多重PCR試劑盒論文多重PCR試劑盒 食源性致病菌 大腸埃希

1、 多重PCR試劑盒論文：食源性致病菌多重PCR檢測(cè)試劑盒的研制與應(yīng)用【中文摘要】近年來,食品安全事件頻發(fā),不僅影響到人們的生活、工作和健康,更是關(guān)系到國(guó)計(jì)民生的大事。在各種食物中毒中,細(xì)菌性食物中毒則是食物中毒的主要因素,常見的食源性致病菌包括沙門氏菌屬、變形桿菌屬、副溶血性弧菌、葡萄球菌及毒素、肉毒梭菌毒素、蠟樣芽胞桿菌、韋氏梭菌、彎曲桿菌、李斯特菌、致病性大腸桿菌、結(jié)腸炎耶爾森氏菌、志賀氏菌屬。本文針對(duì)在我國(guó)食物中毒中最常見的致病菌進(jìn)行研究,尋求食物中毒診斷及食品檢測(cè)的有效方法。本文涉及的食源性致病菌蠟樣芽胞桿菌(Bacillus cereus)、沙門氏(Salmonellaspp)、大腸

2、埃希氏菌0157: H7 (E.coli-0157: H7)、志賀氏菌(Shigella spp)、金黃色葡萄球菌(Sta. aureus)、單增李斯特氏桿菌(Listeria monocy togenes)等菌屬或菌。通過大量的文獻(xiàn)參考和實(shí)驗(yàn),我們經(jīng)過篩選挑取種或?qū)匍g特異的序列及相應(yīng)引物,然后用這些引物對(duì)各種細(xì)菌的基因組序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增檢測(cè)其特異性,最終決定出用于檢測(cè)的最優(yōu)的基因及沙門氏菌的invA基因、單增李斯特菌溶血素hlyA基因和金黃色葡萄球菌耐熱核酸酶Nuc基因、志賀氏菌的侵.【英文摘要】The problem of food safety is becoming more awa

3、red and more serious in many countries .Its associated closely with the national development and peoples health and happiness. The immediate and proper treatment to patients who have eaten contaminated food is important as well as the food safty testing before food are sold or eaten by people. Whats

4、 urgent now is how to detect pathogenic bacteria in food and patients. To develop an effective and practical way to detect foodborn pathogens in this study, six s.【關(guān)鍵詞】多重PCR試劑盒 食源性致病菌 大腸埃希O157:H7 單增李斯特菌 志賀氏菌 家禽屠宰市場(chǎng) 街道零售商【英文關(guān)鍵詞】Multiplex PCR detection kit Pathogens Ecoli-O157:H7 L. monocytogenes Shig

5、ella Chicken abattoirs street vendors【索購全文】聯(lián)系 Q1：138113721 Q2：139938848【目錄】食源性致病菌多重PCR檢測(cè)試劑盒的研制與應(yīng)用中文摘要7-9Abstract9-10前言11-261 食品安全概述11-122 本文所涉及的食源性致病菌12-183 致病菌快速檢測(cè)方法18-253.1 免疫學(xué)技術(shù)18-203.2 代謝學(xué)技術(shù)20-213.3 分子生物學(xué)技術(shù)213.4 生物傳感技術(shù)21-223.5 PCR 技術(shù)22-254 肉及肉制品中食源性致病菌 PCR 檢測(cè)研究現(xiàn)狀25-26研究?jī)?nèi)容26-571 材料26-302 方法30-572

6、.1 食源性致病菌的培養(yǎng)、分離和鑒定30-472.1.1 沙門氏菌的培養(yǎng)、分離和鑒定30-352.1.2 志賀氏菌的培養(yǎng)、分離和鑒定35-372.1.3 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的培養(yǎng)、分離和鑒定37-402.1.4 金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)、分離和鑒定40-422.1.5 大腸埃希氏菌0157:H7 的培養(yǎng)、分離和鑒定42-452.1.6 蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)、分離和鑒定45-472.2 菌體 DNA 的提取47-492.3 目的基因的選擇和引物的設(shè)計(jì)49-502.4 陽性對(duì)照模板的制備50-542.5 多重 PCR 擴(kuò)增條件的優(yōu)化542.6 多重 PCR 體系的特異性54-552.7 多重PCR體系靈敏度55-562.8 試劑盒組裝及重復(fù)性、穩(wěn)定性和保存期試驗(yàn)562.9 山東泰安禽肉市場(chǎng)（屠宰市場(chǎng)，零售商）致病菌流行情況監(jiān)測(cè)調(diào)查56-573 結(jié)果57-693.1 DNA 模板的提取方法的比較573.2 多重 PCR 引物設(shè)計(jì)結(jié)果573.3 多重 PCR 調(diào)試結(jié)果57-593.4 多重 PCR 體系特異性59-613.5 多重 PCR 體系的靈敏度61-623.6 食品模型試驗(yàn)結(jié)果62-653.7 試劑盒的組裝65-663.8 試劑盒重復(fù)性、穩(wěn)定性和保存期試驗(yàn)結(jié)果