濕熱滅菌柜驗(yàn)證_圖文

1、濕熱滅菌工藝驗(yàn)證及良好操作 wen.liu 內(nèi) 容 2 1 1 范 規(guī)理管 菌滅熱 濕的好良 驟步 個(gè)幾的 段階認(rèn)確 驟步 個(gè)幾的 段階發(fā)研 礎(chǔ)基 菌滅熱濕 構(gòu) 結(jié)的證 驗(yàn)其及 藝工菌滅 述概 文劉 司公限有品制物生德斯巴菲諾賽圳深 殺物生及理物的需所 6 于小率概存殘物生微出算計(jì)以可，：面上用利 的下如力滅 鐘分 ：中度限物生微的品產(chǎn)設(shè)假 (FPHY 12 FBIO=D121*(LogN0-LogNF=12 鐘分 ；鐘分 為 L 1, 為力滅殺物生 力滅殺理物 需所 6 為率概存殘物生微到達(dá)，算計(jì)按再 下如得，式公入代據(jù)數(shù)將 力滅殺物生及理物的 鐘分 設(shè)假 : T T0 ） （ 法 滅殺度過

2、 法方 種兩的 菌滅熱濕 其稱，時(shí)多更或 降下體機(jī)有其當(dāng)，質(zhì)物菌無非個(gè)一義菌無 為 定過通 程過 的限有 個(gè)是菌滅 程 過的限 無要需 菌無對(duì)絕 質(zhì) 物性活 有所壞 破：義含 ） 制控 來計(jì)統(tǒng) 率概過 通（程過 體機(jī)有 的活有 沒：義含 念概對(duì)絕 “ ” 10 6 基本概念: 無菌（Sterility） 無菌保證水平（SAL） 滅菌（Sterilisation） N0 102 D121 1 Z 1 0 C L 10 N0 106 D121 1 Z 1 0 C F0=FPHY= FBIO=D121*(LogN0-LogNF=8 Z 概 概 述 述 10 10 4 3 2 鐘分 法 率概存殘 滅菌

3、工藝及其驗(yàn)證的結(jié)構(gòu) 驗(yàn) 證 SAM 滅菌工藝是一門學(xué)問 5 支持性法規(guī)依據(jù) TM1: PDA Validation of Moist Heat Sterilization Processes: Cycle Design, Development, Qualification and Ongoing Control EU Guideline to GMP Medicinal Products fro Human and Veterinary Use Annex 1 British Std. BS EN 285: Sterilization- steam sterilizers-large ste

4、rilizers 菌 滅熱濕業(yè) 工 求 要制控 規(guī)常和 認(rèn)確菌滅 品產(chǎn)健 保療醫(yī) GB 18278 性特物生 透穿熱 布分度溫 化理 段后菌滅 段菌滅 段熱加 定設(shè)數(shù)參 淋噴水熱過 ） （ 和混汽蒸氣空 壓過氣空 換置力重 空真預(yù) 汽蒸和飽 孔多 體液 理管更變 證驗(yàn)再 性用適統(tǒng)系 估評(píng)序程 行放規(guī)常 6 制限性特品產(chǎn)受 熱過 制控續(xù)持 3 段階認(rèn)確 認(rèn)確能性 發(fā)開序程 型類藝工 段階發(fā)研 型 類載裝 法方計(jì)設(shè) 濕熱滅菌基礎(chǔ) 作為滅菌程序的設(shè)計(jì)、 作為滅菌程序的設(shè)計(jì)、研發(fā)及確認(rèn)的基 先要了解基本的技術(shù)參數(shù)，包括： 礎(chǔ)，先要了解基本的技術(shù)參數(shù)，包括： 滅菌機(jī)理 生物指示劑 熱代動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ) 7 滅

5、菌機(jī)理 線曲定設(shè)率死致物生微，下度溫驗(yàn)試的定固 式公存殘物生微 Log NF = -F/DT + Log No 8 4 況情的料材裝包外內(nèi) 度和飽汽蒸 度溫及間時(shí)續(xù)持段后菌滅 型類蘇復(fù)及置配基養(yǎng)培 度溫始起菌滅 間時(shí)作工柜菌滅 件條養(yǎng)培和蘇復(fù) 件條存貯物生微 類種的物生微 ：響影素因下以受，）滅殺難越 大越值（系關(guān)的數(shù)倒負(fù) 間時(shí)的需所位單數(shù)對(duì)個(gè)一降下或滅殺被物生微下度溫定一 , D Z 滅菌機(jī)理 滅菌機(jī)理 D , 10 9 5 數(shù)度的降下或高升度溫 菌滅，位單數(shù)對(duì)個(gè)一化變值 ：數(shù)系化變度溫：子因關(guān)相度溫：值 值 611滅菌機(jī)理L 滅菌率及 F 值 , 即 :一定溫度下的滅菌時(shí)間L 滅菌率 滅菌

6、率是通過參考溫度(Tref 和固定 Z 值的指數(shù)公式來計(jì)算的 : L =10(T-Tref/z. F 值F 值反映的是一個(gè)過程時(shí)間中的綜合滅菌值F o 標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間T ref = 121.1C 及 Z=10C 時(shí)的等效滅菌時(shí)間F PhysicalF phy 用以描述基于循環(huán)中物理參數(shù)指標(biāo)計(jì)算而得的 F 值F BiologicalF Bio 值通過D T x LR來計(jì)算 , 即實(shí)際殺滅生物指示劑中微生物量的多少來 衡量 , DT 是生物指示劑在參考溫度下的 D 值 ,LR 是整個(gè)過程中 BI 的實(shí)際下降值 . 12滅菌過程的指示劑種類較多,但一般涉及兩種:生物指示劑(BI 常用的有:G. ste

7、arothermophilus,嗜熱脂肪芽胞桿菌 D: 1.5-3.0 (2.0Clostridium sporogensis生孢梭 D :0.4-0.8Bacillus coagulans凝結(jié)芽胞桿菌 D: 0.4-0.8Bacillus subtilis枯草芽胞桿菌 D: 0.3-0.7化學(xué)指示帶 顏色變化顯示 及 顏色 漸變 顯示 Indicators vs. Integrators713細(xì)菌的數(shù)量對(duì)殺滅它們是有抵抗作用的 根據(jù) 生物有機(jī)體的種類 一般來說,革蘭氏陽性比革蘭氏陰性細(xì)菌的抵抗力更強(qiáng) 細(xì)菌內(nèi)生孢子有高的抵抗力 真菌孢子的抵抗力弱很多 生物有機(jī)體的生理階段 健康的 -更具抵抗力

8、抵抗力的計(jì)算依據(jù): 生物體的 D 值 微生物限度減少一個(gè)數(shù)量級(jí) (90% 的時(shí)間(劑量 14 嗜熱脂肪芽孢桿菌 已知最具熱抵抗力的微生物 D 121值在 1.5分鐘到 3分鐘之間 生孢梭菌 典型的高抵抗性的 “ 正常菌群 ” D 121大約是 0.8分鐘 葡萄球菌 通常引起潔凈間的污染 D 121大約是 15秒 假單胞菌 通常在水中的微生物 D 121小于 10秒舉一些 D 值的例子 通?？梢杂靡韵聝煞N方式的一種表示滅菌效果 對(duì)數(shù)減少值 LRV (Log Reduction Value = t/D 滅活因子(指數(shù)形式 IF (Inactivation Factor = 10 t/D15舉例 對(duì)

9、嗜熱脂肪芽孢桿菌的殺死效果121C/15 min D = 1.5 t = 15 LRV = 15/1.5 = 10 IF = 1015/1.5= 1010 如果開始的菌的數(shù)量是 103,那么 SAL 值為 : 10(3-10= 10 -7 SAL = 10-7168實(shí)際上 我們通常不只處理一種生物-滅菌循環(huán)要考慮多種微生物的混合 在驗(yàn)證的時(shí)候,我們要考慮最壞情況,所以 =對(duì)于蒸汽滅菌,最壞情況生物指示劑是嗜熱脂肪芽孢桿菌17生物指示劑準(zhǔn)備 在固體培養(yǎng)基上生長并形成孢子 收獲+清洗 確定孢子濃度 分散在載體上 包裝 標(biāo)準(zhǔn)化 . 存活的孢子數(shù)量 抵抗力 (D “ 操作窗口 ” 生存時(shí)間 殺死時(shí)間1

10、891019蒸汽滅菌的生物指示劑 Geobacillus stearothermophilus嗜熱脂肪芽孢桿菌 55-65C 生長 不在室溫或 37C 下生長 堆肥中發(fā)現(xiàn) D 121= 1.5 minutes Z = 10C 孢子層帶有 5 x 105-5 x 106個(gè)孢子 20熱力學(xué)原理傳導(dǎo) 分子 振動(dòng) 可以傳遞能量,此時(shí)物體本身方位沒有發(fā)生變化 對(duì)流 受熱液體的 移動(dòng) 引起熱量的轉(zhuǎn)化輻射 通過 電磁波 轉(zhuǎn)化能量溫度是能量測(cè)試的手段 溫度是能量測(cè)試的手段:一個(gè)系統(tǒng)以及它的周圍環(huán)境的溫度變化引起了熱量傳遞汽蒸 和飽燥干 汽蒸熱過 汽蒸 汽蒸 汽蒸 汽蒸 汽蒸和水 100% 。度溫體腔于高度溫套

11、夾柜菌滅 ；降下然突力壓近附點(diǎn)用使在 ：起引素因下以由要主象現(xiàn)熱過 。值數(shù)的到達(dá)應(yīng)下度溫定規(guī)在于低會(huì)率死致 的物生微，時(shí)熱過。值數(shù)一某到達(dá)度溫下力壓定特在即，態(tài)狀和飽為須汽蒸，言而 標(biāo)指數(shù)對(duì)半的物生微滅殺就 度溫線曲衡平的時(shí)發(fā)蒸水過超下力壓定一在度溫汽蒸 值熱過 值熱過 值熱過 值熱過 。值似近為多值數(shù)的得所，定確以加測(cè)檢過通以可值度燥干。汽蒸和飽的純于小顯 明也量能其，時(shí) 于小度燥干汽蒸，外之象現(xiàn)濕過物載裝起引了除。水相液無 應(yīng) 對(duì)標(biāo)指的水 至 個(gè)一 聯(lián)關(guān)相熱在潛中汽蒸與 量含的水態(tài)液的帶攜中汽蒸測(cè)檢 值燥干 值燥干 值燥干 值燥干 。物合 混的體氣和汽蒸了成變水的相氣、汽蒸的凈純本原將，中

12、汽蒸在夾口出器生發(fā)汽蒸 在以可 等氮化氧二、氣氮、氣空：如體氣的帶攜身本汽蒸由可，器生發(fā)汽蒸于源來 體氣凝冷不 體氣凝冷不 體氣凝冷不 體氣凝冷不 1.0 熱力學(xué) 100% 水 水 水 水 C 0 相位邊界 , 蒸汽質(zhì)量測(cè)試 1.0 . . 0.90 to 0.95 0 100% 1 , 22 21 11 的在潛 量熱總 的測(cè)可 水 點(diǎn)和飽 點(diǎn)和飽 點(diǎn)和飽 點(diǎn)和飽 點(diǎn)沸 點(diǎn)沸 點(diǎn)沸 點(diǎn)沸 點(diǎn)沸 點(diǎn)沸 點(diǎn)沸 點(diǎn)沸 點(diǎn)沸 點(diǎn)沸 點(diǎn)沸 點(diǎn)沸 值燥干 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)（ HTM 2010第3部） 不冷凝氣體 每100毫升置換水中非冷凝氣體體積不超過3.5毫升； 過熱值 過熱值不超過25C ； 干燥值 干燥值不

13、低于0.9 (或，裝載物為金屬時(shí)，不低于 0.95。 23 蒸汽質(zhì)量不過關(guān)帶來的后果 蒸汽過濕：裝載物品“受潮”, 阻礙蒸汽穿 透, 延長加熱時(shí)間 不冷凝氣體: 孢子由空氣包裹著隔離起 來，從而得不到滅菌；形成汽氣混合物: 相同的壓力下溫度達(dá)不到預(yù)定值，從而影 響滅菌的效果 過熱蒸汽: 形成部分飽和蒸汽，降低致死 率 24 12 制控續(xù)持 認(rèn)確能性 發(fā)開序程 型類藝工 型 類載裝 法方計(jì)設(shè) 段階認(rèn)確 驗(yàn) 證 段階發(fā)研 段階發(fā)研 段階發(fā)研 段階發(fā)研 l 理管更變 證驗(yàn)再 性用適統(tǒng)系 估評(píng)序程 行放規(guī)常 性特物生 透穿熱 布分度溫 化理 段后菌滅 段菌滅 段熱加 定設(shè)數(shù)參 淋噴水熱過 ） （ 物汽

14、蒸氣空 壓過氣空 換置力重 空真預(yù) 汽蒸和飽 SAM 孔多 體液 制限性特品產(chǎn)受 熱過 一般經(jīng)過這些步驟： 建立設(shè)計(jì)需求 確定裝載類型 選擇程序類型 確定循環(huán)參數(shù) 滅菌工藝是一門學(xué)問 總述 工藝研發(fā) 26 25 13 。的守保常非是值計(jì)設(shè)個(gè)這 。的守保常非是值計(jì)設(shè)個(gè)這 。的守保常非是值計(jì)設(shè)個(gè)這 。的守保常非是值計(jì)設(shè)個(gè)這 果效的 到達(dá)可即鐘分 鐘分 值 的需所 到達(dá) 算計(jì) 鐘分 值計(jì)設(shè) ）鐘分半到不（鐘分 個(gè) 于少物生微始初 ）力抗抵，量數(shù)（果結(jié)測(cè)檢荷負(fù)物生據(jù)根 ：擇選序程菌滅的品物菌滅待定穩(wěn)不熱： 例 ：擇選序程菌滅的品物菌滅待定穩(wěn)不熱： 例 ：擇選序程菌滅的品物菌滅待定穩(wěn)不熱： 例 ：擇選序

15、程菌滅的品物菌滅待定穩(wěn)不熱： 例 制控性續(xù)持 認(rèn)確能性 發(fā)研序程 型類藝工 型類載裝 認(rèn)確藝工 發(fā)研藝工 發(fā)研藝工 發(fā)研藝工 發(fā)研藝工 法方計(jì)設(shè) 控監(jiān)的度限物生微強(qiáng)加應(yīng)候時(shí)這 控監(jiān)的度限物生微強(qiáng)加應(yīng)候時(shí)這 控監(jiān)的度限物生微強(qiáng)加應(yīng)候時(shí)這 控監(jiān)的度限物生微強(qiáng)加應(yīng)候時(shí)這 果效的 到達(dá)可即鐘分 值 的需所 到達(dá) 算計(jì) 鐘分 值計(jì)設(shè) ）鐘分半到不（鐘分 個(gè)于少物生微始初 ）力抗抵、量數(shù)（果結(jié)測(cè)檢荷負(fù)物生據(jù)根 ： ：例 ：擇選序程菌滅的品物菌滅待定穩(wěn)不熱： 例 型類藝工 制控性續(xù)持 認(rèn)確藝工 認(rèn)確能性 發(fā)研序程 發(fā)研藝工 發(fā)研藝工 發(fā)研藝工 發(fā)研藝工 型類載裝 法方計(jì)設(shè) 法方計(jì)設(shè) 法方計(jì)設(shè) 法方計(jì)設(shè) F0 b c b a F0 2 1 c a 3.2 8 N0 = 102 D121C = 0.4 SAL 10 6 F F121C = (log102 - log10-6 x D121C = 3.2 minutes N0 = 102 D121C = 1.0 SAL 10 6 F F 121C = (log102 - log10-6 x D 121C =