慢性粒細(xì)胞白血病端粒酶活性檢測的臨床意義

1、慢性粒細(xì)胞白血病端粒酶活性檢測的臨床意義            【關(guān)鍵詞】  白血病,髓樣,慢性;端粒酶;診斷;預(yù)后    摘要目的 探討端粒酶活性檢測對慢性粒細(xì)胞白血病（CML）的臨床意義。方法 選取20例慢性期和10例急性轉(zhuǎn)化期（加速期或急變期）的CML病例，以良性血液病病人和正常人作對照，采用改良TRAP-銀染法及亞利恩凝膠成像系統(tǒng)分析檢測其骨髓標(biāo)本內(nèi)的端粒酶活性水平并隨訪。結(jié)果 良性血液病端粒酶陰性或低水平表達(dá);CML

2、慢性期端粒酶活性中等增高（ F=36.38，q=5.84，P 關(guān)鍵詞 白血病，髓樣，慢性;端粒酶;診斷;預(yù)后CLINICAL SIGNIFICANCE OF DETECTION OF TELOMERASE ACTIVITY IN CHRONIC MYELOID LEUKEMIA GUO XIAO-FANG， QIAO HONG， LU WEI （Department of Hematology， Qingdao University Medical College， Qingdao 266021， China） ABSTRACTObjectiveTo assess the clinical s

3、ignificance of telomerase activity in chronic myeloid leukemia（CML）. MethodsUsing modified TRAP-silver staining assay and Yalien analytical software， the telomerase activity in bone marrow sam-ples from 20 CML patients in chronic phase and 10 patients in acute transformation were measured. Patients

4、with benign hematopa-thy and non-hematopathy with normal bone marrow figures served as controls. ResultsIn benign hematopathy， telomerase ex-pression was negative or low; in chronic phase CML， telomerase activity increased moderately; in acute transformation， the activity increased significantly. Hi

5、gh telomerase activity suggested poor prognosis. ConclusionTelomerase activity is closely related to the occurrence and development of chronic myelocytic leukemia. The detection of telomerase activity can be used as a biological marker for diagnosis， monitoring， and prediction of the disease. KEY WO

6、RDSleukemia， myeloid， chronic; telomerase; diagnosis; prognosis端粒酶是一種特殊類型的反轉(zhuǎn)錄酶，可催化端粒DNA的合成與延伸，穩(wěn)定端粒長度，補(bǔ)償端粒的縮短。端粒酶的活化和端粒長度的穩(wěn)定被認(rèn)為是腫瘤細(xì)胞永生化必不可少的步驟。為了解慢性粒細(xì)胞白血?。–ML）不同階段端粒酶的活化情況及其臨床意義，我們采用改良的TRAP-銀染法檢測了30例CML病人骨髓單個核細(xì)胞（MNC）端粒酶活性水平，以探討端粒酶活性檢測對CML的臨床意義。1 資料與方法1.1 對象及分組 30例CML病人中，初診的慢性期病人20例，男10例，女10例，年齡2364歲，

7、平均（43.6± 12.1 ）歲;急性轉(zhuǎn)化期（加速期或急變期）病人10例，男7例，女3例，年齡1563歲，平均（35.2±16.2）歲。所有CML病人均經(jīng)染色體分析證實為Ph陽 性CML。另取25例良性血液病病人及15例正常人為對照。良性血液病包括缺鐵性貧血（IDA）14例，巨幼細(xì)胞貧血（MA）6例，特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）5例。對照組年齡為1860歲，平均（ 30.2± 13.1）歲。所有病人診斷均符合文獻(xiàn)1標(biāo)準(zhǔn)，正常對照均經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查排除血液病。1.2 材料 1.3 實驗方法 1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)以 x±s表示，采用t 檢驗及方差

8、分析。2 結(jié)果2.1 正常對照組端粒酶活性 經(jīng)凝膠成像分析系統(tǒng)分析，15例正常對照者骨髓端粒酶活性為0.74±0.57，無1例陽性或強(qiáng)陽性，均呈陰性或較低水平表達(dá)。2.2 良性血液病對照組端粒酶活性 良性血液病組骨髓細(xì)胞良性增殖，端粒酶活性為0.73±0.42，無端粒酶陽性或強(qiáng)陽性者。良性血液病組端粒酶活性與正常對照組比較不增高（ F=36.38，q=0.180.36，P >0.05）。MA、ITP、IDA端粒酶活性分別為0.85±0.54、0.81±0.61、0.64± 0.53，良性血液病之間端粒酶活性差異無顯著性（ q=0.090.

9、44，P >0.05）。2.3 CML病人端粒酶活性 CML慢性期及急性轉(zhuǎn)化期端粒酶活性分別為2.23±1.48、5.72±1.44，與正常對照組比較均升高（ F=36.38，q=5.84、16.33，P < 0.01）。CML急性轉(zhuǎn)化期端粒酶活性顯著增高，平均端粒酶活性為5.72，約為正常對照的67倍，陽性比例為80%（8/10），其中5例為強(qiáng)陽性。CML慢性期端粒酶活性中等增高，平均端粒酶活性為2.23，約為正常對照的23倍，陽性比例為35%（7/20），其中1例呈強(qiáng)陽性。呈高端粒酶活性者7例，呈低端粒酶活性者13例，兩者白細(xì)胞計數(shù)、紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白量、

10、血小板計數(shù)差異無顯著性（ t=0.1450.928，P >0.05）。見表1。隨訪7例慢性期端粒酶陽性者，發(fā)現(xiàn)1例端粒酶強(qiáng)陽性者于檢測1個月后即發(fā)生了急變，另6例端粒酶陽性者也均在615個月內(nèi)發(fā)生急變，預(yù)后差。表1 CML慢性期端粒酶高活性組與低活性組各指標(biāo)的比較（略） 3 討論 人類大部分的體細(xì)胞缺乏端粒酶活性，而大多數(shù)的原發(fā)性腫瘤和腫瘤細(xì)胞株及永生細(xì)胞系表達(dá)端粒酶活性，因此，端粒酶活性可能反映了一個高度增生的狀態(tài)3，是一種新的腫瘤標(biāo)記物，與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。本文結(jié)果顯示，CML慢性期和轉(zhuǎn)化期端粒酶活性水平均升高，而IDA、MA、ITP等良性血液病及正常人端粒酶均陰性或低水平表達(dá)。這表

11、明端粒酶活性與惡性克隆增殖關(guān)系密切，有助于良惡性血液病的鑒別診斷。而良性血液病之間端粒酶活性無顯著差異，說明端粒酶活性檢測不能用于良性血液病之間的鑒別。CML是臨床上一種發(fā)展較為緩慢的骨髓增生性疾病。目前臨床上尚無能預(yù)測CML病程進(jìn)展的實驗室指標(biāo)。DRUMMOND等4研究顯示，CML端粒酶基因的表達(dá)和端粒長度的穩(wěn)定可影響病程進(jìn) 3期郭小芳，喬宏，盧偉.慢性粒細(xì)胞白血病端粒酶活性檢測的臨床意義199展。本研究的實驗結(jié)果證實，在CML轉(zhuǎn)化期端粒酶陽性率高（80%），而在疾病的慢性階段端粒酶陽性率低（35%），約2/3的病人端粒酶活性陰性或低水平表達(dá)，轉(zhuǎn)化期端粒酶活性顯著高于慢性期，進(jìn)一步說明了端粒

12、酶活性升高可能是腫瘤發(fā)生過程中極為重要的一個環(huán)節(jié)，同時說明端粒酶活性與CML臨床分期、疾病進(jìn)展有著密切關(guān)系，可能是CML進(jìn)展過程中白血病細(xì)胞增殖的一個分子標(biāo)志，因此端粒酶活性可以作為一個有用的標(biāo)志物來評價CML病程的進(jìn)展。VERSTOVSEK等5研究顯示，CML慢性期病人端粒酶活性高者預(yù)后差，在短時間內(nèi)進(jìn)展為加速期或急變期。我們對病人隨訪發(fā)現(xiàn)，在慢性階段1例端粒酶強(qiáng)陽性病人于檢測后1個月即發(fā)生了急變，另6例端粒酶陽性病人也分別于檢測后615個月內(nèi)發(fā)生了急變。這與VERSTOVSEK等的報道也是基本相同的，說明端粒酶活化可能是CML惡性克隆轉(zhuǎn)化的標(biāo)志，可以作為CML的一個預(yù)后指標(biāo)。同時我們還發(fā)現(xiàn)

13、，CML病人的端粒酶活性水平與其白細(xì)胞計數(shù)、紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白量及血小板計數(shù)無關(guān)，因此端粒酶活性可能是一個新的獨立的預(yù)后指標(biāo)。端粒酶活化是細(xì)胞要取得永生化必不可少的步驟，因此，抑制端粒酶活性必將抑制腫瘤細(xì)胞的無限 制增長6。正常情況下絕大多數(shù)人體組織細(xì)胞端粒酶陰性，所以用抗端粒酶療法的副作用較小。端粒酶成為機(jī)制療法的一個新的有潛力的靶子7。我們對慢性粒細(xì)胞白血病的端粒酶研究為這一療法的臨床應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。參考文獻(xiàn)1 張 之南，沈悌.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)M. 第2版. 北京:北京科學(xué)出版社， 1998:258-267. 2 KIM N W， PIATYSZEK M A， PROWSE K

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