中草藥化學(xué)成分一般鑒別方法

1、中草藥化學(xué)成分一般鑒別方法中草藥主要來源于植物。植物的化學(xué)成分較復(fù)雜，有些成分是植物所共有的，如纖維素、蛋白質(zhì)、油脂、淀粉、糖類、色素等。有些成分僅是某些植物所特有的，如生物堿類、甙類、揮發(fā)油、有機(jī)酸、鞣質(zhì)等。 各類化學(xué)成分均具有一定的特性，一般可由藥材的外觀、色、嗅、味等作為初步檢查判斷的手段之一。如藥材樣品折斷后，斷面不油點(diǎn)或擠壓后有油跡者，多含油脂或揮發(fā)油；有粉層的多含淀粉、糖類；嗅之有特殊氣味者，大多含有揮發(fā)油、香豆精、內(nèi)酯；有甜奈者多含糖類；味若者大多含生物堿、甙類、苦味質(zhì)；味酸者含有有機(jī)酸；味澀者多含有鞣質(zhì)等等。 中草藥所含化學(xué)成分均為多類的混合物，分析時(shí)常?；ハ喔蓴_，不易得到正確

2、結(jié)果。因此需根據(jù)中草藥所含各種化學(xué)成分的溶解度、酸堿度、極性等理化性質(zhì)，再用各類成分的鑒別反應(yīng)加以鑒別。 （一）鑒別注意事項(xiàng) 1根據(jù)各灰成分不同性質(zhì)，選用適宜的溶劑提取，以保證等成分能被提取出來。 2檢品提取液的濃度應(yīng)足以達(dá)到各該反應(yīng)的靈敏度。 3檢品提取液的酸堿度（pH）值應(yīng)不致影響鑒別反應(yīng)中所需要的pH值。相差甚大時(shí)應(yīng)事先調(diào)節(jié)。 4提取液較深時(shí)，常易影響觀察鑒別反應(yīng)的效果，此時(shí)可適當(dāng)稀釋，或進(jìn)一步提純。 5鑒別反應(yīng)時(shí)應(yīng)注意防止多類成分的相互干擾，以免出現(xiàn)假陽性，或顏色不正等情況。最好在化學(xué)鑒別的同時(shí)，做空白試驗(yàn)和對(duì)照試驗(yàn)（用已知含某類成分的中草藥或純品做陽性對(duì)照）。 6在鑒別試驗(yàn)中，如果某

3、一類成分的幾個(gè)鑒別反應(yīng)結(jié)果不一致時(shí)（即有的呈陽性反應(yīng)，有的呈陰性）則應(yīng)進(jìn)行全面分析。首先應(yīng)注意呈陽性反應(yīng)的試驗(yàn)是否屬于該類成分的專一反應(yīng)，否則應(yīng)檢查其他類成分能否產(chǎn)生該反應(yīng)，從多方面加以判斷。但也應(yīng)注意，某些反應(yīng)只能對(duì)某一類成分中的某個(gè)化學(xué)基團(tuán)呈性反應(yīng)，如檢查黃酮類的鹽酸鎂粉試驗(yàn)，它只對(duì)黃酮類中的羥基黃酮類（黃酮醇類）反應(yīng)明顯，其余類的黃酮類則不甚明顯，但也不能輕易否定不是黃酮類，為了避免孤立和片面的下結(jié)論，一定要全面考慮綜合分析。 中草藥化學(xué)成分一般鑒別試驗(yàn)屯只是一個(gè)初步判斷，最后確證尚需進(jìn)一步提純，以鑒定后才能予以肯定。 （二）鑒別方法 蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸 （1）加熱或礦酸試驗(yàn)：取檢品的

4、水溶液1ml于試管中，加熱至沸或加5鹽酸，如發(fā)生混濁或有沉淀示含有水溶性蛋白質(zhì)。 （2）縮二脲試驗(yàn)：取檢品的水溶液1ml，加10氧化鈉溶液2滴，充分搖勻，逐漸加入硫酸銅試液，隨加搖勻，注意觀察，如呈現(xiàn)紫色或紫紅色示可能含有蛋白質(zhì)和氨基酸。 凡蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中含有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵（CONH）者均有此反應(yīng)，能在堿性溶液中與Cu2+生成仙絡(luò)合物，呈現(xiàn)一系列的顏色反應(yīng)，二肽呈藍(lán)色，三肽呈紫色，加肽以上呈紅色，肽鍵越多顏色越紅。 （3）茚三酮試驗(yàn)，取檢品的水溶液1ml，加入茚三酮試液23滴，加熱煮沸45分鐘，待其冷卻，呈現(xiàn)紅色棕色或藍(lán)紫色（蛋白質(zhì)、胨類、肽類及氨基酸）。 氨基酸與茚三酮的水合作物作用，氨其

5、酸氧化成醛、氨和二氧化碳，而茚三酮被還原成仲醇，與所后成的氨及另一分子茚三酮縮合生成有藍(lán)紫色的化合物。 【注】茚三酮試劑主要是多肽和氨基酸的顯色劑，反應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。試劑溶液pH值以57為宜，必要時(shí)可加吡啶數(shù)滴或醋酸鈉調(diào)整。 此反應(yīng)非常靈敏，但有個(gè)別氨基酸不能呈紫色，而呈黃色，如脯氨酸。 （4）氨基酸薄層層析檢出反應(yīng)： 吸附劑：硅膠G。 展開劑：（1）正丁醇：水（1：1）（2）正丁醇：醋酸：水（4：1：5） 顯色劑：0.5茚三酮丙酮溶液，噴霧后于1100烘箱放置5分鐘，顯藍(lán)紫允或紫色。 2皂甙 （1）泡沫試驗(yàn)：取檢品的水溶液2ml于帶塞試管中，用力振搖3分鐘，即產(chǎn)生持久性蜂窩狀泡沫（維持10

6、分鐘以上），且泡沫量不少于液體體積的13。 【注】常用的增溶劑吐溫、司盤，振搖時(shí)均能產(chǎn)生持久性泡沫，要注意區(qū)別。 （2）溶血試驗(yàn)：取試管4支，分別加入濾液0.25、0.5、0.75 ml，然后依次分別加入生理鹽水2.25、2.0、1.75、1.5 ml，使每一個(gè)試管中的溶液都成為2.5ml, 再將各試管加入2的血細(xì)胞懸液2.5ml，振搖均勻后，同置于370水浴或25270的室溫中注意觀察溶血情況，一般觀察3小時(shí)即可，或先滴紅細(xì)胞于顯微鏡下，然后滴加檢液看血細(xì)胞是否消失。如有溶血現(xiàn)象示正反應(yīng)。 【注】鞣質(zhì)對(duì)血紅細(xì)胞有凝集作用，干擾溶血試驗(yàn)的觀察，應(yīng)事先除去（可用取勝酰胺粉吸附或用明膠沉淀）。 檢

7、液應(yīng)為中性溶液。 （3）醋酐濃硫酸試驗(yàn)（Liebrmann Burchard反應(yīng)）取檢品的水溶液置蒸發(fā)皿中，于水浴上蒸干，殘?jiān)尤肷倭勘姿崾谷芙?，再加入醋酐濃硫酸?9：1）試液，呈現(xiàn)紅紫色并變成污色綠色（甾類、三萜類成分或皂甙） （4）區(qū)別甾體皂甙和三萜皂甙：取帶塞試管兩支，各盛檢品的水溶解1 ml，1支加0.1N鹽酸溶液2ml，另一支加0.1N氫氧化鈉溶液2ml用力振搖1分鐘（需左右手交替振搖各半分鐘），觀察兩管泡沫的多少，若兩管泡沫體積相同或酸管多，示含三萜式皂甙；若加堿管泡沫多于加酸管示含甾示含甾體皂甙。 三萜皂甙為酸性皂甙在酸性水溶液中形成較穩(wěn)定的泡沫；甾體皂甙為中性皂甙在堿笥溶液

8、中能形成較穩(wěn)定的泡沫。 3糖、多糖或甙類 （1）堿性酒石酸銅試液：取檢品的水溶液12ml（如為醇溶液須將醇蒸發(fā)除去），加入堿笥酒石酸銅試液1ml，于沸水浴上加熱5分鐘，產(chǎn)生棕紅色或磚紅色氧化亞銅沉淀，示有還原糖。 還原糖能使二價(jià)銅鹽（藍(lán)色）還原成氧化亞銅，醛糖的醛基氧化成羧基： 【注】如檢液呈酸性，應(yīng)先堿化。 此反應(yīng)所產(chǎn)生的沉淀由于條件不同，其顏色也不同，質(zhì)點(diǎn)上的呈黃色，質(zhì)點(diǎn)大的呈紅色。有保持性膠體存在時(shí)，也常產(chǎn)生黃色沉淀。 職樣品中含有其他醛、酮及還原較強(qiáng)的其他成分，或中劃藥制劑中附加的抗氧劑、；葡萄糖等均可顯陽性反應(yīng)。 （2）萘酚試驗(yàn)（Molisch紫環(huán)反應(yīng)）：取檢品的水溶液1ml，加5萘

9、酚試液數(shù)滴振搖后，沿管壁滴入56滴濃硫酸，使成兩液層，待23分鐘后，兩層液面出現(xiàn)紫紅色環(huán)（糖、多糖或甙類）。 多糖類遇濃硫酸被水解成單糖，單糖被濃硫酸脫水閉環(huán)，形成糠醛類化合物，在濃硫酸存在下與萘酚發(fā)生酚醛縮合反應(yīng)，生成紫紅色縮合物。 【注】甙的分子結(jié)構(gòu)中含有糖基，一般屬于單糖類，如葡萄糖，鼠李糖、半乳糖，但也有含二分子糖（雙糖）或多分子糖（多糖）。在上述反應(yīng)條件下，甙被水解成單糖，因此甙萘酚試驗(yàn)，系分子中糖部分的反應(yīng)。 由于此反應(yīng)較為靈敏，如有微量濾紙纖維或中草藥粉末存在于溶液中，都能產(chǎn)生上述反應(yīng)。故濾過時(shí)應(yīng)加注意。 （3）多糖的確證試驗(yàn)：取檢品的水溶液5ml于水蒸發(fā)至干，加入1ml蒸餾水，

10、再加入乙醇5ml，如出現(xiàn)沉淀，濾過收集后用少量熱乙醇洗滌，再將沉淀物溶于3ml蒸餾水中，做下例試驗(yàn)。 碘試驗(yàn)：取檢品的不溶液1ml，加碘試液1滴，觀察顏色變化，如呈藍(lán)黑色為地衣糖；紫黑色為糊精；藍(lán)色加熱消失，冷后藍(lán)色再現(xiàn)為淀粉。 多糖水解：取檢品的水溶液1ml，加入稀鹽酸5滴，置沸水浴中加熱1015分鐘，然后用10氫氧化鈉液中和至中性，再加新配制的堿性酒石酸銅試淮4滴，另取檢液1ml，不加酸水解直接加入上述試液4滴，兩管同置水浴上煮沸56分鐘。如果水解后生成棕紅色常常物的量比未經(jīng)水解的多，則示有多糖。 多糖水解后產(chǎn)生單糖，利用單糖的還原性，使銅離子還原成氧化亞銅。 4鞣質(zhì)及酚類 （1）三氯化鐵

11、試驗(yàn)：取檢品的水溶液1ml，加三氯化鐵試液12滴，呈現(xiàn)綠色、污綠色、藍(lán)黑色或暗紫色（可水解鞣質(zhì)顯藍(lán)一藍(lán)黑色，縮合鞣顯綠色一污綠色）。 鞣質(zhì)均是多羥基酚的衍生物，即多元酚，能和三價(jià)鐵離子發(fā)生顏色反應(yīng)生成復(fù)雜的絡(luò)鹽。 【注】此反應(yīng)如遇有礦酸或有機(jī)酸、醋酸鹽等存在，能阻礙顏色的生成。硝基酚類對(duì)三氯化鐵試劑無明顯反應(yīng)。 （2）明膠試驗(yàn)：取檢品的水溶液1ml，加氯化鈉明溶液23滴，即生成白色沉淀物。 鞣質(zhì)有凝固蛋白的性能。 （3）溴試驗(yàn)：取檢品的水溶液1ml，加溴試液12滴，生成白色或沉淀物，示可能含有酚或兒茶酚鞣質(zhì)。 【注】過多的溴會(huì)阻礙鞣質(zhì)的沉淀，因此溴水不宜多加。 （4）香草醛一酸試驗(yàn)：取檢品的水

12、溶液點(diǎn)于濾紙片上，干后，噴霧或滴加香草醛一鹽酸試液，呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)（多元酚類物質(zhì)）。 （5）鞣質(zhì)、酚類薄層層析檢出反應(yīng)： 吸附劑：聚酰胺；硅膠；硅膠；石膏：水（5：1：7）調(diào)成狀，涂成薄板，1050烘干45分鐘。 展開劑：乙醇：醋酸（100：2）；正丁醇：乙酸乙酯：水（5：4：1）；苯：甲醇（95：5）。 顯色劑：10三氯化鐵溶液；1三氯化鐵乙醇溶液與1鐵氰化鉀水溶液（1：1）顯藍(lán)一紫色斑點(diǎn)。 5黃酮及其甙類 （1）鹽酸一鎂（或鋅）粉試驗(yàn)：取檢品的乙醇溶液1ml，加放少量鎂粉（或鋅粉），然后加濃鹽酸45滴，置沸水浴中加熱23分鐘，如出現(xiàn)紅色示有游離黃酮類或黃酮甙（以同法不加鎂或粉做一對(duì)照，如兩管

13、都顯紅色則有花色素存在。如繼續(xù)加碳酸試液使成堿笥即變成紫色雙轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色，即證明含花色素）。 黃酮類的乙醇溶液，在鹽酸存在的情況下，能被鎂粉還原，生成花色甙元而呈現(xiàn)紅色或紫色反應(yīng)（個(gè)別為淡黃色、橙色、紫色或藍(lán)色）。這是由于酮類化合物分子中含有一個(gè)堿性氧原子，致能溶于稀酸中被還原成帶四價(jià)的氧原子即鋅鹽。本法是鑒別黃酮類的一個(gè)反應(yīng)。但花色素本身在酸性下（不需加鎂粉）呈紅色，應(yīng)加以區(qū)別。 【注】此反慶僅在化學(xué)結(jié)構(gòu)中，第三位上帶羥基的酮醇類顯色較明顯，而其它黃酮烷酮類均不甚明顯。因此試驗(yàn)呈陰性反慶是不能做出否定的結(jié)論，尚需結(jié)合其他實(shí)驗(yàn)再做結(jié)論。 試驗(yàn)應(yīng)在醇中進(jìn)行，水分多會(huì)影響顏色的生成。此反慶較慢，有時(shí)

14、需置水浴上加熱，以促使反應(yīng)的進(jìn)行。 （2）熒光試驗(yàn)： 三氯化鋁試驗(yàn)：取檢品的乙醇溶液點(diǎn)于濾紙片上（干后再點(diǎn)1次，使其濃度庥中），干后，噴霧1三氯化鋁乙醇試液，在紫外光燈下觀察，呈現(xiàn)黃色、綠色、橙色等熒光為黃酮類；呈現(xiàn)天藍(lán)色或黃綠色；熒光，則為二氫黃酮類。這是區(qū)別二氫黃酮類化合物的一種鑒別反應(yīng)。 硼酸丙酮枸櫞酸丙酮試驗(yàn)：取檢品的乙醇溶液1ml，在沸水浴上蒸干加入飽和硼酸丙酮溶液及10枸櫞酸丙酮溶液各0.5ml，蒸去丙酮后，在紫外光燈下觀察，管內(nèi)呈現(xiàn)強(qiáng)烈的綠色熒光（黃酮或其甙類）。 （3）堿液試驗(yàn)：取檢品的乙醇溶液點(diǎn)于濾紙片上（干后，再點(diǎn)一次，使其溶液集中），干后，噴1碳酸鈉溶液或在氨蒸氣中熏幾分

15、鐘，呈現(xiàn)亮黃、綠或橙黃色。如將氨氣熏過的濾紙露置空氣中，顏色逐漸裉去而變?yōu)樵械念伾S酮或其甙類）。常見中藥材的水試鑒別法介紹水試法鑒別中藥材，主要是根據(jù)中藥材經(jīng)過水浸泡后產(chǎn)生各種特殊的變化，如顏色改變、產(chǎn)生泡沫、粘性、滑膩、膨脹及其它現(xiàn)象等等，用以確定中藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣。此乃筆者十幾年藥檢工作的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，現(xiàn)介紹如下：1紅花(菊科植物紅花的干燥花)：用水浸泡后，水變成金黃色，花不褪色。2番紅花(鳶尾科植物番紅花的干燥柱頭)：浸泡于水中后，柱頭膨脹呈長(zhǎng)喇叭狀，水面應(yīng)有油狀物漂浮，水被染成黃色，不顯紅色，無沉淀，用棒攪動(dòng)，不易碎斷，否則是偽品。3秦皮：少許浸入水中，因其含有熒光物質(zhì)七葉樹甙和七葉樹

16、素，浸出液在日光下可見藍(lán)色熒光。4香加皮：水或乙醇浸出液，在紫外光下顯紫色熒光，加稀鹽酸熒光不變(與含杠柳總甙有關(guān))，加氫氧化鈉溶液，產(chǎn)生黃綠色熒光(4-甲氧基水楊酸反應(yīng))。而五加皮無此反應(yīng)。5蘇木：投入熱水中，浸液呈鮮艷的桃紅色透明液體，加酸(或醋)液體變?yōu)辄S色，加堿(或石灰水)液體又變紅色。6姜黃：用熱水或乙醇浸泡，呈鮮艷的橙黃色透明液體，加堿(或蘇打水)液體變桃紅色。7熊膽：其粉末投入水杯中，可逐漸溶解而盤旋，有黃線下垂至杯底且不擴(kuò)散。8小通草：水泡后手摸有粘滑感；干品嚼之亦有粘滑感。9南天仙子(水蓑衣)：水浸時(shí)，毛膨脹豎立，蓬松散開，粘性甚大，味淡而粘舌。而天仙子(茄科)無粘性，且味苦

17、。10葶藶子、車前子：加水浸泡后，種子粘滑且體積膨大。11胖大海：熱水浸泡后，體積膨大至原來的數(shù)十倍且呈絮狀團(tuán)。12竹黃：天然竹黃沾到唾液后產(chǎn)生極強(qiáng)的吸舌力，而人工竹黃吸力較小且色澤多為純一白色。天然竹黃水浸液對(duì)酚酞指示劑不顯堿性，而人工竹黃顯堿性反應(yīng)，呈紫紅色。13乳香：加水研磨后成白色乳狀液者為真品。14沒藥：與水研磨形成黃棕色乳狀液者為真品。15青黛：取0.5g加水10ml，振搖后放置片刻，水層不得顯深藍(lán)色，以此檢查是否含有水溶性色素。16兒茶：其水浸出液用火柴桿沾之，使輕微著色，待火柴桿干后，再浸入濃鹽酸中，立即取出，于火焰附近加熱后，桿上發(fā)生深紅色，以此檢查兒茶素。17蘆薈：蘆薈的1

18、100水溶液2ml，加等量飽和溴水，即有四溴蘆薈混合甙的黃色沉淀生成。18牛黃：取少許加清水調(diào)和，涂于指甲上，能將指甲染成黃色并經(jīng)久不褪，俗稱“掛甲”；入口則芳香清涼，味先苦而后微甜，嚼之不粘牙，可慢慢溶化。人工牛黃亦能“掛甲”，但入口后無清涼感，氣微清香而略腥19石膏：取粉末2g，于140烘20分鐘，加水1.5ml攪拌，放置5分鐘，呈粘稠固體。因石膏加熱失去一部分結(jié)晶水而成熟石膏，與水相遇，復(fù)變?yōu)樯喽哂姓承浴e的礦石則無此特性。20銀柴胡：正品水浸液無泡沫反應(yīng)；而偽品山銀柴胡水浸液有較強(qiáng)的泡沫反應(yīng)。21板藍(lán)根：板藍(lán)根根為十字花科植物菘藍(lán)或爵床科植物馬藍(lán)的根。二者的鑒別點(diǎn)在于，菘藍(lán)根的水煎液可顯藍(lán)色熒光；馬藍(lán)根的水煎液則無藍(lán)色熒光反應(yīng)。22遠(yuǎn)志：取粉末0.5g，加熱水10ml，用強(qiáng)力振搖1分鐘，即生成持續(xù)性泡沫，并在10分鐘內(nèi)不消失，以此檢查皂甙。23白芷：取粉末0.5g，加水3ml，振搖后濾過，取濾液2滴，點(diǎn)于濾紙上，置紫外燈光下觀察，顯藍(lán)色熒光。24柴胡：取粉末0.25g放入試管內(nèi)，加蒸餾水5ml，冷浸20分鐘