天然藥化考試總結(jié)

1、天然藥物化學(xué)：是運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)理論與方法，研究天然藥物中化學(xué)成分的一門學(xué)科。 研究對(duì)象：天然藥物中化學(xué)成分 研究?jī)?nèi)容：各類天然藥物中的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、理化性質(zhì)、提取分離方法以及主要類型化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)鑒定等 研究的目的及意義：1.闡明天然藥物中的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，探索中藥防治疾病的原理；2.促進(jìn)藥理藥效理論研究的深入；3.促進(jìn)建立和完善中藥的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)；4.擴(kuò)大藥源，為研制開發(fā)新藥提供理論與實(shí)踐基礎(chǔ)天然藥物來源：植物、動(dòng)物、礦物、微生物和海洋生物一次代謝（初生代謝）：指對(duì)維持植物生命活動(dòng)必不可少的過程一次代謝物：由一次代謝產(chǎn)生的維持植物生命最基本的，不可缺少的物質(zhì)二次代謝：在特定的條件下，一些重要的一次代

2、謝產(chǎn)物作為原料或前體，又進(jìn)一步經(jīng)歷不同的代謝過程二次代謝產(chǎn)物：由二次代謝產(chǎn)生的物質(zhì)叫做二次代謝產(chǎn)物乙酸丙二酸途徑：通過這一途徑可以合成脂肪酸、酚類和蒽酮類化合物甲戊二羥酸途徑：萜類和甾體化合物均由這一途徑生成桂皮酸及莽草酸途徑：具有C6-C3基本骨架的苯丙素、 C6-C3-C6結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物均由此途徑合成而來氨基酸途徑：大多數(shù)生物堿類成分由此途徑生成復(fù)合途徑：結(jié)構(gòu)復(fù)雜的化合物可由多種生物合成途徑復(fù)合完成有效成分的提取方法：溶劑提取法、水蒸氣蒸餾法、超臨界流體萃取法溶劑提取法：煎煮法、浸漬法、滲漉法、回流提取法、連續(xù)回流提取法 作用原理：溶劑穿透藥材粉末的細(xì)胞膜，溶解溶質(zhì)，形成細(xì)胞的內(nèi)外濃度

3、差，將溶質(zhì)滲出細(xì)胞膜，達(dá)到提取目的。 溶劑的選擇（相似相溶原理）（1）分類：溶劑按極性大小可以分為三類，即親脂性溶劑、親水性溶劑和水。（2）極性：常用溶劑極性由強(qiáng)到弱石油醚四氯化碳苯二氯甲烷氯仿乙醚乙酸乙酯正丁醇丙酮甲醇（乙醇） 雙糖極性 苷：均為固體，糖基少的具有完整的晶形呈結(jié)晶狀，含糖基多的多為具有吸濕性的無定形粉末。親水性大小與連接糖的數(shù)目、位置有關(guān)。苷元：為親脂性 （2） 苷鍵的裂解：酸水解、堿水解、乙酰解、酶水解和氧化開裂 酸催化水解反應(yīng)：苷原子先質(zhì)子化，然后斷鍵生成陽碳離子或半椅式的中間體，中間體再與水結(jié)合成糖 從易到難順序?yàn)椋篘 O S C 乙酰解反應(yīng)：與酸催化水解相似，以CH3

4、CO+（即乙酰基，Ac）為進(jìn)攻基團(tuán)常用試劑：醋酐和酸 常用酸:H2SO4、HClO4、CF3COOH或Lewis酸（ZnCl2、BF3）等糖和苷的提取分離 （1） 提?。褐饕獮槿軇┓ㄋ?、稀醇（單糖、低聚糖、多糖） （2） 分離：活性炭柱色譜、纖維素色譜、離子交換柱色譜、凝膠柱色譜、季銨氫氧化物沉淀法、分級(jí)沉淀或分級(jí)溶解法 活性炭柱色譜吸附規(guī)律：對(duì)極性基團(tuán)多的化合物吸附力大于極性基團(tuán)少的化合物；對(duì)芳香族化合物吸附力大于脂肪族化合物；對(duì)分子量大的化合物吸附力大于分子量小的化合物；對(duì)于糖的吸附力：多糖低聚糖單糖 裝柱上樣洗脫（順序?yàn)椋篐2O、10%、20%、30%、50%、70%的乙醇液；無機(jī)鹽、單

5、糖等二糖三糖多糖） 氯仿或乙酸乙酯提取 總提取加水?dāng)嚿?，石油醚脫?石油醚層 水層 氯仿或乙酸乙酯層 （苷元、極性小的苷） 水層正丁醇層（苷類） 水層 （無機(jī)鹽、糖、多肽、蛋白質(zhì)等）水飽和正丁醇提取中藥粉末（必要時(shí)可先脫脂）溶劑浸出，回收溶劑 凝膠柱色譜操作過程：將凝膠在適當(dāng)?shù)娜芤褐薪?；待充分膨脹后裝入層析柱；用洗脫液洗脫；收集、回收溶液，干燥。苷的提?。?苯丙素：天然存在的一類含有一個(gè)或幾個(gè)C6-C3基團(tuán)的酚性物質(zhì)簡(jiǎn)單苯丙素：苯丙烯、苯丙酸、香豆素、木脂素等結(jié)構(gòu)與分類：苯丙烯類、苯丙醇類、苯丙醛類、苯丙酸類提取分離提?。汉?jiǎn)單苯丙素類一般用有機(jī)溶劑或水提??；苯丙烯、苯丙醛及苯丙酸的簡(jiǎn)單酯類衍

6、生物可用水蒸汽蒸餾法提取；苯丙酸衍生物可用有機(jī)酸的常規(guī)方法分離：一般可經(jīng)纖維素、硅膠、大孔樹脂或聚酰胺等色譜法分離香豆素類化合物：簡(jiǎn)單香豆素、呋喃香豆素、吡喃香豆素、其它香豆素類結(jié)構(gòu)：香豆素基本母核，大部分7位有含氧取代分類1、簡(jiǎn)單香豆素：是指在苯環(huán)一側(cè)有取代，且7位OH未與6或8位取代基形成呋喃環(huán)或吡喃環(huán)的香豆素類2、呋喃香豆素：7位羥基與6或8位取代異戊烯基縮合形成呋喃環(huán)的香豆素類3、吡喃香豆素：7位OH與6或8位異戊烯基縮合形成吡喃環(huán)的香豆素類4、其它香豆素類：主要包括-吡喃酮環(huán)上取代的香豆素類理化性質(zhì):(1) 熒光：香豆素類在可見光下為無色或淺黃色結(jié)晶，在紫外光下可見藍(lán)色熒光(2) 內(nèi)

7、酯的堿水解反應(yīng)：內(nèi)酯結(jié)構(gòu)在堿性條件下可水解開環(huán)，生成鄰羥基桂皮酸鹽(3) 顯色反應(yīng) 1、異羥肟酸鐵反應(yīng)：香豆素具有內(nèi)酯結(jié)構(gòu)，堿性條件下開環(huán)，與鹽酸羥胺縮合生成異羥肟酸，在酸性條件下再與Fe3+絡(luò)合而顯紅色。 2、酚羥基反應(yīng)：因分子中含有酚羥基所以可以與FeCl3反應(yīng)產(chǎn)生綠色至黑綠色沉淀。若取代羥基的鄰對(duì)位無取代可用重氮化試劑反應(yīng)而顯紅色至紫紅色。 3、Gibbs反應(yīng)：在PH=910時(shí)，內(nèi)酯環(huán)水解生成酚羥基，如其對(duì)位（6位）無取代，則與2，6二氯苯醌亞胺（Gibbs試劑）反應(yīng)而顯藍(lán)色。 4、Emerson反應(yīng)：與Gibbs反應(yīng)類似，6位無取代時(shí)與Emerson試劑（4-氨基安替比林和鐵氰化鉀）反

8、應(yīng)生成紅色。提取分離提?。喝軇┨崛》āA溶酸沉法、水蒸汽蒸餾法 分離：柱色譜、制備薄層色譜和高效液相色譜生物活性：低濃度可刺激植物發(fā)芽和生長(zhǎng)作用，高濃度則抑制；光敏作用；抗菌、抗病毒作用；平滑肌松弛作用；抗凝血作用；肝毒性木脂素：二芐基丁烷類、二芐基丁內(nèi)酯類、芳基萘類、四氫呋喃類、雙四氫呋喃類、聯(lián)苯環(huán)辛烯類理化性質(zhì)：木脂素多具有多個(gè)手性碳或手性中心，大部分具有光學(xué)活性，遇酸易異構(gòu)化提取分離：溶劑法、堿溶酸沉法、色譜法木脂素的檢識(shí)常用顯色劑：1%茴香醛-濃硫酸試劑，110加熱5分鐘；5%或10%磷鉬酸乙醇溶液，120加熱至斑點(diǎn)出現(xiàn)；10%H2SO4乙醇溶液，110加熱5分鐘；碘蒸氣，熏后呈黃棕色

9、，置紫外光下觀察熒光。生物活性：抗腫瘤、肝保護(hù)和抗氧化作用、中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用、血小板活化因子拮抗作用、抗病毒，抗菌作用、平滑肌解痙作用、毒魚作用、殺蟲作用、其它作用醌類化合物：指具有醌式結(jié)構(gòu)或容易轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂絮愋再|(zhì)的化合物，以及在生物合成方面與醌類有密切聯(lián)系的化合物 主要分為苯醌，萘醌、菲醌和蒽醌四類型蒽醌類：（一）單蒽核類1. 蒽醌及其苷類（醌母核上常被-OH、-OCH3、-COOH等取代）：大黃素型、茜草素型2. 蒽酚（或蒽酮）衍生物（2） 雙蒽核類：二蒽酮類衍生物、萘駢二蒽酮衍生物理化性質(zhì)物理性質(zhì)：升華性及揮發(fā)性、不同pH條件下顯不同的顏色化學(xué)性質(zhì)酸性（以游離蒽醌類衍生物為例，酸性強(qiáng)弱將

10、按下列順序排列：含-COOH 2個(gè)以上-OH 1個(gè)-OH 2個(gè)-OH 1個(gè)-OH）、堿性、顏色反應(yīng)顏色反應(yīng)（1）Feigl反應(yīng)醌類氧化還原過程：醌類衍生物在堿性條件下，加熱能迅速與醛類及二硝基苯反應(yīng)，生成紫色化合物（2）無色亞甲藍(lán)顯色試驗(yàn)：在進(jìn)行薄層色譜檢查或紙色譜檢查時(shí)，無色亞甲藍(lán)作噴霧顯色劑，能檢出苯醌及萘醌，樣品在白色背景上作為藍(lán)色斑點(diǎn)出現(xiàn)（3）Borntragers反應(yīng)（保恩特來格）：羥基蒽醌類化合物遇堿顯紅紫紅色的反應(yīng)（4）與活性次甲基試劑反應(yīng) （Kesting-Craven法）：當(dāng)苯醌及萘醌類化合物的醌環(huán)上有未被取代的位置時(shí)，即可在氨堿性下與一些含有活性次甲基試劑的醇溶液反應(yīng)，生成

11、藍(lán)綠色或藍(lán)紫色（5）與金屬離子反應(yīng)：在蒽醌類化合物結(jié)構(gòu)中，如果有-酚羥基或具有鄰二酚羥基時(shí)，則可與Pb2+、Mg2+等金屬離子形成絡(luò)合物，顏色不同，有橙紅、紫紅、藍(lán)色等（6）對(duì)亞硝基二甲苯胺反應(yīng)：9或10位未取代的羥基蒽酮類可與0.1%對(duì)硝基二甲苯胺吡啶溶液反應(yīng)產(chǎn)生各種顏色提取分離提?。河袡C(jī)溶劑提取法、堿提取酸沉淀法、水蒸氣蒸餾法游離羥基蒽醌的分離：pH梯度萃取法、層析法蒽醌苷的分離：鉛鹽法、溶劑法生物活性：瀉下作用、抗菌作用、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈的作用、其它作用黃酮類化合物：泛指兩個(gè)苯環(huán)（A、B）通過三個(gè)碳原子相互連接而成（C6-C3-C6）結(jié)構(gòu)的一系列化合物分類：黃酮類：以2-苯基色原酮為基本母核

12、，3位無含氧取代，B環(huán)連接在2位 黃酮醇類：基本母核的3位上有含氧取代， B環(huán)連接在2位 二氫黃酮類：基本母核的2、3位雙鍵被氫化，3位無含氧取代，B環(huán)連在2位 二氫黃酮醇類：基本母核的2、3位雙鍵被氫化，3位有含氧取代，B環(huán)連接在2位 異黃酮類：基本母核為3-苯基色原酮的結(jié)構(gòu)，即B環(huán)聯(lián)結(jié)在C環(huán)的3位上 二氫異黃酮類：基本母核2、3位被氫化，B環(huán)連接在3位上 查耳酮：氫黃酮C環(huán)的1、2位鍵斷裂生成開環(huán)衍生物，即三碳鏈不構(gòu)成環(huán)生物活性：對(duì)心血管系統(tǒng)的作用、保護(hù)肝臟、抗炎、雌性激素樣作用、抗菌及抗病毒、瀉下、解痙、抗癌顯色反應(yīng)1.HCl-Mg粉反應(yīng)：在1ml甲醇或乙醇的樣品溶液中，加少許鎂粉振搖，

13、再加幾滴濃鹽酸12分鐘內(nèi)（可微熱）即可顯色，大多顯紅紫紅色，少數(shù)藍(lán)色或綠色。但查耳酮、橙酮、兒茶素類不顯色2.鈉汞齊還原反應(yīng)：在樣品的乙醇溶液中加入鈉汞齊，放置數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)，或加熱過濾，綠葉用鹽酸酸化則黃酮、二氫黃酮類顯紅色，黃酮醇類顯黃淡紅色，二氫黃酮醇顯棕色3.四氫硼鈉還原反應(yīng)：反應(yīng)后，二氫黃酮（醇）類被還原產(chǎn)生紅紫紅色，其它黃酮類均為負(fù)反應(yīng)4.AlCl3反應(yīng)：反應(yīng)生成絡(luò)合物 多呈黃色，在紫外燈下顯鮮黃色熒光，但4-OH黃酮醇或7，4二羥基黃酮醇顯天藍(lán)色熒光5.鋯鹽枸櫞酸反應(yīng)：樣品0.510mg溶于10ml甲醇，加2%二氯氧鋯（ZrOCl2）甲醇液1ml，則會(huì)出現(xiàn)黃色（生成了絡(luò)合物），再

14、加入2%枸櫞酸甲醇液，如黃色不退表示有3-OH，如退色表示無3-OH但有5-OH6.氨性氯化鍶反應(yīng)：如黃酮分子中有鄰二酚羥基則可與氨性氯化鍶反應(yīng)，產(chǎn)生綠色至棕色乃至黑色沉淀7.三氯化鐵反應(yīng)：黃酮分子中大都含有酚羥基可與FeCl3反應(yīng)呈現(xiàn)紫、綠、藍(lán)等不同的顏色8.硼酸顯色反應(yīng)：分子中含有下列結(jié)構(gòu)可與硼酸反應(yīng)產(chǎn)生亮黃色。5-OH黃酮與6-OH查耳酮結(jié)構(gòu)符合要求，反應(yīng)呈陽性，可將這兩種與其他區(qū)分9.堿性試劑反應(yīng)：黃酮與堿性試劑可生成黃色、橙色或 紅色 （1）黃酮類在NaOH水溶液中產(chǎn)生黃橙色。 （2）查耳酮或橙酮遇堿變紅或紫紅。二氫黃酮在冷堿中呈黃橙色，放置或加熱變深紅紫紅色 （3）黃酮醇?jí)A中先呈黃

15、色，通入空氣后由于3-OH氧化，變?yōu)樽厣?（4）當(dāng)分子含3個(gè)鄰位OH時(shí)，在NaOH液中會(huì)產(chǎn)生暗綠色或藍(lán)綠色沉淀。提取分離提?。阂掖蓟蚣状继崛》ǎ?095%的醇適于提取游離黃酮，60%左右適于提取黃酮苷）、熱水提取法（僅限于黃酮苷類）、堿性水或稀醇提取法分離：溶劑萃取法、PH梯度萃?。?%NaHCO3可萃取出7,4-二羥基黃酮；5%Na2CO3萃取出7或4-羥基黃酮；0.2%NaOH可萃取出具一般酚羥基的黃酮；4%NaOH萃取出5-OH黃酮）、柱色譜法（分子中酚羥基越多則吸附越強(qiáng)，形成分子間氫鍵，難以洗脫；易形成分子內(nèi)氫鍵則與聚酰胺的吸附力減小，易被洗脫；分子芳香化程度越高，共軛雙鍵越多，吸附

16、力越強(qiáng)，難以洗脫；不同類型被吸附強(qiáng)弱順序?yàn)椋狐S酮醇黃酮二氫黃酮異黃酮；若洗脫劑為含水系統(tǒng)時(shí)，黃酮苷比游離態(tài)先洗脫下來）萜類化合物：凡由甲戊二羥酸衍生、且分子式符合（C5H8 )n 通式的衍生物物合成:1.經(jīng)驗(yàn)異戊二烯法則(萜類化合物均由異戊二烯單位以頭尾順序或非頭尾順序相連而成);生源異戊二烯法則(萜類化合物由甲戊二羥酸衍生而成)提取分離提取:1、溶劑提取法：對(duì)于非苷性化合物用甲醇或乙醇提取，回收溶劑后加水懸浮，再用乙酸乙酯萃取，也可用不同極性溶劑依次萃取。苷類可先用乙醚或石油醚萃取，除去強(qiáng)脂溶性雜質(zhì)，水溶液再用正丁醇萃取，回收正丁醇即得總苷。2、堿提酸沉法：適用于含內(nèi)酯環(huán)的萜類，在熱堿中開環(huán)

17、成鹽溶于水，酸化后又閉環(huán)析出，但對(duì)酸堿易引起結(jié)構(gòu)發(fā)生不可逆變化的萜內(nèi)酯不可用該法。3、吸附法：利用活性炭和大孔樹脂吸附水溶液中的萜苷后，先用水及稀醇依次洗去水溶性雜質(zhì)，再用合適濃度的乙醇洗脫萜苷。例如：桃葉珊瑚苷及甜葉菊苷可分別用活性炭和大孔樹脂純化獲得。分離:結(jié)晶法、利用特殊官能團(tuán)分離、柱色譜（常用吸附劑：硅膠、中型氧化鋁；洗脫劑：石油醚、正己烷、環(huán)己烷、苯等單一溶劑加入不同比例的乙酸乙酯或用氯仿-甲醇洗脫）揮發(fā)油的提取1.蒸餾法： 是最常用的方法，可以共水蒸餾、隔水蒸餾或水蒸氣蒸餾2.溶劑法：用低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑回流提取或冷浸3.吸收法：用于貴重的揮發(fā)油如玫瑰油，茉莉花油等4.壓榨法： 用于

18、含量多的原料如新鮮的橘子皮、檸檬皮等。5.超臨界二氧化碳流體提?。豢煞乐故軣岵环€(wěn)定的揮發(fā)油，可提高品質(zhì)6.冷凍析晶法：將揮發(fā)油于0以下放置使結(jié)晶析出分離7.分餾法：揮發(fā)油的組成成分類別不同，沸點(diǎn)有差別，可用分餾法大致分離不純需純化。8.化學(xué)分離法：堿性成分的分離；酚、酸性成分的分離；醇類的分離；醛、酮的分離9.色譜分離法：吸附柱色譜最常用硅膠和氧化鋁柱色譜。洗脫劑多用石油醚或己烷，混以不同比例的乙酸乙酯三萜類化合物：由30個(gè)碳原子組成的萜類化合物，分子中有6個(gè)異戊二烯單位。 組成：由苷元（四環(huán)或者五環(huán)三萜）和糖組成。 糖鏈：?jiǎn)翁擎?、雙糖鏈、三糖鏈 成苷位置：3-OH、28-COOH（酯苷）、其

19、它位-OH原生皂苷：天然產(chǎn)生，未發(fā)生水解的皂苷 次生皂苷：原生苷的糖被部分降解的產(chǎn)物四環(huán)三萜：達(dá)瑪烷型（C8位有角甲基且為構(gòu)型）、羊毛脂烷型（3S）-環(huán)氧鯊烯通過椅船椅式構(gòu)象形成）、甘遂烷型、環(huán)阿屯烷型、葫蘆烷型、楝烷 人參總皂苷不能表現(xiàn)出溶血的現(xiàn)象達(dá)瑪烷型的人參皂苷在HCl溶液中加熱煮沸水解，會(huì)發(fā)生差向異構(gòu)化只能得到人參二醇和人參三醇，得不到原生皂苷元原人參二醇和原人參三醇。若要得到原人參皂苷元，必須在緩和的條件下水解20(S)-原人參三醇衍生的皂苷有溶血性質(zhì)，而由20(S)-原人參二醇衍生的皂苷具對(duì)抗溶血的作用，因此人參總皂苷不能表現(xiàn)出溶血的現(xiàn)象。 五環(huán)三萜：齊墩果烷型、烏蘇烷型、羽扇豆烷

20、型、木栓烷型三萜類化合物的理化性質(zhì)溶解度:苷元多有較好結(jié)晶，能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等有機(jī)溶劑，而不溶于水；成苷后，極性加大，不易結(jié)晶，多為無色定形粉末，可溶于水，易溶于熱水，醇中，難溶于乙醚、苯等極性小的有機(jī)溶劑，含水丁醇或戊醇對(duì)皂苷的溶解度較好。皂苷多數(shù)具有苦而辛辣味，吸入鼻內(nèi)能引起噴嚏。顏色反應(yīng)（1）醋酐-濃硫酸反應(yīng)：可產(chǎn)生黃-紅-紫-藍(lán)等顏色最后褪色。（2）五氯化銻反應(yīng)：SbCl5顯灰藍(lán)色、灰紫色等多種顏色。（3）三氯醋酸反應(yīng)：生成紅色-藍(lán)色。（4）氯仿-濃硫酸反應(yīng)：硫酸層呈現(xiàn)紅色或藍(lán)色，氯仿層有綠色熒光出現(xiàn)。（5）冰醋酸-乙酰氯反應(yīng)：淡紅色或紫紅色。表面活性溶血作用沉淀反應(yīng):皂苷

21、水溶液可和金屬鹽如鉛鹽、鋇鹽、銅鹽等產(chǎn)生沉淀三萜皂苷元提取：1、醇類溶劑提取后，提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯等溶劑進(jìn)行分部提取，然后進(jìn)一步分離 ，三萜苷元主要來自氯仿部位；2、以皂苷形式存在的，水解后用氯仿等溶劑萃取，然后進(jìn)行分離三萜皂苷提?。河孟〈继崛?，提取液減壓濃縮后，加適量水，必要時(shí)先用石油醚等萃取，去雜，后用正丁醇萃取，減壓蒸干，通過大孔吸附樹脂，水洗去糖等，后用30%80%甲醇或乙醇梯度洗脫，洗脫液減壓蒸干，得粗制總皂苷。用重結(jié)晶、層析等方法分離純化皂苷。 三萜皂苷分離：分段沉淀法：由于皂苷難溶于乙醚、丙酮等溶劑，故可將粗皂苷先溶于少量乙醇中，然后逐漸加入乙醚、丙酮、皂苷即可析

22、出，可逐漸降低溶劑極性，不同極性的皂苷就會(huì)分批沉淀出來，但效果不太好。吸附柱色譜：正相或反相硅膠柱色譜、分配柱色譜、高效液相色譜、大孔樹脂 正相硅膠色譜：常用硅膠，用混合有機(jī)溶劑洗脫； 反相硅膠色譜：常用Rp-18、Rp-8反相硅膠，用甲醇-水混合系統(tǒng)洗脫。 分配柱色譜：由于皂苷極性大，常用硅膠作支持劑，3%草酸水溶液為固定相，流動(dòng)相為含水的混合有機(jī)溶劑 高效液相色譜：分離效能較高，采用反相色譜柱，以甲醇-水、乙腈-水等系統(tǒng)洗脫 大孔樹脂：分離極性較大的化合物，尤其適用于皂苷的精制和初步分離，將含有皂苷的水溶液上大孔樹脂柱后，先用水洗滌除去糖和其他水溶性雜質(zhì)，然后再用不同濃度的甲醇和乙醇依照濃

23、度由低到高的順序進(jìn)行梯度洗脫。甾體化合物（類固醇化合物）：化學(xué)結(jié)構(gòu)中具有甾體母核-環(huán)戊烷駢多氫菲的一類化合物 主要包括：植物甾醇、膽汁酸、C21甾類（側(cè)鏈為羥甲基衍生物）、昆蟲的變態(tài)激素、強(qiáng)心苷（側(cè)鏈為不飽和內(nèi)酯環(huán)）、甾體皂苷（側(cè)鏈為含氧螺雜環(huán)）、甾體生物堿、蟾毒配基等顏色反應(yīng)1. 醋酐-濃硫酸：樣品溶于冰醋酸，加濃硫酸-醋酐(1:20)，產(chǎn)生紅紅紫藍(lán)綠污綠等顏色變化，最后褪色。 2. Salkowski（氯仿-濃硫酸）反應(yīng)：樣品溶于氯仿，沿管壁滴加濃硫酸，氯仿層顯血紅色或青色，硫酸層顯綠色熒光。 3. 三氯乙酸反應(yīng)：與25%三氯乙酸乙醇溶液反應(yīng)呈紅紫色。4. 三氯化銻或五氯化銻反應(yīng): 樣品液

24、點(diǎn)于濾紙上，噴20%SbCl5的氯仿溶液，于6070下加熱，呈現(xiàn)灰藍(lán)、藍(lán)、灰紫色等顏色。C21甾類:以孕甾烷或其異構(gòu)體為基本骨架的羥基衍生物。一般A/B環(huán)為反式稠合，B/C為反式，C/D環(huán)為順式稠合。甾體母核上多有羥基、羰基（多在C20位）、酯基及雙鍵（C5、C6位）。C17位側(cè)鏈多為-構(gòu)型，但也有-構(gòu)型。 強(qiáng)心苷:存在于植物中具有強(qiáng)心作用的甾體苷類化合物，由強(qiáng)心苷元和糖縮合而成的一類苷 五元不飽和內(nèi)酯環(huán)：稱為強(qiáng)心甾烯類，即甲型強(qiáng)心苷元 六元不飽和內(nèi)酯環(huán)：稱為海蔥甾二烯或蟾蜍甾二烯類，即乙型強(qiáng)心苷元理化性質(zhì)（1） 性狀：多為無定形粉末或無色結(jié)晶，具有旋光性，C17位側(cè)鏈為構(gòu)型者味苦，對(duì)粘膜具有

25、刺激性（2） 溶解度：強(qiáng)心苷一般可溶于水、醇、丙酮等極性溶劑，微溶或幾乎不溶于乙醚、苯和石油醚等極性小的溶劑（3） 內(nèi)酯環(huán)反應(yīng)：內(nèi)酯環(huán)開環(huán)反應(yīng)、內(nèi)酯環(huán)雙鍵氧化反應(yīng)（四）脫水反應(yīng)：強(qiáng)心苷在強(qiáng)酸（3%-5%HCl）條件下加熱水解時(shí)，苷元羥基易發(fā)生脫水反應(yīng)成烯，得到次生的脫水苷元（五）水解反應(yīng) ：強(qiáng)心苷的苷鍵可被酸或酶催化水解，分子中的內(nèi)酯環(huán)和其它酯鍵能被堿水解脫水反應(yīng) 酸水解：（1）溫和酸水解：用稀酸在含水醇中經(jīng)短時(shí)間加熱回流，可使強(qiáng)心苷水解為苷元和糖（2）強(qiáng)烈酸水解3）鹽酸-丙酮法：將強(qiáng)心苷置于含1%HCl的丙酮溶液中，20 置放兩周。糖分子中C2-OH和C3-OH與丙酮反應(yīng)，在發(fā)生水解可得到原

26、生苷元和糖的衍生物 堿水解：苷鍵不被堿水解，但強(qiáng)心苷分子中的?；?nèi)酯環(huán)會(huì)受堿的影響，發(fā)生水解或裂解、雙鍵移位、苷元異構(gòu)化等反應(yīng) 鑒別方法1、甲型強(qiáng)心苷的不飽和五元內(nèi)酯環(huán)，在堿性溶液 中，雙鍵轉(zhuǎn)位可產(chǎn)生活性次甲基，可與Legalsh試劑、Kedde試劑等發(fā)生顯色反應(yīng)；2、基于2去氧糖的顯色反應(yīng)：可用Keller-Kiliani 試劑鑒別，顯藍(lán)綠色。3、UV法：不飽和五元內(nèi)酯環(huán)在220nm處不飽和六元內(nèi)酯環(huán)在300nm處有最大吸收；4、IR法：不飽和五元內(nèi)酯在17001800cm-1都有兩個(gè)強(qiáng)吸收峰，但不飽和六元內(nèi)酯環(huán)的，向低移40cm1。提取分離提取過程注意酶的問題、提取分離時(shí)應(yīng)注意控制酸堿性

27、生理活性：強(qiáng)心苷為心臟興奮劑，主要作用是延長(zhǎng)傳導(dǎo)時(shí)間，興奮心肌甾體皂苷：螺旋甾烷類化合物（C-27甾體）與糖結(jié)合形成的寡糖苷生物活性：防治心血管疾病、抗腫瘤、降血糖和免疫調(diào)節(jié)作用組成：甾體皂苷元（螺旋甾烷的衍生物）、中性糖分類：螺甾烷醇類（C25為S構(gòu)型）、異螺甾烷醇類（C25為R構(gòu)型）、呋甾烷醇類（F環(huán)為開鏈?zhǔn)剑?、變形螺甾烷醇類（F環(huán)四氫呋喃環(huán)）理化性質(zhì)1.甾體皂苷元具親脂性，能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等 有機(jī)溶劑，而不溶于水；多有較好結(jié)晶2、甾體皂苷水溶性大,可溶于水、稀醇、熱甲醇和熱乙醇中，不溶或難溶于乙醚、苯等極性小的有機(jī)溶劑,不易結(jié)晶，大多為無色定形粉末3、表面活性與溶血作用與三萜皂苷類似，但F環(huán)開裂的甾體皂苷往往不具溶血作用4、甾體皂苷