聯(lián)苯雙酯固體脂質(zhì)納米粒的制備

1、聯(lián)苯雙酯固體脂質(zhì)納米粒的制備 作者：張洪，詹新安，成蓓，譚曄 【摘要】 目的 以乳化蒸發(fā)低溫固化法制備聯(lián)苯雙酯固體脂質(zhì)納米粒。方法 在單; 作者：張洪，詹新安，成蓓，譚曄【摘要】; 目的 以乳化蒸發(fā)低溫固化法制備聯(lián)苯雙酯固體脂質(zhì)納米粒。方法 在單因素考察的基礎(chǔ)上以正交試驗(yàn)優(yōu)化、篩選最佳處方和制備工藝。用透射電鏡觀察固體脂質(zhì)納米粒的形態(tài)，激光粒度儀測(cè)定Zeta電位和粒徑大小，葡聚糖凝膠柱法測(cè)定其包封率。結(jié)果 所制得的聯(lián)苯雙酯固體脂質(zhì)納米粒外觀形態(tài)圓整，粒度分布均勻，平均粒徑為（1936）nm,電位為（-21.51.2）mV，包封率為（45.11.1）。結(jié)論 乳化蒸發(fā)低溫固化法適用于聯(lián)苯雙酯固體脂

2、質(zhì)納米粒的制備。 【關(guān)鍵詞】; 聯(lián)苯雙酯；固體脂質(zhì)納米粒；乳化蒸發(fā)-低溫固化法Abstract:Objective; To prepare bifendate-loaded solid lipid nanoparticles by emulsification-evaporation. Methods Based on the result of single factor experiments,four factors affecting the formulation were optimized by orthogonal design. The diameters and the Z

3、eta potentials were measured. TEM was used to observe the particle shapes,and the encapsulation rate was determined by Sephadex gel chromatography. Results The mean particle size was found to be 1936 nm with a narrow particles distribution of polydispersity index. The Zeta potential of the optimized

4、 bifendate-loaded solid lipid nanoparticles was (-21.51.2) mV,and the drug entrapment efficiency was (45.11.1). Conclusion The method of emulsification-evaporation was appropriate for the preparation of bifendate-loaded solid lipid nanoparticles.Key words:bifendate; solid lipid nanoparticles; emulsi

5、fication-evaporation固體脂質(zhì)納米粒( solid lipid nanoparticles,SLN ) 作為控制藥物釋放的新型載體給藥系統(tǒng),引起了人們廣泛的關(guān)注。它以固態(tài)的可生物降解的類脂性化合物為載體,將藥物包裹于類脂核中,形成平均粒徑在501 000 nm的固體膠粒給藥體系。SLN既具備聚合物納米粒物理穩(wěn)定性高、藥物泄漏慢的優(yōu)勢(shì),又兼具了脂質(zhì)體、乳劑的毒性低、可大規(guī)模生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn),可以增加藥物的穩(wěn)定性、控制藥物的釋放、避免藥物的降解以及良好的靶向性等,是一種極有發(fā)展前景的新型給藥系統(tǒng)的載體1,2。; 聯(lián)苯雙酯(bifendate，DDB)系合成五味子丙素的中間體3，是20世

6、紀(jì)80年代我國(guó)自行研制成功的抗肝炎藥，由于其降轉(zhuǎn)氨酶作用顯著，且能降低血中膽紅素水平及-甲肽蛋白的分泌，顯著改善臨床癥狀，在我國(guó)及其他多個(gè)亞洲國(guó)家廣泛應(yīng)用于乙肝及丙肝的治療4。由于聯(lián)苯雙酯水溶性較差，臨床上只有口服制劑，且生物利用度較低。本文以單硬脂酸甘油酯、卵磷脂作為載體材料，采用乳化蒸發(fā)-低溫固化法5制備聯(lián)苯雙酯固體脂質(zhì)納米粒（DDB-SLN），控制粒徑大小，通過(guò)靜脈注射給藥，期望可改變DDB的體內(nèi)分布，提高肝臟局部的藥物濃度，更好地發(fā)揮其治療作用。; 1; 儀器與材料; 戴安P680分析型高效液相色譜儀(美國(guó))；高分辨透射電鏡(JEM-2010UHR,日本電子公司)；Zetasizer

7、3000型激光粒度儀（英國(guó)Malvern公司）；UV-2800紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) （尤尼柯儀器有限公司）；JJ-2增力電動(dòng)攪拌器（江蘇金壇市醫(yī)療儀器廠）；精密恒溫水浴鍋（江蘇金壇市醫(yī)療儀器廠）。; 聯(lián)苯雙酯原料藥（浙江萬(wàn)邦藥業(yè) 批號(hào)：070301）；聯(lián)苯雙酯對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所 批號(hào)：0192-950150）；單硬脂酸甘油酯 （上?；瘜W(xué)試劑有限公司）；卵磷脂（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；泊洛沙姆 188 （深圳優(yōu)普惠公司）；葡聚糖凝膠（G-50,pharmacia公司）；其余試劑均為分析純。; 2; 方法與結(jié)果2.1; DDB-SLN的制備; ; 精密稱取處方量的DDB、單硬脂酸甘油

8、酯、卵磷脂溶于適量的無(wú)水乙醇中，于（752） 水浴下形成有機(jī)相。另取泊洛沙姆溶于相同溫度的水中，保溫，構(gòu)成水相。在攪拌(1 000 r/min)下將有機(jī)相用針頭注入水相中，整個(gè)過(guò)程保持溫度在脂質(zhì)材料熔點(diǎn)以上。攪拌2 h，濃縮體積至原來(lái)的1/2左右。將所得的半透明體系快速分散于02 水相中，繼續(xù)攪拌1 h，即得固體脂質(zhì)納米粒混懸液。2.2; 含量測(cè)定方法A.聯(lián)苯雙酯對(duì)照品;B.空白納米粒;C.聯(lián)苯雙酯固體脂質(zhì)納米粒圖1; 高效液相色譜圖（略）Fig.1; HPLC chromatogram2.3; 包封率測(cè)定 ; 以Sephadex G-50葡聚糖凝膠柱色譜法分離DDB-SLN和游離藥物，測(cè)定其

9、包封率。吸取1 mL DDB-SLN混懸液上柱，蒸餾水洗脫，收集帶有乳光部分的洗脫液，定量吸取該部分洗脫液，加乙腈并超聲，破壞納米粒。另吸取1 mL DDB-SLN混懸液，直接加乙腈并超聲提取。HPLC法分別測(cè)定兩樣品中DDB的含量，按下式計(jì)算包封率：; 包封率=m柱/m總; m柱為DDB-SLN混懸液通過(guò)Sephadex G-50后測(cè)得的聯(lián)苯雙酯的含量；m總為DDB-SLN混懸液直接破乳后測(cè)得的聯(lián)苯雙酯的含量。2.4; 單因素實(shí)驗(yàn) ; 對(duì)制備工藝中影響粒徑的主要因素作進(jìn)一步考察,結(jié)果發(fā)現(xiàn)有機(jī)相（乙醇）和水相的體積比為13，乳化溫度為75 ，轉(zhuǎn)速為1 000 r/min時(shí)，制備的DDB-SLN

10、的粒徑較小。2.5; 正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)及方差分析; 由單因素實(shí)驗(yàn)得知,各種乳化劑的比例、載體材料的用量和投藥量對(duì)DDB-SLN 的粒徑和包封率有較大的影響。因此,選擇DDB(A)、 單硬脂酸甘油酯（B）、卵磷脂(C) 、泊洛沙姆188 (D)用量4個(gè)因素，以正交表L9（34）進(jìn)行實(shí)驗(yàn),各因素安排見(jiàn)表1，正交試驗(yàn)結(jié)果及方差分析見(jiàn)表2、表3。表1; 正交設(shè)計(jì)的因素和水平（略）Tab.1; Factors and levels of orthogonal design;表2; 正交試驗(yàn)的結(jié)果（略）Tab.2; Results of orthogonal experiment注：綜合評(píng)分6= (粒徑的最高值每次測(cè)得的粒徑值)0.5（每次包封率的值包封率的最小值）0.5，其中0.5為粒徑和包封率的權(quán)值。; 表3; 方差分析結(jié)果（略）Tab.3; Results of variance analysis注：根據(jù)直觀分析法的結(jié)果，以第三列作為誤差列進(jìn)行方差分析，F(xiàn)0.05（2，2）19由表2可知，本實(shí)驗(yàn)