實驗室檢測技術(shù)(shl)課件

1、- 0 -黃山德青源種禽有限公司2012-2012-8 8- -3131準(zhǔn)備準(zhǔn)備 陳騰飛陳騰飛- 1 -黃山德青源種禽有限公司目目 錄錄一、細菌對生產(chǎn)的危害及藥敏試驗一、細菌對生產(chǎn)的危害及藥敏試驗二、血清學(xué)檢測技術(shù)在生產(chǎn)中的應(yīng)用二、血清學(xué)檢測技術(shù)在生產(chǎn)中的應(yīng)用三、活苗病毒含量的測定（三、活苗病毒含量的測定（EID50EID50）及無菌檢驗）及無菌檢驗四、滅活苗穩(wěn)定性和粘度實驗四、滅活苗穩(wěn)定性和粘度實驗五、飼料理化檢測技術(shù)五、飼料理化檢測技術(shù)- 2 -黃山德青源種禽有限公司 一、細菌對生產(chǎn)的危害及藥敏試驗一、細菌對生產(chǎn)的危害及藥敏試驗 認(rèn)識微生物： 微生物是一切肉眼看不見或看不清的微小生物。 具

2、有個體小，種類多，繁殖速度快，分布廣泛，活性強，易變異的特點。 細菌，病毒，真菌，放線菌，螺旋體，立克次氏體，支原體，衣原體 細菌：一類細胞細短，結(jié)構(gòu)簡單，胞壁堅韌，多以二分裂方式繁殖和水生性強的原核生物。 生長條件：水，營養(yǎng)物質(zhì)（代謝和合成所需的元素），能量（溫度）等 菌落: 單個細菌用肉眼是看不見的，當(dāng)單個或少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時，便會形成一個 肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群落。 目前理化中心對生產(chǎn)場區(qū)進行的微生物檢測包括：水質(zhì)的細菌總數(shù)及大腸菌群；空氣細菌總數(shù)；泄殖腔（竹排）沙門氏菌；飼料的細菌總數(shù)、大腸、霉菌及沙門；空舍的細菌總數(shù)及孵化廠上孵、落盤微生物；雛雞沙門等。

3、分為四大類：細菌總數(shù)、大腸菌群、沙門氏菌、霉菌總數(shù)，以后將要關(guān)注的有綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌、巴氏桿菌等- 3 -黃山德青源種禽有限公司1.1 水質(zhì)管理對家禽生產(chǎn)性能的影響 水是最關(guān)鍵的營養(yǎng)物質(zhì) ，家禽的攝水量幾乎是采食量的2倍 在家禽代謝中的作用： 體溫調(diào)節(jié) 食物的消化 廢物的排泄水是家禽有效生產(chǎn)的最基本因素- 4 -黃山德青源種禽有限公司 水中微生物能夠影響腸道內(nèi)的微生物菌群 腸道微生物菌群的作用： . 維護腸道健康 . 抵制疾病 . 生產(chǎn)性能和效益 . 利潤率 . 食品安全 影響水質(zhì)的重要因素：u 細菌和其他微生物u 礦物質(zhì)u pH值u 水線衛(wèi)生狀況u 水質(zhì)監(jiān)測 目前我們所檢測的細菌總數(shù)

4、的含量標(biāo)準(zhǔn)cfu100/ml；大腸1/ml- 5 -黃山德青源種禽有限公司v 保證最優(yōu)水質(zhì)的步驟： 第一步：檢測 測定水中的細菌數(shù)量（總細菌數(shù)和大腸菌）；測定水的pH值；測定水的硬度；測定水中礦物質(zhì)含量 我們每個車間都應(yīng)做的工作v 有效控制微生物的含量 1、氯化處理 2、使用碘液消毒 3、臭氧消毒 4、過氧化氫消毒 5、酸化處理清潔改良處理- 6 -黃山德青源種禽有限公司1.2大腸菌群及沙門對家禽的影響 所謂總大腸菌群系指一群在37培養(yǎng)24小時能發(fā)酵乳酸、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。 大腸菌群分布較廣，在溫血動物糞便和自然界廣泛存在-條件性致病菌 大腸桿菌（escheric

5、hia coli）一般不致病。但致病性大腸菌株能引起食物中毒。致病性菌株能侵入腸粘膜上皮細胞，具有痢疾桿菌樣致病力：如腹膜炎、壞死性腸炎等。 革蘭氏陽性菌 革蘭氏陰性菌- 7 -黃山德青源種禽有限公司 家禽沙門氏菌感染可以分為兩種類型：一種是直接危害家禽健康的沙門氏菌感染（雛雞白痢沙門氏菌和雞傷寒沙門氏菌），另一種是危害人類健康的沙門氏菌感染，即副傷寒沙門氏菌，如：腸炎沙門氏菌和鼠傷寒沙門氏菌。 腸道中的沙門氏菌即可經(jīng)腸系膜淋巴結(jié)和淋巴組織進入血液引起全身感染，甚至死亡。如雞白痢沙門氏菌，主要侵害雛雞，引起敗血癥，可造成大批死忙。在成年母雞則主要引起卵巢炎，可在卵黃內(nèi)帶菌而傳給幼雛。- 8 -

6、黃山德青源種禽有限公司- 9 -黃山德青源種禽有限公司 分離鑒定分離鑒定 ELISA PCR 卵黃抗體檢測卵黃抗體檢測 平板凝集試驗平板凝集試驗- 10 -黃山德青源種禽有限公司- 11 -黃山德青源種禽有限公司1.3 藥敏試驗v 抑菌圈： 抗菌藥物紙片在其周圍因抑制細菌生長而出現(xiàn)的無菌生長區(qū)域。v 選擇原則應(yīng)考慮到藥物臨床療效、耐藥菌株流行情況、預(yù)防耐藥菌株產(chǎn)生和經(jīng)濟的綜合因素，最終目的是達到控制感染 用無菌鑷子夾取待檢組織均勻涂布于麥糠凱培養(yǎng)基表面。v 用無菌鑷子夾取制備好的各種藥敏紙片，分別貼到培養(yǎng)基表面，并用鑷子輕壓紙片，使藥敏紙片與培養(yǎng)基表面貼緊。為了能準(zhǔn)確觀察結(jié)果，要求藥敏紙片均勻

7、分布于培養(yǎng)基表面，位置安排適中，防止出現(xiàn)抑菌圈重疊現(xiàn)象。一般可在平皿中央貼一片，外周等距離貼6片。對于自制藥敏試紙，在每貼一種試紙后，應(yīng)在平板底部做好標(biāo)記或貼上標(biāo)簽。v 將貼好藥敏試紙的平板置于4冰箱中15min，使藥物充分?jǐn)U散后,再將平板底部在下，置361培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1824h。v 結(jié)果觀察 用直尺測量抑菌圈直徑的大小，以 mm為單位。 13低敏；14-17中敏；18高敏- 12 -黃山德青源種禽有限公司 二、二、 血清學(xué)檢測技術(shù)在生產(chǎn)中的應(yīng)用血清學(xué)檢測技術(shù)在生產(chǎn)中的應(yīng)用 1 、 常規(guī)檢測：平板凝集試驗、瓊脂擴散試驗（AGP)、血凝試驗（HA）、血凝抑制試驗（HI）。 2 、 酶聯(lián)免疫吸附試

8、驗（ELISA)。 用疫苗按一定免疫程序進行免疫接種是控制雞病流行的主要途徑之一，但用疫苗按一定免疫程序進行免疫接種是控制雞病流行的主要途徑之一，但雞群免疫抗體的產(chǎn)生及維持時間受到雞群免疫應(yīng)答能力、所用疫苗種類、免疫雞群免疫抗體的產(chǎn)生及維持時間受到雞群免疫應(yīng)答能力、所用疫苗種類、免疫方法、免疫次數(shù)、疫病流行狀況等方面的影響，良好的免疫接種不等于雞群能方法、免疫次數(shù)、疫病流行狀況等方面的影響，良好的免疫接種不等于雞群能夠產(chǎn)生良好的保護力。因而通過對雞群進行抗體監(jiān)測，及時檢查雞群的免疫狀夠產(chǎn)生良好的保護力。因而通過對雞群進行抗體監(jiān)測，及時檢查雞群的免疫狀態(tài)、疫苗使用效果，為制定合理的免疫程序提供依

9、據(jù)就顯得非常重要。因此，態(tài)、疫苗使用效果，為制定合理的免疫程序提供依據(jù)就顯得非常重要。因此，建立開展免疫抗體監(jiān)測工作，成為我們養(yǎng)雞生產(chǎn)中的一項重要工作。下面將抗建立開展免疫抗體監(jiān)測工作，成為我們養(yǎng)雞生產(chǎn)中的一項重要工作。下面將抗體監(jiān)測所需設(shè)備及體監(jiān)測所需設(shè)備及檢測項目、檢測項目、監(jiān)測過程向大家做一說明。監(jiān)測過程向大家做一說明。 血清學(xué)檢測項目：血清學(xué)檢測項目：- 13 -黃山德青源種禽有限公司 定義 血凝（HA）：某些病素或病毒的血凝素，能選擇性地使某種或某幾種動物的紅細胞發(fā)生凝集，這種凝集紅細胞的現(xiàn)象稱為血凝，也稱直接血凝反應(yīng)。 血凝抑制（HI）：當(dāng)病毒的懸液中先加入特異性抗體，且這種抗體的

10、量足以抑制病毒顆?；蚱溲貢r，則紅細胞的表面的受體就不能與病毒顆?；蚱溲刂苯咏佑|，這時紅細胞的凝集現(xiàn)象被抑制，稱為紅細胞凝集抑制反應(yīng)，也稱血凝抑制反應(yīng)。 抗原：凡能刺激機體產(chǎn)生抗體，并能與抗體結(jié)合而發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)成為抗原。2.1 2.1 凝集試驗（凝集試驗（HAHA）與凝集抑制試驗（）與凝集抑制試驗（HIHI）- 14 -黃山德青源種禽有限公司 適用范圍：適用于對雞新城疫適用于對雞新城疫(ND)(ND)，禽流感，禽流感(AI:H9(AI:H9、H5(H5-4H5(H5-4、H5-5)H5-5)亞型亞型) )，雞減蛋，雞減蛋綜合癥綜合癥(EDS)(EDS)抗體滴度的檢測?？贵w滴度的檢測。

11、抗體：是機體受到抗原物質(zhì)刺激產(chǎn)生的具有特異性的球蛋白，它能與相應(yīng)的抗原結(jié)合，發(fā)生各種反應(yīng)，并具有一定的解除相應(yīng)病原微生物及其產(chǎn)物的有害作用的能力?？贵w和其他免疫球蛋白一樣，可被中性鹽類沉淀- 15 -黃山德青源種禽有限公司 判定標(biāo)準(zhǔn)：1.ND：育雛育成雞在6以上，產(chǎn)蛋雞在8以上2.H5：育雛育成雞在5以上，產(chǎn)蛋雞在7以上3.H9：育雛育成雞在6以上，產(chǎn)蛋雞在8以上注注：在實際生產(chǎn)中，則以實際免疫程序進行分析抗體滴度值的高低。：在實際生產(chǎn)中，則以實際免疫程序進行分析抗體滴度值的高低。免疫后抗體規(guī)律免疫后抗體規(guī)律一般活疫苗免后7-10天產(chǎn)生抗體，2-3周抗體到達峰值，可以維持1-2個月滅活疫苗免后

12、10-15天產(chǎn)生抗體，3-4周抗體到達峰值，可以維持3-4個月對H5抗體要求711 log2，低于6log2時及時免疫H9抗體在8-11 log2，當(dāng)最低抗體為7log2時及時免疫H9單苗ND抗體在8-12 log2產(chǎn)蛋雞最低值7log2補苗- 16 -黃山德青源種禽有限公司2.2 2.2 ELISAELISA抗體檢測操作規(guī)程抗體檢測操作規(guī)程 酶聯(lián)免疫吸附試驗是免疫酶技術(shù)應(yīng)用最廣的一種，是繼免疫熒光技術(shù)和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的又一種免疫酶技術(shù)，目前廣泛用于多種細菌和病毒等疾病的診斷。 ELISA分為競爭ELISA、夾心ELISA、間接ELISA，我們現(xiàn)在檢測的主要是間接ELISA。- 17

13、 -黃山德青源種禽有限公司 間接ELISA：一般用于抗體的檢測，將已知抗原包被于固相載體上，加入含有特異性抗體的被檢血清，再經(jīng)洗滌后加入酶標(biāo)二抗，洗滌后加底物，底物分解，出現(xiàn)變色，用酶標(biāo)儀測出它的吸光值 1 原理 1.1 使抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面，并保持其免疫活性。 1.2 使抗原或抗體與酶結(jié)合成酶標(biāo)抗原或抗體，并保持抗原或抗體的免疫活性和酶的活性。 1.3 酶標(biāo)的抗原或抗體與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后，結(jié)合在免疫復(fù)合物上的酶催化底物形成水解、氧化或還原反應(yīng)，形成有色物質(zhì)，其顏色深淺與標(biāo)本中抗原或抗體的量直接相關(guān)。特點：高度靈敏、特異、快速，定性、定量、定位特點：高度靈敏、特異、快速，定性、

14、定量、定位- 18 -黃山德青源種禽有限公司- 19 -黃山德青源種禽有限公司 注意事項l ELISA試劑盒購回后及時冷藏（38攝氏度）于冰箱中。l 實驗開始前從冰箱中拿出檢測板和相應(yīng)的試劑于室溫（2225攝氏度）下進行回溫2小時以上，一定要完全回溫后才能開始進行實驗操作。l 要認(rèn)真處理所有的病毒生物材料，以防病毒的傳播。不要使TMB溶液暴露在強光或任何氧化劑條件下。在整個操作過程中，滴加和洗滌要仔細。l 實驗時要根據(jù)試劑盒的操作說明書來完成。- 20 -黃山德青源種禽有限公司三、活苗病毒含量的測定（EID50）及無菌檢驗 活苗病毒含量的測定 雞胚半數(shù)感染劑量（EID50，50% egg in

15、fections dose）是指能使50%雞胚感染的 病毒量。 病毒含量的高低直接反映了產(chǎn)品的質(zhì)量，因此用雞胚接種測定病毒含量可作為判定產(chǎn)品質(zhì)量的依據(jù)。新城疫弱毒苗無菌檢驗步驟： 凍干疫苗用無菌生理鹽水溶解，用T.G（硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基）培養(yǎng)基50ml，接種新城疫弱毒苗（疫苗做10倍稀釋）1ml,置37培養(yǎng)，3天后從瓶中吸培養(yǎng)物，分別接種T.G小管和G.A（酪胨瓊脂）斜面各2支，每支0.2ml，一支置于37，一支置于25；取另一支G.P（葡萄糖蛋白胨湯）小管，接種0.2ml置25，均培養(yǎng)7日，應(yīng)無菌生長。- 21 -黃山德青源種禽有限公司四、滅活苗穩(wěn)定性和粘度實驗 穩(wěn)定性檢驗： 1、在37放置一

16、周不分層；2-10放置一年不分層；室溫1-2月放置不分層，但允許上部有少許半透明油層，比例不得超過1/20,不破乳，3000rpm,15min,不分層。 2、取兩塊干凈的平皿，裝上清水放置桌上，待水面穩(wěn)定后，滴入一滴恢復(fù)至常溫的油苗，立即擴散，再滴入第二滴成為點狀30s-1m內(nèi)不擴散，說明油苗的油包水較好。 粘度檢驗： 用1ml吸管（出口內(nèi)徑為1.2mm），取25左右的疫苗1ml,令其垂直自然流出，記錄流出0.4ml所需時間，不超過8s。- 22 -黃山德青源種禽有限公司五、飼料檢測理化技術(shù)-檢測項目及原理 1.水分 1.1原理：試樣在1302烘箱內(nèi),在大氣壓下烘干,直至恒重,逸失的重量為水分

17、. 1.2快速法（130度，45分鐘） 1.3步驟：用已知恒重的稱樣皿稱取兩份平行試樣,每份2-5g(含水重0.1g以上,樣品厚度4mm以下)準(zhǔn)確至0.0002g,不蓋稱樣皿蓋. 在1302烘箱中烘45min(溫度達到130開始計時) ,取出,蓋好稱樣皿蓋,在干燥器中冷卻30min,稱重.再同樣烘干45min,冷卻,稱重,直至兩次稱重之重量差小于0.0002g. 1.4要點：稱樣皿烘至恒重；溫度達到130度開始計時；冷卻30min開始稱重，復(fù)烘，再稱重；干燥器中的變色硅膠變色時需要烘干；在發(fā)生爭議的時，以國標(biāo)中的仲裁法為準(zhǔn)。- 23 -黃山德青源種禽有限公司 2.粗灰分 2.1原理：試樣在55

18、0灼燒后所得殘渣,用質(zhì)量百分率來表示.殘渣中主要是氧化物,鹽類等礦物質(zhì),也包括混入飼料中的沙石,土等,故稱為粗灰分. 2.2步驟：在已恒重的坩堝中稱取2克試樣（灰份質(zhì)量0.05克以上）準(zhǔn)確至0.0002克，在電爐上小心炭化，在炭化過程中，應(yīng)將試樣在較低溫度狀態(tài)下加熱灼燒至無煙，爾后升溫灼燒至樣品無炭粒，再放入高溫爐，于55020下灼燒3小時，取出，在空氣中冷卻約1分鐘，放入干燥器中冷卻至30分鐘，稱取質(zhì)量，再同樣灼燒1小時，冷卻，稱重，直至兩次質(zhì)量之差小于0.001克為恒重。 2.3要點：在電爐上開始小火燒至無煙，再加大火碳化至無碳粒，再轉(zhuǎn)移到高溫爐中灼燒3h，取出后冷卻30min,稱重，再復(fù)

19、燒30min，稱重。 - 24 -黃山德青源種禽有限公司 3.粗蛋白 3.1原理（凱氏定氮法）：在催化劑的作用下，用硫酸破壞有機物，轉(zhuǎn)化成硫酸銨；硫酸銨在強堿的作用下進行蒸餾逸出氨，用硼酸吸收，最后用鹽酸滴定，測出氮含量 3.2步驟：稱取0.3g(含氮量5-80mg)樣品,準(zhǔn)確至0.0002g.放入消煮管中,加入6.4g混和催化劑,與試樣混和均勻,再加入15ml濃硫酸和2粒玻璃珠,將消煮管置于消煮爐上加熱,開始小火,待樣品焦化,試樣變?yōu)樗{綠色,加強火力再繼續(xù)消煮45分鐘.將試樣消煮液冷卻,加入20ml蒸餾水.連接好蒸餾器各接口,關(guān)閉排水開關(guān)閥門,將帶消化液的管子插在蒸餾裝置上,以50ml硼酸為

20、吸收液,加入兩滴混和指示劑.蒸餾裝置的冷凝管末端要浸入裝有吸收液的錐形瓶內(nèi).打開電源開關(guān),水開關(guān),進入電加熱狀態(tài).向消煮管中加入50ml氫氧化鈉進行蒸餾,蒸餾時間以吸收液體積達到150ml為宜,降下錐形瓶,用蒸餾水沖洗冷凝管末端,取下接收瓶待滴定之用. - 25 -黃山德青源種禽有限公司 2NH2(CH2）2COOH+13 H2SO4（NH4）2 SO4+6 CO2+12 SO2+16 H2 （NH4）2 SO4+2NaOH2NH3+3 H2O+2 Na2SO4 4H3 BO3+ NH3NH4 H B4O7+5 H2O NH4 H B4O7+HCl+5 H2ONH4Cl+4 H 3BO3 3.

21、3要點： 3.3.1在消化中加入硫酸鉀可以提高反應(yīng)溫度加速有機物的分解，一般純硫酸的沸點為330度，添加硫酸鉀可使溫度達到400度，但加入的量不宜過多，溫度太高會使硫酸銨分解生成硫酸氫氨而使氨逸出，造成結(jié)果偏低； 3.3.2.硫酸銅也是加速反應(yīng)的作用； 3.3.3.硫酸量也不要加入過多，過多會在蒸餾過程中浪費氫氧化鈉，造成整個實驗的藥品浪費。 3.3.4.每次重新配置滴定液時，都要做硫酸銨驗證，確保滴定液準(zhǔn)確無誤 - 26 -黃山德青源種禽有限公司 4.鈣 4.1 原理（EDTA絡(luò)合滴定法）：將試樣中有機物破壞，使鈣溶解制備成溶液，用三乙醇胺，乙二胺，鹽酸羥胺和淀粉溶液消除干擾離子的影響，在堿

22、性溶液中以鈣黃綠素為指示劑，用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液絡(luò)合滴定鈣，可快速測定鈣的含量 4.2步驟：稱取試樣25g（精確至0.0002g）于坩堝中，在電爐上小心炭化，再放入高溫爐，在550灼燒3h（或測灰分后繼續(xù)進行）取出冷卻，加入10ml鹽酸和數(shù)滴硝酸，小心煮沸約10min，冷卻后轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，為試樣分解液。準(zhǔn)確移取試樣分解液5ml-25ml(含鈣量2mg-25mg),加水50ml,加淀粉溶液10ml、三乙醇胺2ml、乙二胺1ml、1滴孔雀石綠、滴加氫氧化鉀溶液至無色,再過量10ml,加0.1g鹽酸羥胺(每加一種試劑都須搖勻),加鈣黃綠素少許,在黑色背景下立即用EDTA

23、 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至綠色熒光消失呈現(xiàn)紫紅色為滴定終點.同時做空白實驗.- 27 -黃山德青源種禽有限公司 4.3 要點： 4.3.1.將坩堝中的樣品轉(zhuǎn)移到容量瓶的過程中，可提前向坩堝中加入一定量的蒸餾水，降低在轉(zhuǎn)移過程中的損失的相對量； 4.3.2.要按照順序加各種試劑，每加一種必須搖勻； 4.3.3.由于EDTA與許多金屬離子都可以發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)，加入的三乙醇胺，乙二胺，鹽酸羥胺都是掩蓋劑，主要掩蓋三價鐵離子，二價銅離子，二價錳離子，銻離子，三價鋁離子等； 4.3.4.淀粉主要是作為稀釋劑，擴散氫氧化鎂等，防止磷酸鈣凝集沉淀 4.3.5.孔雀石綠為堿性指示劑 4.3.6.加氫氧化鉀時要一滴一滴

24、加，邊加邊搖，滴到溶液變?yōu)闊o色，已經(jīng)把溶液調(diào)至PH=7，因孔雀石綠在PH=7時剛好無色，然后再加過量的氫氧化鉀使溶液PH達到12堿性條件，在PH12時二價鎂離子完全沉淀，也可以消除鎂離子的干擾。加入的氫氧化鉀也不宜過多，否則一部分鈣離子被氫氧化鎂吸附，使結(jié)果偏低，加入氫氧化鉀不足時，鎂離子沉淀不完全，使結(jié)果偏高 4.3.7.加鹽酸羥胺后需立即滴定 4.3.8.指示劑要保持干燥 4.3.9.絡(luò)合反應(yīng)需要一定的時間，滴定時速度不宜過快，否則反應(yīng)不充分，使結(jié)果偏高- 28 -黃山德青源種禽有限公司 5.總磷 5.1原理（分光光度法）將試樣中的有機物破壞,使磷元素游離出來,在酸性溶液中,用釩鉬酸銨處理

25、,生成黃色的【(NH4)3PO4 NH4VO316MoO3】絡(luò)合物,在波長400nm下進行比色測定. 5.2步驟：準(zhǔn)確稱取試樣分解液1.010.0ml（含磷量50ug750ug）于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色劑10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，常溫下放置10min以上，用1比色皿在400nm波長下測定試樣分解液的吸光度，通過磷標(biāo)準(zhǔn)曲線計算磷含量 5.3要點： 5.3.1.釩鉬酸銨顯色劑出現(xiàn)沉淀時不能再使用； 5.3.2.重配釩鉬酸銨顯色劑時要重作磷標(biāo)準(zhǔn)曲線； 5.3.3.加完釩鉬酸銨顯色劑要放置10min再進行測定- 29 -黃山德青源種禽有限公司6.鹽分 6.1鉻酸鉀指示劑法（莫爾法） 6.2步驟：稱取樣品510克準(zhǔn)確至0。001克，準(zhǔn)確加入蒸餾水200 ml，攪拌15分鐘，放置15分鐘，準(zhǔn)確移取上清液20 ml于三角燒瓶中，加入蒸餾水50 ml，1%鉻酸鉀指示劑1 ml，用硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至呈現(xiàn)磚紅色且1分鐘不變色為終點。 6.3要點：氯化銀的溶解度小于鉻酸銀的溶解度，所以在終點前的沉淀是氯化銀，終點時的沉淀是鉻酸銀，磚紅色的現(xiàn)象。 7.尿酶活性 7.1原理（PH值增值法）：尿素水解產(chǎn)生氨是堿性