微生物檢驗(yàn)原始記錄大腸菌群

1、微生物檢驗(yàn)原始記錄（大腸菌群）檢驗(yàn)原始記錄編號：報(bào)告類別：微生物項(xiàng)目： 大腸菌群coliforms檢驗(yàn)地點(diǎn):樣品名稱： 樣品編號：樣品狀態(tài)：口符合檢驗(yàn)要求；門其他 環(huán)境條件: 實(shí)驗(yàn)依據(jù)及步驟GB4789.3-2016羊品稀木舉口固體和半固體樣品：稱取 25g樣品置盛有225ml生理鹽水或磷酸鹽緩沖液 的無困均質(zhì)有器內(nèi)均質(zhì),或放入盛有 225ml稀釋液的無困均質(zhì)袋中擔(dān)擊式均質(zhì) 器拍打，制成為1:10樣品勻液。依次進(jìn)行10倍遞增稀釋?？谝后w樣品：以無菌吸管吸取 25ml樣品置盛有225ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽 水的無菌錐形瓶（瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠）中混勻，為1:10樣品勻<0樣品勻液

2、的ph應(yīng)在6.5-7.5 之間，必要時(shí)分別用1mol/lNaOH或1mol/lHcL調(diào)取1mL1： 10稀釋勻液沿管壁緩緩注入 9ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無 菌試管中（汴意吸管或吸頭尖端/、要觸及稀釋液面），振搖試管或換用一支無 菌吸管反復(fù)吹打，使其混合均勻，制成 1:100樣品勻液。按上述操作順序做10倍遞增稀釋液，每稀釋一次，換用一支 1mL火菌吸 量管。從樣品勻液制備到樣品接種完畢，全過程不得超過15min。初發(fā)酵試驗(yàn)（9 卜法）每個(gè)樣品，選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液（液體樣品可以選擇原液），每個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白陳（LSD肉湯（大腸菌群測定：如果超過1ml,則用

3、雙料LST肉湯）36c ± 1 C培養(yǎng)24h±2h ,觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生。產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，未產(chǎn)氣則繼續(xù)培養(yǎng)至48± 2h,產(chǎn)期進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)（證實(shí)試驗(yàn)）用接種環(huán)從產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物1環(huán)，移種于煌綠糖膽鹽肉湯 （BGLB管中，36C ±1C培養(yǎng)48h±2h,觀察產(chǎn)氣情況。數(shù)據(jù)分析與結(jié)果菌落計(jì)數(shù) 根據(jù)證實(shí)為大腸菌群的陽性管數(shù)，查 MPN僉索表，報(bào)告大腸菌群的最可能數(shù)。二、緩沖液1 .磷酸鹽緩沖液磷酸二氫鉀34.0g蒸儲水500ml(稀釋液需要1000ml)貯存液：將34.0g磷酸二氫鉀溶于

4、500ml蒸儲水中，用大約175ml的1mol/l氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph至7.2 ,用蒸儲水稀釋至1000ml后貯存冰箱。稀釋液：取貯存液1.25ml用蒸儲水稀釋至1000ml分裝于適宜容器，121c高壓滅菌15min。2 .無菌生理鹽水氯化鈉8.5g 蒸儲水1000ml將稱取好的氯化鈉溶于1000ml蒸儲水中，121c高壓滅菌15min。3 .PH調(diào)節(jié)劑1mol/l氫氧化鈉溶液稱取40g氫氧化鈉溶于1000ml無菌蒸儲水中。1mol/l HcL 溶液移取Hcl 90ml ,用無菌蒸儲水稀釋至1000ml。三、微生物限量采樣方案(根據(jù) GB 4789.1-2016 )1 .采樣方案分為二級和三級

5、方案，二級采樣方案設(shè)有n、c、m值，三級采樣方案設(shè)有n、 c、m和M值。n：同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品件數(shù)c：最大可允許超出m值的樣品數(shù)m微生物指標(biāo)可接受水平的限量值M微生物指標(biāo)的最高安全限量值2 . 例：n=5,c=2,m=1cfu/g,M=10cfu/g, 即從一批產(chǎn)品中采集 5個(gè)樣品，若5個(gè)樣品的檢測結(jié)果均小于或等于 m值(< 1cfu/g ),則這種情況是允許的；若0 2個(gè)樣品的結(jié)果(X)位于m值和M值之間(1cfu/g <X< 10cfu/g ),則這種情況也是允許的；若有3個(gè)及以上樣品的檢驗(yàn)結(jié)果位于 m和M之間，則這種情況是不允許的；若有任一樣品的檢驗(yàn)結(jié)果大于 M (>10cfu/g ),則這種情況也是不允許的。檢測記錄：校對：檢測日期:菌落總數(shù)檢樣原始記錄初發(fā)酵試驗(yàn)未產(chǎn)氣培養(yǎng)士 2h48復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)（接種BGLB管）結(jié)果各試樣菌產(chǎn)品檢測試稀釋液及產(chǎn)氣管 數(shù)稀釋液及產(chǎn)氣管 數(shù)接結(jié)稀釋液及產(chǎn)氣 管數(shù)MPN落分析