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1、實(shí)驗(yàn)六 維生素C含量的測(cè)定2, 6-D滴定法一、目的意義o人類營(yíng)養(yǎng)中最重要的維生素之一。缺乏時(shí)引人類營(yíng)養(yǎng)中最重要的維生素之一。缺乏時(shí)引起壞血病。起壞血病。o果蔬質(zhì)量的重要目的之一。果蔬質(zhì)量的重要目的之一。o不同栽培條件,不同成熟度都可以影響水果、不同栽培條件,不同成熟度都可以影響水果、蔬菜中維生素蔬菜中維生素C C的含量。的含量。o水果、蔬菜保鮮貯藏必需測(cè)定維生素水果、蔬菜保鮮貯藏必需測(cè)定維生素C C含量,含量,了解果蔬質(zhì)量量的高低。了解果蔬質(zhì)量量的高低。測(cè)定方法:滴定管活塞操作滴定操作2.6-2.6-二氯酚靛酚滴定法二氯酚靛酚滴定法滴定操作2.6-2.6-二氯酚靛酚滴定法二氯酚靛酚滴定法o維
2、生素維生素C: 強(qiáng)的復(fù)原性強(qiáng)的復(fù)原性o將染料將染料2.6-D 復(fù)原成無色的復(fù)原成無色的2.6-Do2.6-二氯酚靛酚二氯酚靛酚:強(qiáng)的氧化性強(qiáng)的氧化性o中性中性/堿性堿性: 藍(lán)色藍(lán)色o酸性酸性:紅色紅色復(fù)原型復(fù)原型抗壞血酸抗壞血酸氧化型氧化型2.6-2.6-二氯酚靛酚二氯酚靛酚 紅色紅色復(fù)原型復(fù)原型2.6-2.6-二氯酚靛酚二氯酚靛酚 無色無色氧化型氧化型2.6-2.6-二氯酚靛酚藍(lán)色二氯酚靛酚藍(lán)色 O =C |HO C HO C | H C |HO CH | CH2OHO O =C | O = C | O = C | H C |HO CH | CH2OHO脫氫脫氫抗壞血酸抗壞血酸=NO-Cl
3、|O= |Cl=NOHCl |O= |ClNOHCl |HO |Cl |HH+OH-三、操作步驟三、操作步驟1. 1. 樣品提取樣品提取 2. 2.染料標(biāo)定及樣品中染料標(biāo)定及樣品中VcVc測(cè)定測(cè)定試劑ml空白染料標(biāo)定1染料標(biāo)定2樣品測(cè)定1樣品測(cè)定22%草酸100000規(guī)范Vc 0101000樣品提取液00010102, 6-D滴定值y1Vy0l y1- y1-滴定空白所用染料滴定空白所用染料mlml數(shù)數(shù)l y0- y0-滴定樣品所用染料滴定樣品所用染料mlml數(shù)數(shù)l A-1mL A-1mL染料溶液相當(dāng)?shù)目箟难岬娜玖先芤合喈?dāng)?shù)目箟难岬膍gmg數(shù)數(shù)四、結(jié)果計(jì)算樣品重樣品重(g) 1001001
4、0抗壞血酸含量抗壞血酸含量mg/100g mg/100g 鮮重鮮重 = =y0-y1A從上述標(biāo)定求出從上述標(biāo)定求出五、本卷須知1. Vc1. Vc不穩(wěn)定,在空氣中易被氧化,研磨時(shí),盡能夠要快,不穩(wěn)定,在空氣中易被氧化,研磨時(shí),盡能夠要快,以減少以減少VcVc的氧化。的氧化。2. 2% 2. 2% 草酸可以有效抑制草酸可以有效抑制VcVc氧化酶活性。假設(shè)用樣品含有大氧化酶活性。假設(shè)用樣品含有大量量Fe2+Fe2+,可用,可用8%8%醋酸溶液提取,因在醋酸溶液提取,因在2%2%草酸中草酸中Fe2+ Fe2+ 仍仍可以復(fù)原可以復(fù)原2,6-D, 2,6-D, 改用改用8%8%醋酸溶液提取,醋酸溶液提取
5、,F(xiàn)e2+Fe2+不會(huì)很快與不會(huì)很快與染料起作用。染料起作用。3. 3.維生素維生素C C提取時(shí)要避光、防止與銅鐵接觸,以免提取時(shí)要避光、防止與銅鐵接觸,以免VcVc氧化。氧化。4. 樣品提取液定容時(shí)假設(shè)泡沫太多,可加幾滴乙醚或樣品提取液定容時(shí)假設(shè)泡沫太多,可加幾滴乙醚或辛酸、丁醇消除泡沫后再定容。辛酸、丁醇消除泡沫后再定容。5. 當(dāng)樣品本身帶有顏色時(shí),可以用白陶土脫色。當(dāng)樣品本身帶有顏色時(shí),可以用白陶土脫色。6. 滴定時(shí)間普通不超越滴定時(shí)間普通不超越2分鐘,滴定終點(diǎn)以淡紅色存分鐘,滴定終點(diǎn)以淡紅色存在在30秒為準(zhǔn)。由于樣品中某些雜質(zhì)亦能復(fù)原秒為準(zhǔn)。由于樣品中某些雜質(zhì)亦能復(fù)原2,6-D,但速度較但速度較Vc慢,假設(shè)滴定速度過慢,其它物質(zhì)也會(huì)慢,假設(shè)滴定速度
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