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文檔簡介
1、一般檢驗1 .手工顯微鏡計數紅細胞已不常用,但為什么仍然不能被淘汰?答:手工顯微鏡法是傳統的紅細胞計數法,不需要特殊設備,但比儀器法費時, 現雖已不常用,但仍作為血液分析儀的校正。2 .血沉測定的方法學評價。答:血沉測定方法有:1.手工法包括氏法、氏法等:氏法簡便實用,ICSH推薦 為血沉測定的參比方法;氏法與氏法測定相關性較好,采用手指采血,用血量少, 尤其適用于兒童,但易混入組織液,目前已很少使用。手工法只能測定血沉某個 時刻的最終結果,特異性差,其應用有很大的局限性。2.血沉儀可動態(tài)記錄整個血沉過程的變化,描繪出紅細胞沉降的曲線,反映了不同疾病或疾病不同階段, 血沉3個沉降階段所存在的差
2、異,為臨床分析血沉測定結果提供了新的手段。3 .白細胞分類計數質量控制應注意哪些因素?答:1.影響準確性的因素:主要是細胞在涂片中分布不均和觀察者對細胞辨認的 差異;2.影響精確性的因素;3.影響涂片染色效果的因素;4.白細胞分類計數的 參考方法:EDTA-K2抗凝靜脈血,人工制成血涂片,以 Romanowsky液進行染 色,使用“城墻式”移動法,油鏡下分類計數 200個白細胞。當其他分類法與此 法作為標準進行比較時,需要4個熟練檢驗人員對同一涂片各計數 200個白細胞(即總數為800個細胞)后,求出平均值來作為給類白細胞的靶值。4 .嗜酸性粒細胞升高的臨床意義?答:嗜酸性粒細胞增多是成人外周
3、血嗜酸性粒細胞 0.5*109/L,見于:1.寄生蟲 ??;2.變態(tài)反應性疾?。?.皮膚??;4.血液?。?.某些惡性月中瘤;6.某些傳染病; 7.其他:風濕性疾病、腺垂體功能減低癥等;8.高嗜酸性粒細胞綜合癥。5 .電阻抗法血液分析儀的檢測原理。答:根據細胞相對非導電的性質,懸浮在電解質溶液中的血細胞顆粒在通過計數 小孔時可引起電阻的變化,于是瞬間引起了電壓變化而出現一個脈沖信號。 脈沖 信號變化的程度取決于非導電性細胞體積的大小, 細胞體積越大產生的脈沖振幅 越高,記錄脈沖的數量就可測定細胞數量。這些脈沖信號經過放大、闕值調節(jié)、 甑別、整形、計數及自動控制保護系統,最終可打印出數據報告。6 .
4、血紅蛋白測定方法及其方法學評價答:測定方法包括:1.氟化高鐵血紅蛋白測定法(HiCN)為國際標準參考方法。操作簡單、顯色快且結果穩(wěn)定可靠,可檢測除 SHb外的各種血紅蛋白。KCN有 劇毒,且存在高白細胞和高球蛋白血癥可致試劑混濁,以及 HbCO轉化較慢等 問題。2.十二烷基硫酸鈉(SDS)血紅蛋白測定法可替代 HiCN法。SDS與Hb 作用(除SHb外),生成SDS-Hb棕紅色化合物,具吸收峰在 538nm, SDS可用 HiCN法測定的抗凝血或溶血液,制備標準工作曲線。本法操作簡單,呈色穩(wěn)定, 準確性和精確性符合要求,且無公害,為次選方法。SDS本身質量差異較大,且 破壞白細胞,不適用于同時
5、有白細胞計數和Hb測定的血細胞分析儀上使用。3.疊氮高鐵血紅蛋白(HiN3)測定法與HiCN測定法相似的優(yōu)點,顯色快而穩(wěn)定,試 劑毒性僅為HiCN的1/7,但存在公害問題。4.堿羥血紅蛋白(AHD575)測定法, 試劑簡單,不含有毒劑,呈色穩(wěn)定,可用氯化血紅素作標準品。但此法在血液分 析儀中應用受限。5.多參數血液分析儀測Hb已逐漸取代手工法,操作簡單、快 速,同時可以獲得多項紅細胞的參數。其測定原理多采用 HiCN法,但由于各型 號儀器使用的溶血劑不同,形成 Hb的衍生物不同。儀器要經過 HiCN標準液校 正后,才能進行Hb測定。7 .網織紅細胞檢測的臨床意義答:1.判斷骨髓增生能力,判斷貧
6、血類型:增多,表示骨髓造血功能旺盛。常 見于溶血性貧血(尤其急性溶血)、急性失血;造成恢復期可見 Ret短暫和迅速 增高,是骨髓功能恢復較敏感的指標。減少,表示骨髓造血功能低下,見于冉 障,溶貧、自身免疫性溶貧危象。典型冉障,網織紅細胞計數常低于0.005,網織紅細胞絕對值低于15*109/L,為其診斷標準之一。2 .評價療效,判斷病情變化:Ret是貧血患者隨訪檢查的項目之一。3 .骨髓移植后監(jiān)測骨髓造血恢復。8 .血沉變化的臨床意義。答:1.生理性增快:女性高于男性。婦女經期、妊娠 3個月以上,以及老年人血 沉常增快。2.病理性增快:各種炎癥:感染是血沉加快的最常見原因,如急性 細菌性感染;
7、結核病、結締組織炎癥、風濕熱等慢性炎癥于活動期血沉增快,病 情好轉時血沉減慢,故血沉(ESR)可動態(tài)觀察病情變化。組織損傷及壞死:見 于較大圍組織損傷或手術創(chuàng)傷。心肌梗死時血沉增快,而心絞痛時血沉多正常, 可作為兩者鑒別指標。惡性月中瘤血沉增快,而良性月中瘤血沉多正常。高球蛋 白血癥。貧血。高膽固醇血癥。3.血沉減慢。臨床意義較小,主要見于紅細 胞明顯增多、纖維蛋白原含量嚴重減低時。血沉是較為常用而缺乏特異性的指標, 血沉常作為疾病是否活動的檢測指標。9 .簡述中性粒細胞病理變化的臨床意義。答:中性粒細胞增多指分葉核粒細胞超過 70%,絕對值7*109/L。急性感染 或炎癥是最常見的原因,以中
8、性粒細胞為主。尤其是化膿性球菌感染。具增高程 度與病原體種類、感染部位和程度以及機體的反應性等有關。廣泛組織損傷或 壞死和急性溶血,如嚴重燒傷、心肌梗死等均可見白細胞增多, 以中性粒細胞為 主。急性失血,白細胞迅速增多,以中性粒細胞為主。急性中毒。惡性月中 瘤、白血病,急性白血病以幼稚白血病細胞增多為主。慢性白血病以成熟的白血 病細胞增高為主。10 .為什么血細胞分析儀對白細胞的分類結果只能作為篩檢試驗?答:1.三分群血液分析儀用電阻抗法的原理,依據白細胞體積的大小,人為的將 白細胞分成三群,這種分類不夠準確。2.五分類的血細胞分析儀聯合應用光學和 電學等技術的儀器,檢測同一血細胞的體積、細胞
9、核形狀及胞質中顆粒,在綜合 分析后做出白細胞分類,這種檢測分類,這種檢測分類法雖然較電阻抗法高, 但 仍不能滿足臨床檢出異常細胞的需要。3.各類型的血液分析儀尚不具有識別紅細 胞、白細胞核、血小板的能力,仍不能檢出白細胞形態(tài)的病理性變化,特別是對 幼稚細胞的檢測。而顯微鏡能根據血細胞與染色液特異性的結合,根據血涂片上 細胞的體積、細胞核形狀及胞質中顆粒等著況,進行綜合分析并能識別異常和幼 稚細胞,因此,血細胞分析儀只能作為健康人血液一般檢驗的篩檢之用。11尿常規(guī)分析的臨床價值。答:1.泌尿系統疾病的診斷與療效觀察。泌尿系統的炎癥、結石、月中瘤、血管病 變及腎移植術后發(fā)生排異反應時,各種病變產物
10、直接進入尿中,引起尿液成分變 化,因此尿液分析是泌尿系統疾病診斷與療效觀察的首選項目。2.其他系統疾病的診斷。尿液來自血液,其成分又與機體代有密切關系, 故任何系統疾病的病變 影響血液成分改變時,均能引起尿液成分的變化,因此可通過尿液分析協助臨床 診斷。3.安全用藥的監(jiān)護。某些藥物如慶大霉素、卡那霉素、多黏菌素B與磺胺類藥等??梢鹉I損害,故用藥前及用藥過程中需觀察尿液的變化,以確保用藥安全。4.職業(yè)病的輔助診斷。鉛、鎘、鈿、汞等均可引起腎損害,尿中此類重金 屬排出量增多,對職業(yè)病的診斷及預防有一定意義。12.糞便隱血試驗的臨床意義。答:糞便隱血試驗對消化道出血的診斷有重要價值。消化性潰瘍、藥
11、物致胃黏膜損傷(如服用阿司匹林、呷深美辛、糖皮質激素等)、腸結核、Crohn病、潰瘍 性結腸炎、結腸息肉、鉤蟲病及胃癌、結腸癌等消化道月中瘤時,糞便隱血試驗均 常陽性。故須結合臨床其他資料進行鑒別診斷。在消化性潰瘍時,陽性率為4070%,呈間斷性陽性。消化性潰瘍治療后,當糞便外觀正常時,隱血試驗陽 性仍可持續(xù)57天,此后如出血完全停止,隱血試驗即可轉陰。消化道癌癥時, 陽性率可達95%,呈持續(xù)陽性,故糞便隱血試驗常作為消化道惡性月中瘤診斷的一 個篩選指標。尤其對中老年人早期發(fā)現消化道惡性月中瘤有重要價值。此外在流行性出血熱患者的糞便中隱血試驗也有 84%的陽性率,可作為該病的重要佐證。13尿H
12、CG的檢測原理、答:在纖維素膜的特定位置,分別包被單抗鼠IgG抗體(對照線),單抗人HCG 抗體(測定線),呈上下排列,另外,試帶上還含有均勻分布膠體金標記人B -HCG 單抗、膠體金標記的鼠IgG抗原。檢測時因層吸作用尿液中的 HCG與膠體金標 記人B-HCG單抗結合,移至測定線,形成金標記B -HCG單抗一B -HCG抗原一 單抗人HCG抗體的雙抗體夾心式復合物,測定線呈紫紅色。同時,金標記鼠IgG 抗原隨尿上行至單抗鼠IgG抗體,形成金標記鼠IgG抗原與單抗鼠IgG抗體復 合物,對照線呈紫紅色。血液學檢驗1 .簡述血細胞發(fā)育過程中形態(tài)演變規(guī)律答:胞體由大到小,但原始細胞比阜幼粒細胞小,巨
13、核細胞由小到大,核漿比例 由大到??;胞核由大到小,成熟紅細胞核消失;核形由圓到凹陷到分葉,有的細 胞可不分葉;核染色質結構由細致疏松到粗糙緊密, 核染色質顏色由淡紫色到深 紫色;核膜由不明顯到明顯;核仁由顯著可見到無,胞質量由少到多,胞質顏色 由藍到紅或由深藍到淺藍;胞質顆粒由無到有;紅細胞在成熟過程中,胞質不會 顆粒。2 .再障的骨髓病理學特點答;骨髓增生減退,造血組織與脂肪組織容積百分比降低,脂肪細胞與基質增多。 粒細胞、紅細胞、巨核細胞均減少,淋巴細胞增多。間質漿細胞、肥大細胞、網 狀細胞等非造血細胞增多,并可有問質水月中、出血甚至液性脂肪壞死。3 .再障的診斷標準答:1.全血細胞減少,
14、網織紅細胞絕對值減少;2.一般無肝脾月中大;3.骨髓至少1 個部位增生減低或重度減低,骨髓小粒非造血細胞增多; 4.除外引起全血細胞減 少的其他疾病,如PNH、MDS-RA急性造血功能停滯;5.一般抗貧血藥物治療 無效。4 .溶血性貧血的共性改變答:1.一般貧血實驗室表現,正常細胞性貧血,網織紅細胞一般增高,血片中有 特殊形態(tài)的紅細胞,類白血病反應。骨髓有核細胞顯著增多,粒紅比例倒置。2.血紅蛋白的釋放。3.膽紅素代異常。4.紅細胞壽命縮短。5 .慢性粒細胞白血病與骨髓纖維化的鑒別答:1.發(fā)熱:慢,常見疾病期;骨,不常見。2.貧血:慢,明顯;骨,不一致。3.脾月中大:慢,更明顯;骨,明顯。4.
15、異性紅細胞:慢,不明顯;骨,明顯,見 淚滴紅細胞。5.WBC計數:慢,增多;骨,正常,減少或減增多。6.有核紅細胞: 慢,無或少見;骨,常見。7.NAP:慢,降低或0,急變可增高;骨,正常,增 多或減少。8.骨髓涂片:慢,以中幼、晚幼、桿狀粒細胞增殖為主;骨,多為干 抽。9.骨髓活檢:慢,粒系增殖與脂肪組織取代一致;骨,為纖維組織取代,有 新骨髓組織形成、巨核細胞增多。10.Ph染色體:慢,90%陽性;骨,陰性。11.BCR/ABL融合基因:慢,陽性;骨,陰性。6 .凝血過程的三個階段答:第一階段:血液凝血活酶的形成;第二階段:凝血酶形成;第三階段:纖維 蛋白的形成。第一階段有源性和外源性凝血
16、系統兩個途徑。 外源性凝血系統是由 于血管壁和組織損傷后釋放因子田, 因子即,鈣離子形成復合物,促使因子X活 化,然后形成凝血活酶。源性凝血系統是通過固相和液相激活因子刈, 然后是DC -Vffl-Ca-PF3復合物形成,從而促使因子X活化,形成凝血活酶。7 .如何早期診斷DIC。答:1.存在可引起DIC的病因,如感染、創(chuàng)傷、月中瘤等。2.有兩種以上的下列臨 床表現:反復、嚴重或廣泛的出血;不明原因或難以糾正的休克;出現反映肺、 腦、肝、腎等器官栓塞的癥狀和體征;原來疾病不可解釋的溶血現象。3.實驗室檢查符合以下表現:PLT減少或進行性下降,Fg含量減少,3P試驗陽性或D- 二聚體升高。PT縮
17、短或較正常對照線延長 3s以上。8 .骨髓檢查的適應證答:1.外周血細胞數量、成分、形態(tài)異常。2.不明原因的發(fā)熱、肝月中大、脾月中大、淋巴結月中大。3.不明原因的骨痛、骨質破壞、腎功能異常、黃疸、紫瘢、血沉明 顯加快。4.惡性血液病化療后的療效觀察。5.其他:骨髓細胞培養(yǎng)、微生物學、 寄生蟲學檢驗等。9紅白血病與巨幼細胞貧血的鑒別答:1.細胞形態(tài):紅,類巨幼紅細胞;巨,典型巨幼紅細胞。2.細胞大?。杭t,大小相差懸殊;巨,大而比較一致。3.核質發(fā)育:紅,質落后于核/核落后于質; 巨,核落后于質。4.核染色質:紅,粗細不均,排列紊亂;巨,細致,排列疏松。5.副幼紅細胞變:紅,明顯;巨,極少見。 6
18、.有核紅細胞PAS反應:紅,陽性; 巨,陰性。7.早期幼粒細胞增生:紅,多見;巨,極少見。8.巨核細胞減少:紅, 明顯;巨,不明顯。10 .血小板在止血過程中的作用答:1.PLT能維持正常管壁的完整性,使其通透性減低。2.通過黏附、聚集和釋放反應在創(chuàng)口處形成 PLT栓子。3.釋放各種PLT因子參與血液凝固,其中 PF3 最重要。4.釋放止血物質TXA2,使PLT進一步收縮。5.釋放PLT收縮蛋白,使 血塊收縮,有利于止血。11 .何為白血病M4型,其亞型如何劃分?答:M4為粒單核細胞型血病,按粒細胞、單核細胞的比例,形態(tài)不同分為四個 亞型:1.M4a:以原始及阜幼粒細胞白血病增長生為主。單核細
19、胞系統細胞總數 >20% (NEC)02.M4b:以原、幼單核細胞增生為主,原粒細胞+早幼粒細胞 20% (NEC)。3.M4c:具有粒系又單核系特征的原始細胞>30% (NEC)。4.M4Eo:除上述特征外,還有顆粒粗大且圓、著色較深的嗜酸性粒細胞,占 530%012 .何為造血干細胞?具備哪些特征?答:是一種具有自身復制能力的細胞,必須具備:1.有分裂能力:一個干細胞經 過一個細胞周期活動后可生成兩個與分裂前性質相同的干細胞,這就是干細胞自身復制的特性。由于它有自身復制能力,所以能保持本細胞庫數的恒定。2.有分化為更成熟細胞的能力:即具有向骨髓多系細胞分化的能力。 造血干細胞既
20、能自 身復制,經常維持一定的數量,又能分化為使多系細胞相對穩(wěn)定。概括為:血細 胞來源于骨髓的造血多能干細胞,多能干細胞能分化為多系統的定向干細胞,然后經過原始、幼稚各階段,而后成熟為多種血細胞。13 .試舉例說明急性白血病的 MICM分型。答:M形態(tài)學I免疫學C細胞化學M分子生物學,以M3為例,Hb和RBC輕 中度減少,WBC不定,分類以異常早幼粒為主, 30% (NEC),早幼與原粒之 比3:1,異常阜幼粒細胞核大小不一,胞質中有大小不等顆粒,可見束狀 Auer 小 體 ;POX(+),CD13/CD33(+),CD34/HLA-DR(-),t(15:17)(q22:q12) 形 成PML/
21、RARA融合基因。14 .血栓形成機制答:1.血管壁損傷;局部皮細胞抗血栓形成活性減弱或喪失,使血栓形成的皮下 成分暴露,促使血小板黏附、聚集和釋放,激活源性、外源性凝血途徑,局部形 成纖維蛋白的凝塊或血栓,同時激肽的生成和血小板釋放的血管壁通透性因子使 血管壁通透性增加,利于血栓形成。2.血液成分的改變;血小板數量過多與功能 亢進,血液凝固性增高。纖溶活性減低及白細胞等均利于血栓形成。3.血液淤滯; 血流緩慢、停滯與渦流均可導致血栓形成、血黏度增高,利于血小板黏附、聚集, 利于血栓形成。15 .原發(fā)性纖溶亢進與DIC繼發(fā)性纖溶的鑒別。答:原發(fā)性纖溶亢進:PLT、B-TG、PF4、GNP-14
22、0、F1+2、FPA、SFMC、PCP、 D-二聚體、B B 1542肽,土勻是正常;B0142肽升高。DIC:PLT下降;0-TG、 PF4、GNP-140、F1+2、FPA、SFMC、PCP、D-二聚體,均是升高;B 0 1542 肽, 升高;B0 142肽,正常。16 .舉例說明為什么分析骨髓象必須常規(guī)分析血常規(guī)?答:1.骨髓象相似而血常規(guī)有區(qū)別,如類白血病反應,其骨髓象與慢粒相似,但血中的WBC增多及慢粒顯著。2.骨髓象有區(qū)別而血常規(guī)相似,如傳染性淋巴細 胞增多癥和慢粒時,血常規(guī)都有小淋巴細胞增多,但骨髓象顯示前者淋巴細胞稍 增多而后者顯著增多。3.骨髓象變化不顯著而血常規(guī)有顯著異常,
23、如傳染性淋巴 細胞增多癥,其骨髓象中的異性淋巴細胞遠不及血常規(guī)中明顯。4.骨髓象有顯著變化而血常規(guī)變化不顯著,如多發(fā)性骨髓瘤,骨髓中可見特異性骨髓瘤細胞, 而 血常規(guī)甚少見到。5.骨髓象細胞難辨認,如白血病,血常規(guī)中白血病細胞分化程 度較骨髓象為好,也較骨髓象容易辨認。17 .鑒別類白血病反應和白血病。答:1.明確病因:類,有;白,無。2.臨床表現:類,原發(fā)病癥狀常明顯;白, 貧血、出血、發(fā)熱和肝脾腫大等、白細胞細胞浸潤。3.WBC計數:類,中度增加 100*109/L;白,一般增多,可 100200*109/L。4.不成熟 WBC :類,幼稚 細胞5-15%,原始細胞15%;白,很常見,在
24、30%以上。5.WBC形態(tài):類, 感染病例見中毒顆粒及空泡;白,常有細胞畸形,可見Auer小體嗜堿性粒細胞不增多,慢粒常增多。6.RBC:類,無明顯變化;白,減少且為進行性,并可出 現幼紅細胞。7.PLT:類,正?;蛟黾?;白,除慢粒早期外均減少。8.NAP:類,顯著增加;白,粒細胞白血病顯著減少。9.骨髓象:類,粒系增加,核左移,但 很少達到白血病程度;白,極度增生,并有大量原始及幼稚細胞。10.Ph染色體:類,無;白,90%慢粒陽性,急粒、急單偶見。11.病理檢查:類,無器官和組織 白血病細胞浸潤;白,有浸潤。12.治療反應:類,解除原發(fā)病迅速恢復;白, 療效差。18 .列舉5例引起外周血全
25、血細胞減少的血液病及主要鑒別特征?答1.Hb再障:骨髓有核細胞增生低下,淋巴比例相對增高,粒紅巨三系細胞增 生減低。活檢示造血組織減少,脂肪組織增加。2.PNH: Ham實驗和蔗糖溶血實 驗陽性。3.MDS:骨髓象中可見至少一系的病態(tài)造血。 4.非白血性白血病:骨髓 象中可見大量原始細胞核幼稚細胞。5.惡性組織細胞?。汗撬柘笾锌梢姁盒越M織 細胞。19 .傳染性單核細胞增多癥、傳染性淋巴細胞增多癥和急性淋巴細胞白血病有何 不同?答:1.發(fā)熱:傳單,常持續(xù)13周;急淋,持續(xù)不規(guī)則發(fā)熱;傳淋,無或短暫發(fā) 熱。2.淋巴結月中大:有;有;無。3.脾月中大:2575%有;有;無。4.傳染性:??; 無;大。
26、5.WBC計數:中等度增高;從減少到極度增高;顯著增高。 6.有診斷價 值的細胞:異淋;原淋、幼淋細胞;正常成熟小淋巴細胞。 7.貧血:無;有;無。8.血小板減少:一般無;有;無。9.骨髓象:有異淋;原淋、幼淋顯著增多;正 常小淋巴增多。10.嗜異性凝集試驗:+;-;-。預后:良好;不良;良好。20.病態(tài)造血時粒紅巨三系細胞區(qū)別。答:骨髓:紅,過多或過少;巨幼樣變;幼紅細胞多核;核可畸形、分葉、碎裂; 環(huán)形鐵粒幼細胞。粒,核分葉過多或過少; Pelger樣核異常;顆粒過多或過少; 成熟細胞質嗜堿性;雙核或畸形中幼粒細胞。巨核系,小巨核細胞;多個圓形巨 核;單圓核、巨核。外周血:紅系,有核紅細胞
27、;粒系,幼稚或原始細胞;巨系, 巨大血小板。異形RBC:紅系,巨大RBC;粒系,其他同骨髓;巨系,小巨核 細胞。輸血(血庫)1 .輸注全血有哪些缺點?答:1.全血中含有 WBC、PLT和血漿蛋白,可以使受血者產生抗體,再輸血時, 可發(fā)生輸血反應。2.由于血漿存在,全血容量較大,對老年人和兒童可引起循環(huán) 超負荷,發(fā)生心力衰竭。3.全血的血漿中可能含有較高濃度的枸檬酸鈉、鉀和氨 等,易發(fā)生代性堿中毒。2 . ABO定型試驗中常要注意哪些問題?答:1.ABO亞型:RBC上的A或B抗原很弱,只作正定型時可導致血型誤定。2 .抗A抗B定型血清質量差,對弱得 A或B抗原漏檢。3.受檢血清中存在不規(guī) 則抗體
28、。4.RBC有多凝集現象。5.某些疾病如低丙種球蛋白血癥等,導致反定型 時血清中抗體漏檢。3 .抗球蛋白配血法 步驟答:1.取試管2支,分別標明主次側,主側加受血者血清 2滴和供血者5%RBC 鹽水懸液1滴,次側加供血者血清2滴和受血者5%RBC鹽水懸液1滴。2.混和, 置37度水浴致敏1h,取出后用鹽水離心洗滌 RBC3次,去上清液。3.加最適稀 釋度抗球蛋白血清1滴,混勻,1000rpm離心1min,觀察結果。4.陽性對照:5% 不完全抗D致敏的Rh陽性RBC懸液1滴,加抗球蛋白血清1滴。陰性對照:5%O型RBC懸液1滴,加抗球蛋白血清1滴。鹽水對照:供血者 5%RBC鹽 水懸液1滴,加生
29、理鹽水1滴;受血者5%RBC鹽水懸液1滴加生理鹽水1滴。 5.結果判定:如陽性對照管凝集,陰性對照管、鹽水對照管不凝集,主次側配血 管都不凝集,表示無輸血禁忌。臨床生物化學1 .血糖的來源和去路。答:來源:1肝糖原分解。2.食物經消化吸收的葡萄糖。3.糖異生。去路:1.氧化 供能。2.合成糖原。3.轉變?yōu)橹炯澳承┓潜匦璋被帷?.轉變?yōu)槠渌穷愇镔|。2 .根據米-曼氏方程計算,當(S)是Km的5倍時,反應速度v相當于最大速度 Vmax的多少?答:根據 v=Vmax S /(Km+ S),當S =5Km 時 v=83% Vmax。3 .說明高氨血癥導致昏迷的生化基礎。答:氨+ a-酮戊二酸-谷
30、氨酸;氨+谷氨酸-谷氨酰胺;腦a -酮戊二酸減少導致 了三竣酸循環(huán)減弱,從而 ATP生成減少,腦組織供能缺乏表現昏迷。4 .體膽紅素來源于何種代途徑?答:1.大部分由衰老RBC破壞進入降解而來。Hb破壞后亞鐵血紅素經代轉變成 膽紅素,約占75%。2.小部分來自組織(特別是肝細胞)中非Hb的血紅素蛋白質 的血紅素輔基的分解。3.極小部分由造血過程中血紅素的少量分解,即無效造血 所產生。5 .簡述肝功能檢查及其意義。答:1.膽紅素代檢查了解具有無黃疸、黃疸程度并鑒定其類型。 2.蛋白質代檢查 了解肝細胞合成蛋白質的能力。3.酶類檢查了解肝細胞受損的程度。4.反映肝外 膽汁淤滯的檢查。5.反映肝纖維
31、化程度的檢查。6.反映肝占位性病變的檢查。7. 免疫功能檢查以確定肝炎類型。8.輸血后肝炎檢查。6 .試述ApoAI、ApoB測定的臨床意義?答:Apo作為脂類載體直接與脂類代 ApoAI測定可直接反映HDL和LDL水平, ApoAI含量與HDL含量正相關,與冠心病和動脈硬化的發(fā)生呈負相關, ApoAI 越高對人體越有益,而 ApoB則相反,其水平越高意味著 LDL越高患冠心病危 險越大,ApoAI下降和ApoB增高見于冠心病,還見于未控制的糖尿病、腎病綜合征、活動肝炎、營養(yǎng)不良等,冠心病的優(yōu)選指標是ApoB,其增高比HDL-CH降低和TCH升高更有意義,腦血管病以 HDL-CH , ApoA
32、l下降更明顯。7 .肌鈣蛋白是反映哪個器官損傷的標志物?有何意義?答:Tn是心肌組織的一種特有的調節(jié)蛋白,嚴重心肌缺損時釋放入血,是反映 心肌損傷的血清標志物。肌鈣蛋白以三種球型亞基組成,即 TnT、Tnl和TnC, 相對分子質量一次減小。其含量與年齡、性別、梗死部位及溶栓藥物種類等無關。8 .尿中微量蛋白的檢測對診斷早期腎損傷有什么意義?答:蛋白尿是腎臟疾病的一個重要指標。 在某些腎臟病早期,尿常規(guī)測定常為陰 性,尿中蛋白質含量實際已有微量的增加(20200mg/L)。若早期發(fā)現腎臟損害 疾病如糖尿病腎損害等,必須做一些尿中微量蛋白的檢測,以監(jiān)測腎臟以及其他 器官的功能狀態(tài),提供可靠的生化指
33、標。9 .簡述電泳的工作原理。答:溶液中的帶電粒子在直流電場中向電極相反方向移動的現象稱為電泳。蛋白質、核酸與生物分子具有兩性電離及各自等電點。在PH相同條件下這些生物分子將會有帶不同量得電荷。如果要分離一組等電點不同的蛋白質,只要選擇一個 合適PH,使多種蛋白質在該PH的凈電荷差異最大,即可用此電泳方法檢查得 到滿意的分離效果。10 .簡述光譜吸收法的原理和朗伯-比爾定律。答:光譜吸收法是指利用各種化學物質所具有的吸收光譜的特性來確定其性質、結構和含量的方法。朗伯-比爾定律:A=kbc,其中k是吸光系數,b是比色杯得 光徑,c為溶液濃度。C為1mol/L, b為1cm時,則系數k為摩爾吸光系
34、數,以 e表示,單位為 L/ (mol?cm)。11 .何為連續(xù)監(jiān)測法?其特點是什么?答:連續(xù)測定酶促反應過程中某一反應產物或底物的濃度隨時間變化的多點數據,求出酶反應處速度,間接計算酶活性濃度的方法稱連續(xù)監(jiān)測法。12何為電極法?表示電極法的基本公式是什么?答:利用電極、電位和物質濃度之間的關系來確定物質含量的分析方法稱為電極 法?;竟绞悄芩固胤匠淌?。13 .自動生化分析儀性能評價指標主要由哪些?答:常用性能指標有精確度、波長準確性、相關性、取樣量和最小反應體積及攜 帶污染情況等。14 .簡述干化學法原理。答:是以被測樣本中存在的液體為反應介質(液體中的水溶解了試紙條上的試 劑),被測成分
35、直接與固化與載體上的干試劑反應的一種方式。微生物學檢驗1.細菌有哪些特殊結構?它們在醫(yī)學上有何實際意義?答:1.莢膜:許多細菌胞壁外圍繞一層較厚的黏性、膠凍樣物質。 2.鞭毛:某些 細菌體表面附著有細長呈波狀彎曲的絲狀物。是細菌的運動器官。 3.菌毛:一些 細菌菌體表面遍布著短而細直的蛋白質絲狀物, 稱為菌毛,與細菌的致病性有關。4.芽抱:某些細菌在一定環(huán)境條件下,細胞質脫水濃縮,在菌體形成一個折光性 強的圓形或卵圓形小體。芽抱對外界的抵抗力增強,不易被殺滅。2 .常見的細菌變異現象有哪些有何實際意義?答:有非遺傳性(表型性)改變和遺傳性(基因型)變異。其意義為:表型性改 變,是指當外界環(huán)境條
36、件發(fā)生改變時所引起的細菌某一性狀的改變。當條件回復,可恢復原來的性狀,不遺傳給后代。常見的有:形態(tài)結構的改變,細菌形態(tài)的改 變,毒力的改變。基因型變異,是細菌自身遺傳物質(細菌染色體、質粒)發(fā)生 改變而引起的變異。新獲得的性狀可以穩(wěn)定地傳給后代。3 .外毒素和毒素有哪些主要區(qū)別?答:外毒素是某些細菌在代過程中產生并分泌到菌體外的毒性物質。主要由革蘭陽性菌產生,少數革蘭陰性菌也能產生。外毒素的化學成分是蛋白質,性質不穩(wěn) 定,易被熱、酸及酶破壞;外毒素的毒性作用強;不同細菌產生的外毒素對人體 組織有選擇性的毒性作用,引起特殊病變。外毒素有較強的抗原性,經甲醛處理 可脫去毒性作用,但仍保留抗原性,成
37、為類毒素,類毒素可刺激機體產生相應的 抗毒素,用于人工自動免疫;毒素是革蘭陰性桿菌細胞壁中的脂多糖成分, 只有 當菌體死亡裂解或用人工方法裂解細菌后才釋放出來。毒素對機體組織的毒性作用選擇性不強,引起的病理變化和臨床癥狀基本相同。4 .正常菌群一般不引起人體感染,請問在什么情況下可發(fā)生感染?答:當病人免疫功能下降,體微生態(tài)環(huán)境失衡或發(fā)生細菌易位時,即可發(fā)生感染。5 .頭抱菌素類抗生素,是否第四代頭抱就一定比第一代頭抱抗菌效果好,為什 么?答:不一定,要看對什么細菌而言。如第一代頭抱菌素對革蘭陽性菌抗菌效果要 好于第四代頭抱菌素,而第四代頭抱菌素對革蘭陰性菌抗菌能力則強于第一代頭 抱菌素。6 .
38、藥敏試驗時常報告“中介”結果,你知道其臨床意義嗎?答:中介是介于敏感和耐藥之間的一個實驗緩沖區(qū)域, 有兩層意義:一是反映在 操作中可能因控制不好出現的結果有誤,應重復試驗或改做 MIC ;二是提示高 于正常給藥或在某些生理藥物濃集的部位(如尿液中唾諾酮類)時細菌可被抑制。 7.簡述用細菌制片和進行革蘭染色的基本步驟。答:制片:取生理鹽水一滴,置載玻片上,用接種環(huán)挑取菌落,將細菌放在生理 鹽水研勻成薄得菌膜后,自然干燥,并經火焰固定。染色:1.結晶紫初染1min后,用水洗去染液。2.碘液媒染1min,水洗。3.95%乙醇脫色,不時搖勻 30s, 至無紫色脫落為止,水洗。4.稀釋石碳酸復紅復染30
39、s,水洗,干后鏡檢。8 .簡述甲基紅試驗的原理。答:某些細菌能分解葡萄糖產生丙酮酸,并進一步分解丙酮酸產生甲酸、乙酸、乳酸等使PH下降至4.5以下,加入甲基紅試劑后呈紅色,為陽性。若分解葡萄 糖產酸量少,或產生的酸進一步分解為其他非酸性物質,則 PH在6,.2以上,加 入甲基紅試劑后呈黃色,為陰性。9 .簡述金黃色葡萄球菌的最低鑒定特征。答:1.革蘭陽性球菌,呈葡萄用排列;2.血平板上產生透明溶血環(huán);3.觸酶試驗 陽性;4.血漿凝固酶試驗陽性。10簡述細菌鑒定的基本原理。答:首先進行革蘭染色以區(qū)分細菌的基本形態(tài)和革蘭染色性。根據形態(tài)和染色性 的不同做一些大的分類試驗,如革蘭陰性桿菌做氧化酶試驗
40、,革蘭陽性球菌觸酶 試驗,其后再進行不同的生化試驗,必要時進一步進行血清學試驗。11請敘述血液感染的細菌學檢驗程序。答:無菌采集血液標本增菌培養(yǎng)(需氧或厭氧培養(yǎng))有菌生長取菌落。具體 步驟:1.涂片、染色、鏡檢。2.直接藥敏試驗-初級報告。3.分離培養(yǎng)-觀察菌 落,取菌落涂片、染色、鏡檢。純培養(yǎng)-血清學鑒定、生化鑒定、藥敏試驗-出 示報告。免疫學檢驗1,比較補體兩條激活途徑的不同點。答:1.激活物質:經典,抗原抗體復合物;旁路,LPS、酵母多糖凝聚的IgG、IgA等。2,激活起點:經典,C1q;旁路,C3。3,參與成分:經典,C1C9;旁路, C3BDP因子,C5C9。4.C3轉化酶:經典,C
41、4b2b;旁路,C3bBbp。C3轉化酶: C4b2b3b;旁路,C3bnBbp。5,作用:經典,在特異性體液免疫的效應階段發(fā)揮 作用;旁路,參與非特異性免疫,在感染早期即發(fā)揮作用。2,補體的生物學活性是什么?答:補體的生物學活性是指補體活化過程的產物表現出的具有擴大免疫效應的多 項生物學活性,根據這些產物的活性特點可分為五類:1,細胞溶解作用。2調理作用。3,引起炎癥反應。4,消除免疫復合物。5.免疫調節(jié)作用。3,細胞因子的生物學作用特點是什么?答:1.高效性,極微量即可發(fā)揮生物學效應。2.一時性,只在局部短時間發(fā)揮作 用。3,多效性,一種細胞因子可作用于多種靶細胞,發(fā)揮多種生物學效應。4,
42、網絡性,不同的細胞因子之間有相互協同或相互制約的作用,由此構成了復雜的細胞因子免疫調節(jié)網絡。4 .討論MHC在醫(yī)學上的意義。答:1.器官移植:移植排斥反應的實質是免疫應答,故移植成敗的關鍵是供受者 問MHC的相容程度。2.免疫調節(jié):抗原提呈:無論外源性抗原還是源性抗原 大多需經細胞加工處理后形成抗原肽段,再與HLA-I、R類分子結合,HLA-抗原肽復合物共同表達于細胞膜表面,才能被 CD8+T細胞或CD4+T細胞所識 別;MHC限制性:在免疫應答過程中各種免疫細胞間的相互作用均受到不同 的MHC分子的調控或嚴格的約束。這種特定的 T細胞識別特定類別自身 MHC 分子而發(fā)揮效應的現象稱 MHC限
43、制性;決定免疫應答能力。5 .參與體液免疫應答的細胞有哪些?如何發(fā)揮作用?答:1,抗原呈遞細胞(APC):主要是單核-巨噬細胞類將處理的抗原提呈給 Th細胞并分泌IL-1 , IL-6活化T細胞。2.Th細胞:經抗原激活后分泌細胞因子,特 別是Th2細胞分泌IL-4、IL-5、IL-10等,除輔助B細胞活化分化變成漿細胞產 生抗體,還有調節(jié)抗體產生的作用。3.B細胞:經抗原次級后變成漿細胞合成并 分泌抗體,在對應抗原再次應答時 B細胞是主要的抗原提呈細胞(APC),可處理 并提呈抗原給Th細胞,使之活化。6 .什么事自身抗原?是怎樣產生的?有何臨床意義?答:一般來說,自身物質對自身沒有抗原性。
44、在一定條件下,自身物質對自身發(fā) 揮抗原作用,引起免疫應答,稱之為自身抗原。產生的原因:1.隱蔽的自身抗原: 某些自身物質在正常條件下與血流和免疫系統相對隔絕。外傷、感染或手術不甚等原因,是這些物質進入血液,引起自身免疫應答。2.修飾的自身抗原:在病原微生物感染、電離輻射或藥物等影響下,自身組織分子改變,形成新的抗原決定 簇或暴露出部的隱蔽的決定簇,成為自身抗原刺激機體產生免疫應答,引起自身 免疫疾病。7 .試述抗原抗體反應基本原理。答:抗體能夠特異性結合是基于兩種分子間的結構互補性與親和性,這兩種特性是由抗原與抗體分子的一級結構決定的。 抗原抗體反應分為兩個階段:第一階段 為抗原與抗體發(fā)生特異
45、性結合階段, 此階段反應快,僅需幾秒鐘至幾分鐘,但不 出現可見反應。第二階段為可見反應階段,抗原抗體復合物在環(huán)境因素的影響下, 進一步交聯和聚集,表現為凝集、沉淀、溶解、補體結合介導的生物現象等肉眼 可見的反應。此階段反應慢,往往需要數分鐘至數小時。8 .簡述HVGR和GVHR的主要區(qū)別。答:HVGR和GVHR的主要區(qū)別在于:HVGR是由宿主體致敏的免疫效應細胞 和抗體對移植物進行攻擊,導致移植物排斥;而 GVHR是由移植物中的抗原特 異性淋巴細胞,即“過路”淋巴細胞識別宿主抗原而發(fā)生的一種排斥反應。這種 反應不僅導致移植失敗,而且還能給受者造成嚴重后果。9 .T細胞亞群檢測有何意義?答:T細
46、胞亞群檢測已作為臨床輔助診斷與研究的一種重要手段,對各種疾病如自身免疫病,免疫缺陷病、病毒感染、惡性月中瘤等的發(fā)生、發(fā)展、臨床療效考核 和預后估計都具有極其重要的意義;對了解機體的免疫狀態(tài)也有十分重要的意 義。10 .簡述ELISA的基本原理。答:1.使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。2.使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或酶標抗體,這種酶標抗原或酶標抗體既保留其免 疫活性,又保留酶的活性。在測定時,令受檢標本(測定其中的抗原或抗體)和 酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,最后結合在固相載體
47、上 的,酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。 加入酶反應的底物后,底物被酶 催化形成有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關, 故可根據顏色反 應的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可極大的反應效果, 從而使測定方法達到很高的敏感度。11試述直接Coomb' s試驗與間接Coomb' s試驗的共同點與不同點。答:直接Coomb' s試驗主要用于檢查已吸附在紅細胞上的不完全抗體。此試驗 常用于新生兒溶血癥、自身免疫性溶血癥及特發(fā)性自身免疫性貧血等檢查。問接Coomb' s試驗主要用于檢查血清中游離的不完全抗體。此試驗多用于檢測母體 Rh(D)
48、抗體,可及早發(fā)現和避免新生兒溶血癥的發(fā)生。亦可對紅細胞抗原不相容 性輸血所產生的血型抗體進行檢測。12 .簡述ELISA雙抗體夾心法的操作步驟。答:1.特異性抗體與固相載體相連接,形成固相抗體:洗滌除去為結合的抗體及 雜質。2.加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段之間,讓標本中的抗原與固 相載體上的抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他為結合物質。3.加酶抗體:使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標 抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量呈正相關。4.加底物:夾心復合物中的酶催化底物成為有色產物。 根據顏色反應的程度進行該抗原的定 性或定量。13 .
49、 ELISA操作的注意事項有哪些?答:1.加樣:在ELISA中除了包被外,一般需要進行 45次加樣在定性測定中 有時不強調加樣量得準確性。在定量測定中則加樣量應力求準確。加樣時應將液 體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現氣泡。2.孵育:在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加標本后,此時反應的溫度和時間應按規(guī)定的要求,保溫容器最好是水浴箱,可使溫度迅速平衡。各 ELISA板不應疊在一起。為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將平板放在底部有濕紗布得濕盒中。濕盒應該是金屬的,傳熱容易。如用保溫箱,空濕盒應預先放在其中,以平衡溫度,這一 步在室溫較低時更為重要。加入底物后,反應時間和溫度通常不做嚴格要求。3.洗滌:洗滌在ELISA過程中雖不是反應步驟,但卻是決定成敗的關鍵。洗滌的 目的是洗去反映中沒有與固相抗原或抗體結合的物質以及在反應過程中非特異 性吸附于固相載體的干擾物質。4.顯色及終止反應:顯色是酶促反應,應按規(guī)定 的溫度和時間操作,用酸終止。5.結果判斷:用比色計測定結果,準確性決定于 ELISA板底得平整與透明度和比色計的質量。14 .試述流式細胞術
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