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1、實(shí)驗(yàn)十一 呼吸運(yùn)動的調(diào)節(jié)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?學(xué)習(xí)記錄哺乳動物呼吸運(yùn)動的方法;觀察體液中O2、CO2和H+水平變化對呼吸運(yùn)動的影響;理解肺牽張反射在動物呼吸運(yùn)動中的作用。【實(shí)驗(yàn)原理】吸入氣CO2含量適當(dāng)增加時,呼吸將加深加快,肺通氣量增加。CO2刺激呼吸是通過兩條途徑實(shí)現(xiàn)的:一是通過刺激中樞化學(xué)感受器(主);二是刺激外周化學(xué)感受器(次)。動脈H+濃度增高時,呼吸運(yùn)動加深加快,肺通氣增加;血液中的H+主要通過刺激外周化學(xué)感受器發(fā)揮作用。吸入氣PO2降低時,呼吸運(yùn)動加深、加快,肺通氣增加。低O2對呼吸的刺激作用完全是通過外周化學(xué)感受器實(shí)現(xiàn)的。低O2對中樞的直接作用是抑制作用。肺的牽張反射的傳入神經(jīng)為迷走神
2、經(jīng),切斷家兔迷走神經(jīng),肺的牽張反射不能實(shí)現(xiàn),導(dǎo)致呼吸變深變慢?!緦?shí)驗(yàn)對象】 家兔。【實(shí)驗(yàn)材料】 BL一410 生物功能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),張力換能器,兔手術(shù)臺,哺乳動物手術(shù)器械一套,玻璃分針,氣管插管, 5Ocm長橡皮管一條,注射器(20ml、5ml各1只),鈉石灰瓶l只,球膽2只;20氨基甲酸乙酯,3乳酸,CO2氣體,生理鹽水。 【實(shí)驗(yàn)步驟】 1麻醉與固定動物 稱量家兔體重,用 20 %氨基甲酸乙酯(5 ml / kg 體重)經(jīng)耳緣靜脈緩慢注射麻醉,然后將兔仰臥固定于兔手術(shù)臺上。 2手術(shù)準(zhǔn)備 剪去家兔頸前部的毛,做頸部正中切口,分離氣管在喉頭下在氣管上作一“”形切口,插人“ Y ”形氣管插管,用棉線結(jié)
3、扎固定。分離出頸部兩側(cè)迷走神經(jīng)穿線備用。手術(shù)完畢后用溫生理鹽水紗布覆蓋創(chuàng)口部位。 3記錄呼吸運(yùn)動 呼吸運(yùn)動可通過下述方法進(jìn)行描記。 (1)隔肌運(yùn)動記錄法:切開胸骨下端劍突部位的皮膚,沿腹白線做一長34cm的切口,小心地將劍突表面組織剝離暴露出劍突與胸骨柄,使劍突完全游離(注意不能剪得過深,以免造成氣胸或剪斷下面附著的膈?。4藭r可見劍突軟骨完全隨隔肌舒縮而上下移動。用長線穿過劍突軟骨并結(jié)扎或用一帶線的金屬鉤掛住軟骨,線的另一端連至張力換能器,信號輸人至生物功能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),以描記呼吸曲線。此種描記方法可很好地反映呼吸頻率、呼吸深度及呼吸的停止?fàn)顟B(tài),缺點(diǎn)是在動物移動或稍有掙扎時,基線變化較大,需要再
4、次調(diào)整描記系統(tǒng)。 (2)腹壁運(yùn)動記錄法:這是一種較簡便的記錄呼吸運(yùn)動的方法。即用一帶線的金屬鉤直接鉤起劍突下方腹壁活動較明顯的皮膚,線的另一端連接張力換能器。 4儀器調(diào)試 打開計(jì)算機(jī),進(jìn)人生物功能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)操作界面,由菜單條實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目呼吸實(shí)驗(yàn)呼吸運(yùn)動的調(diào)節(jié)。 5觀察項(xiàng)目 (1)描記正常呼吸曲線:先記錄一段正常呼吸曲線,確定曲線向上為吸氣,向下為呼氣,并觀察呼吸運(yùn)動的頻率、節(jié)律和深度。 (2)增加吸人氣中CO2的濃度:將裝有CO2氣體的球膽管口靠近“ Y ”形氣管插管的一側(cè)管開口處,打開球膽管上的夾子,使家兔吸人氣中 CO2含量增多(氣流速度不宜過急,以免影響描記結(jié)果),觀察呼吸運(yùn)動的變化。然后夾閉
5、球膽,觀察呼吸運(yùn)動恢復(fù)正常的過程。 (3)缺O(jiān)2 :將“Y”形氣管插管的一側(cè)管通過一只鈉石灰瓶與充有一定量空氣的球膽相連,夾閉氣管插管的另一側(cè)管,使動物經(jīng)鈉石灰瓶呼吸球膽內(nèi)的氣體。呼吸一段時間后,球膽中的O2明顯減少,而呼出的CO2被瓶內(nèi)的鈉石灰吸收,觀察缺O(jiān)2對呼吸運(yùn)動的影響。效果明顯后去除上述條件,使呼吸恢復(fù)正常。(亦可通過吸人純氮?dú)舛斐扇毖酢#?)增大無效腔:把 50cm 長的橡皮管連接在氣管插管的一側(cè),另一側(cè)封閉,使動物通過長管進(jìn)行呼吸,觀察呼吸運(yùn)動的變化。待呼吸發(fā)生明顯變化后,去掉橡皮管,使呼吸恢復(fù)正常。 (5)增加血液中的H+濃度:用 5ml 注射器由耳緣靜脈較快地注人3的乳酸12ml,記錄呼吸運(yùn)動的變化過程。(6)切斷迷走神經(jīng):描記一段對照呼吸曲線后,切斷一側(cè)迷走神經(jīng),觀察并記錄呼吸頻率和深度的變化。再切斷另一側(cè)迷走神經(jīng),觀察呼吸頻率和深度的變化。 【注意事項(xiàng)】 1記錄各觀察項(xiàng)目的曲線時,改變實(shí)驗(yàn)條件之前都必須有一段平穩(wěn)的呼吸曲線作為對照。 2游離劍突時,切口不宜過大過深,以防形成氣胸。3記錄呼吸運(yùn)動的連線應(yīng)與張力換能器垂
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