完整版優(yōu)選整合優(yōu)選同步選修1專題5課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段練解析版

1、選修1專題5課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒错憯U(kuò)增DNAt段練1 .在PCRT增前,需要將以下哪些物質(zhì)參加微量離心管中模板DNA模板RN® DNA解旋酶而t高溫的 DNA聚合酶引物PCR緩沖液脫氧核甘酸貯備液核甘酸貯備液A.B.C.D.【答案】A【解析】PCRT增需要的條彳是模板 DNA、耐高溫的DNAm合酶、引物、PCR緩沖液、脫氧核 甘酸貯備液,A正確.2 .復(fù)性溫度是影響 PCR特異性的較重要因素.變性后溫度快速冷卻至4060 C,可使引物和模板發(fā)生結(jié)合.PCR的結(jié)果可不考慮原來(lái)解旋開(kāi)的兩個(gè)DNA莫板鏈的重新結(jié)合,原因是A.引物是人工合成的B.引物為DNA聚合酶提供了 3'端C.參加

2、引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少D.模板鏈加熱解旋已經(jīng)變性不可能再次結(jié)合【答案】C【解析】PCR的結(jié)果可不考慮原來(lái)解旋開(kāi)的兩個(gè)DNA模板鏈的重新結(jié)合, 原因是引物為DNA聚合酶提供了3'端.故C正確.3.有關(guān)PCR術(shù)的說(shuō)法,不正確的選項(xiàng)是A. PC雙一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)B. PC叱術(shù)的原理是DNAZ鏈復(fù)制C.利用PCR術(shù)獲取目的基因的前提是要有一段目的基因的核甘酸序列D. PCRT增中必須有解旋酶才能解開(kāi)雙鏈DNA【答案】D【解析】A、PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒错?是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),A正確；B、PCR技術(shù)以解開(kāi)的雙鏈作為模版,利用

3、的原理是DNAM制,B正確；C、前提是要有一段目的基因的核甘酸序列以便合成引物,C正確；H雙鏈DNA莫版在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈DNA可見(jiàn)該過(guò)程不需要解旋酶解開(kāi)雙鏈DNA D錯(cuò)誤.4.有關(guān)PC破術(shù)的說(shuō)法,不正確的選項(xiàng)是A. PC雙一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)B. PC叱術(shù)的原理是DNAZ鏈復(fù)制C.利用PCR術(shù)獲取目的基因的前提是要有一段目的基因的核甘酸序列D. PCRT增中必須有解旋酶才能解開(kāi)雙鏈DNA【答案】D【解析】A、PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒错?是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),A正確；B、PCR技術(shù)以解開(kāi)的雙鏈作為模版,利用的原理是DNAM制

4、,B正確；C、前提是要有一段目的基因的核甘酸序列以便合成引物,C正確；H雙鏈DNA莫版在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈DNA可見(jiàn)該過(guò)程不需要解旋酶解開(kāi)雙鏈 DNA D錯(cuò)誤.5 .引物的作用是A.翻開(kāi)D.NA.雙鏈 B. 催化合成D.NA.子鏈C.提供模板D. 使D.NA.聚合酶能夠從引物的 3'端開(kāi)始復(fù)制【答案】D【解析】PCR技術(shù)的原理是D.NA.復(fù)制,而D.NA.的復(fù)制需要引物,其主要原因是D.NA.聚合酶只能從3'端延伸D.NA.鏈.因此,引物的作用是使D.NA.聚合酶能夠從引物的 3'端開(kāi)始復(fù)制.6 .復(fù)性溫度是影響 PCR特異性的較重要因素.變性后溫度冷卻至40

5、 C60C ,可使引物和模板發(fā)生結(jié)合.PCR的結(jié)果可不考慮原來(lái)解旋開(kāi)的兩個(gè)DNA莫板鏈的重新結(jié)合,原因不包括A.由于模板DNA比引物復(fù)雜得多B.引物和模板之間的碰撞結(jié)合時(shí)機(jī)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于模板互補(bǔ)鏈之間的碰撞C.模板鏈加熱解旋已經(jīng)變性不可能再次結(jié)合D.參加引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少【答案】C【解析】復(fù)性的原理是堿基互補(bǔ)配對(duì),解旋后DNA分子變成單鏈,堿基序列未發(fā)生改變,冷卻后仍可以進(jìn)行復(fù)性,C項(xiàng)錯(cuò)誤.7 .PCR過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)的 DNA復(fù)制過(guò)程相比,主要有兩點(diǎn)不同,它們是PCR過(guò)程需要的引物是人工合成的單鏈DNA或RNAPCR過(guò)程不需要DNAM合酶PCR過(guò)程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通過(guò)對(duì)反響溫

6、度的限制來(lái)實(shí)現(xiàn)的PCR過(guò)程中,DNA需要解旋,直接以雙鏈 DNW模板進(jìn)行復(fù)制A. B . C . D .【答案】C【解析】PCR±程需要的引物是人工合成的單鏈DNA正確；PCR±程需要而t高溫的 DNA聚合酶,錯(cuò)誤；PCR過(guò)程中DNA的解旋不依靠解旋酶, 而是通過(guò)對(duì)反響溫度的限制來(lái)實(shí)現(xiàn)的,正確；PCR過(guò)程中,DNA不依靠解旋酶解旋,而是利用高溫解旋,然后以單鏈DNW模板進(jìn)行復(fù)制,錯(cuò)誤.故 C正確.8 .PCR技術(shù)中以下說(shuō)法錯(cuò)誤的有幾項(xiàng)復(fù)性的目的是使原來(lái)分開(kāi)的DNA的兩條單鏈重新連接成雙鏈PCR技術(shù)是擴(kuò)增完整的 DNA子DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成 DNA只能從5'端

7、延伸DNA鏈DNA引物在細(xì)胞外可在 DN咪合酶的作用下合成A.有一項(xiàng)B .有二項(xiàng) C .有三項(xiàng) D .有四項(xiàng)【答案】D【解析】PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒错?PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù),原理是DNA復(fù)制,前提條件是要有一段目的基因的核甘酸序以便合成一對(duì)引物,條件還包括模板DNA四種脫氧核甘酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶Taq酶,具體過(guò)程有高溫變性：DNA解旋過(guò)程；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈 DNA±中溫延伸：合成子鏈.PCRT增中雙鏈DNAB開(kāi)不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi).故 D正確.9 .以下關(guān)于PCR的描述中,正確的選項(xiàng)是PCR是一種酶促反響引

8、物決定了擴(kuò)增的特異性擴(kuò)增DNAJ用了熱變性的原理擴(kuò)增的對(duì)象是氨基酸序列A. B . C . D .【答案】D【解析】PC敬術(shù)的卞念是PCRir稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒错?是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定 DNA勺核酸合成技術(shù), 原理是DNAT制,前提條件是要有一段目的基因的核甘酸序列以便合成一對(duì)引物,條件還包括模板 DNA四種脫氧核甘酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶Taq酶,具體過(guò)程有高溫變性：DNA解旋過(guò)程；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈 DNA±中溫延伸：合成子鏈.PCRT增中雙鏈DNAB開(kāi)不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi).10 .如圖表示細(xì)胞內(nèi) DNA復(fù)制和細(xì)胞外PCRT增兩個(gè)過(guò)程,兩反響過(guò)

9、程的條件中相同的是()A.模板 B. 原料 C. 酶 D. 能量供應(yīng)【答案】B【解析】選項(xiàng) A模板不同,胞內(nèi)DNA復(fù)制以整個(gè)DNA分子作為模板,PCR擴(kuò)增卻以一段目的 DNA作為模板. 選項(xiàng)B原料相同,均以4種脫氧核甘酸為原料.選項(xiàng) C酶不相同,胞內(nèi)DNAB旋需要解旋酶,延伸需要DNAm 合酶等；胞外PCRT增通過(guò)高溫解旋而不需要解旋酶 ,延伸只需熱穩(wěn)定的 Taq酶.選項(xiàng)D能量供應(yīng)不同,胞內(nèi) DNA復(fù)制過(guò)程由ATP提供能量,而PCRT增主要由外界供能.11 .重疊延伸PCR術(shù)是一種通過(guò)寡聚核甘酸鏈之間重疊的局部互相搭橋、互為模板,通過(guò)屢次PCRT增,從而獲得目的基因的方法.該技術(shù)在擴(kuò)增較長(zhǎng)片段

10、的DNA不同來(lái)源的DN*段拼接、基因的定點(diǎn)誘變等方面具有廣泛的應(yīng)用前景.右圖是利用重疊延伸PCR技術(shù)擴(kuò)增某目的基因的過(guò)程.其主要沒(méi)計(jì)思路是用具有互補(bǔ)配對(duì)片段的引物(圖中引物2、引物3),分別PCR獲得有重疊鏈的兩種 DNA片段,再在隨后的擴(kuò)增反響中通過(guò)重疊鏈的延伸獲得目的基因.結(jié)合所學(xué)知識(shí),分析以下問(wèn)題.弓14劣3為1ti的增函弓I物N弓物4引的3 弓t.4階置階段期斷段(1)引物中G+C勺含量影響著引物與模板 DNA吉合的穩(wěn)定性,引物中G+C勺含量越高,結(jié)合穩(wěn)定性 ,(2)在第一階段獲得兩種具有重疊片段DNA的過(guò)程中,必'須將引物 1、2和引物3、4置于不同反響系統(tǒng)中,這是由于(3)

11、假設(shè)在引物1和弓I物2組成的反響系統(tǒng)和引物 3、引物4組成的反響系統(tǒng)中均復(fù)制一次,共產(chǎn)生種雙鏈DN6子.(4)在引物1、引物2組成的反響系統(tǒng)中,經(jīng)第一階段形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過(guò) 次復(fù)制.(5)假設(shè)利用微生物擴(kuò)增該目的基因,其根本步驟包括:微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取目的基因.【答案】(1)越高(2)吸引物2和吸引物3存在互補(bǔ)配對(duì)片段,置于同一反響系統(tǒng)中它們會(huì)發(fā)生結(jié)合而失去作用(3) 3(4) 2 (5)基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞【解析】(1)由于一個(gè)C-C之間有三個(gè)氫鍵,而一個(gè) A-T之間有兩個(gè)氫鍵,所以引物中C+C含量越高,引物與模板DNA的結(jié)合就越穩(wěn)定.(2)從圖中

12、可以看出,引物 2和引物3相應(yīng)的堿基之間可以進(jìn)行配對(duì),所以如果將引物2和3放在一個(gè)反響系統(tǒng)中,那么會(huì)引起引物 2和3的失效.(3)兩個(gè)反響系統(tǒng)中各自形成兩種DNA子,但由于引物1和引物4形成兩個(gè)與原 DNAf同的DNA分子,所以含有引物1和4的DNA)!于同一種 DNA故總共形成三種 DN6子.(4)第一次復(fù)制形成的兩個(gè) DNA分子分別含有引物1和引物2,圖中第一階段形成的 DNA分子同時(shí)具有 引物1和引物2,圖示雙鏈DNA子至少要經(jīng)過(guò)第二次復(fù)制才能形成.(5)利用微生物擴(kuò)增該目的基因,需要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,而導(dǎo)入受體細(xì)胞首先要將目的基因與載體結(jié)合.12 .近十年來(lái),PCR術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)?/p>

13、反響) 成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室里的一種常規(guī)手段,其原理是利用DNA半保存復(fù)制,在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖),在很短的時(shí)間內(nèi),將DNAT增幾百萬(wàn)倍甚至幾十億倍, 使實(shí)驗(yàn)所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體.卜口熱至吶 降溫至56力麗至流)(*DNA樣品草桂DNA寡聚核昔酸引物源寓核昔酸連接 兩個(gè)完要的雙模板與DNA單倭形 到DMA單鏈上 鏈DNA分干成配對(duì)結(jié)構(gòu)(1)PCR技術(shù)能把某一 DNM段進(jìn)行擴(kuò)增,依據(jù)的原理是： .(2)加熱使DNA鏈翻開(kāi),這一步是翻開(kāi) 鍵,稱為 ,在細(xì)胞中是在 的作用 下使此鍵斷裂.(3)當(dāng)溫度降低時(shí),引物與模板 端結(jié)合,在 DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最

14、終合成2個(gè)DNA分子,此過(guò)程中參加四種脫氧核甘三磷酸的目的是 ,遵循的原那么(4) PCR技術(shù)的必要條件,除了模板、原料、ATR酶以外,至少還需要三個(gè)條件 .即：液體環(huán)境、適宜的 和.(5)PCR 一般要經(jīng)歷三十屢次循環(huán),每次循環(huán)可分為 、三個(gè)步驟.【答案】(1)DNA分子具有雙螺旋結(jié)構(gòu)和 DN酚子中堿基的互補(bǔ)配對(duì)(2)氫 解旋 解旋酶(3) 3' 既是原料,又能提供能量堿基互補(bǔ)配對(duì)原那么(4)溫度酸堿度(5)變性、退火和延伸【解析】(1) PCR技術(shù)又稱聚合酶鏈?zhǔn)椒错?是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA分子的核酸合成技術(shù). PCR技術(shù)能把某一 DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增,依據(jù)的原理是：DNA分子具有雙螺旋結(jié)構(gòu)和 DNA分子中堿基的互補(bǔ)配對(duì).(2)加熱使DNA雙鏈翻開(kāi),這一步是翻開(kāi)氫鍵,稱為解