蟲草素檢測含量的影響因素研究進展

1、 蟲草素檢測含量的影響因素研究進展作者:郭宇森, 王雅玲, 趙軼男, 馬堃, GUO Yu-sen, WANG Ya-ling, ZHAO Yi-nan, MA Kun作者單位:大連民族學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,遼寧,大連,116600刊名: 廣西農(nóng)業(yè)生物科學(xué)英文刊名:JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE年,卷(期:2008,27(z1引用次數(shù):0次參考文獻(14條2005(613.夏敏反相高效液相色譜法測定蛹蟲草中蟲草素的含量期刊論文-淮陰工學(xué)院學(xué)報 2004(3相似文獻(10條1.期刊論文祁波蛹蟲草蟲草素和蟲草多糖綜合提取工藝

2、的研究-科技信息2009(20科學(xué)2009,37(8究為蛹蟲草固體培養(yǎng)基的深加工和再利用以及開發(fā)新的蟲草素資源提供理論依據(jù)和技術(shù)指導(dǎo).3.學(xué)位論文許曉煒蛹蟲草固體培養(yǎng)基中蟲草多糖、蟲草素提取分離工藝研究2006固體培養(yǎng)方式目前已被廣泛用于蛹蟲草的培養(yǎng),蛹蟲草固體培養(yǎng)基中富含菌絲,但因沒有成熟的工藝對其中的有效成份進行提取分離,目前在培養(yǎng)結(jié)束后固體培養(yǎng)基都被作為廢物棄掉,不僅造成資源的浪費,對環(huán)境也造成一定的影響.隨著蛹蟲草培養(yǎng)產(chǎn)業(yè)規(guī)模的不斷擴大,對蛹蟲草固體培養(yǎng)基如何加工、利用已成為一個迫切需要解決的問題. 本文根據(jù)蛹蟲草固體培養(yǎng)基有效成份的理化性質(zhì),以蛹蟲草固體培養(yǎng)基為原料,對影響有效成份提

3、取的工藝條件進行了研究,通過對提取溫度、提取次數(shù)、提取時間、料液比應(yīng)用正交實驗設(shè)計,最終確定用水80提取三次,120min/次,料液比為1:15的工藝條件為蟲草多糖最佳提取工藝條件,并分別采用Sevage法、改良的Sevage法和澄清劑法去除蟲草多糖粗品中蛋白,以及DEAE纖維素和葡聚糖凝膠柱層析對蟲草多糖進行分離純化.通過對溶劑濃度、提取次數(shù)、提取時間、料液比進行正交實驗設(shè)計,最終確定用75乙醇超聲波提取三次,40min/次,料液比為1:20的工藝條件為蟲草素最佳提取工藝條件,并分別采用陰、陽離子交換樹脂柱層析和硅膠柱層析對蟲草素進行分離純化.通過采用苯酚一硫酸法和HPLC對提取出的蟲草多糖

4、和蟲草素進行含量測定,確定了不同純化方法之間的差異. 對蟲草多糖和蟲草素提取的工藝條件和路線進行分析,結(jié)合生產(chǎn)實際,在小試確定的提取、純化方法基礎(chǔ)上進行以蛹蟲草固體培養(yǎng)基為原料提取蟲草多糖和蟲草素的放大實驗,確定了綜合提取的工藝條件和路線,即采用熱水回流提取法進行初提,用醇沉法分離蟲草多糖并以Sevage法除蛋白;以乙醚萃取,用陰離子交換樹脂層析法分離、純化蟲草素的工藝路線.經(jīng)測定,除蛋白后的蟲草多糖的純度均大于50,蟲草素精品的純度均大于97. 本課題來源于生產(chǎn)實際,研究結(jié)論為相關(guān)企業(yè)對蛹蟲草固體培養(yǎng)基的加工、利用提供了技術(shù)依據(jù).本文用采用不同的碳氮源(玉米淀粉、大米粉、奶粉、豆餅粉組合的培

5、養(yǎng)基,液體發(fā)酵蛹蟲草,以及不同的氮源固體栽培蛹蟲草,采用高效液相色譜法檢測菌絲體、子實體、以及不同氮源固體栽培后的培養(yǎng)基殘基中腺苷和蟲草素的含量。結(jié)果表明,在所設(shè)定的色譜條件下,腺苷和蟲草素可以得到很好的分離,R>1.5,并且在一定濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系;蛹蟲草人工固、液體發(fā)酵菌絲體以及子實體和殘基中都含有含有腺苷和蟲草素,且蟲草素含量高于腺苷的含量。液體發(fā)酵時,玉米淀粉和奶粉組合的培養(yǎng)基發(fā)酵蛹蟲草所得蟲草素和腺苷最高,含量分別可以達到3.229mg·g<'-1>和1.902mg·g-1。在所有組合中用玉米淀粉和奶粉的培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)蛹蟲草,可

6、以獲得最大的生物量,其轉(zhuǎn)化率分高達75.73%。固體栽培時,蛋白胨和麩皮是很理想的氮源,子實體中腺苷和蟲草素的含量分別高達1.593mg·g<'-1>和9.171mg·g<'-1>,1.980mg·g<'-1>和8.932mg·g<'-1>。WENG Liang.YU Lian-huai.WANG Shuai.SHEN Fang.JIANG Hong以蟲草素和腺苷含量為指標優(yōu)化蛹蟲草人工栽培-江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報2005,21(4為提高人工栽培蛹蟲草中主要活性成分的含量,以蟲草素和腺

7、苷含量為檢測指標進行蛹蟲草優(yōu)化栽培研究,在采用Cm-1菌株、以20%豆粕為氮源、水料比為1.4的條件下,可獲得子實體產(chǎn)量為每瓶42.2 g、子實體中蟲草素含量為 4.46 mg·g-1的栽培效果,蟲草素含量超過了以蠶蛹為寄主的蛹蟲草(2.83 mg·g-1,表明植物蛋白完全可以用作栽培蛹蟲草的氮源,同時證實采收子實體后的培養(yǎng)基中仍含有大量蟲草素,可作為提取蟲草素的原料.6.學(xué)位論文毛先兵深層培養(yǎng)藥用蕈菌蛹蟲草生產(chǎn)蟲草素的研究2004蛹蟲草(Cordyceps militaris是我國傳統(tǒng)的名貴藥用蕈菌(medicinal mushroom,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明蟲草素(cordy

8、cepin是其重要的生物活性成分,大規(guī)模深層培養(yǎng)蛹蟲草生產(chǎn)蟲草素具有重要的應(yīng)用價值.本論文首先通過搖瓶培養(yǎng),優(yōu)化了深層培養(yǎng)蛹蟲草生產(chǎn)蟲草素的碳源和氮源,實驗結(jié)果表明,葡萄糖和蛋白胨最有利于蟲草素合成.進一步通過中心組合設(shè)計和響應(yīng)面分析,優(yōu)化了碳氮比.結(jié)果在優(yōu)化的培養(yǎng)基(葡萄糖和蛋白胨濃度分別為42.0 g/L和15.8 g/L中,蟲草素產(chǎn)量達到345.4±8.5 mg/L,比對照提高了35%.本論文詳細研究了氧供應(yīng)對蛹蟲草細胞生長和蟲草素生產(chǎn)的影響,揭示氧供應(yīng)是蛹蟲草生產(chǎn)蟲草素培養(yǎng)過程的一個重要因子.本研究所獲得的結(jié)論有利于大規(guī)模培養(yǎng)蛹蟲草高效率生產(chǎn)蟲草素,所提出的NH<,4&

9、gt;<'+>補加策略、低培養(yǎng)液pH環(huán)境的重要性以及兩階段DO控制策略可能對其它蕈菌的深層培養(yǎng)具有借鑒作用.ZHONG Yun-jun用蛹蟲草固體發(fā)酵法高效生產(chǎn)蟲草素的研究-中國中藥雜志2008,33(19目的:研究并建立用蛹蟲草固體發(fā)酵方式高效生產(chǎn)蟲草素的最佳方法.方法:通過對不同菌株在固體發(fā)酵過程中各生長期的蟲草素含量變化進行跟蹤測定以及正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計、正交試驗設(shè)計等方法塒影響蟲草素產(chǎn)量和含量的各影響因子(包括菌種、生長期、培養(yǎng)基配方和環(huán)境條件等進行系統(tǒng)優(yōu)化.結(jié)果:JF-1是蟲草素生產(chǎn)的最佳菌株,現(xiàn)蕾期是收獲提取蟲草素的最佳時期;最佳的培養(yǎng)基配方為水料比1.1:1(m

10、L·g-1,營養(yǎng)水中酵母膏、蛋白胨、葡萄糖的用量分別為22.6,6.0,25.4 g·L-1,營養(yǎng)水pH 6.6;最佳的環(huán)境條件為:光照強度4 400 lx,每日光照時間18 h,溫度1822.結(jié)論:用以上方法固體發(fā)酵生產(chǎn)蟲草素,經(jīng)過約13 d的培養(yǎng),培養(yǎng)基中蟲草素達到0.60%,比傳統(tǒng)液體發(fā)酵方法的最高產(chǎn)量高近2倍,并且培養(yǎng)時間縮短2 d.2003,33(510.學(xué)位論文王軍蛹蟲草固體栽培及下腳料深加工工藝研究2009本研究課題深入而系統(tǒng)地研究了蛹蟲草固體栽培技術(shù)和蛹蟲草栽培下腳料中蟲草多糖和蟲草素的提取純化工藝、檢測方法、結(jié)構(gòu)鑒定以及蟲草多糖和蟲草素綜合提取的工藝路線,

11、得到了滿意的結(jié)果。 1、蛹蟲草固體栽培需從優(yōu)良菌種的選擇、培養(yǎng)料的科學(xué)配制以及栽培的精心管理等幾個環(huán)節(jié)加以注意,方可獲得優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)。 2、蛹蟲草栽培下腳料中蟲草多糖的提取,熱水提取法優(yōu)于超聲波水提法;蟲草素的提取,超聲波酒精提取法略優(yōu)于熱水提取法、酒精熱回流提取法和超聲波水提取法。 3、通過對影響蟲草多糖和蟲草素提取率的單因素進行分析,并通過四因素三水平的正交實驗分析,最終確定用水80熱回流提取3次,90min/次,料液比為1:20的工藝條件為提取蟲草多糖的最佳工藝條件;確定用75%乙醇超聲波提取三次,20min/次,料液比為1:10的工藝條件為提取蟲草素的最佳工藝條件。 4、對影響蟲草多糖與蟲草素提取的工藝條件進行分析并進行綜合利用提取放大試驗得到綜合提取工藝路線。結(jié)論為從蛹蟲草栽培下腳料中綜合提取蟲草多糖和蟲草素時應(yīng)用20倍量的水,80熱回流提取3次,每次2小時,提取液經(jīng)醇沉法將蟲草多糖和蟲草素分開,采用Sevage法除去蟲草多糖中的蛋白獲得蟲草多糖粗品;將醇沉上清液加入1%活性炭于60水浴中脫色30min,得蟲草素提取液,在用陰離子交換樹脂層析法分離、純化蟲草素得蟲草素精品。經(jīng)苯酚-硫酸法和HPLC法測定,除蛋白工序后得到的蟲草多糖收率均大于5.28%,純度