彎曲菌屬與螺桿菌屬

1、第十六章彎曲菌屬 與螺桿菌屬第一節(jié) 彎曲菌屬是一類呈逗點狀或是一類呈逗點狀或s 形的形的G- 菌，廣泛分布菌，廣泛分布于動物界，其中有些可引起動物與人類的于動物界，其中有些可引起動物與人類的腹瀉、胃腸炎和腸道外感染等疾病。對人腹瀉、胃腸炎和腸道外感染等疾病。對人致病有空腸彎曲菌、大腸彎曲菌、胎兒彎致病有空腸彎曲菌、大腸彎曲菌、胎兒彎曲菌等，其中空腸彎曲菌是腹瀉的常見病曲菌等，其中空腸彎曲菌是腹瀉的常見病原菌。原菌。 該菌借助于鞭毛和外膜蛋白與空腸上皮細(xì)胞該菌借助于鞭毛和外膜蛋白與空腸上皮細(xì)胞結(jié)合，侵入生長繁殖，產(chǎn)生腸毒素、細(xì)胞毒結(jié)合，侵入生長繁殖，產(chǎn)生腸毒素、細(xì)胞毒素和內(nèi)毒素等物質(zhì)，引起腸炎和

2、腸道外感染。素和內(nèi)毒素等物質(zhì)，引起腸炎和腸道外感染。 腹瀉是空腸彎曲菌感染最常見的臨床表現(xiàn)，腹瀉是空腸彎曲菌感染最常見的臨床表現(xiàn)，轉(zhuǎn)為粘液膿血樣便，甚至血便。有發(fā)熱腹痛、轉(zhuǎn)為粘液膿血樣便，甚至血便。有發(fā)熱腹痛、惡心不適等癥狀?？稍趷盒牟贿m等癥狀。可在1 1周內(nèi)消退，周內(nèi)消退，2020患者患者癥狀可持續(xù)癥狀可持續(xù)1-31-3周。周。微生物特性微生物特性1.形態(tài)結(jié)構(gòu)形態(tài)結(jié)構(gòu) G-菌體彎曲呈逗點。無芽孢有鞭菌體彎曲呈逗點。無芽孢有鞭 毛。運(yùn)動活潑，呈投鏢樣為其特征。毛。運(yùn)動活潑，呈投鏢樣為其特征。2.基因組及抗原成分基因組及抗原成分 基因組大小僅為大腸桿基因組大小僅為大腸桿 菌的菌的35； DNA的

3、的G+C為為30-38mol。 按按O抗原不同分為抗原不同分為65個血清型。個血清型。3.培養(yǎng)特征培養(yǎng)特征 為微需氧菌，最佳氣體環(huán)境通常為微需氧菌，最佳氣體環(huán)境通常 為含為含5氧氣、氧氣、10二氧化碳及二氧化碳及85氮氣。氮氣。4.抵抗力不強(qiáng)，在室溫下可迅速死亡。對熱抵抗力不強(qiáng)，在室溫下可迅速死亡。對熱 敏感，標(biāo)本在敏感，標(biāo)本在4冰箱可保存冰箱可保存3周。周。微生物檢驗微生物檢驗 1.糞便直接鏡檢，糞便直接鏡檢，G-呈弧形、呈投鏢式運(yùn)動。呈弧形、呈投鏢式運(yùn)動。2.核酸檢測糞便彎曲菌核酸檢測糞便彎曲菌flaA基因，體外擴(kuò)增基因，體外擴(kuò)增 空腸大腸彎曲菌為空腸大腸彎曲菌為13kb。3.分離培養(yǎng)分離

4、培養(yǎng) 糞便等標(biāo)本可接種選擇平板進(jìn)行糞便等標(biāo)本可接種選擇平板進(jìn)行 分離，置微氧環(huán)境培養(yǎng)?？漳c大腸彎曲生分離，置微氧環(huán)境培養(yǎng)。空腸大腸彎曲生 長溫度為長溫度為43，培養(yǎng)，培養(yǎng)24h可觀察為灰白濕潤、可觀察為灰白濕潤、 扁平邊緣不整的蔓延生長的菌落。扁平邊緣不整的蔓延生長的菌落。 鑒定要點鑒定要點1.為氧化酶陽性，為氧化酶陽性，G-菌體彎曲或呈菌體彎曲或呈S型。型。2.萘啶酸、頭孢噻吩敏感試驗：空腸彎曲菌萘啶酸、頭孢噻吩敏感試驗：空腸彎曲菌 對萘啶酸敏感、噻吩耐藥；胎兒彎曲菌對對萘啶酸敏感、噻吩耐藥；胎兒彎曲菌對 萘啶酸耐藥、對頭孢噻吩敏感。萘啶酸耐藥、對頭孢噻吩敏感。3.3.馬尿酸鹽試驗：有助于鑒

5、定空腸彎曲菌空馬尿酸鹽試驗：有助于鑒定空腸彎曲菌空 腸亞種，凡試驗陽性、在腸亞種，凡試驗陽性、在4242條件下生長，條件下生長， 氧化酶陽性且與鏡檢形態(tài)相符者，即可報氧化酶陽性且與鏡檢形態(tài)相符者，即可報 告為空腸彎曲菌空腸亞種。告為空腸彎曲菌空腸亞種。4.4.醋酸吲哚水解試驗：空腸彎曲菌為陽性，醋酸吲哚水解試驗：空腸彎曲菌為陽性， 胎兒彎曲菌為陰性。胎兒彎曲菌為陰性。5.用抗體包被的乳膠顆粒，遇到相應(yīng)的彎曲菌用抗體包被的乳膠顆粒，遇到相應(yīng)的彎曲菌時便可出現(xiàn)反應(yīng)?？捎糜阼b定空腸大腸彎時便可出現(xiàn)反應(yīng)?？捎糜阼b定空腸大腸彎曲菌，具有高度敏感性和特異性。曲菌，具有高度敏感性和特異性。6.DNA探針：探

6、針：DNA-DNA雜交可以用于鑒別大雜交可以用于鑒別大腸彎曲菌與馬尿酸水解陰性的空腸彎曲菌、腸彎曲菌與馬尿酸水解陰性的空腸彎曲菌、區(qū)別空腸彎曲菌和其他的彎曲菌。區(qū)別空腸彎曲菌和其他的彎曲菌。第二節(jié)第二節(jié) 螺桿菌屬螺桿菌屬 n幽門螺桿菌與萎縮性胃炎、胃、十二指腸潰幽門螺桿菌與萎縮性胃炎、胃、十二指腸潰瘍和胃癌等疾病相關(guān)。瘍和胃癌等疾病相關(guān)。nHP感染非常普遍，平均世界人口的感染非常普遍，平均世界人口的50被感被感染。染。 三、微生物特性三、微生物特性1.G-,細(xì)長彎曲呈螺形。一端或兩端有多根帶鞘細(xì)長彎曲呈螺形。一端或兩端有多根帶鞘 鞭毛，運(yùn)動活潑有動力。鞭毛在定居中起錨鞭毛，運(yùn)動活潑有動力。鞭毛

7、在定居中起錨 住作用。住作用。2.基因組較小，約基因組較小，約167106bp，DNAG+C百百分含量為分含量為37mol，較重要的基因有脲酶基因較重要的基因有脲酶基因 urea、ureB、ureC，細(xì)胞毒素相關(guān)基因細(xì)胞毒素相關(guān)基因cagA， 空泡毒素基因空泡毒素基因vacA。脲酶基因定位在脲酶基因定位在DNA的的 42kb區(qū)段內(nèi)。區(qū)段內(nèi)。3. HP菌株間具有共同抗原。與空腸彎曲菌菌體菌株間具有共同抗原。與空腸彎曲菌菌體 外膜蛋白無交叉免疫反應(yīng)，但其鞭毛蛋白具外膜蛋白無交叉免疫反應(yīng)，但其鞭毛蛋白具 有明顯的交叉反應(yīng)。有明顯的交叉反應(yīng)。3.3.培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性1.HP為微需氧菌，在為微需氧菌，在

8、5O2、10C02、 85N2的中生長良好。最適溫度為的中生長良好。最適溫度為 37, 25不生長，不生長，42少數(shù)生長，少數(shù)生長， 此與彎曲菌屬不同。此與彎曲菌屬不同。2.HP對濕度對濕度(85%以上以上)要求較高，營養(yǎng)要要求較高，營養(yǎng)要求較高需含血液才能生長，常用血瓊脂求較高需含血液才能生長，常用血瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)基,需經(jīng)需經(jīng)72h才長出菌落，故在培養(yǎng)才長出菌落，故在培養(yǎng)基中添加多粘菌素基中添加多粘菌素B(250U/ L)、萬古霉萬古霉素素(6mgL)、兩性霉素兩性霉素(2mgL)、TMP(5mgL)等以抑制雜菌生長。等以抑制雜菌生長。3.HP的菌落形態(tài)為圓形孤立的小菌落，的菌落形態(tài)為圓形孤

9、立的小菌落，無色半透明呈露滴狀。無色半透明呈露滴狀。4.理化性狀理化性狀nHP生化反應(yīng)不活躍，不能利用糖類。生化反應(yīng)不活躍，不能利用糖類。nHP具有大量高活力的胞外脲酶，故脲酶活性具有大量高活力的胞外脲酶，故脲酶活性的測定可作為的測定可作為HP的快速診斷方法。的快速診斷方法。n還能產(chǎn)生氧化酶、觸酶、堿性磷酸酶、還能產(chǎn)生氧化酶、觸酶、堿性磷酸酶、-谷谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、亮氨酸胺肽酶和氨酰轉(zhuǎn)肽酶、亮氨酸胺肽酶和DNA酶等。酶等。 四、微生物檢驗四、微生物檢驗 1.分離培養(yǎng)分離培養(yǎng) 宜用選擇培養(yǎng)基，需新鮮配制，宜用選擇培養(yǎng)基，需新鮮配制， 傾注平皿后應(yīng)密封保存于一定濕度的容器一傾注平皿后應(yīng)密封保存于一定濕

10、度的容器一 周內(nèi)用完。注意將標(biāo)本的粘膜面在培養(yǎng)基上周內(nèi)用完。注意將標(biāo)本的粘膜面在培養(yǎng)基上 反復(fù)涂擦接種。反復(fù)涂擦接種。2培養(yǎng)在含有培養(yǎng)在含有5O2、10C02、85N2的微的微 需氧和需氧和98以上濕度的環(huán)境培養(yǎng)。以上濕度的環(huán)境培養(yǎng)。 3鑒定鑒定 根據(jù)形態(tài)和染色性根據(jù)形態(tài)和染色性, 菌落特征；菌落特征； 37 生長，生長，43、25不生長；氧化酶和過氧化不生長；氧化酶和過氧化 氫酶均陽性、脲酶強(qiáng)陽性；對萘啶酸耐藥、氫酶均陽性、脲酶強(qiáng)陽性；對萘啶酸耐藥、 頭孢噻吩敏感；在頭孢噻吩敏感；在1甘油和甘油和1膽鹽中均不膽鹽中均不 生長。生長。 4.4.快速脲酶試驗快速脲酶試驗是是種簡便實用、快速敏感、

11、較為準(zhǔn)確可靠的種簡便實用、快速敏感、較為準(zhǔn)確可靠的診斷方法。脲酶試劑由尿素、基質(zhì)、酚紅指示診斷方法。脲酶試劑由尿素、基質(zhì)、酚紅指示劑等組成劑等組成, , 將小塊的活組織塊放人裝有尿素培將小塊的活組織塊放人裝有尿素培養(yǎng)基瓶內(nèi)，如培養(yǎng)基由黃變?yōu)榧t色為陽性，提養(yǎng)基瓶內(nèi)，如培養(yǎng)基由黃變?yōu)榧t色為陽性，提示該菌脲酶已將尿素分解。示該菌脲酶已將尿素分解。 5.5.抗體檢測抗體檢測用血清學(xué)方法檢測患者體內(nèi)的抗用血清學(xué)方法檢測患者體內(nèi)的抗HP抗體抗體(IgG、IgM和和IgA)系最常用的無創(chuàng)傷性診斷系最常用的無創(chuàng)傷性診斷HP感染的感染的方法。方法。目前已有補(bǔ)體結(jié)合試驗、膠乳凝集試驗及酶聯(lián)目前已有補(bǔ)體結(jié)合試驗、膠乳凝集試驗及酶聯(lián)免疫吸附試驗免疫吸附試驗(ELISA)等，而以等，而以ELISA應(yīng)用最應(yīng)用最為廣泛，現(xiàn)有商品化的試劑盒，可用于檢測患為廣泛，現(xiàn)有商品化的試劑盒，可用于檢測患者血清中者血清中HP的菌體抗體或脲酶抗體。的菌體抗體或脲酶抗體。6.6.1313C C或或1414C C標(biāo)記尿素呼吸試驗標(biāo)記尿素呼吸