類人膠原蛋白溫度誘導(dǎo)模式過渡溫度糖濃度補(bǔ)料操作方式論文

1、類人膠原蛋白論文：重組E.coli發(fā)酵產(chǎn)HLC過程中溫度誘導(dǎo)模式、糖濃度和補(bǔ)料操作方式的優(yōu)化【中文摘要】本文主要從溫度誘導(dǎo)模式、補(bǔ)料時(shí)機(jī)、糖濃度以及補(bǔ)料操作方式等方面對(duì)重組Escherichia coli BL 21發(fā)酵生產(chǎn)類人膠原蛋白(Human-Like Collagen,簡(jiǎn)稱HLC)的過程進(jìn)行優(yōu)化。在實(shí)驗(yàn)室前期優(yōu)化出培養(yǎng)階段的最佳溫度為34的基礎(chǔ)上,本部分主要對(duì)誘導(dǎo)階段的最佳溫度進(jìn)行了優(yōu)化。在培養(yǎng)過程中,當(dāng)OD(600nm)達(dá)到85時(shí),首先對(duì)是否升溫至37維持1h進(jìn)行了考察,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,不將溫度升高至37維持1h時(shí),1h后含抗性質(zhì)粒菌體的百分比下降為82%,最終的細(xì)胞濃度和蛋白濃度分別

2、為69.7gL和6.3gL。而升溫至37時(shí),1h后含抗性質(zhì)粒菌體的百分比上升為89%,最終的細(xì)胞和蛋白濃度分別為65.2gL和7.1gL,蛋白濃度增加了11.9%。所以需要升溫37。然后對(duì)具體的溫度誘導(dǎo)模式進(jìn)行了考察,設(shè)置了三種模式：先42維持3h,之后一直39：從42開始,每隔1h程序性降溫1；一直維持42。結(jié)果表明,第一種模式下最終的細(xì)胞和蛋白濃度分別為65.5gL和7.3gL：第二種模式下分別為68.1gL和6.4gL；第三種模式下分別為62.2gL和9.7gL,第三種.【英文摘要】In this study, the optimization was performed in the

3、fermentation which Escherichia coli BL 21 products Human-Like Collagen:the temperature induction model, the feeding point, glucose concentration and the feeding operation.On the basis of the optimum culture temperature 34which was already optimized, this part was mainly about the induction temperatu

4、re. Whether the transition temperature was necessary or not was studied when the OD (600nm) reached 85, it was showed that the percentage of resistant pla.【關(guān)鍵詞】類人膠原蛋白 溫度誘導(dǎo)模式 過渡溫度 糖濃度 補(bǔ)料操作方式【英文關(guān)鍵詞】Human-Like Collagen the temperature induction model the transition temperature the glucose concentration

5、 the feeding operation【目錄】重組E.coli發(fā)酵產(chǎn)HLC過程中溫度誘導(dǎo)模式、糖濃度和補(bǔ)料操作方式的優(yōu)化摘要3-5Abstract5-6第一章 緒論10-251.1 膠原蛋白10-171.1.1 膠原蛋白概述10-111.1.2 膠原蛋白的分類11-131.1.3 膠原蛋白的特性13-151.1.4 膠原蛋白的實(shí)際應(yīng)用15-161.1.5 膠原蛋白的發(fā)展前景16-171.2 類人膠原蛋白17-201.2.1 類人膠原蛋白概述171.2.2 類人膠原蛋白表達(dá)系統(tǒng)17-181.2.3 類人膠原蛋白的優(yōu)勢(shì)18-201.3 高密度發(fā)酵20-231.3.1 高密度發(fā)酵概述201.3

6、.2 基因工程菌的高密度發(fā)酵20-211.3.3 重組大腸桿菌的高密度發(fā)酵21-221.3.4 發(fā)展與展望22-231.4 溫度誘導(dǎo)模式對(duì)重組大腸桿菌的生長(zhǎng)和產(chǎn)物形成的影響231.5 糖濃度對(duì)重組大腸桿菌高密度發(fā)酵的影響231.6 本研究的目的、思路及內(nèi)容23-251.6.1 研究目的231.6.2 思路與內(nèi)容23-25第二章 實(shí)驗(yàn)材料及方法25-342.1 實(shí)驗(yàn)材料25-282.1.1 菌種252.1.2 培養(yǎng)基25-262.1.3 主要化學(xué)試劑26-272.1.4 主要儀器與設(shè)備27-282.2 實(shí)驗(yàn)方法28-342.2.1 菌種培養(yǎng)方法28-292.2.2 分析檢測(cè)方法29-34第三章

7、發(fā)酵過程中誘導(dǎo)溫度的優(yōu)化34-433.1 實(shí)驗(yàn)背景34-353.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容353.2.1 誘導(dǎo)前過渡溫度的優(yōu)化353.2.2 誘導(dǎo)階段溫度誘導(dǎo)模式的優(yōu)化353.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析35-423.3.1 誘導(dǎo)前過渡溫度的優(yōu)化35-393.3.2 誘導(dǎo)階段溫度誘導(dǎo)模式的優(yōu)化39-423.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)論42-43第四章 發(fā)酵過程中補(bǔ)糖時(shí)機(jī)的選取及糖濃度的控制43-554.1 實(shí)驗(yàn)背景43-444.2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容44-454.2.1 補(bǔ)糖時(shí)機(jī)的選擇44-454.2.2 補(bǔ)料后糖濃度的控制454.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析45-544.3.1 補(bǔ)糖時(shí)機(jī)的選擇45-504.3.2 補(bǔ)料后糖濃度的控制50-544.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)論54-55第五章 發(fā)酵過程中補(bǔ)料操作方式的選擇55-635.1 實(shí)驗(yàn)背景55-565