生物安全實(shí)驗(yàn)室建立與使用概要

1、2015年12月14日匯報(bào)內(nèi)容 一、什么是生物安全實(shí)驗(yàn)室 二、生物安全實(shí)驗(yàn)室與潔凈實(shí)驗(yàn)室的區(qū)別 三、生物安全實(shí)驗(yàn)室的建立 四、生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理與使用 五、培養(yǎng)基的驗(yàn)收、使用、保存注意事項(xiàng) 什么是生物安全實(shí)驗(yàn)室？ 是通過規(guī)范的實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、實(shí)驗(yàn)設(shè)備的配置、個(gè)人防護(hù)裝備的使用（硬件）、嚴(yán)格遵從標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序和管理規(guī)程等（軟件）：確保操作生物危險(xiǎn)因子的工作人員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象的傷害；確保周圍環(huán)境不受其污染；確保實(shí)驗(yàn)因子保持原有本性所采取綜合措施的實(shí)驗(yàn)室。生物安全防護(hù)的基本原則(三要素) 安全設(shè)備、個(gè)體防護(hù)裝置和措施 。 實(shí)驗(yàn)室的特殊設(shè)計(jì)和建設(shè)要求 。 嚴(yán)格的管理制度和標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序和規(guī)程目標(biāo)確

2、保實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象侵染， 確保周圍環(huán)境不受其污染的目的。 潔凈實(shí)驗(yàn)室與生物安全實(shí)驗(yàn)室的區(qū)別 潔凈實(shí)驗(yàn)室只針對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境提出潔凈要求，不提供對(duì)人員或環(huán)境的生物安全保護(hù)。(超凈工作臺(tái)不能替代生物安全柜)。 普通的微生物實(shí)驗(yàn)(不進(jìn)行病原微生物分離與鑒定)只要求在潔凈實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。 進(jìn)行病原微生物分離與鑒定必須在生物安全實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。潔凈實(shí)驗(yàn)室與生物安全實(shí)驗(yàn)室的區(qū)別空氣潔凈等級(jí)空氣潔凈等級(jí) 含塵濃度含塵濃度 含菌濃度含菌濃度 塵粒粒徑塵粒粒徑(m) (m) 塵粒數(shù)塵粒數(shù)（個(gè)（個(gè)mm3 3 ） 沉降菌沉降菌(cm(cm碟碟0.5h0.5h） 浮游菌浮游菌( (個(gè)個(gè)mm3 3) ) 100100級(jí)級(jí)

3、 0.5 0.5 3,500 3,500 1 1 5 5 5 5 0 0 1000010000級(jí)級(jí) 0.5 0.5 350,000 350,000 3 3 1001005 5 2,000 2,000 100000100000級(jí)級(jí) 0.5 0.5 3,500,000 3,500,000 10105005005 5 20,000 20,000 大于大于100000100000( (相當(dāng)于相當(dāng)于300000300000級(jí)級(jí)) ) 0.5 0.5 10000000 10000000 5 5 61800 61800 生物安全實(shí)驗(yàn)室的主要技術(shù)指標(biāo)級(jí)別級(jí)別潔凈潔凈度級(jí)度級(jí)別別最小換最小換氣次數(shù)氣次數(shù)( (次

4、次/h)/h)與室外方向上與室外方向上相鄰相通房間相鄰相通房間的最小負(fù)壓差的最小負(fù)壓差(Pa)(Pa)溫度溫度相對(duì)濕相對(duì)濕度度%噪聲噪聲dB(A)dB(A)最低照最低照度度lx lx一級(jí)一級(jí)_ _可開窗可開窗_ _1828182870706060200200二級(jí)二級(jí)_ _可開窗可開窗_ _18271827307030706060300300三級(jí)三級(jí)7 7或或8 81515或或1212-10-1015251525306030606060350350四級(jí)四級(jí)7 7或或8 81515或或1212-10-1018241824306030606060350350注：BSL-3主要實(shí)驗(yàn)室相對(duì)于大氣的最小負(fù)

5、壓不應(yīng)小于-30Pa，BSL-4主要實(shí)驗(yàn)室相對(duì)于大氣的最小負(fù)壓不應(yīng)小于-40Pa。本表中的噪聲不包括生物安全柜、動(dòng)物隔離器的噪聲，如包括上述設(shè)備的噪聲，則最大不應(yīng)超過68dB(A)。 1、 符合BSL-2實(shí)驗(yàn)室建設(shè)要求。2、 實(shí)驗(yàn)室門口帶鎖并可自動(dòng)關(guān)閉。實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)有可視窗。3、 有足夠的存儲(chǔ)空間擺放物品以方便使用。在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域處還有供長(zhǎng)期使用的存儲(chǔ)空間。4、 在實(shí)驗(yàn)室的工作區(qū)域處應(yīng)有存放個(gè)人衣物的條件。6、 在實(shí)驗(yàn)室所有的建筑內(nèi)配備高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗(yàn)證，以保證符合要求。7、 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)配備生物安全柜。8、 設(shè)洗眼設(shè)施，必要時(shí)應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。9、 考慮機(jī)械通風(fēng)，如使用窗戶自然

6、通風(fēng)，有防蟲紗窗。10、有可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明。必要時(shí)，重要設(shè)備如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等應(yīng)設(shè)備用電源。11、實(shí)驗(yàn)室出口有在黑暗是可明確辨認(rèn)的標(biāo)識(shí)。生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室 一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡(jiǎn)稱BSL1或P1 二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡(jiǎn)稱BSL2或P2 三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡(jiǎn)稱BSL3或P3 四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，簡(jiǎn)稱BSL4或P4實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)分級(jí)：實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)分級(jí)： BSL BSL：Biosafety levelBiosafety level；P P：Protect.Protect.a)生物安全防護(hù)水平為一級(jí)的實(shí)驗(yàn)室適用于操作在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微

7、生物；b)生物安全防護(hù)水平為二級(jí)的實(shí)驗(yàn)室適用于操作能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物；c)生物安全防護(hù)水平為三級(jí)的實(shí)驗(yàn)室適用于操作能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物；d)生物安全防護(hù)水平為四級(jí)的實(shí)驗(yàn)室適用于操作能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。 BSL-1 對(duì)健康成年人無已知治病作用的，如大腸桿菌等BSL-2 低致病性流感病毒、偽狂犬病病毒、致病性大腸桿菌、沙門氏菌等；B

8、SL-3 豬瘟病毒、狂犬病病毒、炭疽桿菌、艾滋病毒等BSL-4 炭疽桿菌、霍亂弧菌、埃博拉病毒、天花病毒等。塞拉利昂首都弗里敦中塞友好醫(yī)院的中國(guó)移動(dòng)實(shí)驗(yàn)室我國(guó)首個(gè)生物安全防護(hù)等級(jí)最高的實(shí)驗(yàn)室中國(guó)科學(xué)院武漢國(guó)家生物安全實(shí)驗(yàn)室（即武漢P4實(shí)驗(yàn)室） BSL1實(shí)驗(yàn)室：無須特殊選址，普通建筑物即可 BSL2實(shí)驗(yàn)室：在建筑物內(nèi)考慮設(shè)置通風(fēng)系統(tǒng) BSL3實(shí)驗(yàn)室：在建筑物內(nèi)自成隔離區(qū) BSL4實(shí)驗(yàn)室：遠(yuǎn)離城區(qū)，獨(dú)立建筑物，或在建筑 物中的獨(dú)立隔離區(qū)生物安全實(shí)驗(yàn)室選址要求5 5 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原則及基本要求5.1 實(shí)驗(yàn)室選址、設(shè)計(jì)和建造應(yīng)符合國(guó)家和地方環(huán)境保護(hù)和建設(shè)主管部門等的規(guī)定和要求。5.2 實(shí)驗(yàn)室的防火和安全

9、通道設(shè)置應(yīng)符合國(guó)家的消防規(guī)定和要求，同時(shí)應(yīng)考慮生物安全的特殊要求；必要時(shí)，應(yīng)事先征詢消防主管部門的建議。5.3 實(shí)驗(yàn)室的安全保衛(wèi)應(yīng)符合國(guó)家相關(guān)部門對(duì)該類設(shè)施的安全管理規(guī)定和要求。5.4 實(shí)驗(yàn)室的建筑材料和設(shè)備等應(yīng)符合國(guó)家相關(guān)部門對(duì)該類產(chǎn)品生產(chǎn)、銷售和使用的規(guī)定和要求。5.5 實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)應(yīng)保證對(duì)生物、化學(xué)、輻射和物理等危險(xiǎn)源的防護(hù)水平控制在經(jīng)過評(píng)估的可接受程度，為關(guān)聯(lián)的辦公區(qū)和鄰近的公共空間提供安全的工作環(huán)境，及防止危害環(huán)境。5.6 實(shí)驗(yàn)室的走廊和通道應(yīng)不妨礙人員和物品通過。5.7 應(yīng)設(shè)計(jì)緊急撤離路線，緊急出口應(yīng)有明顯的標(biāo)識(shí)。5.8 房間的門根據(jù)需要安裝門鎖，門鎖應(yīng)便于內(nèi)部快速打開。5.9 需

10、要時(shí)（如：正當(dāng)操作危險(xiǎn)材料時(shí)），房間的入口處應(yīng)有警示和進(jìn)入限制。5.10應(yīng)評(píng)估生物材料、樣本、藥品、化學(xué)品和機(jī)密資料等被誤用、被偷盜和被不正當(dāng)使用的風(fēng)險(xiǎn)，并采取相應(yīng)的物理防范措施。5.11應(yīng)有專門設(shè)計(jì)以確保存儲(chǔ)、轉(zhuǎn)運(yùn)、收集、處理和處置危險(xiǎn)物料的安全。5.12 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度、照度、噪聲和潔凈度等室內(nèi)環(huán)境參數(shù)應(yīng)符合工作要求和衛(wèi)生等相關(guān)要求。5.13 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)還應(yīng)考慮節(jié)能、環(huán)保及舒適性要求，應(yīng)符合職業(yè)衛(wèi)生要求和人機(jī)工效學(xué)要求。5.14 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有防止節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物進(jìn)入的措施。5.15 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)設(shè)施還應(yīng)考慮對(duì)動(dòng)物呼吸、排泄、毛發(fā)、抓咬、掙扎、逃逸、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)（如：染毒、醫(yī)學(xué)檢

11、查、取樣、解剖、檢驗(yàn)等）、動(dòng)物飼養(yǎng)、動(dòng)物尸體及排泄物的處置等過程產(chǎn)生的潛在生物危險(xiǎn)的防護(hù)。5.16 應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的種類、身體大小、生活習(xí)性、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡冗x擇具有適當(dāng)防護(hù)水平的、適用于動(dòng)物的飼養(yǎng)設(shè)施、實(shí)驗(yàn)設(shè)施、消毒滅菌設(shè)施和清洗設(shè)施等。5.17 不得循環(huán)使用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室排出的空氣。5.18 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)，如：空間、進(jìn)出通道、解剖室、籠具等應(yīng)考慮動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物福利的要求。5.19 適用時(shí)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)符合國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)的要求。整體布局l微生物實(shí)驗(yàn)室自成一區(qū)，與其他實(shí)驗(yàn)室分開，門口設(shè)有門禁，只有相關(guān)人員通過許可后才能進(jìn)入。l實(shí)驗(yàn)室應(yīng)明確區(qū)分輔助工作區(qū)和防護(hù)區(qū)，實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域外應(yīng)有存放備用物

12、品的條件。l防護(hù)區(qū)中直接從事高風(fēng)險(xiǎn)操作的工作間為核心工作間，人員應(yīng)通過緩沖間進(jìn)入核心工作間。l實(shí)驗(yàn)室輔助工作區(qū)應(yīng)至少包括監(jiān)控室和清潔衣物更換間；防護(hù)區(qū)應(yīng)至少包括緩沖間（可兼作脫防護(hù)服間）及核心工作間。實(shí)驗(yàn)室功能區(qū)域模塊化設(shè)計(jì)非實(shí)驗(yàn)室區(qū)域非實(shí)驗(yàn)室區(qū)域?qū)嶒?yàn)室區(qū)域?qū)嶒?yàn)室區(qū)域辦辦公公室室信信息息室室檔檔案案資資料料室室樣樣品品室室衛(wèi)衛(wèi)生生與與清清潔潔室室實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)輔輔助助室室洗滌、高壓、制水室洗滌、高壓、制水室實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備室實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備室試劑配制室試劑配制室實(shí)驗(yàn)材料儲(chǔ)備室實(shí)驗(yàn)材料儲(chǔ)備室培養(yǎng)觀察室培養(yǎng)觀察室淋浴、更衣室淋浴、更衣室藥物、緊急沖淋裝置藥物、緊急沖淋裝置溫度控制室溫度控制室菌種保管室菌種保

13、管室微生物實(shí)驗(yàn)室平面布局流向非實(shí)驗(yàn)室非實(shí)驗(yàn)室區(qū)域區(qū)域?qū)嶒?yàn)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備區(qū)域區(qū)域潔凈實(shí)驗(yàn)室潔凈實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域工作區(qū)域污染物處理污染物處理區(qū)域區(qū)域病原菌實(shí)驗(yàn)室病原菌實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域工作區(qū)域?qū)嶒?yàn)室受控區(qū)域?qū)嶒?yàn)室受控區(qū)域原則：原則：潔污流線分明、流程簡(jiǎn)捷、層次清析去污有潔污流線分明、流程簡(jiǎn)捷、層次清析去污有 效，能有效地切斷感染途徑，降低感染率。效，能有效地切斷感染途徑，降低感染率。 圍護(hù)結(jié)構(gòu)、裝潢裝飾u圍護(hù)結(jié)構(gòu)（包括墻體）應(yīng)符合國(guó)家對(duì)該類建筑的抗震要求和防火要求。u天花板、地板、墻間的交角應(yīng)易清潔和消毒滅菌。u實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)圍護(hù)結(jié)構(gòu)的所有縫隙和貫穿處的接縫都應(yīng)可靠密封。u實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)圍護(hù)結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面應(yīng)

14、光滑、耐腐蝕、防水，以易于清潔和消毒滅菌。u實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)的地面應(yīng)防滲漏、完整、光潔、防滑、耐腐蝕、不起塵。u實(shí)驗(yàn)室及設(shè)備間的高度應(yīng)滿足設(shè)備的安裝要求，應(yīng)有維修和清潔空間。 u在通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行狀態(tài)下，采用煙霧測(cè)試等目視方法檢查實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)圍護(hù)結(jié)構(gòu)的嚴(yán)密性時(shí)，所有縫隙應(yīng)無可見泄漏實(shí)驗(yàn)室主題框架為彩鋼板玻璃隔斷，顏色為啞白色。隔斷普通玻璃厚度為8MM,為防止沉積灰塵，窗料使用R25MM鋁合金圓弧壓線；所有二維連接處的內(nèi)側(cè)均使用R50MM鋁合金內(nèi)圓角，暴露在外的二維連接線的外側(cè)則用R100MM鋁合金外角連接；彩鋼板的三維連接處使用三維接點(diǎn)過度，而彩鋼板與墻角地面則用鋁合金槽連接。吊頂材料亦為

15、彩鋼板。微生物檢測(cè)室地面為環(huán)氧樹脂材料，具有無縫隙、耐腐蝕、平整、容易清洗的特征。地面地腳線用陰角鋁材裝飾，美觀且嚴(yán)密性好?？照{(diào)、通風(fēng)和凈化 為滿足BLS-2實(shí)驗(yàn)室溫濕度要求，宜配備機(jī)械空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)，有特殊要求的可增設(shè)設(shè)計(jì)要求，如增設(shè)凈化要求并按凈化要求進(jìn)行送回（排）風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)等。這方面，應(yīng)重點(diǎn)處理好以下幾個(gè)問題：1、可以采用帶循環(huán)風(fēng)的空調(diào)系統(tǒng)。如果涉及化學(xué)溶媒，感染性材料和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，則應(yīng)采用全排風(fēng)系統(tǒng)。2、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)各種設(shè)備的位置應(yīng)有利于氣流由“清潔”空間向“污染”空間流動(dòng)，最大限度減少室內(nèi)回流與漏流（生物安全柜一般應(yīng)置于室內(nèi)氣流最下游，即最遠(yuǎn)離送風(fēng)口處）。*生物安全柜的排風(fēng)不能代替室內(nèi)排風(fēng)。

16、潔凈室原理 新風(fēng)新風(fēng)新風(fēng)機(jī)新風(fēng)機(jī)送風(fēng)機(jī)送風(fēng)機(jī)潔凈室潔凈室（+）更更2（+）更更1走廊走廊送風(fēng)送風(fēng)回風(fēng)回風(fēng)+高效過濾器高效過濾器一級(jí)過濾器一級(jí)過濾器二級(jí)過濾器二級(jí)過濾器+排排風(fēng)風(fēng)機(jī)機(jī)1、潔凈度：無要求2、最小換氣次數(shù)：可開窗通風(fēng)3、與室外方向相鄰相通房間的壓差：無要求4、溫度：18275、相對(duì)濕度：30706、噪聲dB(A)：607、最低照度lx：300*上訴指標(biāo)是建立BLS-2實(shí)驗(yàn)室的最低要求，建設(shè)者可根據(jù)實(shí)際需要適當(dāng)提高相應(yīng)指標(biāo)，如潔凈度、壓差等。BSL-2 實(shí)驗(yàn)室對(duì)環(huán)境的要求潔凈實(shí)驗(yàn)室技術(shù)參數(shù)1、新風(fēng)量新風(fēng)量：要滿足潔凈室最小新風(fēng)量、滿足潔要滿足潔凈室最小新風(fēng)量、滿足潔凈室正壓要求的最小新

17、風(fēng)量、滿足每個(gè)人所需凈室正壓要求的最小新風(fēng)量、滿足每個(gè)人所需最小新風(fēng)量之和。最小新風(fēng)量之和。 保證供給潔凈室內(nèi)每人每小保證供給潔凈室內(nèi)每人每小時(shí)的新鮮空氣量不小于時(shí)的新鮮空氣量不小于40m40m3 3。2 2、壓差：潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間的壓差，應(yīng)不、壓差：潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間的壓差，應(yīng)不小于小于5Pa5Pa，潔凈區(qū)與室外的壓差，應(yīng)，潔凈區(qū)與室外的壓差，應(yīng)不小不小10Pa10Pa。潔凈實(shí)驗(yàn)室技術(shù)參數(shù)3 3、配電：有自備電源或不間斷電源供電，持續(xù)、配電：有自備電源或不間斷電源供電，持續(xù)保證潔凈實(shí)驗(yàn)室正常供電。保證潔凈實(shí)驗(yàn)室正常供電。4、空氣凈化級(jí)別表空氣凈化級(jí)別表等級(jí)等級(jí)靜態(tài)空氣潔凈度靜態(tài)空氣潔凈

18、度浮游菌浮游菌落菌量落菌量自凈自凈換氣換氣數(shù)數(shù)級(jí)別級(jí)別0.5m的微粒數(shù)的微粒數(shù)/m3（菌落數(shù)（菌落數(shù)/m3）(菌落數(shù)菌落數(shù)/0.05 ,30min)10035005110003500075210000350000150321-26排水含菌污水應(yīng)經(jīng)高溫高壓消毒或化學(xué)消毒后排放至市政污水排放公用系統(tǒng)。電氣設(shè)置1、應(yīng)設(shè)專用配電箱。2、電源宜設(shè)置漏電檢測(cè)報(bào)警裝置。3、應(yīng)有可靠的接電系統(tǒng)，其接地電阻不宜大于1。4、實(shí)驗(yàn)室入口應(yīng)有實(shí)驗(yàn)室工作狀態(tài)的文字式燈光訊號(hào)顯示。5、應(yīng)設(shè)緊急發(fā)光疏散指示標(biāo)志。消防建筑物耐火等級(jí)不低于二級(jí)。排水、電氣和消防特殊要求及安全設(shè)備1、在生物安全實(shí)驗(yàn)室的入口，應(yīng)明確標(biāo)示出操作所接

19、觸的病原體的名稱、危害等級(jí)、預(yù)防措施負(fù)責(zé)人姓名、緊急聯(lián)絡(luò)方式等，同時(shí)應(yīng)標(biāo)示出國(guó)際通用生物危險(xiǎn)符號(hào)，生物危險(xiǎn)符號(hào)的顏色應(yīng)為黑色，背景色為黃色。2、實(shí)驗(yàn)室門口帶鎖并可自動(dòng)關(guān)閉，并應(yīng)有可視窗。3、送、排風(fēng)管道應(yīng)隱蔽安裝，管道咬口縫均應(yīng)用膠密封，并應(yīng)有安全的現(xiàn)場(chǎng)更換條件。4、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有防止節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物進(jìn)入的措施。實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備 定義定義【隔離隔離】: :生物安全柜生物安全柜防止操作過程中含有危害性

20、或未知生物氣溶膠散逸的空氣凈化安全裝置。生物安全柜是最重要的安全設(shè)備，形成最主要的防護(hù)屏障。超凈工作臺(tái)不可替代生物安全柜使用！注意乳膠手套的使用實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備39實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)施設(shè)備BSL2：實(shí)驗(yàn)室設(shè)施(二級(jí)屏障) u 應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近實(shí)驗(yàn)室的出口處。u 在實(shí)驗(yàn)室門口處應(yīng)設(shè)存衣或掛衣裝置，可將個(gè)人服裝與實(shí)驗(yàn)室工作服分開放置。u 如果有可開啟的窗戶，應(yīng)安裝可防蚊蟲的紗窗。u 避免不必要的反光和強(qiáng)光。u 若操作刺激或腐蝕性物質(zhì)，應(yīng)在30m 內(nèi)設(shè)洗眼裝置，必要時(shí)應(yīng)設(shè)緊急噴淋裝置。u

21、應(yīng)設(shè)應(yīng)急照明裝置。u 供水和排水管道系統(tǒng)應(yīng)不滲漏，下水應(yīng)有防回流設(shè)計(jì)。u 應(yīng)配備適用的通訊設(shè)備。u 應(yīng)配備適當(dāng)?shù)南緶缇O(shè)備。u 實(shí)驗(yàn)室主入口的門、放置生物安全柜實(shí)驗(yàn)間的門應(yīng)可自動(dòng)關(guān)閉；實(shí)驗(yàn)室主入口的門應(yīng)有進(jìn)入控制措施。門鎖及門的開啟方向應(yīng)不妨礙室內(nèi)人員逃生。u 應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)配備洗眼裝置。u 應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室或其所在的建筑內(nèi)配備高壓蒸汽滅菌器或其他適當(dāng)?shù)南緶缇O(shè)備。u 應(yīng)在操作病原微生物樣本的實(shí)驗(yàn)間內(nèi)配備生物安全柜。u 應(yīng)按產(chǎn)品的設(shè)計(jì)要求安裝和使用生物安全柜。如果生物安全柜的排風(fēng)在室內(nèi)循環(huán)，室內(nèi)應(yīng)具備通風(fēng)換氣的條件；如果使用需要管道排風(fēng)的生物安全柜，應(yīng)通過獨(dú)立于建筑物其他公共通風(fēng)系統(tǒng)的管道排出

22、。微生物實(shí)驗(yàn)室常用儀器1、超凈工作臺(tái)2、培養(yǎng)箱/低溫培養(yǎng)箱3、天平4、微生物均質(zhì)器5、菌落計(jì)數(shù)器6、高壓滅菌鍋7、移液器8、微波爐/電爐9、低溫冰箱10、生物安全柜11、搖床12、純水裝置13、生物顯微鏡14、冷凍干燥機(jī)15、恒溫干燥箱16、恒溫水浴鍋17、離心機(jī)18、濁度計(jì)19、低溫冰箱20、離心機(jī)GB 27405-2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范附錄C 設(shè)備的校準(zhǔn)、維護(hù)、和性能驗(yàn)證 微生物實(shí)驗(yàn)室常用耗材1、酒精燈2、試管架3、量筒4、燒杯5、玻璃試管6、滅菌吸管7、剪刀8、鑷子9、脫脂棉10、紗布11、無菌均質(zhì)袋12、接種環(huán)13、過濾器14、凍存管15、離心管16、培養(yǎng)皿17、等等無菌室的管理無

23、菌室在使用前和使用后應(yīng)進(jìn)行有效的消毒。無菌室的消毒效果應(yīng)至少每?jī)芍茯?yàn)證一次。應(yīng)制定清潔、消毒、滅菌、使用和應(yīng)急處理程序。應(yīng)建立環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果，并歸檔保存。不符合規(guī)定時(shí)應(yīng)立即停止使用。微生物實(shí)驗(yàn)室消毒處理方法 無菌室紫外線消毒在室溫2025時(shí)，220V30W紫外燈垂直1.0m處的253.7nm紫外線輻射強(qiáng)度應(yīng)70W/cm2，低于此值時(shí)應(yīng)更換。適當(dāng)數(shù)量的紫外燈，確保平均每立方米應(yīng)不少于1.5W。紫外線消毒時(shí)，無菌室內(nèi)應(yīng)保持清潔干燥。在無人條件下，可采取紫外線消毒，作用時(shí)間應(yīng)30min，室內(nèi)濕度20或40、相對(duì)濕度60%時(shí)，應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)照射時(shí)間。用紫外線消毒物品表面時(shí)，應(yīng)使照射表面受到紫外線的直接照射，

24、且應(yīng)達(dá)到足夠的照射劑量。人員在關(guān)閉紫外燈后至少30min方可入內(nèi)操作。按照ISO18953的規(guī)定，評(píng)價(jià)紫外線的消毒與殺菌效果。 無菌室臭氧消毒封閉無菌室內(nèi)，無人條件下，采用20mg/m3濃度的臭氧，作用時(shí)間應(yīng)30min。消毒后臭氧濃度0.2mg/m3時(shí)方可入內(nèi)操作。按照GB/T18202的規(guī)定，檢測(cè)室內(nèi)臭氧濃度。無菌室空氣滅菌效果驗(yàn)證方法(沉降法)在消毒處理后與開展檢驗(yàn)活動(dòng)之前期間采樣。取樣位點(diǎn)的選擇應(yīng)基于人員流量情況和做試驗(yàn)的頻率。一般情況下，無菌室面積30m2時(shí)，從所設(shè)定的一條對(duì)角線上選取3點(diǎn)，即中心1點(diǎn)，兩端各距墻1m處各取1點(diǎn)；無菌室面積 30m2時(shí)，選取東、西、南、北、中5點(diǎn)，其中東

25、點(diǎn)、西點(diǎn)、南點(diǎn)、北點(diǎn)均距墻1m。無菌室(30m2)無菌室(30m2)無菌室( 30m2)采樣點(diǎn)設(shè)置圖 在所選位點(diǎn)，將平板計(jì)數(shù)瓊脂平板(90mm)或置于距地面80cm，開蓋暴露15min，然后，置36 1的恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h 1h。如果檢測(cè)某目標(biāo)霉菌或細(xì)菌，則可用選擇性瓊脂平板(如XLT-4、PALCAM等) 。確定平板上的菌落數(shù)，如大于所設(shè)定的風(fēng)險(xiǎn)值，應(yīng)分析原因，并采取適當(dāng)措施。 培養(yǎng)基與試劑的消毒與滅菌培養(yǎng)基通常應(yīng)采用高壓溫?zé)釡缇ǎ?21滅菌15min，特殊培養(yǎng)基按使用者的特殊要求進(jìn)行滅菌(如含糖培養(yǎng)基，115 滅菌20min)。部分培養(yǎng)基(如嗜鹽瓊脂培養(yǎng)基、膽硫乳培養(yǎng)基等)，只能煮沸滅

26、菌。對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基或添加物質(zhì)，應(yīng)采用膜過濾的方法過濾除菌。即用型培養(yǎng)基不需滅菌，應(yīng)參見相關(guān)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)或供應(yīng)商使用說明書，直接使用。 器具與設(shè)備的消毒滅菌 溫?zé)釡缇翰捎酶邏簻缇鳎?121滅菌20min，適用于玻璃器皿、移液器吸頭、塑料瓶等。按照GB15981的規(guī)定，評(píng)價(jià)高壓滅菌器的殺菌效果。干燥滅菌：采用干燥箱滅菌，160，滅菌2h，適用于玻璃器皿和不銹鋼器具等。 液體消毒劑消毒：使用適當(dāng)濃度自配或商業(yè)液體消毒劑對(duì)工作臺(tái)面、器具或設(shè)備表面進(jìn)行消毒?？砂凑誈B15981的規(guī)定，評(píng)價(jià)自配或商業(yè)液體消毒劑的消毒效果。可按照ISO18953的規(guī)定，監(jiān)測(cè)工作臺(tái)面、器具或設(shè)備表面的消毒效果。實(shí)驗(yàn)室廢棄物

27、的處理對(duì)于培養(yǎng)物及其污染的物品(如培養(yǎng)基、測(cè)試條、生物鑒定管、血清學(xué)鑒定用玻片、用過的移液器吸頭、細(xì)菌培養(yǎng)皿、注射器等)，應(yīng)使用適當(dāng)濃度的自配或商業(yè)液體消毒劑對(duì)其處理一定時(shí)間，或121高壓滅菌至少20min，或其他有效處理措施。將處理物倒入特殊標(biāo)志的垃圾袋內(nèi)，直接送到指定地點(diǎn)。部分消毒劑的特性消毒劑抗活性被滅活毒性真菌細(xì)菌分枝桿菌孢子親脂病毒 非親脂病毒蛋白質(zhì)天然物質(zhì)合成物質(zhì)硬水去垢劑皮膚眼睛肺G+G_次氯酸鹽+C+乙醇-+-+V+-+甲醛+a+-+戊二醛+b+NA+NA+碘載體+A+-注：+，良好；+，一般；+，輕微；-。零；V，取決于病毒；C，陽離子；A，陰離子；NA，不適用。參考文獻(xiàn) G

28、B 27405-2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品微生物檢測(cè) GB 50364-2011 生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范 GB 19489-2004生物安全通用要求 GB 15981 消毒與滅菌效果的評(píng)價(jià)方法與標(biāo)準(zhǔn) 管理要求1、組織 2、質(zhì)量體系 3、文件控制 4、檢測(cè)和校準(zhǔn)的分包 5、服務(wù)和供應(yīng)品的采購 6、對(duì)客戶的服務(wù) 7、投訴 8、不符合監(jiān)測(cè)工作的控制 9、糾正措施 10、預(yù)防措施 11、記錄的控制 12、內(nèi)部審核 13、管理評(píng)審 技術(shù)要求1、人員 2、設(shè)施與環(huán)境條件 3、方法的確認(rèn) 4、設(shè)備 5、測(cè)量溯源性 6、抽樣 7、測(cè)試和校準(zhǔn)物品的處置 8、檢測(cè)和校準(zhǔn)結(jié)果質(zhì)量的保證 9、結(jié)果報(bào)告GB

29、27405-2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品微生物檢測(cè)GB 19489-2004生物安全通用要求CANS-CL09 檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物領(lǐng)域的應(yīng)用說明62 人員 關(guān)鍵檢測(cè)人員應(yīng)至少具有微生物或相關(guān)專業(yè)?？埔陨系膶W(xué)歷，或者具有10年以上微生物檢測(cè)工作經(jīng)歷。63人員 實(shí)驗(yàn)室使用人員時(shí)，應(yīng)考慮有顏色視覺障礙的人員不能執(zhí)行某些涉及到辨色的試驗(yàn)。64組織實(shí)驗(yàn)室技術(shù)管理者中應(yīng)至少包括一名微生物技術(shù)負(fù)責(zé)人專業(yè)背景：密切相關(guān)的本科以上學(xué)歷檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)：3年以上微生物檢測(cè)的工作經(jīng)歷負(fù)責(zé)指導(dǎo)、培訓(xùn)檢驗(yàn)人員常規(guī)微生物實(shí)驗(yàn)65服務(wù)和供應(yīng)品的采購 對(duì)實(shí)驗(yàn)室自制的培養(yǎng)基即實(shí)驗(yàn)室制備各別成分培養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有培養(yǎng)基

30、質(zhì)量控制程序 包括培養(yǎng)基的性能測(cè)試、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的配制規(guī)范，以監(jiān)控基礎(chǔ)材料的質(zhì)量，確保不同時(shí)期制備的培養(yǎng)基性能的一致性和符合檢測(cè)的要求。對(duì)于關(guān)鍵培養(yǎng)基和試劑，要求進(jìn)行技術(shù)性驗(yàn)收，可參考ISO/TS 11133 或SN/T1538培養(yǎng)基制備指南。當(dāng)有足夠數(shù)據(jù)證明其可信性時(shí)，驗(yàn)收的技術(shù)性指標(biāo)可減少。培養(yǎng)基的質(zhì)量保證微生物要求 ： 微生物污染測(cè)試 （ 適用于即用型培養(yǎng)基 ） 生長(zhǎng)特性1 、 生長(zhǎng)率2 、 選擇性3 、 特異性注 ：參照GB 4789.28 2013錄D E培養(yǎng)基的質(zhì)量保證Miles-Misra法(定量方法)改進(jìn)的平板劃線法(半定量方法)平板接種觀察法(定性方法)上述均為固體培養(yǎng)基測(cè)試方

31、法,液體培養(yǎng)基定量和半定量測(cè)試方法也要通過固體培養(yǎng)基菌落計(jì)數(shù)技術(shù)才能得到結(jié)果。培養(yǎng)基的質(zhì)量保證對(duì)不含指示劑或選擇劑的培養(yǎng)基 ， 只需采用一株陽性菌株進(jìn)行測(cè)試 ； 對(duì)含有指示劑或選擇劑的培養(yǎng)基或試劑 ， 應(yīng)使用能證明其指示作用或選擇作用的菌株進(jìn)行試驗(yàn) ； 復(fù)合培養(yǎng)基 （ 如需要加入 添加成分 的培養(yǎng)基 ） 需要以下四種菌株進(jìn)行驗(yàn)證 ： 具有典型反應(yīng)特性的生長(zhǎng)良好的強(qiáng)陽性菌株 ； 弱陽性菌株 （ 對(duì)培養(yǎng)基中選擇劑等試劑敏感性強(qiáng)的菌株 ）； 不具有該特性的陰性菌株； 部分或完全受抑制的菌株培養(yǎng)基的質(zhì)量保證培養(yǎng)基的質(zhì)量保證-非選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)基的質(zhì)量保證-非選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)基的質(zhì)量保證培養(yǎng)基的質(zhì)量保證-非選擇性培養(yǎng)基大腸埃希氏菌大腸埃希氏菌ATCC 25922 金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌ATCC 6538ATCC 6538 枯草芽孢桿菌枯草芽孢桿菌ATCC 6633ATCC 6633 培養(yǎng)基的質(zhì)量保證-選擇性固體計(jì)數(shù)和分離培養(yǎng)基培養(yǎng)基的質(zhì)量保證培養(yǎng)基的質(zhì)量保證-選擇性固體計(jì)數(shù)和分離培養(yǎng)基副溶血性弧菌副溶血性弧菌ATCC 17802ATCC 17802 大腸埃希氏菌大腸埃希氏菌ATCC 2592