酵母菌數(shù)量變化

1、 培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化的變化探究實(shí)驗(yàn)探究實(shí)驗(yàn) 單細(xì)胞單細(xì)胞真核真核生物生物 生長(zhǎng)周期短，增殖速度快生長(zhǎng)周期短，增殖速度快 還可以用酵母菌作為實(shí)驗(yàn)材料研還可以用酵母菌作為實(shí)驗(yàn)材料研究究 探究酵母菌的呼吸方式探究酵母菌的呼吸方式酵母菌酵母菌一、提出問(wèn)題：一、提出問(wèn)題：培養(yǎng)液中酵母菌種群是怎樣隨時(shí)間變化的？培養(yǎng)液中酵母菌種群是怎樣隨時(shí)間變化的？二、作出假設(shè)：二、作出假設(shè)： 酵母菌在培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，由于食物，酵母菌在培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，由于食物，空間資源等是有限的，種群增長(zhǎng)呈現(xiàn)空間資源等是有限的，種群增長(zhǎng)呈現(xiàn)“S”“S”型型曲線(xiàn)；后期因環(huán)境急劇惡化，種群逐漸消亡。曲線(xiàn)

2、；后期因環(huán)境急劇惡化，種群逐漸消亡。三、討論探究思路三、討論探究思路血細(xì)胞計(jì)數(shù)板血細(xì)胞計(jì)數(shù)板( (血球計(jì)數(shù)板血球計(jì)數(shù)板) )方法名稱(chēng)：方法名稱(chēng)：使用范圍：使用范圍：顯微計(jì)數(shù)顯微計(jì)數(shù)(抽樣檢測(cè)抽樣檢測(cè))調(diào)查細(xì)胞數(shù)量時(shí)；調(diào)查細(xì)胞數(shù)量時(shí)； 肉眼看不見(jiàn)的細(xì)菌、肉眼看不見(jiàn)的細(xì)菌、酵母菌等微生物酵母菌等微生物問(wèn)題一：怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)？問(wèn)題一：怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)？1 1、血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)、血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu) 血球計(jì)數(shù)板是一種專(zhuān)門(mén)用于計(jì)算較大單細(xì)胞微血球計(jì)數(shù)板是一種專(zhuān)門(mén)用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器，由一塊比普通載玻片厚的特制玻生物數(shù)量的儀器，由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的，玻片中有四條下凹的槽

3、，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。片制成的，玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個(gè)每半邊上面刻有一個(gè)方格網(wǎng)方格網(wǎng)。 方格網(wǎng)上刻有方格網(wǎng)上刻有9 9個(gè)個(gè)大方格，其中只有大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格中間的一個(gè)大方格為為計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室，供微生，供微生物計(jì)數(shù)用物計(jì)數(shù)用。 大方格的長(zhǎng)和寬各為大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm1mm，深度為，深度為0.1mm0.1mm，即即1mm1mm1mm1mm0.1mm0.1mm，其容積為，其容積為0.1mm0.1mm3 3；大方格中方格小方格16 （中格）25 （小格）25（中格）16（小

4、格）3、血球計(jì)數(shù)板的分區(qū)與分格 不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造，其每一大方格不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造，其每一大方格都是由都是由161625=2525=2516=40016=400個(gè)小方格組成。個(gè)小方格組成。 2 2、計(jì)數(shù)、計(jì)數(shù)16 62525型：型： 一般取四角的四一般取四角的四個(gè)中方格（個(gè)中方格（100100個(gè)小個(gè)小方格）計(jì)數(shù)方格）計(jì)數(shù)25251616型：型： 一般計(jì)數(shù)四個(gè)角一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方和中央的五個(gè)中方格（格（8080個(gè)小方格）個(gè)小方格）的細(xì)胞數(shù)。的細(xì)胞數(shù)。 例例1 1 通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，若計(jì)數(shù)室為行計(jì)數(shù)，若計(jì)數(shù)室為1mm1m

5、m1mm1mm0.1mm0.1mm方格，方格，由由400400個(gè)小方格組成。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算個(gè)小方格組成。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個(gè)小方格中平均有得每個(gè)小方格中平均有5 5個(gè)酵母菌，則個(gè)酵母菌，則10mL10mL該該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個(gè)。個(gè)。2 210108 8例例2 2 檢測(cè)員將檢測(cè)員將1 mL1 mL水樣稀釋水樣稀釋1010倍后，用抽樣倍后，用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知行滲入計(jì)數(shù)室，并用

6、濾紙吸去多余液體。已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由每個(gè)計(jì)數(shù)室由25251616400400個(gè)小格組成，容納液個(gè)小格組成，容納液體的總體積為體的總體積為0 01 mm1 mm3 3。 現(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示現(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a a、b b、c c、d d、e 5e 5個(gè)中個(gè)中格格8080個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n n個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)藻藻 個(gè)個(gè)mLmL。 5n5n10105 53 3、計(jì)算、計(jì)算b b表示培養(yǎng)液稀釋倍數(shù)；用所數(shù)小方格中細(xì)胞總數(shù)表示培養(yǎng)液稀釋倍數(shù)；用所數(shù)小方格中細(xì)胞總數(shù)/ /所數(shù)小方格數(shù)是為求得每個(gè)小方格中的細(xì)胞總數(shù)。所數(shù)小方格數(shù)是為求得每個(gè)小方格中的細(xì)胞

7、總數(shù)。4 4、血球計(jì)數(shù)板的使用方法步驟、血球計(jì)數(shù)板的使用方法步驟 計(jì)數(shù)：計(jì)數(shù)： 稍待片刻（約稍待片刻（約5min5min），待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)），待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部后，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，先在低倍鏡下找室底部后，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，先在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)并記錄。到計(jì)數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)并記錄。 鏡檢計(jì)數(shù)室：鏡檢計(jì)數(shù)室： 在加樣前，先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物，在加樣前，先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)。則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)。 加樣品：加樣品： 將清潔干燥的血球

8、計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋專(zhuān)用的蓋玻將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋專(zhuān)用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿(mǎn)計(jì)數(shù)室，防止產(chǎn)生讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿(mǎn)計(jì)數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細(xì)胞懸液的量以不超過(guò)計(jì)數(shù)室臺(tái)面與蓋玻片氣泡，充入細(xì)胞懸液的量以不超過(guò)計(jì)數(shù)室臺(tái)面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去。之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去。從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，要從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，要將試管輕輕將試管輕輕震蕩震蕩幾下，這樣使酵母菌分布均幾下，這樣使酵母菌分布均

9、勻，防止酵母凝聚沉淀，提高計(jì)數(shù)的代表性勻，防止酵母凝聚沉淀，提高計(jì)數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性，求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤和準(zhǔn)確性，求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤差小。差小。 問(wèn)題二：從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，應(yīng)問(wèn)題二：從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，應(yīng)該將試管輕輕震蕩幾次，為什么？該將試管輕輕震蕩幾次，為什么？ 一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行當(dāng)對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋稀釋以便于酵母菌的計(jì)數(shù)。以便于酵母菌的計(jì)數(shù)。 具體方法是：搖勻試管，取具體方法是：搖勻試管，取1mL1mL酵母菌培養(yǎng)酵母菌培養(yǎng)液，加入成倍的無(wú)菌水稀釋?zhuān)♂屢?，加入成倍的無(wú)菌水稀釋?zhuān)?/p>

10、釋n n倍后，再倍后，再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內(nèi)含有以每小方格內(nèi)含有4 45 5個(gè)酵母細(xì)胞為宜。特別個(gè)酵母細(xì)胞為宜。特別是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計(jì)數(shù)。是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計(jì)數(shù)。 問(wèn)題三：如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以問(wèn)題三：如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以計(jì)數(shù)，應(yīng)當(dāng)采取怎樣的措施？計(jì)數(shù)，應(yīng)當(dāng)采取怎樣的措施？ 對(duì)于壓在方格界線(xiàn)上對(duì)于壓在方格界線(xiàn)上的酵母菌應(yīng)當(dāng)計(jì)數(shù)同側(cè)相的酵母菌應(yīng)當(dāng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)，一般鄰兩邊上的菌體數(shù)，一般可采取可采取“數(shù)上線(xiàn)不數(shù)下線(xiàn)，數(shù)上線(xiàn)不數(shù)下線(xiàn)，數(shù)左線(xiàn)不數(shù)右線(xiàn)數(shù)左線(xiàn)不數(shù)右線(xiàn)”的原則的原則處理，另兩邊不計(jì)數(shù)。處理，另兩邊不計(jì)數(shù)。 問(wèn)題四：對(duì)于壓在小方格界限上的酵母菌，應(yīng)問(wèn)題四：對(duì)于壓在小方格界限上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？血細(xì)胞計(jì)數(shù)板血細(xì)胞計(jì)數(shù)板( (血球計(jì)數(shù)板血球計(jì)數(shù)板) )方法名稱(chēng)：方法名稱(chēng)：使用范圍：使用范圍：顯微計(jì)數(shù)顯微計(jì)數(shù)(抽樣檢測(cè)抽樣檢測(cè))調(diào)查細(xì)胞數(shù)量時(shí)；調(diào)查細(xì)胞數(shù)量時(shí)； 肉眼看不見(jiàn)的細(xì)菌、肉眼看不見(jiàn)的細(xì)菌、酵母菌等微生物酵母菌等微生物問(wèn)題一：怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)？問(wèn)題一：怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)？大方格中方格小方格 對(duì)于壓在方格界線(xiàn)上