某些因素對離體蛙心心臟活動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)報(bào)告ppt課件

1、離體蛙心灌流及某些離子、藥物離體蛙心灌流及某些離子、藥物對離體蛙心活動(dòng)的影響對離體蛙心活動(dòng)的影響主要內(nèi)容主要內(nèi)容相關(guān)實(shí)際知識相關(guān)實(shí)際知識 正常的蛙心能按靜脈竇的節(jié)律性自動(dòng)產(chǎn)生興奮，心臟的自動(dòng)節(jié)律性活動(dòng)，需求有一個(gè)適宜的理化環(huán)境。 蟾蜍心臟離體后，用任氏液灌流，在一定時(shí)間內(nèi)仍能堅(jiān)持節(jié)律性興奮和收縮活動(dòng)。由于心臟的正?；顒?dòng)還有賴于內(nèi)環(huán)境要素的相對穩(wěn)定，改動(dòng)灌流液的成分可引起心臟活動(dòng)的改動(dòng)。相關(guān)實(shí)際知識相關(guān)實(shí)際知識 心肌細(xì)胞的生理特性表現(xiàn)為：自動(dòng)節(jié)律性、興奮心肌細(xì)胞的生理特性表現(xiàn)為：自動(dòng)節(jié)律性、興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性。性、傳導(dǎo)性和收縮性。 心肌細(xì)胞外離子濃度的變化和因體內(nèi)生物活性物心肌細(xì)胞外離子濃度

2、的變化和因體內(nèi)生物活性物質(zhì)如激素引起的細(xì)胞膜離子通透性的改動(dòng)，對質(zhì)如激素引起的細(xì)胞膜離子通透性的改動(dòng)，對心肌細(xì)胞的生物電活動(dòng)和生理特性必然會(huì)產(chǎn)生明顯心肌細(xì)胞的生物電活動(dòng)和生理特性必然會(huì)產(chǎn)生明顯的影響。的影響。影響心肌細(xì)胞電生理特性的緣由影響心肌細(xì)胞電生理特性的緣由1.1.心肌的自動(dòng)節(jié)律性心肌的自動(dòng)節(jié)律性1 1最大復(fù)極電位與閾電位的差距最大復(fù)極電位與閾電位的差距2 24 4期自動(dòng)除極速度期自動(dòng)除極速度2.2.心肌的興奮性心肌的興奮性1 1靜息電位程度：依賴于細(xì)胞外靜息電位程度：依賴于細(xì)胞外K+K+濃濃度度2 2Na+Na+通道的性狀通道的性狀相關(guān)實(shí)際知識相關(guān)實(shí)際知識3.3.心肌的傳導(dǎo)性心肌的傳導(dǎo)

3、性主要取決于動(dòng)作電位主要取決于動(dòng)作電位0 0期除極速度和幅期除極速度和幅度度4.4.心肌的收縮性心肌的收縮性依賴于細(xì)胞外鈣離子濃度依賴于細(xì)胞外鈣離子濃度相關(guān)實(shí)際知識相關(guān)實(shí)際知識影響心肌細(xì)胞電生理特性的緣由影響心肌細(xì)胞電生理特性的緣由相關(guān)實(shí)際知識相關(guān)實(shí)際知識離子對心臟活動(dòng)的影響離子對心臟活動(dòng)的影響鉀離子鉀離子K+K+參與心肌細(xì)胞的復(fù)極化和自律細(xì)胞的參與心肌細(xì)胞的復(fù)極化和自律細(xì)胞的4 4期自動(dòng)期自動(dòng)去極化過程，其改動(dòng)不僅取決于細(xì)胞內(nèi)外去極化過程，其改動(dòng)不僅取決于細(xì)胞內(nèi)外K+K+濃度濃度梯度，還與細(xì)胞膜對梯度，還與細(xì)胞膜對K+K+通透性有關(guān)，因此其影響通透性有關(guān)，因此其影響是多方面的是多方面的相關(guān)實(shí)

4、際知識相關(guān)實(shí)際知識離子對心臟活動(dòng)的影響離子對心臟活動(dòng)的影響鈣離子鈣離子 Ca2+ Ca2+對對Na+Na+內(nèi)流存在競爭抑制造用，稱膜內(nèi)流存在競爭抑制造用，稱膜屏障作屏障作用，對靜息電位無影響。用，對靜息電位無影響。 Ca2+o Ca2+o ，可使，可使心肌細(xì)心肌細(xì)胞的興奮性降低，傳導(dǎo)減慢，收縮力加強(qiáng)。胞的興奮性降低，傳導(dǎo)減慢，收縮力加強(qiáng)。相關(guān)實(shí)際知識相關(guān)實(shí)際知識迷走神經(jīng)和乙酰膽堿迷走神經(jīng)和乙酰膽堿 迷走神經(jīng)興奮時(shí)，節(jié)后纖維釋放迷走神經(jīng)興奮時(shí)，節(jié)后纖維釋放Ach,Ach,激激動(dòng)心肌動(dòng)心肌細(xì)胞膜上細(xì)胞膜上M M型膽堿受體，產(chǎn)生負(fù)性變力、負(fù)性型膽堿受體，產(chǎn)生負(fù)性變力、負(fù)性傳導(dǎo)、傳導(dǎo)、負(fù)性變時(shí)等效應(yīng)。

5、負(fù)性變時(shí)等效應(yīng)。心交感神經(jīng)與去甲腎上腺素心交感神經(jīng)與去甲腎上腺素 心交感神經(jīng)節(jié)后纖維釋放的遞質(zhì)是去甲心交感神經(jīng)節(jié)后纖維釋放的遞質(zhì)是去甲腎上腎上腺素，激動(dòng)心肌細(xì)胞膜上的腺素，激動(dòng)心肌細(xì)胞膜上的受體，產(chǎn)生正性受體，產(chǎn)生正性變變力、正性傳導(dǎo)、正性變時(shí)等效應(yīng)。力、正性傳導(dǎo)、正性變時(shí)等效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?.1.本實(shí)驗(yàn)的目的是學(xué)習(xí)離體蛙心的灌本實(shí)驗(yàn)的目的是學(xué)習(xí)離體蛙心的灌流方法。流方法。2.2.用離體蛙心灌流的方法察看：用離體蛙心灌流的方法察看： K+ K+、Ca2+Ca2+ 酸、堿度酸、堿度 腎上腺素腎上腺素E E 乙酰膽堿乙酰膽堿AchAch對心臟活動(dòng)的影響對心臟活動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)對象實(shí)驗(yàn)對象 蟾蜍蟾

6、蜍實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備RM6240生物采集系生物采集系統(tǒng)統(tǒng)張力換能器張力換能器蛙類手術(shù)器械蛙類手術(shù)器械蛙心插管蛙心插管試管夾試管夾縫合線縫合線蛙心夾蛙心夾鐵支架鐵支架滴管滴管實(shí)驗(yàn)藥品實(shí)驗(yàn)藥品任氏液任氏液lKCl 3CaC12l：10,000 El：10,000 ACh3乳酸乳酸2.5NaHCO3實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟一、離體蟾蜍心臟標(biāo)本制備一、離體蟾蜍心臟標(biāo)本制備 1.1.破壞腦和脊髓破壞腦和脊髓 2.2.暴露心臟暴露心臟一、離體蟾蜍心臟標(biāo)本制備一、離體蟾蜍心臟標(biāo)本制備1.1.察看心臟的解剖構(gòu)造察看心臟的解剖構(gòu)造實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟腹面腹面 反面反面實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟一、離體蟾蜍心臟標(biāo)本制備一、離體蟾

7、蜍心臟標(biāo)本制備1.1.蛙心插管蛙心插管1.1 1.1 在主在主A A干下穿一線打一干下穿一線打一松結(jié)；在左主松結(jié)；在左主A A下再穿一下再穿一線結(jié)扎。線結(jié)扎。實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟一、離體蟾蜍心臟標(biāo)本制備一、離體蟾蜍心臟標(biāo)本制備1.1.蛙心插管蛙心插管1.2 1.2 在自動(dòng)脈根部剪一在自動(dòng)脈根部剪一斜口，將插管插入動(dòng)脈斜口，將插管插入動(dòng)脈圓錐，圓錐， 在心室收縮時(shí)在心室收縮時(shí)將插管插入心室，結(jié)扎將插管插入心室，結(jié)扎固定。固定。1.1.用試管夾將蛙心管固定用試管夾將蛙心管固定在鐵支架上在鐵支架上2.2.把張力換能器固定鐵支把張力換能器固定鐵支架支臺(tái)上，在心室舒張期架支臺(tái)上，在心室舒張期將與換能器相連的

8、蛙心夾將與換能器相連的蛙心夾夾在心尖上。夾在心尖上。實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟二、銜接儀器和安裝二、銜接儀器和安裝本卷須知本卷須知1.1.蛙心插管內(nèi)液面勿過高或過低，每次換液時(shí)，必蛙心插管內(nèi)液面勿過高或過低，每次換液時(shí)，必需用任氏液沖洗需用任氏液沖洗3 3次。次。2.2.每次加藥，心搏曲線出現(xiàn)變化后立刻將插管內(nèi)液每次加藥，心搏曲線出現(xiàn)變化后立刻將插管內(nèi)液體吸出。體吸出。3.3.隨時(shí)滴加任氏液于心臟外表使之堅(jiān)持潮濕。隨時(shí)滴加任氏液于心臟外表使之堅(jiān)持潮濕。4.4.換能器頭端應(yīng)向下傾斜以免液體進(jìn)人換能器。換能器頭端應(yīng)向下傾斜以免液體進(jìn)人換能器。5.5.各種試劑的滴管不要混淆各種試劑的滴管不要混淆, ,以免影響

9、實(shí)驗(yàn)結(jié)果。以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。察看工程察看工程 一、描記正常心搏曲線一、描記正常心搏曲線 曲線幅度曲線幅度 收縮的程度收縮的程度曲線疏密曲線疏密 心率心率曲線基線曲線基線 舒張的程度舒張的程度二、察看離子、藥物和酸堿的影響二、察看離子、藥物和酸堿的影響1)1)改換任氏液為改換任氏液為3%3%氯化鈣溶液氯化鈣溶液1 12 2滴，記錄心率和滴，記錄心率和收縮幅度，沖洗下同收縮幅度，沖洗下同2)2)滴加滴加1 12 2滴滴1%1%氯化鉀溶液氯化鉀溶液3)3)滴加滴加1 12 2滴滴1 1：1000010000去甲腎上腺素溶液去甲腎上腺素溶液4)4)滴加滴加1 12 2滴滴1 1：1000010000腎

10、上腺素溶液腎上腺素溶液5)5)滴加滴加1 12 2滴滴1 1：10000 10000 乙酰膽堿溶液乙酰膽堿溶液6)6)滴加滴加1 12 2滴滴 2.5%2.5%碳酸氫鈉溶液碳酸氫鈉溶液7)7)滴加滴加1 12 2滴滴3%3%乳酸溶液乳酸溶液察看工程察看工程實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目收縮強(qiáng)度收縮強(qiáng)度心率心率處理前處理前處理后處理后 處理前處理前處理后處理后任氏液任氏液2% CaCl2% CaCl2 21% KCl1% KCl1 1：10000 E10000 E1 1：10000 Ach10000 Ach2.5% NaHCO32.5% NaHCO33% 3% 乳酸乳酸結(jié)果分析與討論結(jié)果分析與

11、討論1.1.任氏液：正常對照任氏液：正常對照2. 3%CaCl22. 3%CaCl2灌流：灌流：Ca2+ o Ca2+ o Ca2+Ca2+內(nèi)流內(nèi)流Ca2+iCa2+i興奮興奮- -收縮耦聯(lián)收縮耦聯(lián)收縮力收縮力結(jié)果分析與討論結(jié)果分析與討論3. 1%KCl3. 1%KCl灌流：灌流：K+ oK+ oAPAP平臺(tái)期縮短平臺(tái)期縮短 Ca2+ Ca2+內(nèi)流內(nèi)流興奮興奮- -收縮耦聯(lián)收縮耦聯(lián)收縮力收縮力結(jié)果分析與討論結(jié)果分析與討論4. 1:10000 E4. 1:10000 E灌流灌流4 4期期 If If 、I CaTI CaT通道通道4 4期自動(dòng)去極速度期自動(dòng)去極速度自律性自律性心率心率與心肌與心肌11受體結(jié)合受體結(jié)合Ca2+Ca2+內(nèi)流內(nèi)流肌漿網(wǎng)釋放肌漿網(wǎng)釋放Ca2+Ca2+興奮興奮- -收縮耦聯(lián)收縮耦聯(lián)收縮力收縮力cAMPcAMP結(jié)果分析與討論結(jié)果分析與討論5. 1:10000 Ach5. 1:10000 Ach灌流灌流與心肌與心肌M M受體結(jié)合受體結(jié)合K+K+外流外流, Ca2+, Ca2+內(nèi)流內(nèi)流E-CE-C耦聯(lián)耦聯(lián)收縮力收縮力最大復(fù)極電位最大復(fù)極電位 4 4期期K+K+外流外流 自律性自律性心率心率Ca2+iCa2+i碳酸氫鈉碳酸氫鈉 乳酸乳酸結(jié)果分析與討論結(jié)果分析與討論6. 2.56. 2.5NaHCO3 NaHCO3 灌流灌流中和中和H+H+，Ca2+Ca2+與肌鈣