOOOHCH3OOCH3Fe3+H+OFe33+/紫紅紫紅麥芽酚麥芽酚整理課件43鏈霉胍特有反應(yīng)鏈霉胍特有反應(yīng)橙橙紅紅羥羥基基喹喹啉

21、啉鏈鏈霉霉胍胍鏈鏈霉霉素素次次溴溴酸酸鈉鈉- - -8OH（或或-萘酚萘酚）NOH8-8-羥基喹啉羥基喹啉坂口反應(yīng)坂口反應(yīng)（五（五） - -萘酚萘酚OHONBrRNHCONH整理課件44（六）（六）- -24SO反應(yīng)反應(yīng)白白 - - BaSOSOBaH+光譜法光譜法（八）（八）慶大霉素?zé)o慶大霉素?zé)oUV吸收吸收nmmax = = 鏈鏈霉霉素素色譜法色譜法（七）（七）整理課件45三、三、 檢查檢查鏈霉素雜質(zhì)鏈霉素雜質(zhì)（一）（一）鏈霉素鏈霉素B（甘露糖鏈霉素）甘露糖鏈霉素） 方法方法 TLC中的對(duì)照品法中的對(duì)照品法 （BP）1. 來源來源 反應(yīng)中間體反應(yīng)中間體整理課件46對(duì)微生物的活性無明顯差異對(duì)微

22、生物的活性無明顯差異毒副作用和耐藥性不同毒副作用和耐藥性不同發(fā)酵菌種不同發(fā)酵菌種不同工藝差別工藝差別C組分比例組分比例不一致不一致規(guī)定控制各組分的相對(duì)百分含量規(guī)定控制各組分的相對(duì)百分含量 HPLC ChPUSPBPJP慶大霉素慶大霉素C組分的測(cè)定組分的測(cè)定（二）（二）整理課件47 .pH吲吲哚哚衍衍生生物物巰巰基基醋醋酸酸鄰鄰苯苯二二醛醛氨氨基基max = 330nm1.衍生化原理衍生化原理 RNH2+HSCH2COOHOH-CHOCHONRSCH2COOH1-烷基硫代烷基硫代-2-烷基烷基異吲哚衍生物異吲哚衍生物整理課件48RPHPLC方法方法 2.規(guī)定規(guī)定 C1 2550% C1a 154

23、0% C2a +C2 2050%計(jì)算計(jì)算 3.%AAAAA%ACCCCiiaa = = 峰面積歸一化法峰面積歸一化法整理課件49整理課件50四、四、 含量測(cè)定含量測(cè)定鏈霉素、慶大霉素鏈霉素、慶大霉素微生物檢定法微生物檢定法 本法系利用抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散作用本法系利用抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散作用量反應(yīng)平行線原理的設(shè)計(jì)，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品兩量反應(yīng)平行線原理的設(shè)計(jì)，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品兩者對(duì)接種的試驗(yàn)菌產(chǎn)生抑菌圈的大小，以測(cè)定供試者對(duì)接種的試驗(yàn)菌產(chǎn)生抑菌圈的大小，以測(cè)定供試品效價(jià)的一種方法。品效價(jià)的一種方法。整理課件51l離子交換色譜法離子交換色譜法l離子對(duì)色譜法離子對(duì)色譜法lRP-HPLC

24、法法整理課件52(Tetracycline Antibiotics)(Tetracycline Antibiotics)整理課件53苯并蒽環(huán)結(jié)構(gòu),C-4為結(jié)構(gòu),是由放線菌產(chǎn)生的,天然有 一、天然四環(huán)素結(jié)構(gòu)特點(diǎn)一、天然四環(huán)素結(jié)構(gòu)特點(diǎn)OHR2HOHNOHOH2NOOR3HHHR1OHCO NH2OHOR2R3R1N(C H3)2HOHHO111098765431212123456789101112R4R4OHOOOHCONH2OHOHHHNR1R2R3R4123456789101112A AB BC CD D4R R1 1 R R2 2 R R3 3 R R4 4四環(huán)素四環(huán)素 H OH CHH O

25、H CH3 3 H 53 H 53年得到年得到土霉素土霉素 OH OH CHOH OH CH3 3 H 50 H 50年得到年得到 金霉素金霉素 H OH CHH OH CH3 3 Cl 48 Cl 48年得到年得到整理課件54二、作用：廣譜抗生素，二、作用：廣譜抗生素，G G+ +、G G- -、部分立克、部分立克 次體、病毒、原蟲等次體、病毒、原蟲等近年來四環(huán)素類抗生素新藥開發(fā)不理想近年來四環(huán)素類抗生素新藥開發(fā)不理想三、作用機(jī)制三、作用機(jī)制: :干擾細(xì)菌蛋白質(zhì)的生物合成干擾細(xì)菌蛋白質(zhì)的生物合成 與細(xì)菌中的與細(xì)菌中的MnMn+ +形成金屬離子絡(luò)合物形成金屬離子絡(luò)合物整理課件55四、理化性質(zhì)：

26、黃色結(jié)晶性粉末四、理化性質(zhì)：黃色結(jié)晶性粉末1 1、酸堿兩性：、酸堿兩性：ArAr1010-OH-OH、=C=C3 3-OH-OH為酸性為酸性 C C4 4 N= N= 為堿性?？扇芩釅A為堿性。可溶酸堿 臨床用其堿，成臨床用其堿，成HClHCl鹽鹽OHOOOHCONH2OHOHHHNR1R2R3R4123456789101112整理課件562 2、穩(wěn)定性：、穩(wěn)定性：PH=2PH=2脫水產(chǎn)物（脫水產(chǎn)物（C C6 6-OH-OH；C C55-H-H）OHOHHOHNOHOH2NOOH3CHHHHOHOHOH2HOHNOHOH2NOOH3CHHHHOHOHHOHNOHOH2NOOCH3HHHHOHH+

27、-H2OOHOHNOHOH2NOHHHOHOHH3C-H+Anhydrotetracycline1)1)在酸性條件下發(fā)生消除反應(yīng)在酸性條件下發(fā)生消除反應(yīng), ,失活失活整理課件57PH=2-6PH=2-6 差向異枸化（差向異枸化（ C C4 4-N-N；由；由 ） 難易：土（氫鍵）四金（位阻）難易：土（氫鍵）四金（位阻）OHOHHOHNOHOH2NOOH3CHHHHOHOHOHHOHHNOHHOH2NOOH3CHHHOHOHOHHOHNOHOH2NOOH3CHHHOHHOHOHHOHNOHOH2NOOH3CHHHOHH4-Epitetracycline2)pH2-6,C-42)pH2-6,C-4

28、二甲胺基易發(fā)生差向異構(gòu)化二甲胺基易發(fā)生差向異構(gòu)化, ,失活失活整理課件58PHPH7 7成內(nèi)酯（成內(nèi)酯（C C環(huán)，環(huán)， C C6 6-OH-OH；C C1111=O =O ）OHOHHOHNOHOH2NOOH3CHHHHOHOHOHOHNOHOH2NOOH3CHHHHOHOHOOHOHNOHOH2NOOH3CHHHHOHOOHOHNOHOH2NOOH3CHHHHOHOOHOHNOHOH2NOOH3CHHHHOH3)OH3)OH- -下下C C環(huán)開裂環(huán)開裂, ,失活失活整理課件59五、臨床用缺點(diǎn)：耐藥性嚴(yán)重五、臨床用缺點(diǎn)：耐藥性嚴(yán)重 吸收不好，血藥濃度低吸收不好，血藥濃度低 影響骨骼生長(zhǎng)影響骨骼

29、生長(zhǎng)孕婦及兒童為何不可用四環(huán)素：孕婦及兒童為何不可用四環(huán)素：牙齒變黃、骨骼生長(zhǎng)抑制牙齒變黃、骨骼生長(zhǎng)抑制4) 和金屬離子的反應(yīng)和金屬離子的反應(yīng)含含OHOH、C=OC=O、=C-OH=C-OH等基團(tuán)，可與等基團(tuán)，可與MnMn+ +生成不溶生成不溶性螯合物性螯合物, ,如成如成CaCa、MgMg、FeFe鹽等鹽等, ,生成不同色生成不同色OHOHHOHNOHOH2NOOH3CHHHHOHOOHHOHNOHOH2NOOH3CHHHHOHMn+Mn+整理課件602. 降解反應(yīng)降解反應(yīng)（1）酸性下降解）酸性下降解脫水金霉素脫水金霉素脫水四環(huán)素脫水四環(huán)素金霉素金霉素四環(huán)素四環(huán)素 pHmax = 445nm

30、max = 435nm橙黃色橙黃色整理課件612CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HON CH3 2HOHCONH2OOHOOHCH3OH脫水四環(huán)素脫水四環(huán)素整理課件622CH3NHOHCONH2OOHOHOOHCH3HOpH26pH26TCOHCONH2OOHOHOOHCH3HCH32NHOETCN CH3 2HOHCONH2OOHOOHCH3OHATCN2CH3OHCONH2OOHOHOHOCH3HEATCpH2pH2整理課件63整理課件64二、二、 鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)H2SO4反應(yīng)反應(yīng)（一）（一）黃色黃色朱紅色朱紅色綠綠藍(lán)藍(lán)深紫色深紫色鹽酸多西環(huán)素鹽酸多西環(huán)素鹽酸土霉素鹽酸土霉

31、素鹽酸金霉素鹽酸金霉素鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素 SOH整理課件65（三）（三）nmmax = = 1mol/L鹽酸鹽酸-甲醇（甲醇（1100）0.01mg/mlUV法法（二）（二）（三）（三）熒光法熒光法土土霉霉素素金金霉霉素素四四環(huán)環(huán)素素綠綠色色熒熒光光藍(lán)藍(lán)色色熒熒光光黃黃色色熒熒光光- -OHUV綠色熒光綠色熒光H+UV整理課件66TLC法法（四）（四）HPLC法法（五）（五） EDTA 克服痕量金屬造成的克服痕量金屬造成的 拖尾現(xiàn)象拖尾現(xiàn)象（六）（六） IR 法法硅藻土做載體硅藻土做載體整理課件67三、三、 檢查檢查有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)（一）（一）HPLC法法自身稀釋對(duì)照法自身稀釋對(duì)照法鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素整理課件68吸收度吸收度（二）（二）nmmax 、鹽酸四環(huán)素鹽酸四環(huán)素整理課件69雜質(zhì)吸收度雜質(zhì)吸收度EATCATC.Anm、控制控制 異四環(huán)素異四環(huán)素控制控制 .An