pH值對(duì)植酸酶酶活的影響及其在豬_雞消化道中的分析

1、 表1不同pH 值條件下兩種植酸酶酶活的測(cè)定值(以pH 值為515時(shí)的測(cè)定值為標(biāo)準(zhǔn)酶活371564016477182471446318586167951131005719516128pH 值對(duì)植酸酶酶活的影響及其在豬、雞消化道中的分析史凱來(lái)王秀坤劉偉陸文清顧云強(qiáng)遼寧省飼料研究所摘要通過測(cè)定在不同pH 值條件下兩種植酸酶的活性,發(fā)現(xiàn)pH 值對(duì)植酸酶活力有較大影響。在雞嗉囊的pH 值條件下,T 植酸酶和N 植酸酶的酶活相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)酶活都是100%,而在動(dòng)物真胃的pH 值條件下,T 植酸酶和N 植酸酶的酶活相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)酶活分別是77182%和49161%。關(guān)鍵詞植酸酶酶活pH 值酶活前言植酸酶是一類能分解植

2、酸(肌醇六磷酸酯釋放無(wú)機(jī)磷的生物酶。目前在飼料工業(yè)中應(yīng)用的飼用植酸酶是一種復(fù)合酶,含有多種組分的酶蛋白,有時(shí)還包括酸性磷酸酶。因?yàn)橐霃氐追纸庵菜岢蔀榧〈己土姿崾请x不開酸性磷酸酶的。有許多的研究結(jié)果表明,目前實(shí)際應(yīng)用的植酸酶絕大多數(shù)是由曲霉和酵母產(chǎn)生的。由曲霉產(chǎn)生的植酸酶主要包括兩種組分。一種組分其最適pH 值在215左右,主要在胃中起分解植酸的作用,簡(jiǎn)稱為PhytA 。另一種組分的最適pH 值在515左右,簡(jiǎn)稱為PhytB ,這種組分在動(dòng)物的腸道內(nèi)起分解植酸的作用。酸性磷酸酶也包括兩種組分。一種組分最適pH 值在215左右,簡(jiǎn)稱為Pa ,第二種組分的最適pH 值在515左右,簡(jiǎn)稱為Pb 。兩

3、者分別在動(dòng)物的胃和小腸(嗉囊、肌胃起分解植酸的作用。由于不同的微生物所產(chǎn)生的植酸酶系不一樣,有的只含有Phy 2tA ,有的只含有PhytB ,有的含有PhytA 和Pa ,有的四種都含有,而不同酶蛋白的最適pH 值也不同,造成了不同微生物所產(chǎn)生的植酸酶的最適pH 值差異很大。為了使飼料生產(chǎn)企業(yè)和養(yǎng)殖戶能正確使用植酸酶,充分發(fā)揮其作用,筆者對(duì)測(cè)定酶活用緩沖液的pH 值與植酸酶活力之間的關(guān)系進(jìn)行了分析。1材料與方法1.1材料T 植酸酶(挑戰(zhàn)植酸酶N 植酸酶(樂多仙植酸酶1.2儀器設(shè)備酸度計(jì)(上海偉業(yè)儀器廠恒溫水浴鍋(陜西省文水醫(yī)療器械廠磁力攪拌器(深圳天南海北有限公司分光光度計(jì)(756型(上海第

4、三分析儀器廠1.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)分為兩組,第一組T 植酸酶用pH 值分別為210、215、310、315、410、415、510、515、610、615的緩沖液進(jìn)行樣品的前處理,測(cè)定時(shí)底物植酸鈉溶液的pH 值與樣品處理液的pH 值相對(duì)應(yīng)。第二組也用pH 值分別為210、215、310、315、410、415、510、515、610、615的緩沖液對(duì)N 植酸酶樣品進(jìn)行前處理,測(cè)定時(shí)底物植酸鈉溶液的pH 值與樣品前處理液的pH 值相對(duì)應(yīng)。測(cè)定酶活時(shí)設(shè)兩個(gè)平行,取平均值。1.4酶活測(cè)定方法:FeS O 4磷鉬酸銨法3。2實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論從表1可以看出緩沖液的pH 值對(duì)植酸酶的酶活影響很大,而且對(duì)于不同的

5、植酸酶產(chǎn)品的酶活影響也不相同。從圖1可以看出在動(dòng)物的消化道的不同部位的pH 值條件下,植酸酶的酶活差異很大,在8飼料研究2000年第7期圖1動(dòng)物體消化道內(nèi)pH值條件下兩種植酸酶酶活柱1表示在動(dòng)物的胃中pH值條件下N植酸酶的相對(duì)酶活柱2表示在雞的嗉囊pH值條件下N植酸酶的相對(duì)酶活柱3表示在動(dòng)物的胃中pH值條件下T植酸酶的相對(duì)酶活柱4表示在雞的嗉囊pH值條件下T植酸酶的相對(duì)酶活真胃的pH值條件下的T植酸酶酶活只有標(biāo)準(zhǔn)酶活的77182%,N植酸酶只有標(biāo)準(zhǔn)酶活的49161%,在雞嗉囊的pH值條件下,T植酸酶和N植酸酶的酶活都是標(biāo)準(zhǔn)酶活的100%。植酸酶主要應(yīng)用于單胃動(dòng)物,常見的單胃動(dòng)物有豬和雞。對(duì)于豬

6、來(lái)說植酸酶對(duì)植酸水解作用主要發(fā)生在胃中,在腸道中植酸酶會(huì)被蛋白酶分解,幾乎全部喪失活性。對(duì)于雞來(lái)說植酸水解主要發(fā)生在嗉囊、肌胃和腺胃中。在豬胃中食糜的pH值在24之間,在雞嗉囊和肌胃的pH值是56之間。所以測(cè)出的標(biāo)準(zhǔn)酶活對(duì)于雞的飼喂有一定的指導(dǎo)意義,而對(duì)于豬來(lái)說意義不大。目前有些文獻(xiàn)表明:每kg 飼料中植酸酶的添加量應(yīng)在3501200FY T之間。而有些報(bào)道認(rèn)為:在豬的飼養(yǎng)過程中,植酸酶添加量在350500FY T之間,再高就無(wú)意義,推想可能是由于實(shí)驗(yàn)中所使用的植酸酶產(chǎn)品不同。3結(jié)論從實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可以看出,pH值對(duì)植酸酶的活力影響很大,而且對(duì)不同來(lái)源的植酸酶酶活的影響也不相同?，F(xiàn)在測(cè)定植酸酶酶活

7、的方法多是在pH值為515的條件下進(jìn)行的,雖然這樣可以獲得最高酶活值,但不能全面反映出植酸酶的實(shí)際使用效果。植酸酶作為一種生物催化劑只有在動(dòng)物消化道內(nèi)的pH值條件下測(cè)出的酶活才有指導(dǎo)價(jià)值。飼養(yǎng)戶在使用植酸酶產(chǎn)品時(shí)一定要根據(jù)飼養(yǎng)對(duì)象選擇產(chǎn)品,充分發(fā)揮植酸酶的實(shí)際使用價(jià)值,降低飼養(yǎng)成本。主要參考文獻(xiàn)1張興會(huì).飼料工業(yè),1999,7,142黃遵錫,慕躍林.飼料工業(yè),1999,5,8103黃遵錫,植酸酶的研究:博士學(xué)位論文.無(wú)錫輕工大學(xué), 19974Liu,J.,J Anim.Sci.,1997,72,1026通訊地址:錦州市凌河區(qū)云飛街安和里14號(hào)樓121000(上接第27頁(yè)失活以及外源菌肉雞腸道定

8、植能力不強(qiáng)等有關(guān)。溢康素為珠海溢多利公司的寡聚糖產(chǎn)品,可選擇刺激肉雞腸道固有的有益菌(如:雙歧桿菌、乳桿菌等的增殖而形成腸道最佳的微生物區(qū)系,還可通過多種途徑提高動(dòng)物的免疫機(jī)能,從而提高雞的免疫力,防止雛雞下痢,降低其死亡率。有益微生物的繁殖合成了多種維生素,并促進(jìn)了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在體內(nèi)的消化、吸收,提高飼料的消化率和能量轉(zhuǎn)化率,從而提高肉雞的增重和飼料報(bào)酬。本次試驗(yàn),試驗(yàn)二組(溢康素組料肉比比金霉素組下降213%(P< 0105;腹瀉率比金霉素組下降39114%(P>0105,比試驗(yàn)一組(益生素組下降53135%(P<0105;對(duì)雞糞pH值影響不明顯;但對(duì)雞糞含水量的影響比金霉素低318%(P<0105;與以往報(bào)道一致,在肉雞生產(chǎn)中其抗生素替代能力是明顯的。本次試驗(yàn)中對(duì)抗生素的替代作用,寡聚糖類產(chǎn)品溢康素優(yōu)于活菌制劑益生素,說明了糖類物質(zhì)的溢康素比活菌的益生素抗逆性強(qiáng),刺激內(nèi)源菌增殖作用可克服外源菌動(dòng)物腸道定殖能力等缺陷,實(shí)際應(yīng)用中問題較少,本次試驗(yàn)中取得了更明顯的抗生素的替代效果。參考文獻(xiàn)1何明清,等1活菌制劑對(duì)豬、禽和魚的抗病及增產(chǎn)試驗(yàn)初報(bào)1中國(guó)微生態(tài)雜志,1989,1(12蔡輝益,等1飼用微生物添加劑研究與應(yīng)用進(jìn)展1飼料工業(yè),1993,14(4:7123師守信,等1益生素預(yù)防畜禽腹瀉機(jī)理的研究1黑龍江畜牧獸醫(yī),1994,(2:354呂道俊,等1飼用芽孢