PCNA、T和Th淋巴細胞在腎透明細胞癌的表達與預(yù)后的關(guān)系

1、    PCNA、T和Th淋巴細胞在腎透明細胞癌的表達與預(yù)后的關(guān)系        摘要應(yīng)用免疫組化方法檢測增殖細胞核抗原(PCNA)、T淋巴細胞(T)和輔助T淋巴細胞(Th)在52例腎透明細胞癌中的陽性表達，分析其與預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果:PCNA指數(shù)(PCNA-LI)與腫瘤核分級存在相關(guān)性，與分期無關(guān);PCNA-LI20組的生存率明顯低于<20組(P<0.05)。T淋巴細胞標記指數(shù)(T-LI)10組生存率明顯高于<10組（P<0.05);輔助T淋巴細胞標記

2、指數(shù)(Th-LI)10及Th-LI<10兩組間生存率無顯著性差異(P>0.05)，T-LI、Th-LI與腫瘤分期、核分級無相關(guān)性。結(jié)論：PCNA-LI、T-LI可以作為腎透明細胞癌的預(yù)后指標，Th-LI與預(yù)后無相關(guān)性。關(guān)鍵詞腎腫瘤預(yù)后免疫組化PCNA, T and Th lymphocyte expression in the prognosis of renal clear cell carcinomaZhang Guan,Hou Shukun,Li Ying,et al.Department of Urology, the Second Affiliated Hospital,

3、 Xuzhou Medical College, Xuzhou 221006AbstractProliferating nuclear cell antigen (PCNA)、T and Th lymphocyte expression were assayed immunohistochemical in 52 cases of renal clear cell carcinoma.The result revealed that PCNA-LI was related to the tumor grade but not to the tumor stage.Patients with P

4、CNA-LI above 20% had a poor survival than those under 20% (P0.05).On the other hand,patients with T-LI above 10% had a better survival than those under 10% (P0.05).No difference in survival has been observed in those with Th-LI were not related to the tumor stage and tumor grade.It was concluded tha

5、t a high T-LI and a low PCNA-LI denoted a better prognosis in patients with renal clear cell carcinoma.Key wordsKidney neoplasmsPrognosisImmunohistochemistry作者單位：221006 徐州醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院泌尿外科(張冠)；北京醫(yī)科大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院泌尿外科(侯樹坤、張小東、李鷹、朱積川、王曉峰)；北京醫(yī)科大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院泌尿外科(陳忠新)我們用免疫組化方法(LSAB)，對增殖細胞核抗原(PCNA)、T淋巴細胞(T)和輔助T淋巴細胞(Th)

6、在腎透明細胞癌中的表達進行了分析，研究其與預(yù)后的關(guān)系。材料和方法一、材料19891994年腎透明細胞癌標本52例。所有患者只接受了腎癌根治術(shù)，未經(jīng)放療及化療。組織經(jīng)10福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，每個標本作連續(xù)切片，制成5m厚度備染。年齡2272歲，平均51歲，男女比例3.5:1。根據(jù)Robson分期標準:R1 17例、R2 16例、R3 15例、R4 4例;腫瘤核分級根據(jù)Fuhrman核分級標準:G1 3例、G2 39例、G3 9例、G4 1例。隨訪時間862個月（平均34個月），14例死亡。二、免疫組化方法應(yīng)用免疫組化抗生物素蛋白鏈菌素結(jié)合物法(LSAB)。一抗，鼠抗人PCNA(PC10，

7、1:100)，鼠抗人T細胞(CD45RO，1:100)，鼠抗人Th細胞(OPD4，1:100)及相對應(yīng)的藥盒均為DAKO公司產(chǎn)品。用乳腺癌陽性切片作PCNA陽性對照，淋巴結(jié)陽性切片作T和Th細胞陽性對照，分別用PBS液代替一抗作陰性對照。三、免疫組化結(jié)果評定方法1、PCNA陽性染色結(jié)果:細胞核棕黃色或棕褐色。隨機選擇10個視野計數(shù)1 000個細胞中的陽性細胞數(shù)以平均百分率(）表示，作為標記指數(shù)單位(PCNA-LI)。2、T和Th淋巴細胞陽性染色結(jié)果:細胞膜黃褐色或棕褐色的單核細胞。定于腫瘤包膜下或腫瘤內(nèi)部血管周圍區(qū)，隨機選擇10個視野計數(shù)1 000個細胞中的陽性細胞數(shù)，以平均百分率(）表示，作

8、為標記指數(shù)單位(T-LI、Th-LI)。四、統(tǒng)計方法本組實驗數(shù)據(jù)處理時應(yīng)用t檢驗、生存率曲線、時序檢驗、等級相關(guān)。結(jié)果一、T、Th、PCNA指數(shù)與腫瘤核分級，分期的關(guān)系由于病例分布不均，結(jié)果分析時進行重新組合分組，G1G2組T、Th、PCNA指數(shù)分別為 7.2±1.3%、7.1±4.9%、 13.9±11.9%，G3G4組分別為22.3±12.1%、9.1±7.2%、25.1±24.8%，兩組間T、Th指數(shù)無顯著性差異(P0.05)，PCNA指數(shù)有顯著性意義(P0.05)。R1組T、Tb、PCNA指數(shù)分別為19.4±9.5%

9、、7.2±5.1%、11.3±7.8%；R2組分別為16.7±13.0%、6.1±4.4%、14.5±9.1%；R3R4組分別為18.4±12.3%、8.9±6.0%、21.5±15.9%，三組間T、Th、PCNA指數(shù)差異無顯著性。二、T-LI、Th-LI、PCNA-LI與預(yù)后的關(guān)系T和Th細胞以10為標準分組，T-LI10組的生存率明顯高于T-LI<10組，Th-LI10組和Th-LI<10組的生存率無顯著性差異。PCNA以20為標準分組，PCNA-LI20組的生存率明顯低于PCNA-LI<20

10、組。分別繪制Kaplan-meier經(jīng)Log-rank檢驗，。三、相關(guān)檢驗運用Spearman等級相關(guān)檢驗PCNA-LI、T-LI、Th-LI及腫瘤核分級、分期的關(guān)系顯示，T-LI和Th-LI存在正相關(guān)，PCNA-LI與T-LI和Th-LI存在弱負相關(guān)，PCNA-LI及核分級存在相關(guān)，其余指標之間均無相關(guān)性。討論腎癌的組織來源復(fù)雜，目前常分為六種組織類型：腎透明細胞癌、腎顆粒細胞癌、腎嫌色細胞癌、腎Bellini管型癌、腎移行細胞癌、腎神經(jīng)內(nèi)分泌癌，其預(yù)后各不相同。其中腎透明細胞癌最常見，約占751。有人用免疫組化方法對100例不同分級的結(jié)腸或直腸癌的研究發(fā)現(xiàn)，TIL與腫瘤細胞空間關(guān)系密切，主

11、要是T淋巴細胞的浸潤程度與預(yù)后呈正相關(guān)24。Nomura等5發(fā)現(xiàn)一個由自體腫瘤特異性Th細胞產(chǎn)生的因子，可以增加Tc細胞浸潤到腫瘤組織的能力。還有人在研究腎腫瘤時發(fā)現(xiàn)在相鄰的腎組織及浸潤到腫瘤里的Th細胞，其表型標志無統(tǒng)計學(xué)意義6，7。本組結(jié)果顯示，T細胞與預(yù)后有關(guān)，T-LI10其預(yù)后較好，不受臨床分期和病理核分級的影響。T-LI與Th-LI有一定的相關(guān)性，Th細胞與預(yù)后無關(guān)，與文獻報道相符合。因此，我們認為Th細胞不直接參加對腫瘤的局部免疫反應(yīng)，不能作為預(yù)后的指標；T-LI基本上反應(yīng)TIL的作用，可以代表腎透明細胞癌的局部免疫狀態(tài)，用于推測預(yù)后。近幾年有許多報道用抗PCNA的單克隆抗體，對多

12、種腫瘤進行免疫組化研究，結(jié)論是PCNA與腫瘤分級有關(guān)，級別越高，PCNA的陽性率細胞越高，預(yù)后越差。而與分期無相關(guān)性810。在腎癌的研究中，PCNA-LI與腎癌的DNA含量、分級、預(yù)后有關(guān)11。本組結(jié)果顯示PCNA-LI與病理核分級存在相關(guān)性，而與臨床分期無相關(guān)性，PCNA-LI20其預(yù)后較差，與文獻報道相符合。表明PCNA-LI可作為腎透明細胞癌的增殖程度指標，用于估價預(yù)后。分析本組結(jié)果發(fā)現(xiàn)，T-LI和Th-LI與PCNA-LI之間存在弱負相關(guān)，表明腫瘤增殖程度與宿主的局部免疫狀態(tài)間存在著相互制約的作用。有文獻報道，這種關(guān)系是因為腫瘤細胞分泌的可溶性介質(zhì)損害了淋巴細胞對有絲分裂素及抗原的反應(yīng)

13、能力，導(dǎo)致機體對腫瘤免疫功能的損害1214。目前尚不清楚這種相互抑制的機制和程度，有待深入研究。參考文獻1Storkel S,Van den Berg E.Morphological classification of renal cancer.World J Urol,1995,13:153-158.2Svennevig JL,Lunde OC,Holter J, et al.Lymphoid infiltration and prognosis in colorectal carcinoma.Br J Cancer, 1984,49:375-377.3，1-10.4Brocker EB,K

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