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文檔簡介
1、北京雷根生物技術有限公司 SDS-PAGE凝膠快速配制試劑盒簡介:聚丙烯酰胺凝膠電泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE),其原理在于聚丙烯酰胺凝膠為網(wǎng)狀結構,具有分子篩效應。它有兩種形式:非變性聚丙烯酰胺凝膠及SDS-聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE);非變性聚丙烯酰胺凝膠蛋白質能夠保持完整狀態(tài),并依據(jù)蛋白質的分子量大小、蛋白質的形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開,主要用于分離蛋白質和寡核苷酸。SDS-PAGE凝膠快速配制試劑盒把所需的緩沖液、SDS等預混于下層膠緩沖液(4×)(
2、用于配制分離膠)和上層膠緩沖液(4×)(用于配制濃縮膠),分別含有Tris-HCl(pH8.8)、SDS和Tris-HCl(pH6.8)、SDS,30T一般可以配制3040塊,具體配制的量應根據(jù)器具大小決定。組成:操作步驟(僅供參考):1、 配制10%過硫酸銨:直接在0.5g Ammonium Persulfate中加入5ml蒸餾水,充分溶解,分裝成小份儲存于-20或4。2、 根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適的凝膠濃度,按照下面的表格配制SDS-PAGE的分離膠(下層膠):北京雷根生物技術有限公司 北京雷根生物技術有限公司 注意事項:1、 過硫酸銨配制成10%溶液后應當-20保存。應盡量減少室溫存放時間以防失效。有效避免失效的方法是分成小份,-20保存,用23次,剩余的棄用,亦可4保存幾天。 2、 TEMED易揮發(fā),使用后請蓋緊瓶蓋。另外凝膠凝聚的速度和溫度及光照關系密切,可通過適當調節(jié)TEMED的用量,控制在不同的室內環(huán)境下凝膠凝聚的速度。 3、 配制聚丙烯凝膠的過程中,如果室溫較低,可以置于37放置,加速凝固。 4、 30%Acr-Bis(
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