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1、1會計學(xué)病毒學(xué)病毒感染與細胞凋亡病毒學(xué)病毒感染與細胞凋亡概念:是由一系列基因控制并受復(fù) 雜信號調(diào)節(jié)的細胞自然死亡 的現(xiàn)象。Apoptosis “葉子凋落”左,正常胸腺細胞;右,凋亡胸腺細胞富含半胱氨酸死亡結(jié)構(gòu)域 death effector domain BIDn Caspase 可激活名叫CAD(caspase-activated Dnase)的核酸酶,CAD能在核小體的連接區(qū)將其切斷,形成約為200bp整數(shù)倍的核酸片段。正常情況下CAD存在于胞質(zhì)中,并且與抑制因子ICAD/DFF-45蛋白結(jié)合,不能進入細胞核。Caspase活化后可以降解ICAD/DFF-45,釋放出CAD,使它進入細胞核
2、降解DNA。 nCaspase可直接破壞細胞結(jié)構(gòu),如裂解核纖層,核纖層(Lamina)是由核纖層蛋白通過聚合作用而連成頭尾相接的多聚體,由此形成核膜的骨架結(jié)構(gòu),使染色質(zhì)(chromatin)得以形成并進行正常的排列。在細胞發(fā)生凋亡時,核纖層蛋白作為底物被Caspase在一個近中部的固定部位所裂解,從而使核纖層蛋白崩解,導(dǎo)致細胞染色質(zhì)的固縮。n Caspase可作用于幾種與細胞骨架調(diào)節(jié)有關(guān)的酶或蛋白,改變細胞結(jié)構(gòu)。除此之外,Caspase還能滅活或下調(diào)與DNA修復(fù)有關(guān)的酶、mRNA剪切蛋白和DNA交聯(lián)蛋白。 細胞凋亡的檢測方法形態(tài)學(xué)觀測:染色法、透射和掃描電鏡觀察DNA電泳:DNA片段就呈現(xiàn)出梯狀條帶TUNEL測定法,即DNA斷裂的原位末端標(biāo)記法彗星電泳法(comet assay)流式細胞分析 DNA電泳鑒定電泳鑒定+壞死凋亡細胞色素c誘導(dǎo)的凋亡細胞DNA電泳圖1細胞色素c誘導(dǎo)0 h2細胞色素c誘導(dǎo)1 h3細胞色素c誘導(dǎo)2 h4細胞色素c誘導(dǎo)3 h5細胞色素
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