臨床檢驗儀器學(xué)考試重點資料知識總結(jié)

1、臨床檢驗儀器學(xué)第一章 概論1.臨床檢驗儀器的分類（ 1）分離分析檢驗儀器（離心機、氣象色譜儀）（ 2）光譜分析檢驗儀器（紫外可見分光光度計、熒光分析儀）（ 3）目視檢驗儀器（普通生物顯微鏡、熒光顯微鏡）（ 4）細(xì)胞及分子生物學(xué)檢驗儀器（培養(yǎng)箱、生物安全柜）（ 5）臨床檢驗常規(guī)儀器（血細(xì)胞分析儀、血沉分析儀）（ 6）其他臨床檢驗儀器2.臨床檢驗儀器常用性能指標(biāo)（可能考問答題）（ 1） 靈敏度 （ 2）誤差（ 3）噪聲（ 4）最小檢測量（5） 精確度 （ 6）可靠性（ 7）重復(fù)性（ 8）分辨率（ 9）測量范圍和示值范圍（10） 線性范圍（ 11）響應(yīng)時間（12） 頻率影響范圍3.臨床檢驗儀器的維護(hù)

2、（ 1）正確使用（ 2）環(huán)境要求（ 3）電源要求（4）定期校驗（ 5）做好記錄第二章 離心機1. 離心現(xiàn)象是指物體在離心力場中表現(xiàn)的沉降運動現(xiàn)象。2. 沉降系數(shù)：顆粒在單位離心力場作用下的沉降速度，其單位為秒。3. 顆粒的沉降速度取決于離心機的轉(zhuǎn)速、顆粒的質(zhì)量、大小和密度。4. 按轉(zhuǎn)速分：低速、高速、超速離心機。按用途分：分析型和制備分析兩用型按結(jié)構(gòu)：臺式、多管微量式、細(xì)胞涂片式等5. 離心機的基本結(jié)構(gòu)低速離心機的結(jié)構(gòu)較簡單，由電動機，離心轉(zhuǎn)盤（轉(zhuǎn)頭）、調(diào)速器、定時器、離心套管與底座等主要部件構(gòu)成。其最大轉(zhuǎn)速在10000r/min 以內(nèi)，相對離心力在 15000xg 以內(nèi)。高速（冷凍）離心機最

3、大轉(zhuǎn)速為2000025000r/min超速（冷凍）離心機最大轉(zhuǎn)速可達(dá)5000080000r/min6. 密度梯度離心法特點優(yōu)點：有很好的分辨率，分離效果好缺點：離心時間長；需要制備梯度液；操作嚴(yán)格、不易掌握7. 差速離心法的特點優(yōu)點：操作簡單，離心后用傾倒法即可將上清液與沉淀分開，并可使用容量較大的角式轉(zhuǎn)子；分離時間短、重復(fù)性高；樣品處理量大。缺點：分辨率有限、分離效果差，沉淀系數(shù)在同一個數(shù)量級內(nèi)的各種粒子不容易分開，不能一次得到純顆粒；壁效應(yīng)嚴(yán)重，特別是當(dāng)顆粒很大或濃度很高時，在離心管一側(cè)會出現(xiàn)沉淀，顆粒被擠壓，離心力過大、離心時間過長會使顆粒變形、聚集而失活。8. 維護(hù)：（ 1）安放在堅固

4、、平穩(wěn)的臺面（ 2）定期檢查；保持清潔長。長時間不用時要將轉(zhuǎn)子取出3）離心機臺面禁止放其他物品第三章 顯微鏡1. 光學(xué)顯微鏡的工作原理：光學(xué)顯微鏡是利用光學(xué)原理，把人眼所不能分辨的微小物體放大成像，供人們提取物質(zhì)細(xì)微結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。光學(xué)顯微鏡由兩組會聚透鏡組成光學(xué)折射系統(tǒng)。把焦距較短，靠近觀察物、成實像的透鏡組稱為物鏡；焦距較長，靠近眼睛、成虛象的透鏡組稱為目鏡。被觀察的物體位于物鏡前方，被物鏡作為第一級放大后成一倒立的實像，然后此實像再被目鏡作為第二級放大，得到最大放大效果的倒立的虛象，位于人眼的明視距離處。2. 光學(xué)系統(tǒng)包括物鏡、目鏡、聚光鏡、反光鏡3. 機械系統(tǒng)包括調(diào)焦系統(tǒng)、載物臺、

5、物鏡轉(zhuǎn)換器等4. 一只物鏡從外殼從上至下有三行標(biāo)記“油一100/1.258/0.17,表明該物鏡為油浸式高倍，放大倍數(shù)為100， NA 為 1.25.第四章 紫外可見分光光度計1. 光的吸收定律：即郎伯比爾定律2. 紫外可見分光光度計的性能指標(biāo)（ 1） 波長準(zhǔn)確度和波長重復(fù)性（ 2）光度準(zhǔn)確度（ 3）光度線性范圍（ 4） 分辨率 （ 5）光譜帶寬（ 6）雜散光（ 7）基線穩(wěn)定度（ 8）基線平直度3. 紫外可見分光光度計的基本分析方法（ 1）定性分析（ 2）定量分析（ 3）純度鑒定4. 紫外可見分光光度計的基本結(jié)構(gòu)（ 1）光源（2）單色器（3）吸收池（4）檢測器（5）信號顯示系統(tǒng)第五章 臨床血液

6、常規(guī)檢驗儀器1. 血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞計數(shù)原理（ 1） 電阻抗型血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞計數(shù)原理：血細(xì)胞與等滲的電解質(zhì)溶液相比為不良導(dǎo)體，其電阻值比稀釋值大。當(dāng)血細(xì)胞通過檢測器的微孔的孔徑感受區(qū)時，其內(nèi)外電極的恒流電路上的電阻值瞬間增大，產(chǎn)生電壓脈沖信號。脈沖信號數(shù)等于通過的細(xì)胞數(shù)，脈沖信號幅度大小與細(xì)胞體積成正比。根據(jù)歐姆定律，在恒電流電路上，電壓變化與電阻變化成正比，電阻值又同細(xì)胞體積成正比，血細(xì)胞體積越大，電壓越高，產(chǎn)生信號的脈沖幅度就越大。各種大小不同的細(xì)胞產(chǎn)生的脈沖信號分別被送入儀器的檢測通道，經(jīng)計算機處理后，以體積直方圖顯示出特定細(xì)胞群中的細(xì)胞體積和細(xì)胞分布情況。最后得出白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血

7、小板等相關(guān)參數(shù)。（ 2） 聯(lián)合檢測型血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞計數(shù)原理：以流式技術(shù)為基礎(chǔ)再聯(lián)合使用流式、激光、射頻、電導(dǎo)、電阻抗、細(xì)胞化學(xué)染色等多項技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分析，并綜合分析檢測數(shù)據(jù)，從而得出較為準(zhǔn)確的“五分類”結(jié)果。其均使用了流式細(xì)胞計數(shù)，形成流體動力聚焦的流式通道，使單細(xì)胞流在鞘液的包裹下通過流式通道，將重疊限制到最低濃度。2. 國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會（ICSH）推薦的氟化高鐵（HiCN）法的最大吸收峰 在 540nm.3. 血液凝固分析儀的凝固法是通過檢測血漿在凝血激活劑作用下一系列物理量（光、電、超聲、機械運動等）的變化，再由計算機分析所的數(shù)據(jù)并將之換算成最終結(jié)果的方法。4. 半自動血凝儀的基

8、本結(jié)構(gòu)：主要由樣本和試劑預(yù)熱槽、加樣器、 檢測系統(tǒng) （光學(xué)、磁場）及微機組成。有的半自動儀器還配備了發(fā)色檢測通道，使該類儀器同時具備了檢測抗凝及纖維蛋白溶解系統(tǒng)活性的功能。第六章 臨床血液流變學(xué)檢驗儀器1. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實驗室常用的血小板分析儀的檢測系統(tǒng)主要采用光學(xué)法和電阻抗 法。2. 血液黏度計的分類（ 1）按工作原理毛細(xì)管黏度計和旋轉(zhuǎn)式黏度計（2）按自動化程度半自動黏度計和全自動黏度計第七章 臨床尿液檢驗儀器1. 尿液分析儀的檢測原理：（可能考大題）把試劑帶浸入尿液以后，除了空白塊外，其余的試劑塊都因和尿液發(fā)生了化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生了顏色的變化，試劑塊的顏色深淺與光的吸收和反射程度有關(guān)，顏色越深，相

9、應(yīng)某種成分濃度越高，吸收光量值越大，反射光量值越小：反之，反射率越大。因為顏色的深淺與光的反射率成反比關(guān)系，而顏色的深淺又與尿液中各種成分的濃度成比例關(guān)系，所以只有測得光的反射率及可以求得尿液中各種成分的濃度。2. 尿液分析儀一般采用雙波長法測定試劑塊的顏色變化3. 尿液分析儀的使用注意事項（ 1）保持儀器清潔（2）使用干凈的取樣杯，使用新鮮的混合尿液（ 3）不同類型的尿液分析儀使用不同的尿試帶，每次取用后立即蓋上瓶蓋（ 4）試劑帶浸入尿樣的時間2 秒，所有的試劑帶全部浸入尿液中（ 5）結(jié)合半定量值進(jìn)行分析4. 尿液分析儀的質(zhì)量控制（ 1）檢測前的質(zhì)量控制（2）檢測中的質(zhì)量控制（3）檢測后的質(zhì)

10、量控制第八章 臨床自動生化分析儀器1 .根據(jù)儀器反應(yīng)裝置結(jié)構(gòu)的不同分為：連續(xù)流動式、離心式、分離式、干化學(xué)式2 .分立式自動生化分析儀工作原理是按手工操作的方式編排程序，并以有序的機械操作代替手工操作，用加樣探針將樣品加入各自的反應(yīng)杯中，試劑探針按一定時間自動定量加入試劑，經(jīng)攪拌器充分混勻后，在一定條件下反應(yīng)。反應(yīng)杯同時作為比色杯進(jìn)行比色測定。各環(huán)節(jié)用傳送帶連接，按順序依次操作，故稱為“順序式”分析。除常用的反應(yīng)杯轉(zhuǎn)盤式或軌道式分立式自動生化分析儀外，還有一種袋式分立式自動生化分析儀，其試劑裝在均勻透明的塑料夾中形成特殊的測試管，一袋一檢測。測試袋被連續(xù)傳送系統(tǒng)送到分析區(qū)，在混合器處經(jīng)機械敲擊

11、，樣品和試劑充分混合反應(yīng)，在比色計處經(jīng)特殊裝置的作用，測試袋形成光徑1cm 的比色杯，監(jiān)測后的廢測試袋被排出。該類儀器污染少、靈活、準(zhǔn)確，分析項目科達(dá)60 項。但測試帶是一次性的。3. 目前比較常用的是集空氣浴與水浴優(yōu)點于一身的恒溫液循環(huán)間接加溫干式浴。4. 自動生化分析儀基本參數(shù)反應(yīng)溫度：通常設(shè)有25 30 37等溫度，為了使酶的反應(yīng)溫度與體內(nèi)溫度一致，一般選用37。第九章 臨床電化學(xué)分析儀器2. 血氣分析儀玻璃電極與甘汞參比電極構(gòu)成電池，其電動勢的大小主要取決于內(nèi)部溶液的PH 值， 而電極導(dǎo)線將內(nèi)部電極引出的電位值傳輸?shù)椒糯笃?。此類電極的標(biāo)本用量一般不超過100 微升， PH 測定范圍為0

12、10,37時電極的98響應(yīng)時間不超過15 秒3. 血氣分析儀PO2 電極 PO2 電極是一種Clark 電極， 屬于氣敏氧電極，也是極譜電極。其工作原理是基于點解氧的過程中產(chǎn)生的電極電流，其大小與PO城正比。這種電極采用鋁絲，直徑通常為20微米，與直徑0.3毫米的鉑絲引出線點焊后封閉在玻璃柱中，前段暴露作為陰極；Ag/AgCl電極圍繞在玻璃柱的后端。將此玻璃柱裝在一有機玻璃套內(nèi)，套的一端覆蓋著O2半透膜，套內(nèi)空隙充滿PO2g沖液，玻璃柱的前端磨砂，使柏 陰極與O2半透膜之間保持一薄層緩沖液。膜外為測量室。O2半透膜用約 20 微米的聚丙烯膜或聚四氟乙烯膜，也有用聚乙烯，聚酯做電極膜。電極與測量

13、室保持恒定溫度(3638)第十章 臨床微生物檢測儀器1. 目前微生物鑒定的自動化系統(tǒng)大致分為2 類：一類是自動血培養(yǎng)檢測和分析系統(tǒng)，另一類是微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)。2. 微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)基本結(jié)構(gòu)：測試卡、菌液接種器、培養(yǎng)和 檢測系統(tǒng)、數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)第十一章臨床免疫檢驗儀器1. 微孔板固相酶免疫測定儀器目前，微孔板式ELISA使用的載體為96孔板,采用直接對微孔板測定吸光度(A)的比色計。2. 磁微粒固相酶免疫測定儀磁微粒可用磁鐵吸引與液相分離，是免疫測定中較為理想的固相載體。3. 發(fā)光免疫方法是將發(fā)光反應(yīng)與免疫反應(yīng)相結(jié)合，產(chǎn)生的一種很有前途的免疫分析方法。4. 全自動電化學(xué)發(fā)光

14、免疫分析儀原理： 將待測標(biāo)本與包被抗體的順磁性微粒和發(fā)光劑標(biāo)記的抗體加在反應(yīng)杯中共同溫育，形成磁性微珠包被抗體抗原一發(fā)光劑標(biāo)記抗體復(fù)合物。復(fù)合物被吸入流動室，同時用TPA緩沖液沖洗。當(dāng)磁性微粒流經(jīng)電極表面時，被安裝在電極下的磁鐵吸引住，而游離的發(fā)光標(biāo)記抗體被沖洗走。同時在電極加電壓，啟動電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，使發(fā)光試劑標(biāo)記物三氯聯(lián)吡啶在電極表面進(jìn)行電子轉(zhuǎn)移，產(chǎn)生電化學(xué)發(fā)光，光的強度與待測抗原的濃度成正比。第十二章臨床即時檢驗儀器1 . 即時檢驗：指在患者身邊，由非檢驗專業(yè)人員（臨床人員或患者）利用便攜式儀器快速分析患者標(biāo)本并準(zhǔn)確獲取結(jié)果的分析技術(shù)，或者說測試不在主實驗室而在一個可移動的系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行。2

15、 .紅外和遠(yuǎn)紅外分光光度技術(shù)相關(guān)的 POCT：器該儀器包括由紅外光發(fā)射 管構(gòu)成的紅外光源。第十三章PCR 核酸擴增儀1. PCR 核酸擴增儀的工作關(guān)鍵是溫度控制，也就是由變性溫度退火溫度延伸溫度等程控循環(huán)升降溫度的過程。PCR 核酸擴增儀的控溫方式：水浴控溫、壓縮機控溫、半導(dǎo)體控溫、離心式空氣加熱控溫2. 實時熒光定量PCRK酸擴增儀 熒光實時定量PC雙在PCR5應(yīng)體系中加 入特異性的熒光染料或探針，熒光信號的變化真實地反應(yīng)了體系中模板的增加，可以實時檢測整個PCRS應(yīng)過程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析。3. PCR 擴增儀的性能指標(biāo)（一） 溫度控制（ 1）溫度的準(zhǔn)確性（ 2）溫度的

16、均一性（ 3）升降溫的速度（ 4）不同模式下的相同溫度特性（ 5）熱蓋溫度 （二）熒光檢測（ 1） Ct 值重復(fù)性錯誤（ 2）熒光檢測范圍（ 3）儀器的檢測通道數(shù)量（三） 樣品基座容量和樣品數(shù)4. PCRK酸擴增儀常見的故障的排除熒光強度減弱或不穩(wěn)定：原因有濾光片發(fā)霉或有水氣等，需工程師檢修；或光源損耗，需更換光源；或需調(diào)節(jié)檢測元件靈敏度，也需工程師調(diào)試。第十四章 全自動DNAM序儀和蛋白質(zhì)自動測序儀1.目前DNAH序的工作原理主要利用Sanger雙脫氧鏈末端終止法或Maxam- Gilbert 化學(xué)降解法第十五章流式細(xì)胞儀1. 流式細(xì)月fi儀（FCM是以激光為光源，集流體力學(xué)，電子物理技術(shù)，

17、光電測量技術(shù)， 計算機技術(shù)，細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)和單克隆抗體技術(shù)為一體新型高科技儀器。應(yīng)用FCM寸于處在快速直線流動狀態(tài)下的生物顆粒進(jìn)行快速的、多參數(shù)的定量分析和分選技術(shù)成為流式細(xì)胞術(shù)，他是在單細(xì)胞水平上，對于這些生物顆粒進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析和分選技術(shù)，現(xiàn)以成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)最先進(jìn)的分析技術(shù)之一。生物學(xué)顆粒包括大的免疫學(xué)復(fù)合物、DNA、 RNA、蛋白質(zhì)、病毒顆粒，脂質(zhì)體，細(xì)胞器、細(xì)菌、真菌、染色體、真核細(xì)胞、雜交細(xì)胞、 聚集細(xì)胞等，所檢測的生物顆粒理化性質(zhì)包括細(xì)胞大小、細(xì)胞形態(tài)，包漿顆?；潭?、DN給量、總蛋白質(zhì)含量、細(xì)胞膜完整性和酶的活性等。由于融合了單克隆抗體技術(shù)、定量細(xì)胞化學(xué)和定量熒光細(xì)

18、胞化學(xué)。FCM乍為一項生物檢測技術(shù)已經(jīng)日臻完善。2. 流式細(xì)胞分析儀的分析原理：將特異熒光染料染色的單細(xì)胞懸液放入樣品管，在氣體壓力作用下，懸浮在樣品管中的單細(xì)胞經(jīng)管道進(jìn)入FCMa動室，沿流動室的軸心向下流動形成樣品流。3. 作為FC帆學(xué)系統(tǒng)中的主要光學(xué)元件的濾光片，主要分為長通濾光片、短通濾光片和帶通濾光片三類。4. 前向角散射：前向角散射與被測細(xì)胞的大小有關(guān)，確切的說與細(xì)胞直徑的平方密切相關(guān)。5. 細(xì)胞分選器細(xì)胞分選器由水滴形成、充電和偏轉(zhuǎn)三部分組成。通過壓電晶體的震動使自噴孔噴出的流束形成水滴，分選邏輯電路根據(jù)分選細(xì)胞的參數(shù)， 給含有此參數(shù)的細(xì)胞液滴充電，充電的液滴經(jīng)過電極偏轉(zhuǎn)板時，依所

19、帶電荷的不同而偏向不同的電極板，在電極下方放置收集容器，就可得到要分選的細(xì)胞。6. 流式細(xì)胞儀的主要性能指標(biāo)（ 1） 靈敏度 （ 2） 分辨率 （ 3） 分析速度（ 4）分選指標(biāo)第十六章臨床電泳分析儀器1. 電泳的基本原理：物質(zhì)分子在正常情況下一般不帶電，即所帶正負(fù)電荷量相等， 故不顯示帶電性。但是在一定的物理作用或化學(xué)反應(yīng)條件下，某些物質(zhì)分子會成為帶電的離子，不同的物質(zhì)，由于其帶電性質(zhì)、顆粒性狀和大小不同， 他們在一定的電場中移動的方向和速度也就不同，因此就可以將他們分離。2. 免疫電泳該技術(shù)有兩大優(yōu)點，一是加快了沉淀反應(yīng)的速度；二是將某些蛋白組分根據(jù)其帶電荷的不同而分開，再與抗體起反應(yīng)，從

20、而使此方法更為微量化、多樣化。免疫電泳可用于的研究：抗原和抗體的相對應(yīng)性，測定樣品的各成分及他們的電泳遷移率，根據(jù)蛋白質(zhì)的電泳遷移率，免疫特性及其他特性，可以確定該復(fù)合物中某些蛋白質(zhì)，鑒定抗原或抗體的程度。3. 電泳儀的基本機構(gòu)包括主要設(shè)備（分離系統(tǒng)）和輔助設(shè)備（ 檢測系統(tǒng)）分離系統(tǒng)包括電泳電源、電泳槽輔助設(shè)備包括恒溫循環(huán)冷卻裝置、伏式積分裝置，凝膠烘干器等4. 電泳儀的主要技術(shù)指標(biāo)輸出電壓輸出電流輸出功率電壓穩(wěn)定度電流穩(wěn)定度 功率穩(wěn)定度連續(xù)工作時間顯示方式定時方式第十七章熒光光譜分析儀和原子光譜分析儀1. 熒光光譜儀的光學(xué)系統(tǒng)包括激發(fā)光源、單色器、樣品池和檢測器四部分。2. 熒光光譜儀的性能指標(biāo)與評價靈敏度 波長范圍波長精度分辨率 光譜帶寬 信噪比與響應(yīng)速度第十八章色譜分析儀器1.