左旋門冬酰胺酶兩種用藥方式治療兒童淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤的藥代動(dòng)力

1、    左旋門冬酰胺酶兩種用藥方式治療兒童 淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤的藥代動(dòng)力學(xué)研究        【摘要】目的通過(guò)對(duì)20例惡性淋巴系統(tǒng)腫瘤患兒的治療，探索左旋門冬酰胺酶(L-ASP)安全、有效的用藥方式，指導(dǎo)臨床治療。方法將20例患兒隨機(jī)分為每天用藥組及隔天用藥組，兩組均用8次L-ASP，每次6 000 KU/m2(1 KU=1 IU)靜脈滴注，每次用藥前檢測(cè)血清中L-ASP活性及其底物門冬酰胺水平，以比較兩種用藥方法的差異性，并觀察其不良反應(yīng)之差異。結(jié)果每天用藥組血清中

2、L-ASP谷值水平明顯高于隔天用藥組(P<0.01)；兩組門冬酰胺最低濃度的平均水平及分布情況差距不大(P>0.05)；每天用藥組消化道反應(yīng)、血清清蛋白水平下降及ALT(GPT)升高的發(fā)生率明顯高于隔天組(P<0.05)。結(jié)論隔天每次L-ASP 6 000 KU/m2靜脈滴注為安全、有效的用藥方法。【關(guān)鍵詞】天冬酰胺酶淋巴系統(tǒng)疾病藥代動(dòng)力學(xué) Comparative pharmacokinetic study of two different ways of using L-asparaginase as the main drug in combination chemoth

3、erapWANG Yaoping?,JIANG Hui,XIE Xiaotian, et al.Shanghai Pediatric Medical Center, Shanghai Second Medical University, Shanghai200092【Abstract】ObjectiveTo search for a safer and more effective way of using L-asparaginase as the main drug in combination protocol. MethodTwenty children with lymphoid m

4、alignancies were randomly divided into two groups: Group A and Group B, for L-asparaginase therapy. Group A: Leunase 6 000 KU/m2，continuous intravenous injection every day for 8 times；Group B:Leunase 6 000 KU/m2，continuous intravenous injection every other day for 8 times. Blood samples were collect

5、ed every day for group A and every other day for group B and serum L-asparaginase and L-asparagine levels were tested. ResultsThe pre-treatment mean value of serum L-asparaginase in group A was significantly higher than that in group B (P<0.01).The levels of L-asparaginase in group A tended to in

6、crease day by day during the therapeutic course while those in group B without increasing tendency. The L-asparagine levels and their dynamic changes were not significantly different between the two groups (P>0.05).ConclusionThe administration of Leunase by continuous intravenous injection every

7、other day is a much safer and effective protocol and worthy of recommendation.【Key words】AsparaginasesLymphatic diseasesPharmacokinetics淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤是危及兒童生命的主要惡性腫瘤。近年來(lái)由于應(yīng)用以左旋門冬酰胺酶(L-ASP)為主的聯(lián)合化療1-3，預(yù)后有了明顯改觀，完全緩解(CR)率達(dá)98以上，5年以上無(wú)病生存率已大于70。L-ASP的作用機(jī)制為使對(duì)左旋門冬酰胺為必需營(yíng)養(yǎng)素的淋巴系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞，通過(guò)L-ASP的作用，分解而減少宿主血中左旋門冬酰胺，使腫瘤呈營(yíng)養(yǎng)障

8、礙以抑制增殖。L-ASP進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)多年，療效肯定?，F(xiàn)國(guó)內(nèi)基本存在每天和隔天應(yīng)用兩種用藥方法。我們通過(guò)檢測(cè)用了L-ASP后，血中L-ASP的活性及其底物（左旋門冬酰胺）的水平，比較兩種用藥方式在治療兒童淋巴系統(tǒng)腫瘤中的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及臨床不良反應(yīng)，以探索L-ASP安全、有效的用藥方式，指導(dǎo)臨床治療。病例和方法1病例20例淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤患兒19例急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL），1例非霍奇金淋巴瘤期，其中男15例，女5例，中位年齡8歲（214歲），相繼于1997年6月1998年1月入住本協(xié)作組各醫(yī)院，隨機(jī)分為兩組（每組10例)。兩組基本聯(lián)合用藥方案均相同，為潑尼松柔紅霉素長(zhǎng)春新堿，在此基礎(chǔ)上再加L

9、-ASP（日本協(xié)和發(fā)酵工業(yè)株式會(huì)社產(chǎn)品）。A組：L-ASP 6 000 KU/m2，每天靜脈滴注，共8天；B組：L-ASP 6 000 KU/m2，隔天靜脈滴注，共8次。每例患兒在每次靜脈滴注L-ASP前12小時(shí)抽靜脈血3 ml，以3 000×g離心5分鐘，分離血清，共8次（第1次為治療之前，后7次為治療中）。分離出的血清等分為A、B兩份。A部分（400 l）立即加100 g/L磺基水楊酸100 l充分混勻，以進(jìn)行脫蛋白處理，然后在常溫下以3 000×g離心5分鐘，取出上清液，80 冰箱保存。整個(gè)處理過(guò)程盡量在1520分鐘內(nèi)完成，此標(biāo)本用于測(cè)定天門冬酰胺濃度；B部分（400

10、 l）立即置于80 冰箱中保存，用于測(cè)定L-ASP活性（到此為止標(biāo)本的前處理工作由各協(xié)作醫(yī)院完成，以下正式實(shí)驗(yàn)部分在上海市衛(wèi)生防疫站中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行）。2L-ASP活性測(cè)定4，5將100 l血清加于900 l 0.044 mmol/LL-ASP緩沖液中，在37 中孵育45分鐘，然后加入245 g/L 三氯醋酸250 l，離心沉淀后取500 l上清液加到納氏（Nesslers）溶液中（納氏試劑由上海市衛(wèi)生防疫站提供），混勻放置10分鐘，然后用Shimadzu UV260紫外比色計(jì)比色，波長(zhǎng)450 nm，然后將讀得的吸光度與按標(biāo)準(zhǔn)濃度(0.01，0.02，0.04，0.05，0.10，0.50，1.

11、00，2.50 mmol/L)所作的硫酸銨-納氏標(biāo)準(zhǔn)曲線所得的吸光度相比較，按每分鐘釋放出的氨的微克分子數(shù)作為酶活性單位。3門冬酰胺測(cè)定按Lenda等報(bào)道的方法6，用RP-HPLC技術(shù)檢測(cè)血清中門冬酰胺水平，并用RF535儀，在波長(zhǎng)455 nm及波長(zhǎng)335 nm處作熒光讀數(shù)，將此測(cè)定值與按標(biāo)準(zhǔn)濃度0.10，0.25，0.50，1.00，5.00，10.00，50.00，100.00 mol/L作的標(biāo)準(zhǔn)曲線所得的讀數(shù)作比較。本方法測(cè)定限度為0.1 mol/L。4評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)5谷值是指前一次輸注L-ASP后接著應(yīng)用L-ASP前血中門冬酰胺酶的活性和門冬酰胺的濃度。生理情況下，血門冬酰胺水平約為40.0

12、0 mol/L?；純褐委熐伴T冬酰胺值在正常范圍內(nèi)，用L-ASP后門冬酰胺缺乏程度分級(jí)：完全缺乏為0.1 mol/L；幾乎完全消失為>0.10.5 mol/L；中度減少為>0.51.0 mol/L；輕度減少為>1.040.0 mol/L；不減少為>40.0 mol/L。將兩組所得的結(jié)果，進(jìn)行t檢驗(yàn)。結(jié)果1兩組L-ASP活性水平比較在每天序貫應(yīng)用L-ASP前測(cè)得的L-ASP活性為（2 110±349）U/L（10例患兒70份標(biāo)本中位值2 250 U/L），發(fā)現(xiàn)每天用藥組體內(nèi)L-ASP酶水平有日漸增高的趨勢(shì)；隔天序貫應(yīng)用L-ASP前測(cè)得的L-ASP活性為（695&#

13、177;92）U/L（10例患兒68份標(biāo)本中位值554 U/L），隔天用藥組體內(nèi)L-ASP酶水平分布較均勻，無(wú)增高趨勢(shì)。提示每天用藥組的L-ASP活性谷值水平的平均值明顯高于隔天用藥組（P<0.01）。2兩組門冬酰胺水平比較2.1每天序貫應(yīng)用L-ASP前測(cè)得的門冬酰胺水平為（0.49±0.05） mol/L（10例患兒69份標(biāo)本中位值0.46 mol/L）；隔天序貫用藥組所測(cè)得的門冬酰胺水平為（0.45±0.06）mol/L（10例患兒69份標(biāo)本中位值0.43 mol/L）。2.2根據(jù)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：每天序貫應(yīng)用L-ASP組，門冬酰胺完全缺乏率為1.5（69份標(biāo)本中1份），

14、幾乎完全消失率為59.4（69份標(biāo)本中41份），中度缺乏率為39.1（69份標(biāo)本中27份）；隔天序貫用藥組，完全缺乏率為5.8（69份標(biāo)本中4份），幾乎完全消失率為56.5（69份標(biāo)本中39份），中度缺乏率為37.7（69份標(biāo)本中26份）。提示兩組每次用藥前測(cè)定的門冬酰胺最低濃度的平均水平及分布情況的差距不大（P>0.05）。3兩組不良反應(yīng)比較每天用藥組納差6例，惡心、嘔吐6例，血清清蛋白降低3例，ALT(GPT)升高7例；隔天用藥組納差7例，惡心、嘔吐4例，ALT升高3例。以上結(jié)果提示，每天用藥組的消化道反應(yīng)、血清清蛋白水平下降及ALT(GPT)水平升高的發(fā)生率均明顯高于隔天組（經(jīng)U檢

15、驗(yàn)，P<0.05）。討論從本研究結(jié)果可以看出，雖然每天用藥組患兒血清中L-ASP活性較隔天用藥組高2倍以上，但血清中門冬酰胺水平同隔天用藥組相近，亦只不過(guò)達(dá)到幾乎完全消失標(biāo)準(zhǔn)。提示如以門冬酰胺水平作為一個(gè)效果指標(biāo)，隔天用藥組已可達(dá)到足夠低的門冬酰胺的水平，故在臨床治療上，隔天用6 000 KU/m2 的L-ASP劑量已經(jīng)足夠。同時(shí)，每天用藥組的不良反應(yīng)發(fā)生率明顯高于隔天用藥組，這與每天用藥組所達(dá)到的過(guò)高的酶活性有關(guān)系。故提示：隔天用L-ASP 6 000 KUm2靜脈滴注為安全、有效的方案，值得推薦應(yīng)用。作者單位：王耀平200092上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬上海兒童醫(yī)學(xué)中心蔣慧陸正華上海市兒童

16、醫(yī)院謝曉恬上海鐵道醫(yī)科大學(xué)附屬甘泉醫(yī)院杜玲珍王耀莉上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬瑞金醫(yī)院參考文獻(xiàn)1Sallas SE,Hitchcock BS,Gelber R,et al.Influence of intensive asparaginase in the treatment of childhood non-T-cell acute lymphoblastic leukemia. Cancer Res,1983,43：5601-5607.2Broome JD. L-asparaginase:discovery and development as a tumor-inhibitory agent.C

17、ancer Treat Rep,1981,65 Supp14:111-114.3Chabner BA.Enzyme therapy:L-asparaginase.In: Chabner BA,Collins JM,eds.Cancer chemotherapy.Principles and practice.Philadelphia:J B Lippincott Company,1990. 397-407.4Boos J.Pharmacokinetics and drug monitoring of L-asparaginase treatment.Intern J Clin Pharmacol Ther, 1997，35：96-98.5Boos J,Werber G,Ahike E,et al.Monitoring of asparaginase activity and asparagi