低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目的變化

1、1/ 3 低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目的變化 低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目的變化一、實(shí)驗(yàn)教學(xué)目標(biāo) 1. 知識(shí)目標(biāo) :理解低溫誘導(dǎo)植物細(xì)胞染色體數(shù)目變化的作用機(jī)制。 2. 能力目標(biāo) :學(xué)會(huì)低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目變化的方法。 3. 情感態(tài)度價(jià)值觀 :體會(huì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來的成就感 ,感受團(tuán)隊(duì)合作的快樂。 二、實(shí)驗(yàn)原理 進(jìn)行正常有絲分裂的植物分生組織細(xì)胞 ,在有絲分裂后期 ,染色體的著絲點(diǎn)分 裂,子染色體在紡錘絲的作用下 ,分別移向兩極 ,最終被平均分配到兩個(gè)子細(xì)胞中 去。 用低溫處理植物分生組織細(xì)胞 ,能夠抑制紡錘體的形成 ,以致影響染色體被拉 向兩極 ,使細(xì)胞也不能分裂成兩個(gè)子細(xì)胞。結(jié)果 ,植物細(xì)胞染色體數(shù)目發(fā)生

2、變化。 三、實(shí)驗(yàn)儀器材料 洋蔥或大蔥、蒜、培養(yǎng)皿、濾紙、紗布、燒杯、鑷子、剪刀、顯微鏡、載 玻片、蓋玻片、冰箱、卡諾氏液、改良苯酚品紅染液、體積分?jǐn)?shù)為 15%的鹽酸 溶液、體積分?jǐn)?shù)為 95%的酒精溶液。 四、實(shí)驗(yàn)方法 1.培養(yǎng)根尖 :將洋蔥放在裝滿清水的廣口瓶 ,讓洋蔥的底部接觸水面。 2.低溫誘導(dǎo) :待洋蔥長(zhǎng)出 1cm 左右的不定根時(shí) ,將整個(gè)裝置放入冰箱的低溫室 (4C)內(nèi),誘導(dǎo)培養(yǎng) 36 小時(shí)。 3固定細(xì)胞形態(tài)：剪去誘導(dǎo)處理的根尖約 0.5-25px 放入卡諾氏液中浸泡 0.5-1 小時(shí),以固定細(xì)胞的形態(tài) ,然后用體積分?jǐn)?shù)約 95的酒精沖洗 2 次。 4. 制作裝片 ：取固定好的根尖 ,

3、進(jìn)行解離 ;漂洗;染色;制片 4 個(gè)步驟,具體操作方 法與“觀察植物細(xì)胞的有絲分裂 ”實(shí)驗(yàn)相同。 5. 觀察裝片 :先用低倍鏡尋找染色體形態(tài)較好的分裂相。視野中既有正常的 二倍2/ 3 體細(xì)胞 ,也有染色體數(shù)目發(fā)生改變的細(xì)胞 ,發(fā)生染色體數(shù)目變化的細(xì)胞中染色 體數(shù)目可能為正常細(xì)胞的兩倍。確認(rèn)某個(gè)細(xì)胞發(fā)生染色體數(shù)目變化后、再用高 倍鏡觀察。 6. 記錄結(jié)果 :對(duì)看到的發(fā)生染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞拍照記錄。 試劑及用途 : (1) 卡諾氏液 :固定細(xì)胞形態(tài)。 (2) 95%酒精:沖洗附著在根尖表面的卡諾氏液。 (3) 解離液:(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 15%HCI 和體積分?jǐn)?shù)為 95%酒精 1:1 混合)使組織中

4、的 細(xì)胞分離開。 (4) 清水:洗去解離液 ,防止解離過度 ,便于染色。 (5) 改良苯酚品紅染液 :使染色體著色。 五、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的采集分析 (一) 學(xué)生觀察到的較好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果后 ,由老師拍照記錄。 (二) 造成看不到染色體數(shù)加倍細(xì)胞原因較多 ,常見原因有 :1.沒有培養(yǎng)出分 生區(qū)或沒有剪取到分生區(qū) 2.低溫誘導(dǎo)時(shí)間不足 3.解離不充分或漂洗不干凈造成 染色不足 4.染色時(shí)間控制不當(dāng) ,看不清染色體 5.沒有低倍鏡尋找過程六、實(shí)驗(yàn)總 結(jié)反思與修正 1 .針對(duì)新洋蔥不容易生根的問題 ,解決方法為 :先將新洋蔥放在干燥、通風(fēng)、 陽光下曬 10 天左右，再放入冰箱中低溫室內(nèi)(4C左右均可)3-5 天

5、左右,可以解 除休眠 ,就很容易發(fā)根了。 2.針對(duì)剪取根尖時(shí) ,很多根尖已經(jīng)被上一個(gè)班級(jí)的同學(xué)剪掉 ,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗的 問題,解決方法為 :每次剪取根尖時(shí)先把根從基部剪掉 ,然后剪取上面的根尖 ,這樣, 就可以避免以上問題的出現(xiàn)。 3針對(duì)調(diào)整解離時(shí)間和解離方式的問題。解決方法為 :解離時(shí)間少于 5 分鐘 解離效果不太好 ,在制作裝片時(shí)細(xì)胞分散效果不好。解離時(shí)將根尖放在培養(yǎng)皿的 邊上,傾3/ 3 斜放置培養(yǎng)皿 ,滴加 1 毫升的解離液解離即可 ,這樣用量少 ,既節(jié)約又更加 安全。或者在酒精燈火焰上稍微加熱 ,可以節(jié)省解離的時(shí)間。 4.針對(duì)染色液的濃度和染色時(shí)間的問題 ,解決方法為 :將初始染液稀釋 10 倍, 并且染色時(shí)間為 3 分鐘 ,效果最好。如果染色液不稀釋 ,就會(huì)把染色體染色太深 ,以 至于在顯微鏡下觀察時(shí) ,看到的是深藍(lán)的一片 ,很難分辨一條條的染色體。將染液 稀釋 10倍,并且染色時(shí)間減少為 3 分鐘,染色清晰、而且時(shí)間長(zhǎng)也不影響染色效 果