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文檔簡介

1、理和方法。了解糖發(fā)酵的原理及在腸道細(xì)菌鑒定中的重要作用。掌握通過糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法。學(xué)習(xí)微生物接菌技術(shù)。二、基本原理1、淀粉水解試驗(yàn) 微生物不能直接利用淀粉，必須靠自身產(chǎn)生的胞外淀粉酶將大分子淀粉分解成糊精、雙糖和單糖才能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，細(xì)菌是否能產(chǎn)生淀粉酶可通過觀察細(xì)菌菌落周圍的淀粉物質(zhì)是否被水解來證實(shí)，淀粉遇碘液會產(chǎn)生藍(lán)色，被細(xì)菌水解淀粉的區(qū)域，用碘則呈褐色。二、基本原理2、明膠水解試驗(yàn) 微生物不能直接利用明膠這蛋白質(zhì)，必須靠自身產(chǎn)生的胞外明膠酶將大分子蛋白質(zhì)水解成蛋白胨或氨基酸才能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，細(xì)菌能否產(chǎn)生明膠酶可通過明膠穿刺培養(yǎng)來證實(shí)，在微生物的明膠酶作用下，明膠失去凝固性，呈液化狀

2、態(tài)。二、基本原理3、糖發(fā)酵試驗(yàn) 糖發(fā)酵試驗(yàn)是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng)，在腸道細(xì)菌的鑒定中尤為重要。大腸菌群能在370C培養(yǎng)下，利用乳糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣。當(dāng)產(chǎn)酸時(shí)，溴甲酚紫指示劑可由紫色pH6.8變?yōu)辄S色pH5.2）。當(dāng)產(chǎn)氣時(shí)，可通過倒置小倒管內(nèi)的氣泡來判斷。圖 糖類發(fā)酵試驗(yàn) 試管/每組(6人）乳糖發(fā)酵培養(yǎng)液 3支試管/每組(6人）葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)液 3支試管/每組(6人）2、試劑：碘液3、儀器或其他用具：培養(yǎng)箱、水浴鍋、接種環(huán)、接種針、酒精燈、無菌培養(yǎng)血等。別有無淀粉水解圈2、明膠水解試驗(yàn)取五支明膠試管培養(yǎng)基 用接種針分別穿刺接入大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、普通變形桿菌，另一支不接菌為空白對照管貼好標(biāo)簽 200C培養(yǎng)3-5d 觀察明膠液化情況4、葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)取三支葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基 分別接入大腸桿菌、普通變形桿菌，另一支不接菌為空白對照管 貼好標(biāo)簽 370C培養(yǎng)24小時(shí) 觀察產(chǎn)酸、產(chǎn)氣情況操作要點(diǎn)：注意無菌操作，勿染雜菌。接好菌的

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