中藥質(zhì)量控制與質(zhì)量評(píng)價(jià)

1、 中藥質(zhì)量控制與質(zhì)量評(píng)價(jià)一：中藥的有效成分 上現(xiàn)代研究結(jié)果證明中藥的有效成分主要是生物堿、黃酮苷類、酚類、甾醇、蒽酮、木脂素、有機(jī)酸、氨基酸、多糖、蛋白質(zhì)、多肽酶、以及揮發(fā)油萜類。至今為止研究的主要對(duì)象集中在生物堿、皂苷、黃酮、多糖類成分的研究上二：中藥有效成分的提取藥物的粉碎可用超微粉碎技術(shù)。1 中藥有效成分傳統(tǒng)的提取方法1.1 浸漬法 浸潰法:它是最常見的簡(jiǎn)便浸出方法。除特別規(guī)定外,浸漬法一般在常溫下進(jìn)行。其最適用于有效成分遇熱揮發(fā)或易被破壞的藥材。缺點(diǎn)是操作時(shí)間長(zhǎng), 且往往不易完全浸出有效成分。1.2 滲漉法 是用流動(dòng)的溶媒滲過藥粉而進(jìn)行提取。由于隨時(shí)保持相當(dāng)?shù)臐舛炔?故提取效率高,浸出

2、液較澄清,缺點(diǎn)是溶劑消耗量大,費(fèi)時(shí),操作麻煩。1.3 煎煮法 煎煮法是我國(guó)最早使用的傳統(tǒng)的浸出方法。此法簡(jiǎn)便易行,能煎出大部分有效成分,但煎出液中雜志較多,且容易發(fā)生霉變,一些不耐熱揮發(fā)性成分易損失。1.4 回流提取法 在應(yīng)用乙醇等易揮發(fā)的有機(jī)溶媒時(shí),為減少溶媒消耗,提高浸出效率而采用回流熱浸法。循環(huán)回流熱浸法則是采用少量溶媒,通過連續(xù)回流進(jìn)行提取。在回流時(shí)要加熱,故對(duì)受熱易破壞成分不適用,且溶劑耗量仍大,操作麻煩1.5 連續(xù)提取法 連續(xù)提取法是實(shí)驗(yàn)室做中藥有效成分分析時(shí),用有機(jī)溶劑提取中常用的方法,通常用脂肪提取器或稱索氏提取器來(lái)完成。這種提取法,需用溶劑量較少,提取成分也少,但一般需數(shù)小時(shí)

3、才能完成,所以遇熱不穩(wěn)定易變化的中藥成分不宜采用此法。2 中藥有效成分提取新技術(shù)分析2.1 微波萃取技術(shù) 微波萃取技術(shù)的原理就是利用不同組分吸收微波能力的差異,使基體物質(zhì)的某些區(qū)域或萃取體系中的某些組分被選擇性加熱,從而使得被萃取物質(zhì)從基體或體系中分離,進(jìn)入到介電常數(shù)較小、微波吸收能力相對(duì)較差的萃取劑中,并達(dá)到較高的產(chǎn)率。微波提取技術(shù)也具有局限性:(1)富含揮發(fā)性或熱敏性成分的中藥材以及富含淀粉或樹膠的天然植物不適合微波干燥。(2)微波處理具有一定的選擇性。微波干燥要求被處理的物質(zhì)具有良好的吸水性。2.2 吸附分離技術(shù) 吸附分離的方法靈活,設(shè)備簡(jiǎn)單,運(yùn)行成本低。因此,我國(guó)大規(guī)模生產(chǎn)的天然產(chǎn)物甜

4、菊苷和銀杏葉提取物均采用了樹脂吸附分離法。從機(jī)理上說(shuō), 非水吸附應(yīng)包括靜電吸附、氫鍵吸附、絡(luò)合吸附等。非水吸附在中藥成分的提取分離中雖然剛剛開始研究,但已顯示出良好的應(yīng)用前景。2.3 超聲提取法 原理: 超聲波萃取簡(jiǎn)稱UE，是利用超聲波振動(dòng)產(chǎn)生并傳遞強(qiáng)大的能量，并在提取介質(zhì)中產(chǎn)生的強(qiáng)烈空化效應(yīng)、擾動(dòng)效應(yīng)、高加速度、擊碎和攪拌等作用，增大物質(zhì)分子運(yùn)動(dòng)頻率和速度，增加溶劑穿透力，同時(shí)產(chǎn)生瞬時(shí)高溫和極大壓力造成被破碎物細(xì)胞壁及整個(gè)生物體瞬間破裂，加速植物有效成分溶出，促進(jìn)萃取的進(jìn)行，提高提取效率1-2。超聲波次級(jí)效應(yīng)，如：機(jī)械震動(dòng)、乳化、擴(kuò)散、擊碎等，也能加速提取成分的擴(kuò)散、釋放并與溶劑充分混合而利

5、于提取。 超聲波提取法在實(shí)驗(yàn)室中已成功地應(yīng)用于皂苷類、生物堿類、黃酮類、蒽醌類、有機(jī)酸類及多糖類等成分的提取。超聲波提取法無(wú)須加熱,且提取時(shí)間短,提取率高,可以作為實(shí)驗(yàn)室和大生產(chǎn)的模擬工藝。但是超聲波提取對(duì)容器壁的厚薄及容器放置位置要求較高,否則會(huì)影響藥材浸出效果,而且超聲波發(fā)生器工作噪音比較大,所以工業(yè)應(yīng)用有一定的困難,這些問題都有待于進(jìn)一步解決。2.4 超臨界流體提取法 超臨界流體提取法是利用超臨界狀態(tài)下的流體所具有的高密度、低粘度等特征提取中藥有效成分,然后通過降壓的方法,將溶劑與溶質(zhì)相分開,具有萃取和蒸餾雙重作用。由于CO2本身無(wú)毒無(wú)腐蝕性,臨界條件適中,故成為超臨界流體提取法中最常用

6、的超臨界流體。2.5 半仿生提取法 半仿生提取法是將整體藥物研究法與分子藥物研究法相結(jié)合,從生物藥劑學(xué)的角度,模擬口服給藥及藥物經(jīng)胃腸轉(zhuǎn)運(yùn)的原理,將藥料先用一定pH 的酸水提取,繼以一定pH 的堿水提取,提取液分別過濾、濃縮,制成制劑。半仿生提取法能體現(xiàn)中醫(yī)臨床用藥綜合作用的特點(diǎn),符合口服給藥經(jīng)胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)吸收的原理,且在提取過程中,不經(jīng)乙醇處理,可以提取和保留更多的有效成分,縮短生產(chǎn)周期。但目前這種提取方法仍沿襲高溫煎煮法,長(zhǎng)時(shí)間高溫煎煮會(huì)影響許多有效成分,降低藥效。2.6 超濾技術(shù)(膜分離技術(shù)) 超濾是以多孔性半透膜超濾膜作為分離介質(zhì)的一種膜分離技術(shù),與通常的分離方法相比,超濾不需要加熱,不

7、需添加化學(xué)試劑,操作條件溫和,沒有相態(tài)變化,具有破壞有效成分的可能性小、能量消耗少、工藝流程短等優(yōu)點(diǎn)。2.7 酶解提取法 酶解是一種能夠最大限度從植物體內(nèi)提取有效成分的方法之一。中藥的有效成分經(jīng)常與蛋白質(zhì)、果膠、淀粉、植物纖維等雜質(zhì)混合,這些雜質(zhì)不但影響植物細(xì)胞中活性成分的浸出,而且影響中藥液體制劑的澄清度。選擇恰當(dāng)?shù)拿?不但可以將這些雜質(zhì)祛除,而且可以通過酶反應(yīng)較溫和地將植物組織分解,加速有效成分的釋放提取,還可以促進(jìn)脂溶性成分轉(zhuǎn)化為易溶于水的成分而有利于提取。2.8 高速逆流色譜技術(shù) 高速逆流色譜是一種固態(tài)支撐體或載體的液液分配技術(shù)是一種能實(shí)現(xiàn)連續(xù)有效的分配功能的實(shí)用分離技術(shù)。近年來(lái)在天然

8、藥物研究領(lǐng)域獨(dú)顯其特色和作用,它能構(gòu)成連續(xù)、自動(dòng)、高效和非高壓的色譜系統(tǒng),既能實(shí)現(xiàn)從微克量級(jí)的分離到數(shù)克上百毫升量級(jí)的制備提純,又能用于未經(jīng)處理的大量粗制樣品的中間級(jí)分離以及直接與間接的高純度分離,可望解決“要用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不一致的原料,生產(chǎn)出質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)一致的成藥”這一難題。2.9 破碎提取法 破碎提取法是通過使植物材料在適當(dāng)溶劑中破碎而達(dá)到提取的目的。破碎提取法操作簡(jiǎn)單,提取時(shí)間短,避免了高溫加熱,但目前還只是局限于實(shí)驗(yàn)室研究,要應(yīng)用于工業(yè)化大生產(chǎn),仍需進(jìn)一步研究。2.10 液泛提取法 液泛法的應(yīng)用原理是利用加熱溶劑時(shí)所產(chǎn)生的蒸汽,增加液相的湍動(dòng)程度,提高溶質(zhì)的擴(kuò)散速率。同時(shí),不斷加入的冷凝液,使

9、溶質(zhì)與溶劑間保持較高的濃度梯度,提高了相間傳質(zhì)推動(dòng)力,使提取率得到了提高。液泛提取法目前在中藥有效成分的提取中應(yīng)用還很少,其應(yīng)用范圍有待于進(jìn)一步研究、擴(kuò)大。2.11 空氣爆破提取法 空氣爆破法的應(yīng)用原理是利用藥材組織中的空氣受壓縮后突然減壓時(shí)釋放出的強(qiáng)大的力量沖破植物細(xì)胞壁,撕裂植物組織,使藥材結(jié)構(gòu)疏松,有利于溶劑滲入藥材內(nèi)部,以及溶劑在藥材顆粒內(nèi)部的運(yùn)動(dòng)和輸送。空氣爆破提取法適用于提取植物的根、莖、皮、葉等多纖維藥材,但不適用于短纖維和高含淀粉的藥材。固相微萃取(SPME) 是一項(xiàng)新型的無(wú)溶劑化樣品前處理技術(shù)。SPME 以帶有特殊涂層石英纖維作為固相提取器將其浸入樣品溶液或頂空提取,然后直接

10、進(jìn)行GC ,HPLC 分析。SPME由Pawliszyn1 1989 年首次報(bào)道,近10 年來(lái)SPME 技術(shù)已成功的應(yīng)用于氣體,液體及固體樣品的前處理。至今在環(huán)境分析領(lǐng)域已經(jīng)較成熟,但在天然產(chǎn)物分析研究領(lǐng)域的應(yīng)用正處于起步階段。2.12 固相微萃取技術(shù)及原理 固相微萃取法是以固相萃取為基礎(chǔ)發(fā)展起來(lái)的方法,SPME利用了固相萃取吸附的幾何微區(qū)效應(yīng),其裝置結(jié)構(gòu)的超微化決定了它能避開經(jīng)典固相萃取的許多弱點(diǎn)。固相微萃取技術(shù)是在一根纖細(xì)的熔融石英纖維表面涂布一層聚合物并將其作為萃取介質(zhì)(萃取頭) ,再將萃取頭直接浸入樣品溶液(直接浸沒2固相微萃取方法,簡(jiǎn)稱DI2SPME) 或采用頂空-固相微萃取方法(H

11、S2SPME) 采樣。由于聚合物涂層的種類很多,因而可對(duì)樣品組分進(jìn)行選擇性富集和采集。固相微萃取的原理是一個(gè)基于待測(cè)物質(zhì)在樣品及萃取涂層中平衡三：中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)：中藥指紋圖譜與系統(tǒng)生物學(xué)在中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)與控制中的應(yīng)用 中藥的質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)是中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵問題之一，也是中藥研究的難點(diǎn)和熱點(diǎn)。中藥質(zhì)量控制的目的是保證中藥的有效性和安全性。中藥質(zhì)量控制就是監(jiān)測(cè)中藥的藥效物質(zhì)、有毒物質(zhì)及其變化規(guī)律，是依據(jù)一系列質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)中藥生產(chǎn)過程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)與控制。而中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)的技術(shù)、方法和策略的研究是制訂科學(xué)、合理、先進(jìn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)。一些研究者提出了建立基于道地藥材和生物效價(jià)檢測(cè)的中藥生產(chǎn)質(zhì)量管

12、理模式的構(gòu)想，即在嚴(yán)格控制的試驗(yàn)條件下，通過比較標(biāo)準(zhǔn)品和供試品對(duì)生物體或離體器官與組織的特定生物效應(yīng)，從而控制和評(píng)價(jià)中藥的質(zhì)量和活性。這種模式突出體現(xiàn)了中藥的作用效應(yīng)，而不只是某些成分，其應(yīng)用正在摸索中。如果能夠有簡(jiǎn)便易行的生物效應(yīng)測(cè)定法，此種模式將有效控制中藥的實(shí)際質(zhì)量。中藥發(fā)揮藥效作用除了多成分的特點(diǎn)外，還以多靶點(diǎn)、多層次對(duì)機(jī)體產(chǎn)生作用。以代謝組學(xué)為核心的系統(tǒng)生物學(xué)開啟了研究中藥整體性復(fù)雜成分與機(jī)體這一復(fù)雜生物系統(tǒng)相互作用以及中藥“內(nèi)在”、“綜合”質(zhì)量的控制和評(píng)價(jià)新模式的可能性?？筛鶕?jù)每味中藥材都含有多種化學(xué)成分的特點(diǎn)擬以中藥材所含組分的指紋圖譜(包括：高效液相色譜HPLC、高效毛細(xì)管電泳

13、色譜HPCE等)進(jìn)行其品種鑒定(真?zhèn)?；同時(shí)，根據(jù)中藥材所含的化學(xué)成分特點(diǎn)，采用先進(jìn)的分析技術(shù)(高效液相色譜、高效毛細(xì)管電泳色譜、分光光度法等分析方法)，對(duì)中藥材中主要成分含量進(jìn)行比較分析，并采用數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)，以灰色關(guān)聯(lián)度分析模型12，進(jìn)行中藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)模式的研究；并采用多元相關(guān)分析與逐步回歸分析等多元統(tǒng)計(jì)方法，優(yōu)選、簡(jiǎn)化質(zhì)量控制指標(biāo)，從而建立中藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)的技術(shù)平臺(tái)，為中藥材的標(biāo)準(zhǔn)化、國(guó)際化提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)1、中藥指紋圖譜中藥指紋譜是指借助于現(xiàn)代儀器分析手段將中藥化學(xué)成分組合物中的某類化學(xué)物質(zhì)或各個(gè)化學(xué)物質(zhì)的化學(xué)信息從定性和定量?jī)蓚€(gè)角度以圖形(圖像) 的方式來(lái)表征并加以描述的圖譜。最常

14、見的、用得最多的是色譜峰形式。在應(yīng)用中,它借用了法醫(yī)學(xué)的指紋鑒定的概念,具備個(gè)體的絕對(duì)唯一性、物種特征的唯一性和同種個(gè)體之間的相似性,否則,它就沒有鑒別意義了。在現(xiàn)階段的應(yīng)用中,指紋譜獲取和指紋譜計(jì)算是兩個(gè)核心問題。指紋譜獲取是指采用色譜、光譜或聯(lián)用等儀器分析手段獲取能表征中藥化學(xué)成分組合物組成特征的組分群體分析圖譜或圖像;指紋譜計(jì)算是指運(yùn)用計(jì)算分析技術(shù)對(duì)所獲得的圖譜或圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行科學(xué)處理,通過篩選、簡(jiǎn)并和綜合,獲得專屬、宏觀、整體的化學(xué)特征信息,并對(duì)組合物中化學(xué)組成的總體差異程度進(jìn)行定量估測(cè)。處理方法可應(yīng)用多元統(tǒng)計(jì)、人工神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)、統(tǒng)計(jì)學(xué)習(xí)、模式識(shí)別、模糊數(shù)學(xué)、最優(yōu)化技術(shù)等。在綜合處理和分析

15、上,化學(xué)特征提取、化學(xué)模式分類、相似性測(cè)度性能評(píng)價(jià)、統(tǒng)計(jì)質(zhì)量控制計(jì)算、相似度計(jì)算和算法性能等都直接影響中藥指紋譜的可靠性。國(guó)內(nèi)不同的研究組開發(fā)了各具特色的功能軟件,在使用和功能上各有千秋,應(yīng)有相應(yīng)的監(jiān)管部門統(tǒng)一協(xié)調(diào),各取所長(zhǎng),發(fā)展形成國(guó)家認(rèn)證、認(rèn)可的中藥指紋譜計(jì)算分析方法學(xué)體系。中藥指紋圖譜是指某種(或某產(chǎn)地)中藥材或中成藥經(jīng)適當(dāng)?shù)奶幚砗?，采用一定的分析手段，得到的能夠?biāo)志該中藥特征的色譜圖或光譜圖。指紋圖譜強(qiáng)調(diào)的是多個(gè)成分以相對(duì)穩(wěn)定的比例關(guān)系及位置順序相互制約的完整的色譜或綜合的光譜特征，即指紋圖譜的整體性特征和共同特征的基礎(chǔ)上個(gè)體之間又相互有差異的模糊特征性。這與中醫(yī)藥理論的機(jī)體整體調(diào)節(jié)和

16、辨證施治的原則相一致。評(píng)價(jià)及與藥效和毒性相關(guān)的評(píng)價(jià)中的作用。中藥指紋圖譜是目前能夠?yàn)閲?guó)內(nèi)外廣泛接受的一種中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)模式，由于國(guó)情和傳統(tǒng)的原因，不同國(guó)家的應(yīng)用方法和思路有某些差異。日本把采用道地藥材按飲片配方煎煮得到的煎汁作為標(biāo)準(zhǔn)提取物， 標(biāo)準(zhǔn)提取物的指紋圖譜即為標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜， 以此對(duì)生產(chǎn)的原料、配方和工藝作嚴(yán)格控制， 使成品指紋圖與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜一致。法國(guó)和德國(guó)的植物藥制劑大多以“標(biāo)準(zhǔn)浸膏” 投料， 減少了以植物藥為直接原料帶來(lái)的不穩(wěn)定性， 然后嚴(yán)格控制生產(chǎn)工藝的各個(gè)過程， 保證成藥指紋圖譜的穩(wěn)定性。質(zhì)量控制可以采用指紋圖譜。在國(guó)外對(duì)植物制劑的指紋圖譜研究中， 主要是針對(duì)單味藥材提取物而言，

17、在植物制劑的整體性作用和藥效相關(guān)性方面缺乏理論依據(jù)和相應(yīng)的理論指導(dǎo)， 并不適用于中藥材及中藥制劑的質(zhì)量評(píng)價(jià)。國(guó)內(nèi)中藥指紋圖譜研究開始僅作為一種指紋性對(duì)比， 用于鑒定中藥材的種屬。如HPLC、GC、TLC、CE、IR 等以及一些聯(lián)用技術(shù)。但是研究仍處于起始階段， 對(duì)指圖譜在質(zhì)量控制方面的全面認(rèn)識(shí)有待深化（1） 中藥指紋圖譜分析方法 薄層色譜是最早用于中藥指紋圖譜研究的技術(shù)，也是目前用于中藥真實(shí)性評(píng)價(jià)的普遍方法。HPLC及其各種聯(lián)用技術(shù)幾乎成為中藥指紋圖譜的通用工具。a. 毛細(xì)管電泳分析它是年來(lái)興起的一種新型分離方法。它以高壓電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力,以毛細(xì)管為分離通道,依據(jù)樣品中各組分之間電泳淌度或分配行為

18、的差異而實(shí)現(xiàn)分離。這一技術(shù)與高效液相色譜法相比,具有制樣要求低、分離效率高、分析時(shí)間短、進(jìn)樣量少、檢測(cè)限低、重現(xiàn)性好、柱子不易污染、儀器簡(jiǎn)單、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)。 b.光譜法也是有效而簡(jiǎn)便的指紋圖譜分析方法。c. 薄層色譜法薄層色譜法具有設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便、分離速度快等特點(diǎn)。一般采用吸附薄層，吸附劑大多用硅膠和聚酰胺。常被作為定性和半定量的手段 d. 各種色譜聯(lián)用技術(shù)。在中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制方面也有較好的前景。HPLCMS,HPLC-NMR,HPLC-IR等方法e. 氣相色譜法GC f. 高效液相色譜法HPLC分析方法主要有比色法、分光光度法、極譜法、模擬移動(dòng)床色譜、超臨界液體色譜。（2）中藥指紋

19、圖譜作用指紋圖譜用于中藥的質(zhì)量一致性和穩(wěn)定性評(píng)價(jià) 指紋圖譜信息量大，特征性強(qiáng)，能較有效地表征中藥產(chǎn)品質(zhì)量，指紋圖譜技術(shù)除用于中藥材產(chǎn)地、采收季節(jié)、儲(chǔ)存時(shí)間等因素的考察，為藥材的質(zhì)量控制提供依據(jù)外，更用于評(píng)價(jià)中藥產(chǎn)品的質(zhì)量一致性及穩(wěn)定性，用以中藥生產(chǎn)過程的質(zhì)量控制。通過對(duì)藥材、中間體和成品制劑指紋圖譜的相關(guān)性研究，利用指紋圖譜作為監(jiān)控手段控制投料藥材和中間體的質(zhì)量，以保證中藥制劑的質(zhì)量穩(wěn)定性。我們?cè)谶M(jìn)行復(fù)方大青葉注射液指紋圖譜研究時(shí)，為其組成藥味的藥材建立了標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；同時(shí)對(duì)生產(chǎn)工藝中每一步所得的中間體都進(jìn)行指紋指紋圖譜用于中藥的真實(shí)性評(píng)價(jià) 通過比較，根據(jù)指紋圖譜譜峰的強(qiáng)度和位置對(duì)各種成分進(jìn)行

20、分析對(duì)比，從而確定是否是同一種成分圖譜分析，找出了影響產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵步驟；企業(yè)用；企業(yè)用指紋圖譜監(jiān)控生產(chǎn)過程，使各企業(yè)的產(chǎn)品的質(zhì)量均一、穩(wěn)定。許國(guó)旺課題組1211建立了參麥注射液的特征指紋圖譜，適用于參麥注射液生產(chǎn)質(zhì)量的控制。曹進(jìn)等I恐1建立了復(fù)方清開靈注射液的指紋圖譜，并同時(shí)對(duì)其中7種成分進(jìn)行了定量測(cè)定，為其質(zhì)量控制提供了一種可以同時(shí)實(shí)現(xiàn)整體定性、指標(biāo)成分定量且簡(jiǎn)便易行的方法模式。中藥指紋圖譜用于中藥的藥效相關(guān)性評(píng)價(jià) 將中藥指紋圖譜所體現(xiàn)的化學(xué)成分信息與中藥的體內(nèi)外活性即藥效信息相結(jié)合，是評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量與藥效相關(guān)性的又一進(jìn)展。這種方法是利用計(jì)算機(jī)技術(shù)和化學(xué)統(tǒng)計(jì)方法將指紋峰及其面積等化學(xué)數(shù)據(jù)與中

21、藥的主要藥效數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析、主成分分析等相關(guān)處理，提取與藥效相關(guān)的有效成分群，并以此為其質(zhì)量控制的指標(biāo)。這種方法尤其適合于中藥復(fù)方制劑的研究。在傷寒論名方苓桂術(shù)甘湯的研究中，采用逐步回歸分析和典型相關(guān)分析將指紋圖譜和藥理指標(biāo)二類數(shù)據(jù)相關(guān)聯(lián)，發(fā)現(xiàn)17個(gè)峰所代表的化學(xué)成分對(duì)藥效有顯著貢獻(xiàn)，可作為其質(zhì)量控制指數(shù)。這種與藥效相關(guān)聯(lián)的中藥指紋圖譜彌補(bǔ)了單純化學(xué)指紋圖譜的不足，可為中藥質(zhì)量控制提供更為科學(xué)有效的數(shù)據(jù)。2、系統(tǒng)生物學(xué)（1） 系統(tǒng)生物學(xué)系統(tǒng)生物學(xué)作用系統(tǒng)生物是美國(guó)的Hood教授提出的概念和研究體系。它涵蓋了基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)等多種組學(xué)I雛刎。系統(tǒng)生物學(xué)是以整體性研究為特

22、征的一門科學(xué)，其認(rèn)識(shí)生物的觀點(diǎn)是從局部觀走向整體觀，從線性思維走向復(fù)雜性思維。應(yīng)用系統(tǒng)生物學(xué)的各種組學(xué)策略和技術(shù)對(duì)中藥的種質(zhì)資源、配伍規(guī)律、內(nèi)在成分和藥效物質(zhì)、作用機(jī)制和作用靶點(diǎn)及安全性等進(jìn)行研究，將為實(shí)現(xiàn)中藥“內(nèi)在”、“綜合”質(zhì)量的評(píng)價(jià)和控制奠定重要的基礎(chǔ)。(2)系統(tǒng)生物學(xué)的作用1系統(tǒng)生物學(xué)在中藥種質(zhì)資源和中藥材質(zhì)量控制中的作用大部分中藥都來(lái)源于植物，但隨著野生植物資源短缺，相當(dāng)一部分中藥材由野生型改為人工繁育、種植，我國(guó)建立了數(shù)百個(gè)中藥材規(guī)范化種植基地。為確保中藥資源的質(zhì)量，需要以基因組學(xué)等技術(shù)對(duì)中藥種質(zhì)資源進(jìn)行研究。植物功能基因組學(xué)主要包括利用分子生物學(xué)和生物信息學(xué)方法系統(tǒng)地研究與其成分

23、的生物合成及其代謝調(diào)控相關(guān)的基因；比較分析DNA指紋圖譜，對(duì)相關(guān)基因進(jìn)行功能分析，確定影響其品質(zhì)的基因。中藥材基因組學(xué)研究將能建立道地藥材的真?zhèn)舞b別系統(tǒng)，以確保中藥材的質(zhì)量，保護(hù)名貴、稀有中藥材的種質(zhì)資源。例如，用DNA芯片可鑒別不同種屬石斛30l，marK基因的測(cè)序分析可成為杜仲正品鑒定的有效手段t311。此外，對(duì)藥用植物野生株和人工繁育株的代謝表型、在不同外界環(huán)境影響下的活性化合物代謝途徑和相關(guān)代謝網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行代謝組學(xué)研究，也將有利于解決遺傳育種和品質(zhì)改良中的問題，為中藥資源的可持續(xù)發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)和保障。利用代謝組學(xué)方法檢測(cè)代謝物的變化能夠判斷基因表達(dá)水平的變化，從應(yīng)用代謝組學(xué)技術(shù)監(jiān)測(cè)藥材的

24、整體代謝物組是評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量的一種綜合模式。許國(guó)旺課題組采用氣相色譜和氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)青蒿的植物代謝物及代謝指紋譜進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)青蒿在不同的生長(zhǎng)階段的代謝指紋譜有明顯的差異。用代謝組學(xué)方法對(duì)中藥銀杏葉的次生代謝物的影響因素進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)光照使銀杏苦內(nèi)酯、白果內(nèi)脂含量升高，甚至采摘時(shí)間也會(huì)對(duì)銀杏葉的次生代謝物的含量產(chǎn)生影響341。Tianniam等采用GCTOF方法分析了日本不同產(chǎn)地東當(dāng)歸的代謝物組，并結(jié)合主成分分析實(shí)現(xiàn)了對(duì)東當(dāng)歸栽培基地、氣候和處理方法的有效區(qū)分。用1HNMR獲得的迷迭香全成分譜可實(shí)現(xiàn)對(duì)采收季節(jié)的檢測(cè)區(qū)分閉。由此可見，基因?qū)W和代謝組學(xué)方法能實(shí)現(xiàn)中藥道地性、品質(zhì)及其影響因素的有效監(jiān)控

25、。治療疾病。代謝組學(xué)通過認(rèn)識(shí)機(jī)體“代謝指紋圖譜”變化的原因，闡明中藥作用的靶點(diǎn)或受體，在闡明作用機(jī)制的同時(shí)，搞清發(fā)揮作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。在中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的代謝組學(xué)研究方面，羅國(guó)安等1371提出了“化學(xué)物質(zhì)組學(xué)”的研究思路，并按照此思路進(jìn)行了清開靈注射液的藥效物質(zhì)和配伍研究。將有效組分配伍，組成新復(fù)方，為組分中藥作為復(fù)方藥物提供了理論基礎(chǔ)。我們應(yīng)用代謝組學(xué)的策略進(jìn)行中藥的藥效物質(zhì)組學(xué)研究閉，對(duì)補(bǔ)腎中藥淫羊藿、骨碎補(bǔ)等進(jìn)行的系統(tǒng)研究中，獲得其化學(xué)成分譜、進(jìn)人體內(nèi)的成分及其產(chǎn)生的代謝物譜；比較大鼠體內(nèi)基礎(chǔ)代謝物譜、腎陽(yáng)虛大鼠代謝物譜及給藥干預(yù)后的代謝物譜，探索其補(bǔ)腎作用機(jī)制及藥效物質(zhì)組I剪刪。劉昌孝課

26、題組用代謝組學(xué)方法研究了鉤藤等多味中藥組成的多動(dòng)合劑的藥效作用物質(zhì)基礎(chǔ)，發(fā)現(xiàn)該中藥激發(fā)機(jī)體形成洋地黃樣的多肽物質(zhì)是緩解心衰的物質(zhì)基礎(chǔ)。系統(tǒng)生物學(xué)中的代謝組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)都有報(bào)道用于中藥作用機(jī)制研究，22系統(tǒng)生物學(xué)在中藥藥效控制和作用機(jī)制研究中的作用中藥進(jìn)入機(jī)體后，以其多組分、多靶點(diǎn)協(xié)同作用而發(fā)揮藥效作用，協(xié)調(diào)干預(yù)人體內(nèi)源性代謝物組來(lái)代謝組學(xué)研究的報(bào)道更多。采用GCMS和多元統(tǒng)計(jì)方法對(duì)氫化可的松誘導(dǎo)腎虛證及用溫陽(yáng)中藥干預(yù)后大鼠的生物化學(xué)譜進(jìn)行代謝組學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)溫陽(yáng)中藥對(duì)腎陽(yáng)虛的作用機(jī)制1421。在對(duì)人參總皂苷雙向調(diào)節(jié)高血壓作用機(jī)制研究中，通過分析相關(guān)生物標(biāo)志物的形成、轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制和過程，深入了解高血壓的發(fā)病機(jī)制和人參總皂苷的雙向調(diào)節(jié)作用。對(duì)乙醇引起肝毒性的大鼠給予傳統(tǒng)中藥制劑茵陳蒿湯，研究治療組、肝中毒組和空白對(duì)照組大鼠尿液代謝組的差異，確定神經(jīng)胺(d18：125：0)為乙醇所致肝毒性的標(biāo)記物，茵陳蒿湯顯示對(duì)不正常代謝途徑的“修復(fù)”作用m1。依據(jù)多基因致病的關(guān)聯(lián)特性，通過蛋白質(zhì)表達(dá)譜和表達(dá)產(chǎn)物的差比性分析，可以揭示證候發(fā)生和發(fā)展的