外周血泌乳素水平與T淋巴細胞亞群的相關性研究

1、外周血泌乳素水平與T淋巴細胞亞群的相關性研究    【關鍵詞】 泌乳素;T淋巴細胞;垂體腺瘤 The study of the relevance of PRL and Tlymphocyte subsets in the peripheral blood YU Jing,CHEN Lei,SU Zhiguo,et al. Department of Brain faculties,Fifth Central Hospital of Tiangjin,Tianjing 300450,China 【Abstract】 Objective To invest

2、igate the relationship between PRL and immune system, the level of PRL and the changes of Tlymphocyte subsets were detected in the peripheral bloodThe relevance of them was also analyzedMethods 100 patientents with pituitary adenoma and 56 people were used The peripheral blood of every person was co

3、llected for determining the levels of Tlymphocyte subsets of CD4 CD25 , CD3 , CD3 CD4 and CD3 CD8 with flow cytometry The levels of PRL in peripheral blood were omit measured at the same time with the method of magnetic separation enzyme immunoassay as wellResults The amount of CD3 lymphocytes in th

4、e peripheral blood of patients was significantly lower than that in the control group (P005) The amount of CD3 CD4 lymphocytes in the peripheral blood of patients was not significant different (P>005), and the amount of CD3 CD4 lymphocytes in the patients whose PRL level was less than 100 ng/ml w

5、as no different from the persons that in the patients whose PRL level was exceeded 100 ng/ml (P 作者單位:300450天津市第五中心醫(yī)院腦系科 nificant difference about the amount of CD3 CD8 lymphocytes in the peripheral blood of patients (P> 005),and there was no significant difference between the groups which grouped

6、 the patients into the PRL levels The amount of CD4 CD25 lymphocytes in the peripheral blood of patients was significantly higher than that in the normal group (P【Key words】 Prolactin; T lymphocyte; Pituitary adenoma 神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)在功能上是一個整體,它們之間相互作用、相互制約,對機體功能實施精密的調(diào)節(jié)1。垂體是神經(jīng)內(nèi)分泌器官,可以分泌各種激素,對機體的內(nèi)分泌系統(tǒng)進行調(diào)控,

7、在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的主導控制下,通過神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡的整合,協(xié)調(diào)有序地調(diào)控機體的功能,使機體對內(nèi)外環(huán)境的刺激產(chǎn)生統(tǒng)一的適應性反應,以維持穩(wěn)態(tài)2。同時研究證實,免疫細胞上有很多神經(jīng)遞質(zhì)和激素的受體,神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)通過自分泌或旁分泌的方式由神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)分泌的細胞因子,并藉此調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的功能3。本文通過對垂體腺瘤患者外周血PRL激素水平及T淋巴細胞亞群的分析,對神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡的調(diào)控機制進行進一步研究。        1 材料與方法 11 材料 本組垂體腺瘤患者共有100例,均為本院住院患者,根據(jù)臨床癥狀、影像學檢查

8、、實驗室檢查及組織病理免疫組化確診。其中男42例,女58例,年齡2175歲,平均年齡為45歲。外周血PRL100 ng/ml者22例。正常組有56例,為正常體檢健康人,其中男性25例,女性31例,年齡2050歲。 2 方法 21 流式細胞儀檢測外周血T淋巴細胞亞群 取檢測者清晨(7:00)空腹靜脈血,取10l抗體于流式管中,再取患者外周抗凝血50l于流式管中與抗體充分結合,于暗處室溫孵育15 min,加450l甲酸溶液混勻,使之溶血,再加入2 ml PBS溶液,予以1500轉(zhuǎn)離心5 min,去上清液,加500lPBS混勻,重懸,予以流式細胞儀測定外周血CD4 CD25 、CD3 、CD3 CD

9、4 及CD3 CD8 T淋巴細胞。 22 磁性分離酶免疫法檢測PRL水平 取檢測者清晨(7:00)空腹靜脈血,待標本完全自然形成凝塊后,予以離心,取上層血清,然后嚴格按照說明書進行操作,放入Access儀器進行分析測定。 23 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)采用SPASS 160統(tǒng)計軟件,結果以均數(shù)±標準差(x±s)表示,組間比較用 t檢驗和方差分析,各指標間進行相關分析, P3 結果 外周血CD3 T淋巴細胞病例組為(6305±1264)%,顯著低于正常組(6998±579)%(t=564,P<00001),其中病例組中PRL100 ng/ml組(6998&#

10、177;579)%有顯著差異(t=2085,P=004005);其中病例組中PRL100 ng/ml組(3906±1139)%有顯著差異(t=2348,P=002101);其中病例組中PRL100 ng/ml組(2508±434)%無顯著差異(t=111,P=027>005)。CD4 CD25 T淋巴細胞病例組為(1447±698)%,顯著高于正常范圍(253±038)%(t=1293,P<00001);其中病例組中PRL100 ng/ml組(1519±918)%無顯著差異(t=0544,P=0588>005)(表12)。 4

11、 討論 自1977年Besedovsky首次提出體內(nèi)存在神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡的假說之后,近年來國內(nèi)外對機體調(diào)控該網(wǎng)絡的機制的研究越來越重視。T淋巴細胞是機體免疫系統(tǒng)中主要的調(diào)節(jié)效應細胞,可通過對抗原識別、處理、遞呈引起多種細胞因子與多種細胞間的網(wǎng)絡聯(lián)系,構成維持免疫功能生理狀態(tài)的平衡4。CD3 細胞為T淋巴細胞上的標志,主要由CD4 T淋巴細胞和CD8 T淋巴細胞組成。其中CD4 T淋巴細胞是T淋巴細胞中數(shù)量最多的細胞, 一般認為CD3 CD4 T淋巴細胞為輔助性, 可分泌IL2和IFN, 并與NK細胞有顯著協(xié)同功能, 因此對防御腫瘤有重要作用。CD8 抑制性T淋巴細胞具有與輔助性T淋巴細胞(T

12、h)相反的作用, 可導致正常免疫應答的抑制。在正常情況下, 兩者相互誘導和制約形成T細胞網(wǎng)絡,對調(diào)節(jié)細胞免疫反應和維持免疫平衡具有重要意義。其中CD4 T細胞中有較少(約10%)的細胞具有抑制其他淋巴細胞活性的功能,它們同時表達CD25 5。我們的研究結果顯示,垂體腺瘤患者外周血T淋巴細胞亞群CD4 CD25 T淋巴細胞明顯高于對照組,但病例組內(nèi)根據(jù)外周血激素的改變分組后,各組CD4 CD25 T淋巴細胞無顯著差異。腫瘤患者常處于免疫功能低下狀態(tài),腫瘤細胞利用一系列逃避腫瘤免疫反應的機制得以生存和侵襲,這其中與CD4 CD25 調(diào)節(jié)性T細胞通過在腫瘤發(fā)生發(fā)展中抑制識別了自身腫瘤細胞的腫瘤效應細

13、胞的發(fā)育和活化,從而介導機體腫瘤免疫耐受密不可分。我們認為垂體腺瘤患者,機體也同樣存在這種腫瘤免疫,故表現(xiàn)為外周血中CD4 CD25 T淋巴細胞明顯升高。國內(nèi)外研究表明,CD4 CD25 T淋巴細胞為調(diào)節(jié)性T淋巴細胞,調(diào)節(jié)性T細胞可調(diào)節(jié)很多細胞因子的分泌,如可以使CD4 T淋巴細胞增殖,減少IFN的分泌,同時增加了IL10和TGF的分泌,對各種免疫細胞均有調(diào)節(jié)作用,從而進行免疫調(diào)節(jié)。CD4 CD25 Treg細胞的免疫抑制機制是多方面的。CD4 CD25 Treg細胞上的CD25為IL2受體鏈,且CD25分子在Treg細胞上呈高表達狀態(tài),能夠與效應細胞競爭結合IL2。而IL2是細胞增殖信號,并

14、可以活化多種免疫細胞。在T淋巴細胞激活過程中,IL2以自分泌、旁分泌和內(nèi)分泌形式作用于T淋巴細胞,被認為是T淋巴細胞增殖的必要條件。 而外周血中CD4 CD25 Treg細胞增多,使得外周血IL2減少,進一步使效應細胞無法得到生長信號而不能增殖?；罨腃D4 CD25 Treg細胞還通過接觸抑制的方式抑制T細胞的活化和增殖,并且可以分泌IL4、IL10和轉(zhuǎn)化生長因子(TGF),而IL10與TGF為具有免疫抑制作用的細胞因子,促使Thl向Th2的漂移6,從而導致CD3 CD4 T淋巴細胞減少,使得CD3 T淋巴細胞的減少7。這就不難解釋CD3 T淋巴細胞明顯低于對照組的原因了。 

15、60;      PRL是腺垂體分泌的一種激素,為一種重要的神經(jīng)內(nèi)分泌因子,具有細胞因子的特征,垂體PRL腺瘤患者的外周血PRL均有不同程度的升高,PRL水平的紊亂對于免疫系統(tǒng)會產(chǎn)生不同程度的影響8。我們的研究結果表明,外周血PRL100 ng/ml者,但CD3 CD8 T淋巴細胞與對照組無顯著性差異。我們認為外周血PRL>100 ng/ml者,外周血T淋巴細胞顯著增加,進一步增強了機體的免疫功能。有文獻表明,高PRL血癥者受多種因素的影響而使T淋巴細胞亞群比例失調(diào),進一步使得免疫功能發(fā)生改變9。PRL可能是神經(jīng)內(nèi)分泌免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)

16、絡中重要的中介體。PRL可通過協(xié)同其他細胞因子或激素以促進輔助性T細胞增生、NK細胞的細胞毒活性及活化B細胞增生及產(chǎn)生抗體。研究發(fā)現(xiàn),PRL可誘導T淋巴細胞表面的IL2受體表達,增加淋巴細胞對IL2的反應性,被稱為IL2表達的第二信使。國外一些學者的實驗也表明PRL可以通過上調(diào)IL2R鏈表達而抑制外周血T淋巴細胞的凋亡。PRL還能促進DNA合成,增加CMyc基因的表達,在淋巴細胞增生調(diào)節(jié)中具有重要作用。PRL對B細胞的功能也有影響,主要表現(xiàn)在對活性B細胞分泌IgM和IgG功能的促進作用。PRL通過與外周血中各免疫細胞表面PRL受體結合,發(fā)揮其免疫調(diào)控機能。外周血中的PRL與胸腺上PRL受體結合

17、后,刺激胸腺上皮細胞產(chǎn)生胸腺素,胸腺素又可促進淋巴組織生長和淋巴細胞的分化與活化。由此可見,PRL在體液免疫和細胞免疫中均具有重要的調(diào)節(jié)作用。同時免疫細胞自身也可分泌PRL ,所以PRL是神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)之間聯(lián)系的共同語言之一10。但也有學者研究,發(fā)現(xiàn)長期高PRL血癥可使患者耐受,并且阻止了患者對PRL的急性免疫刺激效應。急性高PRL血癥可通過免疫細胞作用而導致PRL受體表達的增加,但持續(xù)高PRL血癥則不能11,12。這說明,垂體PRL腺瘤患者外周血中T淋巴細胞的變化不僅僅受外周血PRL水平的影響,還受其病程長短的影響。 因此,我們認為CD3 T淋巴細胞的減少可能是垂體腫瘤細胞本身刺激

18、CD4 CD25 T淋巴細胞的增生,導致外周血IL2減少,從而抑制了T淋巴細胞的活化和增殖,即表現(xiàn)為CD3 CD4 T淋巴細胞減少,使得CD3 T淋巴細胞的減少。對于外周血PRL100 ng/ml組,我們考慮PRL>100 ng/ml組外周血PRL顯著升高,通過刺激各種細胞因子的分泌,而進一步促進T淋巴細胞的活化及增殖,同時,外周血中高PRL可直接抑制外周血T淋巴細胞的凋亡。 參 考 文 獻 1 Reiche EM, Nunes SO, Morimoto HK. Stress, depression, the immune system, and cancer. Lancet Oncol

19、,2004,5(10):617625. 2 Caturegli P, Lupi I, LandekSalgado M, et al. Pituitary autoimmunity: 30 years later. Autoimmun Rev,2008,7(8):631637. 3 Figueira ML, Ouakinin S. From psychosomatic to psychological medicine: what's the future? Curr Opin Psychiatry,2008,21(4):412416. 4 Tamagno G, De Carlo E, Murialdo G, et al. A possible link between genetic hemochromatosis and autoimmune thyroiditis.Minerva Med,