高效液相色譜法測定復(fù)方丹參注射液中丹參素的含量

1、    高效液相色譜法測定復(fù)方丹參注射液中丹參素的含量        摘要：目的：考察不同廠家復(fù)方丹參注射液中丹參素含量。方法：選擇復(fù)方丹參注射液中活性成份丹參素作為指標(biāo)，用反相高效液相色譜法，以甲醇-0.4%醋酸（595）作流動(dòng)相，檢測波長為281nm。結(jié)果與結(jié)論：樣品平均加樣回收率為99.71%，RSD為0.96%，測定結(jié)果不同廠家產(chǎn)品差異很大，為保證臨床用藥安全有效，應(yīng)對(duì)其有效成份建立控制標(biāo)準(zhǔn)。關(guān)鍵詞：復(fù)方丹參注射液；HPLC；丹參素中分類號(hào)：R927.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

2、文章編號(hào)：1008-9926(2000)05-277-02Determination of Danshensu in Compound Danshen Injection by HPLCDAI Cai-Qin，YUAN Jie(Yuanwang Hospital of Jiangyin city,Jiangyin214431,Jiangsu)ABSTRACT：Aim To determine the contents of danshensu in compound danshen injectn of different factories.Methods A HPLC method has

3、 been developed to determine danshensu in compound danshen injection,with a detection wavelength of 281nm.The analysis was carried out by using MeOH0.4% HAC(595) as the mobile phase.Conclusion RSD was 0.96%,the recovery was 99.71%.The result was different to different factorys' products.The meth

4、od of quality control should be estabilished.KEY WORDS：Compound danshen injection；HPLC；Danshensu復(fù)方丹參注射液為丹參、降香經(jīng)提取制成的滅菌水溶液，相當(dāng)于原生藥1g*ml-1，為棕色澄明液體。目前有多家生產(chǎn)，但色澤卻有差異，療效也不盡相同，這可能與復(fù)方丹參注射液主要成份的含量有關(guān)。文獻(xiàn)報(bào)道有紙層析紫外分光光度法1，薄層掃描法2。本文采用HPLC法對(duì)不同廠家復(fù)方丹參注射液中丹參素的含量進(jìn)行考察，其操作方法簡便，準(zhǔn)確可靠。1實(shí)驗(yàn)材料1.1儀器1100型高效液相色譜儀(美國惠普公司)。1.2試劑丹參素鈉對(duì)照

5、品（上海醫(yī)科大學(xué)提供）；甲醇、醋酸等均為分析純。1.3藥品復(fù)方丹參注射液(A藥廠，批號(hào) 981204；B藥廠，批號(hào) 981240；C藥廠，批號(hào) 980340；D藥廠，批號(hào) 990128；E藥廠，批號(hào) 981101；F藥廠，批號(hào) 980829)。2實(shí)驗(yàn)部分2.1色譜分析條件色譜柱HEWLETT 5m(200×46mm)；流動(dòng)相：甲醇-0.4%醋酸溶液（595）；檢測波長：281nm；柱溫：室溫；流量：1.2ml/min：按該條件測得對(duì)照品及樣品色譜見1。1對(duì)照品及樣品高效液相色譜a 丹參素2.2方法與結(jié)果2.2.1對(duì)照品溶液的制備取丹參素鈉對(duì)照品（約相當(dāng)于丹參素10mg），精密稱定，置

6、10ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。2.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密吸取對(duì)照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml置10ml量瓶中加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，依上述條件取10l注入色譜儀，記錄色譜，以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)（X），對(duì)照品峰面積積分值(Y)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=5.612X-38.1，r=0.999 1丹參素濃度在20120g*ml-1范圍內(nèi)峰面積積分值與濃度呈良好的線性關(guān)系。2.2.3重現(xiàn)性試驗(yàn)取同一批號(hào)樣品5份，分別依本法處理進(jìn)行測定，結(jié)果見表1。表1重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果(n=5)編號(hào)含量（mg.ml-1）RSD（%）14.1

7、40 24.13834.1424.1401.0744.13954.1432.2.4回收率試驗(yàn)精密稱取已知含量的樣品適量，精密加入一定量的丹參素對(duì)照品，依本法進(jìn)行含量測定并計(jì)算回收率，結(jié)果見表2。 表2丹參素回收率試驗(yàn)結(jié)果（n=3）樣品量（mg）加入量（mg）測得量（mg）回收率（%）（%）RSD（%）0.5450.4500.998100.3 0.6280.4501.07399.5499.710.960.5170.4500.96099.282.2.5樣品的測定分別精密吸取供試品溶液0.5ml，置25ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，依上述條件取供試品溶液10l進(jìn)行分析，結(jié)果見表3。 表3不同廠家

8、復(fù)方丹參注射液中丹參素的含量（n=3）編號(hào)含量（mg.ml-1）RSD（%）9812044.2250.96 9812402.9471.109803404.0430.869901284.1940.979811012.3400.729808292.5950.813討論 3.1丹參有效成份為丹參素、原兒茶醛、原兒茶酸等。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道3，丹參素含量較高，故選擇丹參素含量作為本試驗(yàn)質(zhì)量考察的指標(biāo)。本文用HPLC法對(duì)復(fù)方丹參注射液中有效成份丹參素進(jìn)行了測定，此法準(zhǔn)確、快速、簡便、重復(fù)性好，其回收率為99.71%，RSD為0.96%。3.2本研究結(jié)果表明，6個(gè)廠家復(fù)方丹參注射液中丹參素的含量不一致，產(chǎn)品質(zhì)量上的差異很大，這是給臨床療效造成較大差異的主要原因之一。最近文獻(xiàn)4已對(duì)復(fù)方丹參注射液（又名香丹注射液）的另一成份原兒茶醛含量測定進(jìn)行了規(guī)范，建議有關(guān)部門對(duì)主要成份丹參素也建立質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，以保證臨床用藥安全有效。作者簡介：代彩芹(1972-)，女，學(xué)士，藥師。代彩芹（江陰市遠(yuǎn)望醫(yī)院江蘇江陰214431）袁杰（江陰市遠(yuǎn)望醫(yī)院江蘇江陰214431）參考文獻(xiàn)：1何懷冰，秦芝玲，張德成，等.紙層析紫外分光光度法測定丹參注射液中丹參素的含量J.藥物分析雜志，1984，4（4）:2122倪坤儀，張雨梅，于如嘏.薄層掃描測定丹參注射液中水溶性成份J.南京藥學(xué)學(xué)報(bào)，19