精編啤酒廠化驗(yàn)室設(shè)計(jì)

1、（精編）啤酒廠化驗(yàn)室設(shè)計(jì)廣西工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院設(shè)計(jì)說明書課題名稱：啤酒廠微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)姓名：廖國(guó)旭專業(yè)：食品藥品監(jiān)督管理班級(jí)：藥監(jiān)1031班起止日期：指導(dǎo)教師：韋麗刖言設(shè)計(jì)化驗(yàn)室目的在于對(duì)啤酒原輔料及成品進(jìn)行檢驗(yàn)，確保啤酒的質(zhì)量與安全，全面控制和管理生產(chǎn)，保證和監(jiān)督啤酒質(zhì)量和衛(wèi)生指標(biāo)， 提高質(zhì)量安全和達(dá) 到食品可接受水平，保證飲品質(zhì)量，維護(hù)消費(fèi)者權(quán)利，為企業(yè)提供有力銷售保障， 使企業(yè)強(qiáng)有力的立足于世界市場(chǎng)?；?yàn)室基本任務(wù)是對(duì)啤酒原輔料、 半成品及成品進(jìn)行檢驗(yàn)，確保啤酒的質(zhì)量 與安全，全面控制和管理生產(chǎn)，保證和監(jiān)督啤酒質(zhì)量和衛(wèi)生指標(biāo)， 提高質(zhì)量安全 和達(dá)到食品可接受水平，保證飲品質(zhì)量?；?yàn)室功能

2、是為啤酒的質(zhì)量提供有效的保障，讓啤酒達(dá)到消費(fèi)者可接受水平，保證啤酒質(zhì)量，通過工作人員運(yùn)用精密的檢測(cè)儀器設(shè)備對(duì)啤酒進(jìn)行檢驗(yàn)與驗(yàn)證，以合格的身份進(jìn)入銷售市場(chǎng)，讓消費(fèi)者買的放心喝得開心?；?yàn)室主要由理化實(shí)驗(yàn)室、微生物室、值班室、辦公室、儀器室、天平室、 更衣室、洗涮室、緩沖間、無(wú)困室、準(zhǔn)備室摘要對(duì)于啤酒生產(chǎn)來說，質(zhì)量檢驗(yàn)的重要性是不言而寓的。化驗(yàn)室應(yīng)該擺脫僅僅進(jìn)行 化驗(yàn)的狹隘定義，而要為啤酒生產(chǎn)的各個(gè)工序提供指導(dǎo)， 對(duì)啤酒質(zhì)量進(jìn)行有效的 控制。為保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，就要從多個(gè)方面對(duì)化驗(yàn)室進(jìn)行建造， 建立合理 完善的管理制度。本分析化驗(yàn)室主要擔(dān)任本廠所有原料、半成品及成品的檢測(cè) ，起到控制和管理生

3、產(chǎn)，保證和監(jiān)督本廠生產(chǎn)的味精的質(zhì)量和衛(wèi)生指標(biāo)的作用，也為開發(fā)新產(chǎn)品、制定 合理的工藝參數(shù)提供數(shù)據(jù)依據(jù)本分析化驗(yàn)室主要包括：辦公室、儀器室、試劑室、 理化實(shí)驗(yàn)室、準(zhǔn)備室、微生物檢驗(yàn)室.啤酒廠分析化驗(yàn)室的主要任務(wù)是對(duì)原材料分析、 半成品化驗(yàn)分析、成品化驗(yàn)分析 起到控制和管理生產(chǎn)，保證和監(jiān)督食品質(zhì)量和衛(wèi)生指標(biāo)作用。 在成品成廠時(shí)，必 須對(duì)出廠的各規(guī)格啤酒，經(jīng)過檢驗(yàn)，各理化指標(biāo)、技術(shù)質(zhì)量均要符合衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)， 以保證人民健康和商品信譽(yù)。本分析化驗(yàn)室的整體目標(biāo)是完成對(duì)原料、 輔料、半成品及成品的檢測(cè)和質(zhì)量 控制，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。并對(duì)新產(chǎn)品、新工藝的開發(fā)。1.啤酒原料、半成品及成品的檢測(cè)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)41.2原料

4、的檢測(cè)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn) 41.3半成品檢測(cè)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn) 41.4成品檢測(cè)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn) 52啤酒原料、半成品及成品的檢測(cè)方法62.1啤酒原料的檢測(cè)方法 62.2啤酒半成品的檢測(cè)方法72.3啤酒成品的檢測(cè)方法 7-233. 試劑和儀器清單243.1試劑清單253.2玻璃儀器清單 263.3設(shè)備清單273.4化驗(yàn)室的月試劑消耗量 274. 化驗(yàn)室的平面布置圖及設(shè)計(jì)說明 284.1化驗(yàn)室設(shè)置294.2化驗(yàn)室的平面布置圖 304.3設(shè)計(jì)說明（包括水、電、平面布置說1明）315. 化驗(yàn)室人員配制和組織管理326. 化驗(yàn)室的崗位責(zé)任制347. 參考文獻(xiàn)368. 謝辭361.啤酒原料、半成品及成品的檢測(cè)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)1.1

5、啤酒半成品檢測(cè)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)序號(hào)微生物檢驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)1致病菌、厭氧菌不得檢出2乳酸菌數(shù)>1 X106cfu/mL1.2啤酒成品檢測(cè)項(xiàng)目及標(biāo)準(zhǔn)序號(hào)微生物檢測(cè)項(xiàng)目檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)1菌落總數(shù)<502大腸困群<33致病菌不得檢出2.啤酒半成品及成品的檢測(cè)方法2.1半成品2.1.1酵母死活細(xì)胞（死亡率）的測(cè)定活的菌體，由于新陳代謝不停的進(jìn)行著，細(xì)胞內(nèi)氧化還原值（ rH ）較小，而還原力強(qiáng)。這時(shí)如有像美藍(lán)那樣的無(wú)毒染料進(jìn)入活的細(xì)胞內(nèi)，即被還原脫色： 而死的細(xì)胞代謝停止，無(wú)還原力，即被染成藍(lán)色。美藍(lán)無(wú)毒，且能為活細(xì)胞還原 成無(wú)色故多用于區(qū)別細(xì)胞的死活。 但美藍(lán)濃度、作用時(shí)間等都用影響，因此以制 片后五分

6、鐘內(nèi)計(jì)算的死細(xì)胞數(shù)為據(jù)。檢查方法：取0.1%美藍(lán)一滴，置載玻片中央，然后去酒母液少許和入美藍(lán)液中， 攪拌均勻，加蓋玻片，在顯微鏡下檢查數(shù)已變藍(lán)的細(xì)胞及未變藍(lán)的細(xì)胞（可數(shù) 56個(gè)視野的細(xì)胞數(shù)），計(jì)算死細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的百分率。死亡率的計(jì)算：酵母死亡率一般用百分?jǐn)?shù)表示，即死亡細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)，在顯微鏡下數(shù)一定的細(xì)胞數(shù)，并記錄死活細(xì)胞數(shù)，按下式計(jì)算死亡率死亡率=b/a%2.2成品2.2.1志賀氏菌檢驗(yàn)221.1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中志賀氏菌（Shigella）的檢驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中志賀氏菌的檢驗(yàn)221.2設(shè)備和材料除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：a恒溫培養(yǎng)箱：36

7、 C±C；b冰箱：2 C5 C；c膜過濾系統(tǒng)；d厭氧培養(yǎng)裝置：41.5 C± 1 C；e電子天平：感量0.1g ；f顯微鏡：10 x100 X；g均質(zhì)器；h振蕩器；i無(wú)菌吸管：1mL （具0.01mL刻度）、10mL （具0.1mL刻度）或微量移液器及吸頭；j無(wú)菌均質(zhì)杯或無(wú)菌均質(zhì)袋：容量 500mL ；k無(wú)菌培養(yǎng)皿：直徑 90mm ；IpH計(jì)或pH比色管或精密pH試紙；m全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)。2.2.1.3培養(yǎng)基和試劑a志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素。b麥康凱（MAC ）瓊脂。c木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽（XLD）瓊脂。d志賀氏菌顯色培養(yǎng)基。e三糖鐵（TSI）瓊脂 f營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面

8、。g半固體瓊脂。h葡萄糖銨培養(yǎng)基。i尿素瓊脂。j禺半乳糖苷酶培養(yǎng)基。k氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培 養(yǎng)基。l糖發(fā)酵管。m西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基。n粘液酸鹽培 養(yǎng)基。o蛋白胨水、靛基質(zhì)試劑。p志賀氏菌屬診斷血清。q生化鑒定試劑盒。221.4操作步驟221.5增菌以無(wú)菌操作取檢樣25g （mL），加入裝有滅菌225mL志賀氏菌增菌肉湯的 均質(zhì)杯，用旋轉(zhuǎn)刀片式均質(zhì)器以 8000r/mi n10000r/mi n 均質(zhì)；或加入裝有 225mL志賀氏菌增菌肉湯的均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器連續(xù)均質(zhì)1min2min , 液體樣品振蕩混勻即可。于41.5 C±1C，厭氧培養(yǎng)16h20h。2.2.1.6 分離取增菌

9、后的志賀氏增菌液分別劃線接種于 XLD瓊脂平板和MAC瓊脂平板或志賀氏菌顯色培養(yǎng)基平板上，于36 CC培養(yǎng)20h24h ,觀察各個(gè)平板上生長(zhǎng)的菌落形態(tài)。宋內(nèi)氏志賀氏菌的單個(gè)菌落直徑大于其他志賀氏菌。若出現(xiàn)的菌落不典型或菌落較小不易觀察，則繼續(xù)培養(yǎng)至48h再進(jìn)行觀察。志賀氏菌在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征見表 1。表1志賀氏菌在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征選擇性瓊脂平板志賀氏困的困洛特征MAC瓊脂無(wú)色至淺粉紅色，半透明、光滑、濕潤(rùn)、圓形、邊緣整齊或不齊XLD瓊脂粉紅色至無(wú)色，半透明、光滑、濕潤(rùn)、圓形、邊緣整齊或不齊志賀氏菌顯色培養(yǎng)基按照顯色培養(yǎng)基的說明進(jìn)行判定221.7初步生化試驗(yàn)221.8

10、自選擇性瓊脂平板上分別挑取2個(gè)以上典型或可疑菌落，分別接種 TSI、 半固體和營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面各一管，置 36 C C培養(yǎng)20h24h，分別觀察結(jié)果。2.2.1.9凡是三糖鐵瓊脂中斜面產(chǎn)堿、底層產(chǎn)酸（發(fā)酵葡萄糖，不發(fā)酵乳糖，蔗 糖）、不產(chǎn)氣（福氏志賀氏菌6型可產(chǎn)生少量氣體）、不產(chǎn)硫化氫、半固體管中無(wú) 動(dòng)力的菌株，挑取其2.2.1.6中已培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面上生長(zhǎng)的菌苔，進(jìn)行生化 試驗(yàn)和血清學(xué)分型。2.2.1.10生化試驗(yàn)及附加生化試驗(yàn)2.2.1.11生化試驗(yàn)用2.2.1.8中已培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面上生長(zhǎng)的菌苔，進(jìn)行生化試驗(yàn)，即B-半乳糖苷酶、尿素、賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶以及水楊苷和七葉苷的分解試驗(yàn)

11、。除宋內(nèi)氏志賀氏菌、鮑氏志賀氏菌13型的鳥氨酸陽(yáng)性；宋內(nèi)氏菌和痢疾志賀氏菌 1型，鮑氏志賀氏菌13型的B-半乳糖苷酶為陽(yáng)性以外，其余生化試驗(yàn)志賀氏菌 屬的培養(yǎng)物均為陰性結(jié)果。另外由于福氏志賀氏菌6型的生化特性和痢疾志賀氏 菌或鮑氏志賀氏菌相似，必要時(shí)還需加做靛基質(zhì)、甘露醇、棉子糖、甘油試驗(yàn)， 也可做革蘭氏染色檢查和氧化酶試驗(yàn)， 應(yīng)為氧化酶陰性的革蘭氏陰性桿菌。 生化 反應(yīng)不符合的菌株，即使能與某種志賀氏菌分型血清發(fā)生凝集， 仍不得判定為志 賀氏菌屬。志賀氏菌屬生化特性見表 2。表2志賀氏菌屬四個(gè)群的生化特征生化反應(yīng)A群：痢疾B群：福氏C群：鮑氏D群：宋內(nèi)志賀氏困志賀氏困志賀氏困氏志賀氏菌?-半

12、乳糖a-a+苷酶尿素一一一一賴氨酸脫羧一一一一酶鳥氨酸脫羧一一b+酶水楊苷一一一一七葉苷一一一一靛基質(zhì)/ +(+)一 / +一甘露醇一+ c+棉子糖一+一+甘油(+)一(+)d注：+表示陽(yáng)性；-表示陰性；-/+表示多數(shù)陰性；+/-表示多數(shù)陽(yáng)性；（+ ）表示遲緩陽(yáng)性；d表示有不同生化型。a痢疾志賀1型和鮑氏13型為陽(yáng)性。b鮑氏13型為鳥氨酸陽(yáng)性。c福氏4型和6型常見甘露醇陰性變種。221.12附加生化實(shí)驗(yàn)由于某些不活潑的大腸埃希氏菌（an aeroge ni cE.coli ）、A-D（Alkalesce ns-Disparbiotypes堿性-異型）菌的部分生化特征與志賀氏菌相似，并能與某種志

13、賀氏菌分型血清發(fā)生凝集；因此前面生化實(shí)驗(yàn)符合志賀氏菌屬生化特性的培養(yǎng)物還需另加葡萄糖胺、西蒙氏檸檬酸鹽、粘液酸鹽試驗(yàn)（36 °C培養(yǎng)24h48h）。志賀氏菌屬和不活潑大腸埃希氏菌、A-D菌的生化特性區(qū)別見表3。表3志賀氏菌屬和不活潑大腸埃希氏菌、A-D菌的生化特性區(qū)別生化反A群：痢B 群:福C群：鮑D群：宋大腸埃A-D菌應(yīng)疾志賀氏志賀氏志賀內(nèi)氏志希氏菌氏菌氏菌氏菌賀氏菌葡萄糖一一一一+銨西蒙氏一一一一dd檸檬酸鹽粘液酸一一一d+d鹽注1 : +表示陽(yáng)性；-表示陰性；d表示有不同生化型。注2 :在葡萄糖銨、西蒙氏檸檬酸鹽、粘液酸鹽試驗(yàn)三項(xiàng)反應(yīng)中志賀氏菌一般為陰性，而不活潑的大腸埃希氏菌

14、、A-D （堿性-異型）菌至少有一項(xiàng)反應(yīng)為陽(yáng)性。221.13如選擇生化鑒定試劑盒或全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)，可根據(jù)表3的初步判斷結(jié)果，用4.3.1中已培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面上生長(zhǎng)的菌苔，使用生化鑒定試 劑盒或全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。2.2.1.14結(jié)果報(bào)告綜合以上生化試驗(yàn)的結(jié)果，報(bào)告 25g （mL）樣品中檢出或未檢出志賀氏菌。2.2.3沙門氏菌檢驗(yàn)2.2.3.1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中沙門氏菌（Salmonella ）的檢驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中沙門氏菌的檢驗(yàn)。2.2.3.2設(shè)備和材料除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：1 ）冰箱：2 C5C。2）恒溫培養(yǎng)箱：36

15、 C±C，42 C±C。3 ）均質(zhì)器。4 ）振蕩器。5）電子天平：感量 0.1g。6）無(wú)菌錐形瓶容量500mL， 250mL。7）無(wú)菌吸管：1mL （具O.OImL刻度）、10mL （具O.ImL刻度）或微量移液器及吸頭。8）無(wú)菌培養(yǎng)皿：直徑 9Omm 。9） 無(wú)菌試管：3mm X50mm、10mm X75mm。10 ）無(wú)菌毛細(xì)管。11 ） pH計(jì)或pH比色管或精密pH試紙。12 ）全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)。2.2.3.3 培養(yǎng)基和試劑1 ）緩沖蛋白胨水（ BPW）。2）四硫磺酸鈉煌綠（TTB）增菌液。3）亞硒酸鹽胱氨酸（SC）增菌液。4）亞硫酸鉍（BS）瓊脂。5）HE 瓊

16、脂。6）木糖賴氨酸脫氧膽鹽（ XLD ）瓊脂。7）沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基。8）三糖鐵（TSI）瓊脂。9）蛋白胨水、靛基質(zhì)試劑。10）尿素瓊脂（ pH7.2 ）。11 ）氰化鉀（KCN ）培養(yǎng)基。12 ）賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培 養(yǎng)基。13 ）糖發(fā)酵管。14 ）鄰硝基酚B-D半乳糖苷（ON MG ）培養(yǎng)基。15 ）半固體瓊脂16 ）丙二酸鈉培養(yǎng)基。17）沙門氏菌0和H診斷血清。18 ）生化鑒定試劑盒。2.3.3.4 操作步驟2.3.3.4.1 前增菌稱取25g（mL）樣品放入盛有225mLBPW 的無(wú)菌均質(zhì)杯中，以8000r/min 10000r/min 均質(zhì)1min2min ,或置于盛有225mLBP

17、W 的無(wú)菌均質(zhì)袋中，用 拍擊式均質(zhì)器拍打 1min 2min 。若樣品為液態(tài)，不需要均質(zhì)，振蕩混勻。如需 測(cè)定 pH 值，用 1mol/mL 無(wú)菌 Na0H 或 HCl 調(diào) pH 至 6.8±0.2。無(wú)菌操作將樣品轉(zhuǎn)至500mL錐形瓶中，如使用均質(zhì)袋，可直接進(jìn)行培養(yǎng)，于36 °C ±C培養(yǎng)8h18h。如為冷凍產(chǎn)品，應(yīng)在45 C以下不超過15min,或2 C5 C不超過18h解凍。2.3.3.4.2 增菌輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)過的樣品混合物，移取 1mL，轉(zhuǎn)種于10mLTTB內(nèi)，于42 C± 1C培養(yǎng)18h24h。同時(shí)，另取1mL，轉(zhuǎn)種于10mLSC內(nèi)，于36 C&

18、#177;1 C培養(yǎng) 18h 24h 。2.3.3.4.2 分離分別用接種環(huán)取增菌液1環(huán)，劃線接種于一個(gè)BS瓊脂平板和一個(gè)XLD瓊脂 平板（或HE瓊脂平板或沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板）。于36 C±1 C分別培養(yǎng) 18h24h （XLD瓊脂平板、HE瓊脂平板、沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板）或40h48h（BS 瓊脂平板），觀察各個(gè)平板上生長(zhǎng)的菌落 ,各個(gè)平板上的菌落特征見表 1表1沙門氏菌屬在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征選擇性瓊脂平板沙門氏菌BS瓊脂困洛為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色，困洛周圍培養(yǎng)基可 呈黑色或棕色；有些菌株形成灰綠色的菌落，周圍培養(yǎng)基不 變。HE瓊脂監(jiān)綠色或監(jiān)色，多數(shù)困

19、洛中心黑色或幾乎全黑色；有些困株 為黃色，中心黑色或幾乎全黑色。XLD瓊脂困洛呈粉紅色，帶或不帶黑色中心，有些困株可呈現(xiàn)大的帶 光澤的黑色中心，或呈現(xiàn)全部黑色的菌落；有些菌株為黃色 困洛，帶或不帶黑色中心。沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基按照顯色培養(yǎng)基的說明進(jìn)行判定。23343生化試驗(yàn)自選擇性瓊脂平板上分別挑取2個(gè)以上典型或可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂，先在 斜面劃線，再于底層穿刺；接種針不要滅菌 ，直接接種賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基 和營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，于36 C±C培養(yǎng)18h24h，必要時(shí)可延長(zhǎng)至48h。在三糖 鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基內(nèi)，沙門氏菌屬的反應(yīng)結(jié)果見表2。表2沙門氏菌屬在三糖鐵瓊脂和賴

20、氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基內(nèi)的反應(yīng)結(jié)果三糖鐵瓊脂賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基初步判斷斜面底層產(chǎn)氣硫化氫KA +(-) + (-)+可疑沙門氏菌屬KA +(-) + (-)-可疑沙門氏菌屬AA +(-) + (-)+可疑沙門氏菌屬AA + / + / 非沙門氏菌KK+ / - + / + / 非沙門氏菌注：K:產(chǎn)堿，A:產(chǎn)酸；+:陽(yáng)性,:陰性； + ( ):多數(shù)陽(yáng)性，少數(shù)陰性；+ / :陽(yáng)性或陰性。接種三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基的同時(shí)，可直接接種蛋白胨水(供做靛基質(zhì)試驗(yàn))、尿素瓊脂(pH7.2 )、氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基，也可在初步判斷結(jié) 果后從營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落接種。于36 C±

21、C培養(yǎng)18h24h，必要時(shí)可延長(zhǎng)至48h，按表3判定結(jié)果。將已挑菌落的平板儲(chǔ)存于 2 C5 C或室溫 至少保留24h，以備必要時(shí)復(fù)查。表3沙門氏菌屬生化反應(yīng)初步鑒別表反應(yīng)序號(hào)硫化氫(H2S)靛基質(zhì)pH7.2 尿素氰化鉀(KCN)賴氨酸脫羧酶A1+A2+A3+ / 注：+陽(yáng)性；一陰性；+ / 陽(yáng)性或陰性。反應(yīng)序號(hào)A1 :典型反應(yīng)判定為沙門氏菌屬。如尿素、KCN和賴氨酸脫羧酶3項(xiàng)中有1項(xiàng)異常，按表4可判定為沙門氏菌。如有2項(xiàng)異常為非沙門氏菌。表4沙門氏菌屬生化反應(yīng)初步鑒別表pH7.2尿素氰化鉀（KCN）賴氨酸脫羧酶判定結(jié)果甲型副傷寒沙門氏菌（要求血清學(xué)鑒定結(jié)果）+沙門氏菌W或V（要求符合本群生化特

22、性）+一+沙門氏菌個(gè)別變體（要求血清學(xué)鑒定結(jié)果）注：+表示陽(yáng)性；+表示陰性。反應(yīng)序號(hào)A2 :補(bǔ)做甘露醇和山梨醇試驗(yàn)，沙門氏菌靛基質(zhì)陽(yáng)性變體兩項(xiàng)試驗(yàn)結(jié) 果均為陽(yáng)性，但需要結(jié)合血清學(xué)鑒定結(jié)果進(jìn)行判定。反應(yīng)序號(hào)A3 :補(bǔ)做ON MG。ON MG陰性為沙門氏菌，同時(shí)賴氨酸脫羧酶陽(yáng)性 甲型副傷寒沙門氏菌為賴氨酸脫羧酶陰性。必要時(shí)按表5進(jìn)行沙門氏菌生化群的鑒別。表5沙門氏菌屬各生化群的鑒別項(xiàng)目InIVV衛(wèi)矛醇+一一+一山梨醇+一水楊苷一一一+一一ON MG一一+一+一丙二酸鹽一+一一一KCN一一一+一注：+表示陽(yáng)性；一表示陰性。如選擇生化鑒定試劑盒或全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)，可根據(jù)541的初步判斷結(jié)果，從

23、營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落，用生理鹽水制備成濁度適當(dāng)?shù)木鷳乙海?使用生化鑒定試劑盒或全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。233.5結(jié)果與報(bào)告綜合以上生化試驗(yàn)的結(jié)果，報(bào)告 25g （mL）樣品中檢出或未檢出沙門氏菌。2.2.4金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)2.241設(shè)備和材料除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：恒溫培養(yǎng)箱：36 C±C。、冰箱：2 C5 C、恒溫水浴箱：37C65 C、天平: 感量0.1g、均質(zhì)器、振蕩器。無(wú)菌吸管：1mL （具O.OImL刻度）、10mL （具0.1mL刻度）或微量移液器及 吸頭。無(wú)菌錐形瓶：容量100mL、500mL。無(wú)菌培養(yǎng)皿：直徑90mm。

24、注射器：0.5mL。pH計(jì)或pH比色管或精密pH試紙。2.2.4.2培養(yǎng)基和試劑10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯。7.5%氯化鈉肉湯。血瓊脂平板。Baird-Parker 瓊脂平板腦心浸出液肉湯 (BHI) 。兔血漿。稀釋液：磷酸鹽緩沖液。營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面。革蘭氏染色液。無(wú)菌生理鹽水2.2.4.3 操作步驟2.2.4.3.1 樣品的處理稱取 25g 樣品至盛有 225mL7.5% 氯化鈉肉湯或 10% 氯化鈉胰酪胨大豆肉湯的無(wú)菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000r/min 10000r/min 均質(zhì)1min2min，或放入盛有225mL7.5% 氯化鈉肉湯或 10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯的無(wú)菌均質(zhì)袋中， 用拍擊 式均質(zhì)

25、器拍打 1min 2min 。若樣品為液態(tài)，吸取 25mL 樣品至盛有 225mL7.5% 氯化鈉肉湯或 10% 氯化鈉胰酪胨大豆肉湯的無(wú)菌錐形瓶 (瓶?jī)?nèi)可預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的 無(wú)菌玻璃珠 )中，振蕩混勻。2.2.4.3.2 增菌和分離培養(yǎng)將上述樣品勻液于36 C±C培養(yǎng)18h24h。金黃色葡萄球菌在7.5%氯化鈉 肉湯中呈混濁生長(zhǎng)，污染嚴(yán)重時(shí)在 10% 氯化鈉胰酪胨大豆肉湯內(nèi)呈混濁生長(zhǎng)。將上述培養(yǎng)物， 分別劃線接種到 Baird-Parker 平板和血平板， 血平板 36C±1C培養(yǎng) 18h 24h。Baird-Parker 平板 36 C±1 C 培養(yǎng) 18h 24

26、h 或 45h 48h。金黃色葡萄球菌在 Baird-Parker 平板上，菌落直徑為 2mm 3mm ，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落有似奶油至樹膠樣的硬度， 偶然會(huì)遇到非脂肪溶解的類似菌落； 但無(wú)混濁帶及透明圈。長(zhǎng)期保存的冷凍或干燥食品中所分離的菌落比典型菌落所產(chǎn)生的黑色 較淡些，外觀可能粗糙并干燥。在血平板上，形成菌落較大，圓形、光滑凸起、 濕潤(rùn)、金黃色（有時(shí)為白色） ，菌落周圍可見完全透明溶血圈。挑取上述菌落進(jìn) 行革蘭氏染色鏡檢及血漿凝固酶試驗(yàn)。2.2.4.3.3 鑒定 染色鏡檢：金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽(yáng)性球菌，排列呈葡萄球狀，無(wú)芽胞

27、，無(wú)莢 膜，直徑約為0.5 （jm1。血漿凝固酶試驗(yàn)：挑取、 Baird-Parker 平板或血平板上可疑菌落 1 個(gè)或以上，分別接種到5mLBHI和營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面，36 C±C培養(yǎng)18h24h。取新鮮配 置兔血漿 0.5mL ，放入小試管中，再加入 BHI 培養(yǎng)物 0.2mL 0.3mL ，振蕩搖 勻，置36 C±1 C溫箱或水浴箱內(nèi)，每半小時(shí)觀察一次，觀察6h，如呈現(xiàn)凝固（即將試管傾斜或倒置時(shí)， 呈現(xiàn)凝塊） 或凝固體積大于原體積的一半， 被判定為 陽(yáng)性結(jié)果。同時(shí)以血漿凝固酶試驗(yàn)陽(yáng)性和陰性葡萄球菌菌株的肉湯培養(yǎng)物作為對(duì) 照。也可用商品化的試劑，按說明書操作，進(jìn)行血漿凝固酶

28、試驗(yàn)。結(jié)果如可疑，挑取營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面的菌落到5mLBHI，36 C±1 C培養(yǎng)18h 48h ，重復(fù)試驗(yàn)。葡萄球菌腸毒素的檢驗(yàn)： 未檢出金黃色可疑食物中毒樣品或產(chǎn)生葡萄球菌腸毒素 的金黃色葡萄球菌菌株的鑒定，應(yīng)按附錄 B 檢測(cè)葡萄球菌腸毒素。2.2.4.3.4 結(jié)果與報(bào)告結(jié)果判定：符合 5.2.3、5.3，可判定為金黃色葡萄球菌。結(jié)果報(bào)告：在25g （mL ）樣品中檢出或葡萄球菌2.2.4 菌落總數(shù)2.2.4.1 樣品的稀釋固體和半固體樣品： 稱取 25g 樣品置盛有 225mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000r/min 10000r/min 均質(zhì)1min2min，或

29、放入盛有225mL稀釋液的無(wú)菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min2min，制成1:10的樣品勻液。液體樣品：以無(wú)菌吸管吸取 25mL 樣品置盛有 225mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水 的無(wú)菌錐形瓶（瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無(wú)菌玻璃珠）中，充分混勻，制成 1:10 的 樣品勻液。2.2.4.2 檢樣25g（mL）樣品+225mL稀釋液，均質(zhì)10倍系列稀釋選擇2個(gè)3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液，各取 1mL 分別加入無(wú)菌培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)計(jì)數(shù)各平板菌落數(shù)計(jì)算菌落總數(shù)每皿中加入 15mL 20mL平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，混勻報(bào)告用 1mL 無(wú)菌吸管或微量移液器吸取 1:10 樣品勻液 1mL ，沿管壁緩慢注于盛有9mL

30、稀釋液的無(wú)菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面） ，振搖試管 或換用 1 支無(wú)菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻，制成 1:100 的樣品勻液。按上述操作程序，制備 10 倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用 1 次 1mL 無(wú)菌吸管或吸頭。根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)，選擇2個(gè)3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液），在進(jìn)行 10 倍遞增稀釋時(shí)，吸取 1mL 樣品勻液于無(wú)菌平皿內(nèi)，每 個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。同時(shí)，分別吸取 1mL 空白稀釋液加入兩個(gè)無(wú)菌平皿內(nèi)作 空白對(duì)照。2.2.4.3 培養(yǎng)瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36 ±CC培養(yǎng)48h ±2h。水產(chǎn)品30 土C培養(yǎng)7

31、2h ±3h 。如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長(zhǎng)的菌落時(shí)， 可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基（約4mL），凝固后翻轉(zhuǎn)平板，按621條件進(jìn)行培養(yǎng)。2.2.4.4 菌落計(jì)數(shù) 可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位（colony-formingunits，CFU）表示。選取菌落數(shù)在 30CFU300CFU 之間、無(wú)蔓延菌落生長(zhǎng)的平板計(jì)數(shù)菌落總數(shù)。 低于 30CFU 的平板記錄具體菌落數(shù)，大于 300CFU 的可記錄為多不可計(jì)。每個(gè) 稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)， 則不宜采用，

32、 而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平 板作為該稀釋度的菌落數(shù)； 若片狀菌落不到平板的一半， 而其余一半中菌落分布 又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以 2，代表一個(gè)平板菌落數(shù)。當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無(wú)明顯界線的鏈狀生長(zhǎng)時(shí)，則將每條單鏈作為一個(gè)菌落計(jì) 數(shù)。2.2.4.5 結(jié)果與報(bào)告 若只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)， 計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平 均值，再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每 g （mL ）樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。 計(jì)算：1）（式中：N樣品中菌落數(shù)；UC平板（含適宜范圍菌落數(shù)的平板）菌落數(shù)之和；n1 第一稀釋度）低稀釋倍數(shù)）平板個(gè)數(shù)；n2 第二稀釋度）高稀釋倍數(shù)）平板個(gè)數(shù)；d 稀釋因子）第一稀釋度

33、） 。若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于 300CFU ，則對(duì)稀釋度最高的平板進(jìn)行計(jì) 數(shù)，其他平板可記錄為多不可計(jì)， 結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。 若 所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于 30CFU ，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以 稀釋倍數(shù)計(jì)算。若所有稀釋度）包括液體樣品原液） 平板均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于 1乘以最低稀 釋倍數(shù)計(jì)算。若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在 30CFU300CFU之間，其中一部分小于 30CFU 或大于 300CFU 時(shí)，則以最接近 30CFU 或 300CFU 的平均菌落數(shù)乘 以稀釋倍數(shù)計(jì)算。2.2.4.6 菌落總數(shù)的報(bào)告菌落數(shù)小于 100CFU 時(shí)，按“四舍五入

34、”原則修約，以整數(shù)報(bào)告。 7.2.2 菌落數(shù)大于或等于 100CFU 時(shí)，第 3 位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后，取前 2 位數(shù)字，后面用 0 代替位數(shù)；也可用 10 的指數(shù)形式來表示，按“四舍五入”原則 修約后，采用兩位有效數(shù)字。若所有平板上為蔓延菌落而無(wú)法計(jì)數(shù)，則報(bào)告菌落蔓延。 若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng)，則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。稱重取樣以 CFU/g 為單位報(bào)告，體積取樣以 CFU/mL 為單位報(bào)告。2.2.5 大腸菌群測(cè)定2.2.5.1 范圍 木標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中大腸菌群的測(cè)定方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中大腸菌群的測(cè)定。2.2.5.2 儀器和試劑冰箱:0°C-4 °C。恒

35、溫培養(yǎng)箱:36 C士 1C。恒溫水浴鍋:46 C 士 1 C .顯微鏡:10X100X。均質(zhì)器或滅菌乳缽。架盤藥物天平 :0g-500g, 精確至 0.5g.滅菌吸管1mL（具0.01mL刻度）,10mL（具0.1mL刻度）。滅菌錐形瓶 :500mL.滅苗玻璃珠 :直徑約 5mm.滅菌培養(yǎng)皿 :直徑 90mm.滅苗試管：16mm X160mm.滅菌刀 .剪子、攝子等2.2.5.3 培養(yǎng)基和試劑乳糖膽鹽發(fā)酵管。伊紅美藍(lán)瓊脂平板。乳糖發(fā)酵管。EC肉湯。磷酸鹽緩沖液 .0.85% 滅菌生理鹽水 .革蘭氏染色液。2.2.5.4 操作步驟2.2.5.4.1 檢樣稀釋以無(wú)菌操作將檢樣 25g（mL） 放于

36、含有 225ml ，滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅茵玻璃瓶?jī)?nèi) （瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠 ）或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨做成 1：10 的均勻稀釋液。固體檢樣最好用均質(zhì)器，以 8000r/min10000r/min 的 速度處理 1min ，做成 1 ：10 的均勻稀釋液。用 1mL 滅菌吸管吸取 1:10 稀釋液 1mL ，注人含有 9ML 滅菌內(nèi)，振搖試管混勻， 做成 1 ：100 的稀釋液。另取 1mL 滅菌吸管，按上條操作依次做 10 倍遞增稀釋液，每遞一次，換用 1 支 1ml 滅菌吸管。根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情漢的估計(jì)， 選擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度， 接種三管。2.2.5

37、.4.2 乳糖發(fā)酵試驗(yàn)將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，接種量在 1mL 以上者，用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管，1mL以及1mL以下者，用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。每一稀釋度接種三管， 置36 C 士C溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24h 士 2h ,如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣，則可報(bào)告為人腸菌群陰性，如有產(chǎn)氣省，則按下列程序進(jìn)行。2.2.5.4.3 分離培養(yǎng)將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，置36 C士 1C溫箱內(nèi)，培養(yǎng)18h-24h ，然后取出，觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實(shí)試驗(yàn)。2.2.5.4.4 證實(shí)試驗(yàn)在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落 1 個(gè)2 個(gè)進(jìn)行革蘭氏染色，同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管，置36 C士

38、1 C培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h 士 2h，觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖管產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無(wú)芽胞桿菌，即可報(bào)告為大腸菌群陽(yáng)性。2.2.5.4.5 報(bào)告根據(jù)證實(shí)為大腸菌群陽(yáng)性的管數(shù)，查 MPN 檢索表，報(bào)告每 100mL（g） 大腸菌群 的 MPN 值 .2.2.5.4.6 糞大腸菌群 （Faecalcoliform）用接種環(huán)將所有產(chǎn)氣的乳糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)物 （見 4.2）轉(zhuǎn)種于 EC 肉湯管內(nèi)，置44.5 C 士 0.2 C水浴箱內(nèi)（水浴箱內(nèi)的水面應(yīng)高于EC肉湯液面），培養(yǎng)24h 士 2h， 經(jīng)培養(yǎng)后，如所有EC肉湯管均不產(chǎn)氣，則可報(bào)告為陰性；如有產(chǎn)氣者，則將所有產(chǎn)氣的EC肉湯管分別轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂

39、平板上，置培養(yǎng)18h-24h，凡平板上有典型菌落者，則證實(shí)為糞大腸菌群陽(yáng)性。2.2.5.5 結(jié)果報(bào)告根據(jù)證實(shí)為糞大腸菌群的陽(yáng)性管數(shù)，查 MPN 檢索表，報(bào)告每 100mL （g）糞大腸菌群的MPN值（見表1 ）。表1大腸菌群最可能數(shù)（MPN ）檢索表陽(yáng)性管數(shù)MPN100 mL (g)95%可信限1mL (g) X30.1mL (g )X30.01mL (g ) X3下限上限000000000123<30306090<590000011110123306090120<51300000222201236090120160000033330123901301601901100014

40、070<51020021010211010315011070102301111103036011215011319012011030360121150122200123240130160131200132240133190200901036020114030370202200203260220210404702212801001500222350223420230290231360232440233530300230401200301390701300302640150380030395032043070210032175014023003221200300380032316003209

41、3015038003211500300440032221003504700323290033024003601300033146007102400033211000150048000333>24000注1 ：本表采用3個(gè)稀釋度imL(g)、0.1mL(g)和0.01mL(g)，每稀釋度三管。注2 :表內(nèi)所列檢樣量如改用10mL(g)、1mL(g)和0.1mL(g)時(shí)，表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)降低10倍；如改用O.ImL、O.OImL (g)和O.OO1mL(g)時(shí)，其余可類推3. 試劑和儀器清單3.1試劑清單試劑名稱規(guī)格數(shù)量蔗糖5OOg2葡萄糖5OOg2D 果糖25g2乳糖5OOg2淀粉酶25Og

42、2胰蛋白酶25Og2瓊脂粉1OOg2牛肉膏5OOml2酵母膏5OOml2大豆蛋白胨5OOml2蛋白胨5OOml2胰蛋白胨5OOml2胰酪胨5OOg2植物蛋白胨5OOg2多胨5OOg2氫氧化鈉500g2品紅25g4異戊醇500ml2乙醇500ml2石蕊25g3乙醚500ml2濃硫酸500ml2甲基紅25g4硫酸銅、500g4硫酸鉀500g4硼酸250ml4溴甲酚綠25ml2酚酞25ml3鹽酸500ml3磷酸500ml23.2玻璃儀器清單儀器名稱規(guī)格（ml）需要量（個(gè)）燒杯100104004錐形瓶250105005漏斗2分液漏斗2鑷子4吸管110210510105205255玻璃棒5火困刀或剪子5

43、橡膠管5試管18*18010燒瓶5003酸、堿式滴定管50各3量筒102502100525055002溫度計(jì)100 C5酒精燈5表面皿中號(hào)5平皿90cm100容量瓶10450510010250550023.3設(shè)備清單儀器名稱型號(hào)數(shù)量雙數(shù)顯振湯培養(yǎng)相BS-1E 型3烘箱SX2-2.5-10 型5咼壓蒸汽火菌鍋MLS-3750 型3干熱火菌器MOV-112S90L/AT 型5自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀迅數(shù)AS1型5微生物米樣器JWL-I 型5臥式超低溫保存箱MDF-293 型5冰箱西門子KG23E6710°C-4 °C生化培養(yǎng)箱SPX-250B 型 205L4014±1°

44、;C, 25 °C60 °生物顯微鏡XS2-3G401600X2004143014干燥消毒箱GRX202PH計(jì)33.4化驗(yàn)室的月試劑消耗量例：以金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)中的10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯使用量計(jì)算，每次實(shí)驗(yàn)所消耗的10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯使用量為 225ml,每周做一次檢測(cè)項(xiàng)目 的10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯使用量為 225ml,則每月使用的10%氯化鈉胰酪 胨大豆肉湯使用量為量為900ml，規(guī)格為1000ml瓶，折合得使用10%氯化鈉 胰酪胨大豆肉湯為0.9瓶.4. 化驗(yàn)室的平面布置圖及設(shè)計(jì)說明4.1化驗(yàn)室設(shè)置設(shè)計(jì)的化驗(yàn)室包括：微生物化驗(yàn)室、辦公室、緩沖間、無(wú)菌室、

45、天平室、設(shè)備室、 更衣室。4.2化驗(yàn)室平面圖4.3設(shè)計(jì)說明4.3.1微生物化驗(yàn)室布局微生物化驗(yàn)室是按2 : 1的比例尺來進(jìn)行設(shè)計(jì)的。整個(gè)微生物化驗(yàn)室總面積為（長(zhǎng)3000cm X寬2000cm ）,化驗(yàn)室操作臺(tái)坐落在微生物化驗(yàn)室的西南角， 操作臺(tái)（長(zhǎng)1234cm X寬276cm ），操作臺(tái)兩邊各設(shè)2個(gè)水槽，操作臺(tái)上配有均 質(zhì)器、水浴鍋、通風(fēng)櫥（長(zhǎng) 334cm X寬276cm ），有毒或刺激性藥物的取用在通風(fēng)櫥內(nèi)操作，操作臺(tái)旁電源開關(guān)一組，電插座 2個(gè)整個(gè)化驗(yàn)室的所有門都是防火防腐蝕的 ,門統(tǒng)一規(guī)格為 141cm, 向內(nèi)推開式， 化驗(yàn)室內(nèi)各功能室采用隔板做墻隔開， 以減小占地面積 ,隔板也為防火防

46、腐蝕的， 采用耐火或不易燃材料建筑；電路電線埋入墻體內(nèi)，以免遭氧化及腐蝕。4.3.1.1 操作區(qū)4.3.1.1.1 整潔：微生物操作區(qū)是各種病原菌相對(duì)集中的地方 ,為了減少粉塵流動(dòng) , 防止交叉污染 ,操作區(qū)應(yīng)與外界分開。操作區(qū)地面用專用拖把每天拖1 次,每周用消毒劑擦洗一次。每天早上工作前 ,用紫外線照射 30min ，或每天工作后 ,用紫外 線照射 60min ，對(duì)整個(gè)操作區(qū)進(jìn)行消毒 ,下午工作結(jié)束后用消毒液消毒工作臺(tái)面 , 以保證工作環(huán)境的安全清潔。4.3.1.1.2 光線：細(xì)菌培養(yǎng)的細(xì)小菌落及血清試驗(yàn)?zāi)垲w粒的觀察,都需要有充足的光線。操作區(qū)除設(shè)置常規(guī)照明燈外，還必須安裝操作臺(tái)燈,以保

47、證試驗(yàn)結(jié)果的正確判斷。4.3.1.1.3 溫度和濕度：由于無(wú)菌操作的要求 ,實(shí)驗(yàn)過程中經(jīng)常使用酒精燈，因此 , 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室不能安裝吊扇。為了達(dá)到實(shí)驗(yàn)所需的適宜溫度,尤其是滿足某些儀器對(duì)溫度濕度的要求 ,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)安裝空調(diào)。4.3.1.1.4 污染物處理： 操作區(qū)備有消毒缸 ,用于處理沾有活菌的玻片等污染物品。 檢驗(yàn)剩余的標(biāo)本及使用過的帶菌平板、 試管均須集中地點(diǎn)安全防止， 經(jīng)消毒滅菌 處理后再洗滌或丟棄。4.3.1.2 無(wú)菌室布局無(wú)菌室面積為（長(zhǎng)782cm X寬925cm ）,無(wú)菌室溫度控制在17 C25 C；溫度 波動(dòng)小于0.5 C /h ;濕度j075%，無(wú)菌室完全封閉，進(jìn)出無(wú)菌室至少要

48、經(jīng)兩道門 ,中間隔有緩沖間，無(wú)菌室與外間設(shè)置一個(gè)可開的窗口，用于傳遞器具。第一緩沖間面積為（長(zhǎng)782cm X寬545cm），第二緩沖間面積為（長(zhǎng) 782cm X寬230cm ），最后才進(jìn)到無(wú)菌操作室，無(wú)菌操作室內(nèi)還設(shè)有無(wú)菌操作臺(tái) （長(zhǎng)782cm X寬 275cm ） ,位于室中間，臺(tái)面材料為具有耐酸，耐堿以及剛度好的塑料材料， 地板為防滑地被磚、潔凈、干燥，室內(nèi)還應(yīng)設(shè)有空調(diào) ,滅火器。4.3.1.2.1 無(wú)菌室必須保持整潔，無(wú)菌室為 10000 級(jí)（局部 100 級(jí)）清潔區(qū)，采 用紫外燈配合臭氧滅菌， 工作人員進(jìn)入無(wú)菌室應(yīng)換專用鞋、 專用衣。 無(wú)菌室使用 前必須用紫外線消毒 30min ，操作

49、結(jié)束后清潔臺(tái)面，再用紫外線消毒 30min 。 定期用乳酸或甲醛熏蒸。4.3.2 辦公室布局辦公室面積為（長(zhǎng)782cm X寬725cm ），應(yīng)設(shè)有辦公桌（長(zhǎng)260cm X寬155cm）、冰箱（長(zhǎng)343cm X寬171cm ）、空調(diào)、滅火器、桌上擺有電腦、打印 機(jī)以及相關(guān)的檢驗(yàn)書籍和文件等，辦公桌旁設(shè)電源開關(guān)一組，電插座 6 個(gè)。4.3.3 天平室布局天平室面積總為（長(zhǎng) 741cm X寬750cm ）,天平室有雙層玻璃和窗簾，室 內(nèi)設(shè)有滅火器、空調(diào)、天平臺(tái)（長(zhǎng) 423cm X寬316cm ），各天平之間有合理的間 距,各不影響 ,天平臺(tái)旁設(shè)電源開關(guān)一組，電插座 1 個(gè)。4.3.4 設(shè)備室布局設(shè)備

50、室面積為（長(zhǎng)741cm X寬675cm ）,內(nèi)設(shè)有滅菌鍋、冰箱、低溫保存 箱、培養(yǎng)箱 ,還設(shè)有電源插座各一個(gè)。4.3.5 更衣室布局更衣室分為男女更衣室，總面積為（長(zhǎng)903cm X寬741cm ）,男更衣室（長(zhǎng)460cm X寬354cm ）,女更衣室（長(zhǎng)460cm X寬387cm ）,男女更衣室間,各設(shè)有 小型衣柜（長(zhǎng)460cm X寬130cm ），衣桿、水龍頭1個(gè)、吹風(fēng)器1臺(tái)以及酒精 消毒器1臺(tái)，對(duì)工作人員進(jìn)行工作前消毒。4.3.供電化驗(yàn)室建筑的供電應(yīng)留有足夠的負(fù)荷余量， 設(shè)施應(yīng)安全可靠，一般采用雙路 供電，不具備雙路供電條件的，應(yīng)設(shè)置自備電源。有特殊要求的，應(yīng)配備不間斷 電源。各個(gè)實(shí)驗(yàn)室配

51、置三相（338v）和單相（220v）供電路線、設(shè)置電源總開關(guān)、總 開關(guān)上均安裝上漏電保護(hù)措施（對(duì)電冰箱、等長(zhǎng)期運(yùn)行電器不受總開關(guān)控制），穩(wěn)定供電電壓?jiǎn)?，配置足夠供電電源插座，電線路采用護(hù)套暗鋪，且在走廊配置 防爆燈等。為保障實(shí)驗(yàn)室的正常工作，電源的質(zhì)量、安全可靠性及連續(xù)性必需保 證。一般用電和實(shí)驗(yàn)用電必須分開，對(duì)一些精密、貴重儀器設(shè)備 要求提供穩(wěn)壓、 恒流、穩(wěn)頻、抗干擾的電源，必要時(shí)須建立不中斷供電系統(tǒng)，還要配備專用電， 如不間斷電源（UPS）等。4.4供水供水要求為自來水和專用水，水壓不夠要設(shè)有水箱。排水中若有酸性或堿性物質(zhì)， 要標(biāo)明濃度和數(shù)量；若有放射性物質(zhì)要注明有多少種放射性物質(zhì)和濃度。4.5通風(fēng)實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng)，人員多和實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生一些有害氣體，造成空氣 污濁，對(duì)人體不利。為了防止實(shí)驗(yàn)室工作人員吸入或咽入一些有毒的、可致病的 或毒性不明的化學(xué)物質(zhì)和有機(jī)氣體，實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)有良好的通風(fēng)，必要時(shí)應(yīng)設(shè)空調(diào)。5. 化驗(yàn)室人員配制和組織管理5.1人員配置：化驗(yàn)室主任、技術(shù)負(fù)責(zé)人、質(zhì)量負(fù)責(zé)人、儀器設(shè)備管理負(fù)責(zé)人、試劑管理負(fù)責(zé)人、檢驗(yàn)人員（共10人）5.2 化驗(yàn)室人員管理5.2.1 所有化驗(yàn)員需培訓(xùn)考核合格后持證上崗，熟悉化驗(yàn)專業(yè)知識(shí)。5.2.2 掌握采取樣品的性質(zhì)，熟悉采樣方法，會(huì)使用采樣工具。5.2.3 掌握分析所用各種標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置