霉菌、酵母檢驗(yàn)

1、霉菌、酵母菌檢驗(yàn)（一）實(shí)驗(yàn)原理霉菌和酵母菌菌數(shù)的測(cè)定是指食品檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下培養(yǎng)后，所得1g或1mL檢樣中所含的霉菌和酵母菌菌落數(shù)（糧食樣品是指1g糧食表面的霉菌總數(shù)）。（二）實(shí)驗(yàn)器材1.培養(yǎng)基：馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯（去皮切塊） 300 g 葡萄糖 20.0 g 瓊脂 20.0 g 氯霉素 0.1 g 蒸餾水 1000 mL制法：將馬鈴薯去皮切塊，加1000mL蒸餾水，煮沸10 min20 min。用紗布過(guò)濾，補(bǔ)加蒸餾水至 1000 mL。加入葡萄糖和瓊脂，加熱溶化，分裝后，121 滅菌 20 min。傾注平板前，用少量乙醇溶解氯霉素加入培養(yǎng)基中。2.器皿：已滅菌的平皿（9套

2、/組），1mL吸管（6支/組），試管（15×150）（6/組），三角錐瓶500mL、三角錐瓶500mL（內(nèi)裝蒸餾水250mL），10mL吸管。3.其他：牛皮紙或報(bào)紙，酒精燈，棉花，高壓蒸汽菌鍋，電烘箱，線繩，毛刷等。（三）操作步驟1.檢驗(yàn)程序2.操作要點(diǎn)1）采樣 選取有代表性的樣品并避免采樣時(shí)的污染。2）樣品處理（1）以無(wú)菌操作稱取檢樣25mL，放入含有225mL滅菌水的玻塞三角瓶中，振搖30 min，即為1:10稀釋液。（2）用滅菌吸量管吸取1:10稀釋液10mL，注入試管中，另用帶橡皮乳頭的1mL滅菌吸量管反復(fù)吹吸50次，使霉菌孢子充分散開。（3）取1mL 1:10稀釋液注入含有

3、9mL滅菌水的試管中，另?yè)Q一支1mL滅菌吸量管吹吸5次，此液為1:100稀釋液。（4）按上述操作順序做10倍遞增稀釋液，每稀釋一次，換用一支1mL滅菌吸量管。3）接種培養(yǎng) 根據(jù)對(duì)樣品污染情況的估計(jì)，選擇3個(gè)合適的稀釋度，分別在做10倍稀釋的同時(shí)，吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中，每個(gè)稀釋度做2個(gè)平皿，然后將涼至45 左右的培養(yǎng)基注入平皿中，待瓊脂凝固后，倒置于2528溫箱中，3d后開始觀察，共培養(yǎng)觀察5d。4）計(jì)算方法 通常選擇菌落數(shù)在10150之間的平皿進(jìn)行計(jì)數(shù)，一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板，采用兩個(gè)平板的平均數(shù)；選擇稀釋度也選擇平均菌落數(shù)在10150之間的稀釋度，菌落平均數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，即為每克（或毫升）檢樣中所含霉菌和酵母數(shù)。（四）實(shí)驗(yàn)報(bào)告平皿菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏。在記下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板的平均菌落總數(shù)。（1）將各稀釋平板上的菌落數(shù)填入下表霉菌測(cè)定報(bào)告：表1 霉菌檢測(cè)結(jié)果稀釋度平板號(hào)123平均123平均123平均菌落個(gè)數(shù)根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，報(bào)告檢測(cè)結(jié)果：每1mL（g）食品中的霉菌數(shù)是_。酵母菌測(cè)定報(bào)告：表2 酵母菌檢測(cè)結(jié)