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1、課題4:生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)的檢測(cè)【課標(biāo)要求】檢測(cè)生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)?!究枷虿t望】生物組織中化合物的檢測(cè)及注意事項(xiàng),也有可能與其他實(shí)驗(yàn)相結(jié)合?!局R(shí)梳理】一、生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)的檢測(cè)原理利用某些化學(xué)試劑與生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。(一)還原糖與斐林試劑發(fā)生作用,生成磚紅色沉淀。(二)淀粉遇碘變藍(lán)。(三)脂肪被蘇丹染液染成橘黃色,或被蘇丹染液染成紅色。(四)蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑作用產(chǎn)生紫色。二、實(shí)驗(yàn)流程歸納:(一)選材制備組織樣液顯色反應(yīng)。(二)脂肪的檢測(cè)還可利用顯微鏡觀察法,實(shí)驗(yàn)流程為:取材切片制片觀察。三、實(shí)驗(yàn)材料的選擇:(一)可溶性還原糖的
2、鑒定實(shí)驗(yàn)中,最理想的實(shí)驗(yàn)材料是還原糖含量較高的生物組織(或器官),而且組織的顏色較淺,易于觀察。可選用蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等。(二)脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)材料最好選富含脂肪的生物組織,若利用顯微鏡觀察,則最好選擇花生種子。如果是新鮮花生種子,可不必浸泡,浸泡效果反而不好,如果是干種子,需浸泡3h4h最適宜切片(浸泡時(shí)間短,不容易切片;浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng),組織太軟,切下的薄片不易成形)。(三)蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn),最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織。植物材料常用大豆,且浸泡1d2d,適于研磨,動(dòng)物材料常用雞卵清蛋白。四、實(shí)驗(yàn)操作中的注意事項(xiàng)(一)在鑒定可溶性還原糖的實(shí)驗(yàn)中,加熱試管中的溶液時(shí),應(yīng)該用試管
3、夾夾住試管上部,放入盛5065溫水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部;斐林試劑不穩(wěn)定易變性,應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。(二)還原糖、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,在加相應(yīng)試劑鑒定之前,要留出一部分組織樣液,以便與鑒定后的樣液顏色作對(duì)比,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)明力。(三)在蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,如果用蛋清稀釋液作為實(shí)驗(yàn)材料,一定要稀釋到一定程度,否則,與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會(huì)粘在試管的內(nèi)壁上,使反應(yīng)不徹底,試管也不易洗刷干凈。五、斐林試劑與雙縮脲試劑比較斐林試劑雙縮脲試劑甲液乙液A液B液成分/mLNaOH溶液/mLCuSO4溶液/mLNaOH溶液/mLCuSO4溶液鑒定物質(zhì)可溶性還原糖蛋白質(zhì)添加順序甲乙兩液等量混勻后立即
4、使用先加入A液1mL,搖勻,再加入B液4滴,搖勻反應(yīng)條件水浴5065加熱不需加熱,搖勻即可反應(yīng)現(xiàn)象樣液變磚紅色樣液變紫色(一)濃度不同。斐林試劑中CuSO4溶液濃度為g/mL,雙縮脲試劑中CuSO4溶液濃度為g/mL。(二)原理不同。斐林試劑的實(shí)質(zhì)是新配制的Cu(OH)2濁液;雙縮脲試劑實(shí)質(zhì)是堿性環(huán)境中的Cu2。(三)使用方法不同。斐林試劑是先將NaOH溶液與CuSO4溶液混合后再使用;雙縮脲試劑是先加入NaOH溶液,再滴加CuSO4溶液?!舅伎几形颉吭搶?shí)驗(yàn)原理、方法、步驟在生產(chǎn)、生活中還有什么用途?可用于對(duì)生物組織、消化液(如唾液)、食品(如奶粉)進(jìn)行某種成分的檢測(cè)或鑒定,也可用于醫(yī)學(xué)上某些
5、疾病的診斷,如糖尿病、腎炎等?!净A(chǔ)訓(xùn)練】1、廣東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局曾從亨氏美味源(廣州)食品有限公司272箱美味源金嘜桂林辣椒醬中檢驗(yàn)出含有“蘇丹”成分。“蘇丹”型色素是一種人造偶氮苯類化學(xué)制劑,在人體內(nèi)可形成二苯胺,二苯胺具有強(qiáng)烈的致癌性,全球多數(shù)國(guó)家都禁止將其用于食品生產(chǎn)??茖W(xué)家通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),“蘇丹”會(huì)導(dǎo)致鼠類患癌,癌變部位具明顯的腫塊,它在人類肝細(xì)胞研究中也顯現(xiàn)出可能致癌的特性。據(jù)此回答下列問(wèn)題:(1)蘇丹紅作為生物組織染色劑,用它對(duì)大豆子葉染色鏡檢,可被染色的成分或結(jié)構(gòu)是( C )A、多糖B、蛋白質(zhì)C、油滴D、核酸(2)利用蘇丹或蘇丹對(duì)(1)中的答案選項(xiàng)進(jìn)行染色時(shí)的顏色反應(yīng)分別是橘黃色
6、和紅色。(3)為了證明“蘇丹”具有強(qiáng)烈的致癌性,某學(xué)校課外小組的同學(xué)做了一個(gè)實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)課題名稱:驗(yàn)證“蘇丹”能強(qiáng)烈誘發(fā)小白鼠肝細(xì)胞癌變。材料用具藥品:生長(zhǎng)狀況一樣的健康小白鼠12只;“蘇丹”;解剖盤;解剖剪;放大鏡等。實(shí)驗(yàn)步驟:第一步:將小白鼠等分為兩組,編號(hào)為A、B;第二步:A組小白鼠飼喂拌有足量“蘇丹”的飼料,B組小白鼠飼喂普通飼料,兩組放在相同的適宜條件下飼養(yǎng);第三步:一段時(shí)間后,觀察兩組小白鼠的長(zhǎng)勢(shì)并解剖小白鼠,用放大鏡觀察其肝臟并記錄結(jié)果。預(yù)期結(jié)果及結(jié)論:A組小白鼠長(zhǎng)勢(shì)明顯不如B組,且放大鏡下觀察,A組小白鼠肝臟有明顯腫塊,而B組小白鼠生長(zhǎng)正常,解剖觀察肝臟無(wú)明顯腫塊,說(shuō)明“蘇丹”可誘發(fā)小白鼠肝細(xì)胞癌變。2、青蘋果遇碘液顯藍(lán)色,熟蘋果汁能與斐林試劑反應(yīng),產(chǎn)生磚紅色沉淀,這說(shuō)明( C )A、青蘋果中含淀粉不含糖類B、熟蘋果中只含糖類不含淀粉C、蘋果轉(zhuǎn)熟時(shí)淀粉水解為還原糖D、蘋果轉(zhuǎn)熟時(shí)單聚糖合成淀粉3、現(xiàn)提供新配制的斐林試劑甲液(/mLNaOH溶液)、乙液(/mLCuSO4溶液)、蒸餾水,則充分利用上述試劑及必需的實(shí)驗(yàn)用具,能鑒別出下列哪些物質(zhì)( C )葡萄糖蔗糖胰蛋白酶DNAA、只有B、和C、和D、和【高考模擬】4、(2007廣東高考)下列健康人的4種液體樣本中,能與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)的是( D )尿液胃液汗液唾液A、B、C、D、5、(200
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