2010沙門菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查記錄

1、表：2.1057 沙門菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查記錄1、適用范圍：成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按處方配制的培養(yǎng)基均應進行培養(yǎng)基適用性檢查。2、驗證目的：培養(yǎng)基適用性檢查試驗目的是為了確定實驗室所使用培養(yǎng)基、制備程序、保存條件等是否滿足微生物限度檢查用要求。3、參照標準：中國藥典2010年版、中國藥品檢驗標準操作規(guī)范2010年版4、檢查項目、菌株及判斷標準培養(yǎng)基測試菌株測試特性測試指標營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基乙型副傷寒沙門菌促生長能力渾濁金黃色葡萄球菌促生長能力渾濁四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（TTB）乙型副傷寒沙門菌促生長能力上清渾濁金黃色葡萄球菌抑制能力上清未見渾濁膽鹽硫乳瓊脂（DHL）或沙門菌志賀菌瓊脂（SS）

2、乙型副傷寒沙門菌促生長能力回收率乙型副傷寒沙門菌指示能力顏色形態(tài)同對照曙紅亞甲藍瓊脂（EMB）或麥康凱瓊脂（固體）大腸埃希菌促生長能力回收率乙型副傷寒沙門菌回收率大腸埃希菌指示能力顏色形態(tài)同對照乙型副傷寒沙門菌顏色形態(tài)同對照5、驗證所用培養(yǎng)基：分類名 稱生產(chǎn)廠家批 號被檢培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（TTB）膽鹽硫乳瓊脂（DHL）或沙門菌志賀菌瓊脂（SS）沙門菌志賀菌瓊脂（SS）曙紅亞甲藍瓊脂（EMB）或麥康凱瓊脂對照培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯對照培養(yǎng)基四硫磺酸鈉亮綠對照培養(yǎng)基（TTB）膽鹽硫乳瓊脂（DHL）或沙門菌志賀菌瓊脂（SS）對照培養(yǎng)基沙門菌志賀菌瓊脂（SS）曙紅亞甲藍瓊脂（EMB）或

3、麥康凱瓊脂對照培養(yǎng)基6、實驗操作6.1、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基：新鮮配制100ml/瓶的對照營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基3瓶，121滅菌15min，備用。取5支，分別接種乙型副傷寒沙門菌和金黃色葡萄球菌各1瓶，接種菌液1ml（不大于100cfu），另一支不接種菌作為空白對照；被檢培養(yǎng)基同法操作。置3035，培養(yǎng)18h、48h，分別觀察結果。6.2、四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（TTB）：新鮮配制10ml/支的對照TTB培養(yǎng)基，121滅菌15min，備用。臨用前，無菌操作加入0.2ml碘試液和0.1ml亮綠試液。取5支，分別接種乙型副傷寒沙門菌和金黃色葡萄球菌各2支，接種菌液1ml（不大于100cfu），另一支不接種菌作為空

4、白對照；被檢培養(yǎng)基同法操作。置3035，培養(yǎng)18h、24h，分別觀察結果。由于TTB中的碳酸鈣對渾濁現(xiàn)象觀察有影響，因此若渾濁現(xiàn)象不明顯，則將各培養(yǎng)物接種至膽鹽硫乳瓊脂或沙門、志賀屬瓊脂平板上劃線觀察TTB培養(yǎng)物生長情況。 6.3、膽鹽硫乳瓊脂（DHL）【或沙門菌志賀菌瓊脂（SS）】：新鮮配制對照DHL或（SS）瓊脂培養(yǎng)基，加熱充分溶解，冷卻至60傾注平皿，35培養(yǎng)箱預培8h后備用。取3個無菌DHL或（SS）瓊脂平板，涂布接種乙型副傷寒沙門菌2皿，接種菌液0.1ml（含菌50100cfu），另一平板不接種菌作為空白對照，涂布均勻后于3035倒置培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基同法操作。18h、48h分別觀察結

5、果。6.4、曙紅亞甲藍瓊脂（或麥康凱瓊脂）培養(yǎng)基：新鮮配制對照曙紅亞甲藍瓊脂（或麥康凱瓊脂）培養(yǎng)基，121滅菌15min，冷卻至60傾注平皿，35培養(yǎng)箱預培8h后備用。取5個無菌曙紅亞甲藍瓊脂（或麥康凱瓊脂）平板，分別涂布接種大腸埃希菌和乙型副傷寒沙門菌各2皿，接種液0.1ml（含菌50100cfu），另一平板不接種作為空白對照，涂布均勻后于3035倒置培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基同法操作。18h、24h分別觀察結果。7、結果培養(yǎng)基驗證菌株編號被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基檢查結果營養(yǎng)肉湯（3035，18h、48h）乙型副傷寒沙門菌1金黃色葡萄球菌2空白3四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（TTB）（3035，18h、24h）乙型副傷寒沙門菌12金黃色葡萄球菌34空白5膽鹽硫乳瓊脂（DHL）（3035，18h、48h）乙型副傷寒沙門菌12空白3沙門菌志賀菌瓊脂（SS）（3035，18h、48h）乙型副傷寒沙門菌12空白3曙紅亞甲藍瓊脂（EMB）（3035，18h、24h）大腸埃希菌12乙型副