獸用生物(診斷)制品技術(shù)指導(dǎo)原則

1、【 獸藥管理(Veterinary Drug Administration 】中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第 683號(hào)Announcement No.683 of the Ministry of Agricultureof the Peoples Republic of China為進(jìn)一步規(guī)范獸用生物制品研究工作,根據(jù)獸藥管理?xiàng)l例、獸藥注冊(cè)辦法、新獸藥 研制管理辦法規(guī)定,我部組織制定了獸用生物制品通用名命名指導(dǎo)原則(附件一、獸用 生物制品安全和效力試驗(yàn)報(bào)告編寫指導(dǎo)原則(附件二、獸用生物制品生產(chǎn)用細(xì)胞系試驗(yàn)研究 指導(dǎo)原則 (附件三 、 獸用生物制品菌 (毒、 蟲 種種子批建立試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則 (附件

2、四 、 獸用生物制品菌(毒、蟲種毒力返強(qiáng)試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則(附件五、獸用生物制品實(shí)驗(yàn)室 安全試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則 (附件六、 獸用生物制品實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則 (附件七、 獸用生物制品穩(wěn)定性試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則(附件八、獸用生物制品臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則 (附件九、獸用診斷制品試驗(yàn)研究技術(shù)指導(dǎo)原則(附件十、獸用免疫診斷試劑盒試驗(yàn)研 究技術(shù)指導(dǎo)原則 (附件十一等 11個(gè)獸用生物制品試驗(yàn)研究技術(shù)指導(dǎo)原則,現(xiàn)予發(fā)布,請(qǐng)參照?qǐng)?zhí) 行。二六年七月十二日附件一:獸用生物制品通用名命名指導(dǎo)原則1 目的 制定統(tǒng)一的獸用生物制品通用名的命名原則,使獸用生物制品的名稱更科學(xué)、簡(jiǎn)練、 明確,并使每個(gè)具有不同特性的產(chǎn)品具有唯

3、一的通用名。2 背景 在中華人民共和國(guó)獸藥典和農(nóng)業(yè)部發(fā)布的其他獸用生物制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中,獸用 生物制品的名稱均采用通用名; 獸藥標(biāo)簽和說明書管理辦法 中規(guī)定, 獸藥的標(biāo)簽和說明書中必須 標(biāo)注通用名; 獸藥注冊(cè)辦法 中規(guī)定, 申請(qǐng)?jiān)谖覈?guó)注冊(cè)的新獸藥和進(jìn)口獸藥, 必須按照規(guī)定的命名 原則進(jìn)行通用名的命名。3 命名原則3.1 基本命名原則 獸用生物制品的通用名采用規(guī)范的漢字進(jìn)行命名,標(biāo)注微生物的群、型、 亞型、株名和毒素的群、型、亞型等時(shí),可以使用字母、數(shù)字或其他符號(hào)。采用的病名、微生物名、 毒素名等應(yīng)為其最新命名或?qū)W名。采用的譯名應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)規(guī)定。按照下列原則進(jìn)行命名后,通 用名中重復(fù)內(nèi)容應(yīng)刪除。

4、3.2 獸用疫苗的命名 獸用疫苗的通用名一般采用“病名 + 制品種類”的形式命名。例如:馬傳染性貧血活疫苗豬萎縮性鼻炎滅活疫苗豬瘟、豬丹毒、豬多殺性巴氏桿菌病三聯(lián)活疫苗在某些情形下,不能采用上述一般命名方法進(jìn)行命名,此時(shí),可視具體情況,按照下列有關(guān)原 則進(jìn)行命名。3.2.1 當(dāng)通用名中涉及到微生物的型(血清型、亞型、毒素型、生物型等時(shí),采用“微生物 名 + ×型(亞型 + 制品種類”的形式命名。例如:?？谔阋卟《?O 型滅活疫苗3.2.2 由屬于相同種的兩個(gè)或兩個(gè)以上型(血清型、毒素型、生物型或亞型等的微生物制成 的一種疫苗,采用“微生物名 + 若干型名 + X 價(jià) + 制品種類”的

5、形式命名。例如:?？谔阋卟《?O 型、 A 型二價(jià)滅活疫苗3.2.3 當(dāng)疫苗中含有兩種或兩種以上微生物, 其中一種或多種微生物含有兩個(gè)或兩個(gè)以上型 (血 清型或毒素型等時(shí),采用“微生物名 1 + 微生物名 2(型別 1+ 型別 2 + X聯(lián) + 制品種類”的 形式命名。例如:雞新城疫病毒、副雞嗜血桿菌(A 型、 C 型二聯(lián)滅活疫苗3.2.4 對(duì)用轉(zhuǎn)基因微生物制備的疫苗,采用“微生物名(或毒素等抗原名 + 修飾詞 + 制品 種類 + (株名 ”的形式命名。例如:豬偽狂犬病病毒基因缺失活疫苗(C 株禽流感病毒 H5亞型重組病毒滅活疫苗(Re1株禽流感病毒 H5亞型禽痘病毒載體活疫苗(FPV-HA-

6、NA 株大腸桿菌 ST 毒素、產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素大腸桿菌載體滅活疫苗(EC-2株3.2.5 對(duì)類毒素疫苗,采用“微生物名 + 類毒素”的形式命名。例如:破傷風(fēng)梭菌類毒素3.2.6 當(dāng)一種疫苗應(yīng)用于兩種或兩種以上動(dòng)物時(shí), 采用 “動(dòng)物 +病名 (微生物名等 +制品種類” 的形式命名。例如:豬、牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗牛、羊口蹄疫病毒 O 型滅活疫苗3.2.7 當(dāng)按照上述原則獲得的通用名不足以與已有同類制品或與將來可能注冊(cè)的同類制品相區(qū) 分時(shí),可以按照順序在通用名中標(biāo)明動(dòng)物種名、株名(一般標(biāo)注在制品種類后,通用名中含有兩個(gè) 或兩個(gè)以上株名時(shí),則分別標(biāo)注在各自的微生物名后,加括號(hào) 、劑型(標(biāo)注在制

7、品種類前 、佐劑 (標(biāo)注在制品種類前 、保護(hù)劑(標(biāo)注在制品種類前 、特殊工藝(標(biāo)注在制品種類前 、特殊原材料 (標(biāo)注在制品種類后,加括號(hào) 、特定使用途徑(標(biāo)注在制品種類前中的一項(xiàng)或幾項(xiàng),但應(yīng)盡可能 減少此類內(nèi)容。例如:犬狂犬病滅活疫苗(ERA 株雞新城疫病毒(La Sota株 、雞傳染性支氣管炎病毒(M41株二聯(lián)滅活疫苗雞馬立克氏病凍結(jié)活疫苗(HVT FC-126株雞多殺性巴氏桿菌病蜂膠佐劑滅活疫苗(G190株雞新城疫耐熱保護(hù)劑活疫苗(La Sota株牛流行熱亞單位疫苗豬口蹄疫病毒 O 型合成肽疫苗雞傳染性支氣管炎細(xì)胞源活疫苗(H120株豬瘟耐熱保護(hù)劑活疫苗(兔源犬狂犬病口服活疫苗豬胸膜肺炎放

8、線桿菌 1、 4、 7型三價(jià)油佐劑滅活疫苗雞馬立克氏病病毒型活疫苗(Rispens/CVI988株3.3 用于預(yù)防或治療的抗血清、抗體的命名3.3.1 對(duì)于抗血清,采用“微生物名 + 抗血清”的形式命名。例如:多殺性巴氏桿菌抗血清豬瘟病毒抗血清B 型產(chǎn)氣莢膜梭菌抗血清3.3.2 對(duì)于抗體,采用“微生物名 + 抗體”的形式命名,必要時(shí),在抗體前標(biāo)明特殊生產(chǎn)工 藝和來源。例如:雞傳染性法氏囊病病毒純化卵黃抗體雞傳染性法氏囊病病毒單克隆抗體3.4 活菌制劑的命名3.4.1 對(duì)含有一種細(xì)菌的活菌制劑,采用“微生物名 + 活菌制劑”的形式命名,必要時(shí),在 活菌制劑后標(biāo)明菌株名。例如:蠟樣芽孢桿菌活菌制劑

9、(SA38株3.4.2 對(duì)含有兩種或兩種以上細(xì)菌的活菌制劑,采用“若干微生物名 + 復(fù)合活菌制劑”的形 式命名。必要時(shí),在活菌制劑后標(biāo)明菌株名。例如:嗜酸乳桿菌、糞鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌復(fù)合活菌制劑3.5 診斷制品的命名3.5.1 診斷制品的通用名,一般采用“病名 + 試驗(yàn)名稱 + 制品種類”的形式,這里的制品種 類包括抗原、抗原與陰陽性血清等。例如:豬支原體肺炎微量間接血凝試驗(yàn)抗原布魯氏菌病試管凝集試驗(yàn)抗原與陰陽性血清3.5.2 當(dāng)通用名中涉及到微生物特征(群、亞群、型、亞型、生物型、抗原種類時(shí),采用“微 生物名 + 型別 + 試驗(yàn)名稱 + 制品種類”的形式命名。例如:禽流感病毒 H5亞型血凝

10、抑制試驗(yàn)抗原與陰、陽性血清大腸桿菌 K88纖毛抗原定型血清3.5.3 對(duì)抗體檢測(cè)試劑盒的命名,采用“微生物名 + 試驗(yàn)名稱 + 抗體檢測(cè)試劑盒”的形式。 例如:豬瘟病毒 ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒雞傳染性法氏囊病病毒 ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒3.5.4 對(duì)抗原檢測(cè)試劑盒的命名, 采用 “微生物名 + 試驗(yàn)名稱 + 檢測(cè)試劑盒” 的形式。 例如:雞傳染性法氏囊病病毒夾心 ELISA 檢測(cè)試劑盒3.5.5 按照上述原則進(jìn)行抗原、 抗體檢測(cè)試劑盒命名時(shí), 如果檢測(cè)的對(duì)象為特殊的抗原或抗體, 可在微生物名后適當(dāng)增加說明。例如:錐蟲循環(huán)抗原 ELISA 檢測(cè)試劑盒口蹄疫病毒 O 型非結(jié)構(gòu)蛋白 ELIS

11、A 抗體檢測(cè)試劑盒3.5.6 對(duì)試紙條的命名,采用“微生物名 + 檢測(cè)試紙條”的形式,如用于檢測(cè)抗體,則在微 生物名后加“抗體”二字。例如:傳染性法氏囊病病毒檢測(cè)試紙條傳染性法氏囊病病毒抗體檢測(cè)試紙條3.5.7 對(duì)不能標(biāo)明或無須標(biāo)明試驗(yàn)方法的診斷制品的命名,可在上述原則的基礎(chǔ)上適當(dāng)簡(jiǎn)化。 例如:豬瘟病毒酶標(biāo)抗體豬瘟病毒熒光抗體3.6 其他獸用生物制品的命名對(duì)細(xì)胞因子、干擾素等,參考通行學(xué)術(shù)名進(jìn)行命名,必要時(shí)增加動(dòng)物品種、特殊生產(chǎn)工藝等。 例如:豬白細(xì)胞干擾素(凍干型附件二:獸用生物制品安全和效力試驗(yàn)報(bào)告編寫指導(dǎo)原則1 目的 制定統(tǒng)一的獸用生物制品安全和效力試驗(yàn)報(bào)告編寫原則,使試驗(yàn)報(bào)告的格式統(tǒng)一

12、、 結(jié)構(gòu)良好、層次分明、內(nèi)容完整、易于評(píng)價(jià)。2 背景 獸用生物制品安全和效力試驗(yàn)報(bào)告是對(duì)獸用生物制品的安全和效力試驗(yàn)過程和結(jié)果 進(jìn)行的系統(tǒng)總結(jié),是對(duì)獸用生物制品的安全性、有效性等進(jìn)行合理評(píng)價(jià)的重要依據(jù),也是我國(guó)獸用 生物制品注冊(cè)所需的重要資料。3 基本原則 試驗(yàn)報(bào)告中,對(duì)試驗(yàn)的整體設(shè)計(jì)及其關(guān)鍵點(diǎn),應(yīng)給予清晰、完整的闡述;對(duì)試驗(yàn) 實(shí)施過程的描述,應(yīng)條理分明;應(yīng)包括翔實(shí)的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法,以便對(duì)關(guān)鍵數(shù)據(jù)和結(jié)果進(jìn)行 分析。本原則只對(duì)獸用生物制品安全和效力試驗(yàn)報(bào)告的結(jié)構(gòu)和內(nèi)容提出原則性要求, 列出報(bào)告中應(yīng)涵蓋 的基本點(diǎn),不可能做到完全細(xì)化。鑒于試驗(yàn)研究的復(fù)雜性,試驗(yàn)報(bào)告的起草人可根據(jù)試驗(yàn)的具體情

13、況 對(duì)報(bào)告的結(jié)構(gòu)和內(nèi)容進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。4 獸用生物制品安全和效力試驗(yàn)報(bào)告的結(jié)構(gòu)和內(nèi)容4.1 首篇4.1.1 封面標(biāo)題 包括試驗(yàn)用制品的通用名、試驗(yàn)名稱、試驗(yàn)編號(hào)、試驗(yàn)開始日期、試驗(yàn)完成日 期、試驗(yàn)負(fù)責(zé)人(簽名、試驗(yàn)單位(蓋章、統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人簽名及單位蓋章(如果有、申報(bào)單位 聯(lián)系人及聯(lián)系方式、報(bào)告日期、原始資料和樣本 /標(biāo)本保存地點(diǎn)。4.1.2 目錄 列出整個(gè)報(bào)告的內(nèi)容目錄和對(duì)應(yīng)頁碼。4.1.3 報(bào)告摘要 對(duì)所完成的試驗(yàn)進(jìn)行摘要性介紹。 應(yīng)通過重要的數(shù)據(jù)來體現(xiàn)結(jié)果, 而不能僅以 文字和 P 值(統(tǒng)計(jì)學(xué)名詞來敘述。4.1.4 動(dòng)物和動(dòng)物設(shè)施相關(guān)資料 須申明完成的試驗(yàn)嚴(yán)格遵守國(guó)家關(guān)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利的有關(guān)規(guī)

14、 定,并提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證的復(fù)印件(如果適用。4.1.5 試驗(yàn)人員 列出試驗(yàn)負(fù)責(zé)人和主要參加人員的姓名、 單位、 在試驗(yàn)中的作用及其主要背景 等,包括主要試驗(yàn)者及參加人員、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的負(fù)責(zé)人(如果有、試驗(yàn)報(bào)告的撰寫人等。4.1.6 縮略語 試驗(yàn)報(bào)告中所用縮略語的全稱。4.2 試驗(yàn)報(bào)告的正文內(nèi)容和報(bào)告格式 各類試驗(yàn)報(bào)告中均應(yīng)包含下列主要項(xiàng)目。4.2.1 引言 介紹受試制品研發(fā)的背景、依據(jù)及合理性,針對(duì)的靶動(dòng)物,目前國(guó)內(nèi)外同類制品的 研制、使用情況等。4.2.2 試驗(yàn)?zāi)康?說明本試驗(yàn)所要達(dá)到的目的。4.2.3 試驗(yàn)管理 對(duì)試驗(yàn)管理和符合 GLP 、 GCP 的情況進(jìn)行描述,

15、如試驗(yàn)人員的培訓(xùn)、試驗(yàn)負(fù)責(zé) 人對(duì)試驗(yàn)過程的監(jiān)督、發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)的報(bào)告制度、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制情況、保證數(shù)據(jù)達(dá)到準(zhǔn)確可靠 的質(zhì)量控制過程、統(tǒng)計(jì) /數(shù)據(jù)管理情況、試驗(yàn)中發(fā)生的問題及其處理措施等。4.2.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)4.2.4.1 試驗(yàn)總體設(shè)計(jì)方案 試驗(yàn)總體設(shè)計(jì)方案的描述應(yīng)清晰、簡(jiǎn)潔,必要時(shí)采用圖表等直觀的 方式。包括:試驗(yàn)用制品名稱、來源、制備日期、質(zhì)量狀況、劑量組、稀釋劑種類、稀釋方法、制品 的具體用法,試驗(yàn)動(dòng)物的品種、級(jí)別、大小、數(shù)量、性別、來源、質(zhì)量狀況、動(dòng)物供應(yīng)單位的合法性, 設(shè)盲方法和程度(非盲、單盲、雙盲等、對(duì)照的設(shè)立方法、分組方法、試驗(yàn)時(shí)間及順序(盡量采用 圖表的方式來直觀表示時(shí)間安排

16、情況、對(duì)安全問題或特殊情況的處理預(yù)案等。4.2.4.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及對(duì)照組的選擇 應(yīng)闡明所設(shè)立對(duì)照的確定依據(jù)及其合理性。如果試驗(yàn)中不設(shè) 對(duì)照組, 應(yīng)說明原因; 如未采用隨機(jī)分組, 則應(yīng)詳細(xì)解釋和說明能有效克服系統(tǒng)偏差的其他技術(shù)措施。 應(yīng)對(duì)試驗(yàn)設(shè)計(jì)中涉及到的制品使用時(shí)間間隔的合理性進(jìn)行說明。4.2.4.3 試驗(yàn)動(dòng)物的選擇與管理 根據(jù)研究疾病的種類、動(dòng)物的年齡、性別、體重、品種等確定 合理可行的選擇標(biāo)準(zhǔn)和剔除標(biāo)準(zhǔn)。必要時(shí)進(jìn)行合理的論證。確定動(dòng)物設(shè)施的條件,動(dòng)物的飼養(yǎng)管理?xiàng)l 件和方式(飼料、飲水的供給方式,動(dòng)物舍條件等。不同試驗(yàn)組的動(dòng)物混合飼養(yǎng)時(shí),應(yīng)說明不同組 的甄別方法。4.2.4.5 研究指標(biāo)和統(tǒng)

17、計(jì)處理方案 應(yīng)明確研究的指標(biāo)(臨床觀察和檢查的項(xiàng)目和頻率,取樣種 類和頻率,樣品的處理、保存條件和時(shí)間,血清學(xué)檢測(cè)方法,剖檢觀察時(shí)間和內(nèi)容,體重、增重量、 飼料轉(zhuǎn)化率、產(chǎn)蛋率、產(chǎn)仔率等性能指標(biāo)的獲取時(shí)間和方式等 。應(yīng)明確列出各種指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)分析方 法、有效性及安全性評(píng)價(jià)方法等。4.2.5 生物安全事項(xiàng) 針對(duì)試驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的生物安全問題 (如病原體的擴(kuò)散、 操作人員的 感染等,應(yīng)提出特別的注意事項(xiàng)。如果無,可注明“沒有需要特別注意的事項(xiàng)”。4.2.6 材料和方法 針對(duì)試驗(yàn)設(shè)計(jì)中的各個(gè)方面, 詳細(xì)描述試驗(yàn)過程中實(shí)際執(zhí)行的情況。 試驗(yàn)設(shè) 計(jì)方案不宜更改。如果不得不更改,應(yīng)對(duì)更改的時(shí)間、理由、更改過

18、程及有無備案進(jìn)行詳細(xì)說明并論 證其對(duì)整個(gè)試驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià)的影響。詳細(xì)描述試驗(yàn)用制品在試驗(yàn)中的應(yīng)用過程及其相關(guān)事宜。列出試驗(yàn)用制品的名稱、劑型、規(guī)格、 來源、制備日期、批號(hào)(如采用多個(gè)批號(hào),對(duì)各組動(dòng)物使用的制品批號(hào)應(yīng)登記、主要質(zhì)量指標(biāo)、保 存條件及有效期。對(duì)特殊的對(duì)照制品也應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)說明和評(píng)價(jià)。詳細(xì)描述試驗(yàn)用制品的用法與用量(包括稀釋劑、稀釋方式、使用途徑、使用劑量、使用方式和 使用時(shí)間的安排等,隨機(jī)分組的方法和操作(隨機(jī)號(hào)碼的生成方法。描述盲法的具體操作方式、 緊急破盲的情況 (如嚴(yán)重的不良事件、 泄密等 、 保證試驗(yàn)用制品和對(duì)照制品無法區(qū)別所采取的措施、 無法設(shè)盲或可以不設(shè)盲的理由并說明如何控制

19、偏差。 描述除試驗(yàn)制品外的其他制品使用、 記錄情況及 其規(guī)定步驟, 并評(píng)價(jià)其對(duì)試驗(yàn)制品試驗(yàn)結(jié)果的影響, 闡明如何區(qū)分和判斷其與試驗(yàn)制品對(duì)觀察指標(biāo)的 不同作用。應(yīng)對(duì)有效性和安全性具體的指標(biāo)加以闡述。必要時(shí),應(yīng)解釋特定指標(biāo)的定義、計(jì)算方法和公式。 如采用的有效性或安全性指標(biāo)是非常規(guī)、非標(biāo)準(zhǔn)的特殊指標(biāo),應(yīng)當(dāng)對(duì)其準(zhǔn)確性、可靠性和相關(guān)性進(jìn)行 說明。判斷有效性的主要終點(diǎn)指標(biāo)應(yīng)清晰,并提供相應(yīng)的確定依據(jù),如使用替代指標(biāo),則應(yīng)提供相應(yīng)依 據(jù)。應(yīng)提出試驗(yàn)結(jié)果有效或成立的條件。4.2.7 結(jié)果4.2.7.1 試驗(yàn)動(dòng)物 參加試驗(yàn)的各組動(dòng)物數(shù)可以圖表方式加以描述,包括篩選動(dòng)物數(shù)、隨機(jī)化動(dòng) 物數(shù)、完成試驗(yàn)的動(dòng)物數(shù)、未完

20、成試驗(yàn)的動(dòng)物數(shù)、不符合入選標(biāo)準(zhǔn)但進(jìn)入試驗(yàn)研究的動(dòng)物、符合剔除 標(biāo)準(zhǔn)但未剔除的動(dòng)物、接受錯(cuò)誤用藥的動(dòng)物及服用禁用藥物的動(dòng)物。4.2.7.2 安全性評(píng)價(jià)4.2.7.2.1 基本內(nèi)容 只要使用過至少一次試驗(yàn)制品的動(dòng)物,均應(yīng)進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。安全性包括三個(gè)層次:第一,動(dòng)物的用藥劑量、用藥時(shí)間和次數(shù);第二,以合理的方式對(duì)常見的 不良反應(yīng)和各種安全指標(biāo)的改變進(jìn)行歸類, 以合適的統(tǒng)計(jì)分析比較各組間的差異, 分析影響不良反應(yīng) 發(fā)生頻率的可能因素;第三,嚴(yán)重的不良反應(yīng)和其他重要的不良反應(yīng)。對(duì)所有不良反應(yīng),應(yīng)明確與藥 物的因果關(guān)系。使用試驗(yàn)制品和對(duì)照制品后出現(xiàn)的不良反應(yīng)均應(yīng)報(bào)告,以圖、表的方式對(duì)出現(xiàn)的不良 反應(yīng)進(jìn)行

21、總結(jié), 對(duì)重點(diǎn)關(guān)注的不良反應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)描述。 分析時(shí)比較試驗(yàn)組和對(duì)照組的不良反應(yīng)的發(fā)生 率,最好結(jié)合反應(yīng)的嚴(yán)重程度及因果關(guān)系進(jìn)行判斷分類,需要時(shí),應(yīng)分析其與給藥劑量、給藥時(shí)間、 給藥次數(shù)等的相關(guān)性。嚴(yán)重不良反應(yīng)和主要試驗(yàn)者認(rèn)為需要報(bào)告的重要不良反應(yīng)應(yīng)單獨(dú)進(jìn)行總結(jié)和分析, 并提供發(fā)生嚴(yán) 重不良反應(yīng)和重要不良反應(yīng)的每個(gè)動(dòng)物編號(hào)、特征、發(fā)生的不良反應(yīng)情況(發(fā)生時(shí)間、持續(xù)時(shí)間、嚴(yán) 重程度、處理措施、結(jié)局和因果關(guān)系判斷等。4.2.7.2.2 安全性小結(jié) 對(duì)試驗(yàn)制品的總體安全性進(jìn)行小結(jié),重點(diǎn)關(guān)注嚴(yán)重不良反應(yīng)。闡述試驗(yàn) 制品大面積應(yīng)用的安全性。4.2.7.3 有效性評(píng)價(jià)4.2.7.3.1 基本內(nèi)容 應(yīng)報(bào)告用作

22、制品有效性判定基礎(chǔ)的各類數(shù)據(jù),如試驗(yàn)組和對(duì)照組中動(dòng)物的 死亡情況、存活動(dòng)物的臨床癥狀、病理學(xué)變化、血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果等。能夠以數(shù)量表達(dá)的指標(biāo),應(yīng)盡可 能以具體數(shù)據(jù)表示。應(yīng)以文字結(jié)合圖表的形式報(bào)告結(jié)果,不能僅出具原始數(shù)據(jù)表。能夠報(bào)告每只動(dòng)物的數(shù)據(jù)時(shí),不應(yīng)僅僅報(bào)告統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后的數(shù)據(jù)。4.2.7.3.2 有效性小結(jié) 通過主要和次要效果指標(biāo)的分析,簡(jiǎn)要小結(jié)試驗(yàn)制品的有效性及臨床意 義。4.2.8 討論 通過以上部分的數(shù)據(jù)、圖表、說明、論證和分析,對(duì)試驗(yàn)中的有效性和安全性結(jié)果進(jìn)行總結(jié),討論并權(quán)衡試驗(yàn)制品的利益風(fēng)險(xiǎn)。不要簡(jiǎn)單地重復(fù)結(jié)果,也不要引出新的結(jié)果。4.2.9 結(jié)論 根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,得出簡(jiǎn)潔的結(jié)論。結(jié)論應(yīng)

23、清晰明確,對(duì)其意義和可能的問題應(yīng)加以 評(píng)述,闡明需注意的問題以及今后進(jìn)一步試驗(yàn)的意義。4.2.10 參考文獻(xiàn) 列出試驗(yàn)報(bào)告的有關(guān)參考文獻(xiàn)。4.2.11 人員簽名 應(yīng)在試驗(yàn)報(bào)告的結(jié)尾部分由試驗(yàn)負(fù)責(zé)人、 試驗(yàn)執(zhí)行人、 報(bào)告起草人簽署姓名 和日期。附件三:獸用生物制品生產(chǎn)用細(xì)胞系試驗(yàn)研究指導(dǎo)原則1 目的 制定獸用生物制品生產(chǎn)用細(xì)胞系的試驗(yàn)指導(dǎo)原則,確保獸用生物制品生產(chǎn)用細(xì)胞系 的純凈性和安全性。2 背景 與哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞相比,細(xì)胞系具有突出的優(yōu)勢(shì)。在發(fā)達(dá)國(guó)家,已有部分細(xì)胞系 應(yīng)用于多種獸用生物制品的生產(chǎn),但我國(guó)僅在部分滅活疫苗的生產(chǎn)中使用細(xì)胞系,活疫苗的生產(chǎn)中 尚未使用過細(xì)胞系。按照國(guó)際慣例,在將

24、特定細(xì)胞系用于疫苗生產(chǎn)前,必須按規(guī)定進(jìn)行全面鑒定, 并建立種子庫。3 基本管理要求3.1 細(xì)胞系的應(yīng)用原則如果一種病毒能夠在已經(jīng)建立的、以種子批制度為基礎(chǔ)的細(xì)胞系上有效地增殖,則不應(yīng)使用任 何哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞。本原則中的細(xì)胞系泛指細(xì)胞系和細(xì)胞株。狹義的細(xì)胞系一般由人或動(dòng)物腫瘤組織或發(fā)生突變的 正常細(xì)胞傳代轉(zhuǎn)化而來。細(xì)胞株是通過選擇或克隆培養(yǎng),從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊 遺傳、生化性質(zhì)或特異標(biāo)記的細(xì)胞群。細(xì)胞系可單層培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)或用載體培養(yǎng),能大規(guī)模生產(chǎn)。這些細(xì)胞可以有限或無限傳代, 但有些細(xì)胞系傳到一定代次后,會(huì)對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生致瘤性;并且對(duì)病毒的適應(yīng)性降低。同時(shí),細(xì)胞系在 建系和傳代過

25、程中可能污染細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒。所以,對(duì)生產(chǎn)用細(xì)胞系應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格檢驗(yàn), 并限定使用代次。獸用生物制品生產(chǎn)中使用的任何細(xì)胞系,均需得到農(nóng)業(yè)部的批準(zhǔn)。3.2 細(xì)胞系種子庫的建立 生產(chǎn)中所用細(xì)胞系通常應(yīng)根據(jù)種子批制度進(jìn)行制備。3.2.1 原始細(xì)胞庫的建立 一旦選用某一細(xì)胞系作為生物制品生產(chǎn)的細(xì)胞基質(zhì),即應(yīng)建立原始 細(xì)胞庫,以確保在制品的持續(xù)生產(chǎn)期內(nèi),能充分供應(yīng)質(zhì)量均質(zhì)的細(xì)胞。原始細(xì)胞庫應(yīng)由來源清楚、 一定數(shù)量、成分一致的細(xì)胞組成,按一定量均勻分裝于安瓿,于液氮中凍存?zhèn)溆?。?duì)原始細(xì)胞庫應(yīng) 做全面檢驗(yàn)和鑒定,以保證沒有其他細(xì)胞的交叉污染和細(xì)菌、霉菌、支原體、病毒污染。3.2.2 基礎(chǔ)細(xì)胞庫的建立 取

26、原始細(xì)胞庫細(xì)胞,通過適當(dāng)方式進(jìn)行細(xì)胞傳代,增殖到一定數(shù)量 細(xì)胞,將相同代次水平的所有細(xì)胞均勻混合成一批,定量分裝于安瓿,于液氮中凍存?zhèn)溆?。必須?據(jù)特定的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)這些細(xì)胞進(jìn)行全面檢驗(yàn)和鑒定, 全部合格后即為基礎(chǔ)細(xì)胞庫, 用于建立工作細(xì)胞庫。 3.2.3 工作細(xì)胞庫的建立 工作細(xì)胞庫的細(xì)胞由基礎(chǔ)細(xì)胞庫細(xì)胞傳代擴(kuò)增而來?；A(chǔ)細(xì)胞庫細(xì) 胞經(jīng)傳代增殖后,將相同代次水平的所有細(xì)胞全部合并成一批均質(zhì)細(xì)胞群體,再按一定細(xì)胞數(shù)量分 裝于安瓿中,于液氮或 -100以下凍存?zhèn)溆谩９ぷ骷?xì)胞庫應(yīng)有足夠的數(shù)量,以滿足生產(chǎn)所需。必須根據(jù)特定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)和鑒定,合格后方可用于生產(chǎn)用細(xì)胞的制備。3.2.4 生產(chǎn)用細(xì)胞的培養(yǎng)

27、取出凍存的工作細(xì)胞庫中一個(gè)或多個(gè)安瓿,混合后傳代培養(yǎng),傳到 一定代次后供生產(chǎn)制品使用。生產(chǎn)用細(xì)胞的傳代水平必須限制在最高代次范圍之內(nèi)。從工作細(xì)胞庫 取出的細(xì)胞種子增殖出來的細(xì)胞,不再回凍保存和再用于生產(chǎn)。3.3 細(xì)胞庫的管理 對(duì)基礎(chǔ)細(xì)胞庫和工作細(xì)胞庫, 都應(yīng)詳細(xì)記錄細(xì)胞的代次、 安瓿的存放位置、 識(shí)別標(biāo)志、凍存日期和庫存量;建議將基礎(chǔ)細(xì)胞庫和工作細(xì)胞庫分別存放在生產(chǎn)區(qū)中相距較遠(yuǎn)的兩 處、多個(gè)容器中,以防意外,避免細(xì)胞系丟失。非生產(chǎn)用細(xì)胞與生產(chǎn)用細(xì)胞應(yīng)嚴(yán)格分開存放。 為了容易區(qū)分,每種基礎(chǔ)細(xì)胞庫要有一個(gè)指定的代碼。4 細(xì)胞系的檢驗(yàn)4.1 一般要求 應(yīng)詳細(xì)了解并書面記錄細(xì)胞系的歷史(如來源、代次、

28、培養(yǎng)基以及保存條件 。 應(yīng)闡述細(xì)胞系的保存與使用方法,包括在生產(chǎn)過程中如何確保所用細(xì)胞系不超過批準(zhǔn)的最高代次等 詳細(xì)情況。 應(yīng)保存有足夠量的基礎(chǔ)細(xì)胞庫細(xì)胞和工作細(xì)胞庫細(xì)胞, 供有關(guān)部門可能進(jìn)行的抽樣檢驗(yàn)。 應(yīng)對(duì)細(xì)胞傳代過程中使用的牛血清、胰蛋白酶等生物源性原材料的來源和質(zhì)量加以說明,并證 明這些原材料的使用不影響已經(jīng)鑒定合格的細(xì)胞系質(zhì)量。4.2 細(xì)胞系的檢驗(yàn) 對(duì)基礎(chǔ)細(xì)胞庫和工作細(xì)胞庫細(xì)胞均應(yīng)進(jìn)行全面檢驗(yàn)。在下列檢驗(yàn)中,必須用基礎(chǔ)細(xì)胞庫細(xì)胞、工作細(xì)胞庫細(xì)胞以及來源于工作細(xì)胞庫的最高生產(chǎn)代 次的、具有代表性的同源細(xì)胞樣品進(jìn)行(見表 1 。一般還應(yīng)用超過最高限制代次 10代以上的細(xì)胞 進(jìn)行試驗(yàn)。4.

29、2.1 顯微鏡檢查 用顯微鏡檢查細(xì)胞的形態(tài)、一致性等。4.2.2 細(xì)菌和霉菌檢驗(yàn) 按照中國(guó)獸藥典進(jìn)行檢驗(yàn)。4.2.3 支原體檢驗(yàn) 按照中國(guó)獸藥典進(jìn)行檢驗(yàn)。表 1 各種傳代水平的細(xì)胞系應(yīng)該進(jìn)行的檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)項(xiàng)目 基礎(chǔ)細(xì)胞庫細(xì)胞工作細(xì)胞庫細(xì)胞最高限制代次細(xì)胞高于最高代次 10代的細(xì)胞顯微鏡檢查細(xì)菌和霉菌檢驗(yàn)支原體檢驗(yàn)病毒檢驗(yàn)細(xì)胞鑒別胞核學(xué)檢查致瘤和致癌性檢驗(yàn)病毒培養(yǎng)適應(yīng)性檢驗(yàn)注意:帶“ +”號(hào)的為必檢項(xiàng)目。4.2.4 病毒檢驗(yàn)4.2.4.1 致細(xì)胞病變病毒和紅細(xì)胞吸附病毒的檢驗(yàn) 檢驗(yàn)用細(xì)胞單層的面積應(yīng)不低于 70cm 2, 其制備方法、培養(yǎng)基、添加物和生長(zhǎng)條件等,應(yīng)與其在生物制品生產(chǎn)過程中的條件相

30、同。將單層細(xì)胞在培養(yǎng)基中至少維持 28日, 每隔 7日進(jìn)行一次傳代, 如果細(xì)胞不能存活這么長(zhǎng)時(shí)間, 則在盡可能長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間后進(jìn)行傳代。為了進(jìn)行下列檢驗(yàn),最后一次傳代時(shí),應(yīng)在適當(dāng)容器中培養(yǎng)足量細(xì)胞。在整個(gè)培養(yǎng)期內(nèi),定期對(duì)細(xì)胞單層進(jìn)行檢查,觀察是否出現(xiàn)細(xì)胞病變(CPE 。在進(jìn)行 CPE 檢 查的末期,按照下列方法進(jìn)行檢驗(yàn)。致細(xì)胞病變病毒的檢驗(yàn) 取 2個(gè)細(xì)胞單層, 每個(gè)單層至少 6cm 2, 用適宜的細(xì)胞染色液進(jìn)行染色。 觀察每個(gè)單層的全部區(qū)域,檢查有無細(xì)胞異常如包涵體、巨細(xì)胞數(shù)目異常以及能夠表明存在污染物 的其他任何病變。紅細(xì)胞吸附病毒的檢驗(yàn) 取總面積不低于 70cm 2的細(xì)胞單層,用適宜緩沖液洗

31、滌數(shù)次,加入足 量的適宜紅細(xì)胞懸液均勻覆蓋細(xì)胞單層表面。觀察細(xì)胞上是否出現(xiàn)紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象。4.2.4.2 特定病毒的檢驗(yàn) 應(yīng)針對(duì)細(xì)胞系的來源動(dòng)物和疫苗使用對(duì)象動(dòng)物的常見病毒對(duì)細(xì)胞系 進(jìn)行檢驗(yàn)。應(yīng)在適宜支持物上制備足量細(xì)胞進(jìn)行特定病原檢驗(yàn)。每次試驗(yàn)中應(yīng)設(shè)立適宜的陽性對(duì)照。用免 疫熒光抗體或其他檢驗(yàn)方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行檢驗(yàn)。用其他細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行的檢驗(yàn) 取面積不低于 140cm 2的細(xì)胞單層,反復(fù)凍融至少 3 次,離心, 去除細(xì)胞碎片;在下列細(xì)胞的單層覆蓋率達(dá)到 70%前等量接種上述凍融提取物:細(xì)胞系來源動(dòng)物的原代細(xì)胞;對(duì)疫苗使用對(duì)象動(dòng)物致病性病毒敏感的細(xì)胞;對(duì)相應(yīng)瘟病毒敏感的細(xì)胞。將接種后的細(xì)胞維持培養(yǎng)

32、 4日以上,按上述方法制備凍融提取物,再接種到上述細(xì)胞的足量新 鮮培養(yǎng)物上,繼續(xù)培養(yǎng) 4日以上。培養(yǎng)期間定期觀察所有培養(yǎng)物,檢查 CPE 。在培養(yǎng)期末,對(duì)接種的細(xì)胞進(jìn)行下列檢驗(yàn):檢驗(yàn)有無致細(xì)胞病變和紅細(xì)胞吸附性病毒存在。用免疫熒光法等檢驗(yàn)有無瘟病毒和其他特定污染物。4.2.5 細(xì)胞鑒別 應(yīng)用適宜方法證明:基礎(chǔ)細(xì)胞庫細(xì)胞和最高代次生產(chǎn)用細(xì)胞來源于指定的動(dòng) 物種類。用針對(duì)細(xì)胞系來源動(dòng)物的血清進(jìn)行熒光試驗(yàn)時(shí),如果所有被檢細(xì)胞都出現(xiàn)熒光,就沒有必要用有 關(guān)試劑進(jìn)行其他試驗(yàn)檢測(cè)是否有其他動(dòng)物種類的細(xì)胞污染。4.2.6 胞核學(xué)檢查 對(duì)不同傳代水平的細(xì)胞, 取 50個(gè)處于有絲分裂中期的細(xì)胞進(jìn)行檢查。 在基

33、礎(chǔ)細(xì)胞庫細(xì)胞中存在的染色體標(biāo)志,在最高代次細(xì)胞中也應(yīng)存在。與基礎(chǔ)細(xì)胞庫的細(xì)胞相比,所有 細(xì)胞的染色體模式數(shù)不得高出 15%。核型必須相同。如果模式數(shù)超過所述標(biāo)準(zhǔn),最高代次細(xì)胞中發(fā) 現(xiàn)染色體標(biāo)志或發(fā)現(xiàn)核型不同,則該細(xì)胞系不得用于生產(chǎn)生物制品。4.2.7 致瘤性檢驗(yàn) 某些細(xì)胞系在一定代次范圍內(nèi)具有致瘤性和致癌性。如果將這些細(xì)胞系用 于疫苗生產(chǎn),應(yīng)就細(xì)胞系對(duì)靶動(dòng)物的潛在致瘤性和致癌性進(jìn)行檢驗(yàn)。下列方法任擇其一。4.2.7.1 用無胸腺小鼠至少 10只, 各皮下或肌肉注射 107個(gè)待檢細(xì)胞, 同時(shí)用 Hela 細(xì)胞或 Hep-2細(xì)胞或其他適宜細(xì)胞系皮下或肌肉注射無胸腺小鼠,每只 106個(gè)細(xì)胞,用適宜細(xì)

34、胞作為陰性對(duì)照。 4.2.7.2 取 35日齡乳鼠或體重 810g 小鼠 6只,用抗胸腺血清處理后,每只皮下接種 107個(gè)待檢細(xì)胞,并按 4.2.7.1設(shè)立對(duì)照。逐日觀察 14日,檢查有無結(jié)節(jié)或腫瘤形成。如有結(jié)節(jié)或可疑病灶,應(yīng)在觀察至少 12周后剖 檢, 進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。 對(duì)未發(fā)現(xiàn)結(jié)節(jié)的動(dòng)物, 對(duì)其中的一半動(dòng)物觀察 21日后剖檢, 對(duì)另外一半 動(dòng)物觀察 12周后剖檢, 觀察各個(gè)淋巴結(jié)和器官中是否形成結(jié)節(jié), 如有懷疑, 應(yīng)進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。 不應(yīng)有移植瘤形成。陽性對(duì)照組觀察 21日后,應(yīng)出現(xiàn)明顯的腫瘤。陰性對(duì)照組觀察 21日,應(yīng)為陰性。4.2.8 病毒培養(yǎng)適應(yīng)性檢驗(yàn) 病毒能否在細(xì)胞系中高水

35、平地穩(wěn)定繁殖,且保持其免疫原性和毒 力,是生產(chǎn)生物制品的關(guān)鍵。因此,應(yīng)用基礎(chǔ)細(xì)胞庫細(xì)胞、工作細(xì)胞庫細(xì)胞和最高限定代次細(xì)胞對(duì) 病毒培養(yǎng)的適應(yīng)性進(jìn)行檢驗(yàn)。檢驗(yàn)項(xiàng)目包括病毒含量測(cè)定、免疫原性鑒定、毒力測(cè)定等;對(duì)一些特 殊制品(如豬囊尾蚴細(xì)胞疫苗 ,應(yīng)視情況確定檢驗(yàn)項(xiàng)目。附件四:獸用生物制品菌(毒、蟲種種子批建立試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則1 目的 為獸用新生物制品研制人員進(jìn)行獸用生物制品菌(毒、蟲種子批建立及各級(jí)種子 鑒定提供原則性指導(dǎo)。2 背景 獸藥注冊(cè)辦法和農(nóng)業(yè)部第 442號(hào)公告規(guī)定,獸用生物制品的制造應(yīng)以種子批系 統(tǒng)為基礎(chǔ)。種子批分三級(jí):原始種子、基礎(chǔ)種子和生產(chǎn)種子。只有按照規(guī)定項(xiàng)目和方法進(jìn)行檢驗(yàn)證 明合

36、格的種子,方可用于生產(chǎn)獸用生物制品。3 定義3.1 原始種子 具有一定數(shù)量、背景明確、組成均一、經(jīng)系統(tǒng)鑒定免疫原性和繁殖特性良好、 生物學(xué)特性和鑒別特征明確、純凈的病毒(細(xì)菌、蟲株。3.2 基礎(chǔ)種子 由原始種子制備、處于規(guī)定代次水平、一定數(shù)量、組成均一、經(jīng)系統(tǒng)鑒定符合 有關(guān)規(guī)定的活病毒(菌體、蟲培養(yǎng)物。3.3 生產(chǎn)種子 由基礎(chǔ)種子制備、 處于規(guī)定代次范圍內(nèi)、 經(jīng)鑒定符合有關(guān)規(guī)定的活病毒 (菌體、 蟲培養(yǎng)物。4 種子批的建立4.1 原始種子批的建立 選用某一菌(毒、蟲株用于獸用生物制品研制和生產(chǎn)后,即應(yīng)建立 原始種子批,以確保在制品的持續(xù)生產(chǎn)期內(nèi),能充分供應(yīng)質(zhì)量均一的種子。原始種子批建立基本原則

37、為對(duì)選定的菌(毒、蟲株進(jìn)行純培養(yǎng),并將培養(yǎng)物分成一定數(shù)量、 裝量和成分一致的小包裝 (如安瓿 , 于液氮中或其他適宜條件下保存。 對(duì)原始種子批要按照有關(guān)要 求做系統(tǒng)鑒定。通常情況下,應(yīng)對(duì)原始種子的繁殖或培養(yǎng)特性、免疫原性、血清學(xué)特性、鑒別特征 和純凈性進(jìn)行鑒定。4.2 基礎(chǔ)種子批的建立4.2.1 基礎(chǔ)種子由原始種子經(jīng)適當(dāng)方式傳代擴(kuò)增而來,增殖到一定數(shù)量后,將相同代次的所有 培養(yǎng)物均勻混合成一批, 定量分裝 (如安瓿 , 保存于液氮中或其他適宜條件下備用。 按照規(guī)定項(xiàng)目 和方法進(jìn)行系統(tǒng)鑒定合格后,方可作為基礎(chǔ)種子使用?；A(chǔ)種子批應(yīng)達(dá)到足夠的規(guī)模,以便能夠保 證相當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)的生產(chǎn)需要。4.2.2

38、基礎(chǔ)種子代次的確定 通常情況下,將基礎(chǔ)種子傳代至規(guī)定最高代次以上第 3代,取不 同代次水平的培養(yǎng)物進(jìn)行含量、免疫原性試驗(yàn),考察其繁殖特性和免疫原性的穩(wěn)定性。必要時(shí),還 須考察基礎(chǔ)種子的遺傳穩(wěn)定性。4.3 生產(chǎn)種子批的建立 生產(chǎn)種子由基礎(chǔ)種子經(jīng)適當(dāng)方式傳代擴(kuò)增而來,達(dá)到一定數(shù)量后,均 勻混合,定量分裝,保存于液氮或其他適宜條件下備用。根據(jù)特定生產(chǎn)種子批的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)逐項(xiàng)(一 般應(yīng)包括純凈性檢驗(yàn)、特異性檢驗(yàn)和含量測(cè)定等進(jìn)行檢驗(yàn),合格后方可用于生產(chǎn)。并須確定生產(chǎn) 種子在特定保存條件下的保存期。生產(chǎn)種子批應(yīng)達(dá)到一定規(guī)模, 并含有足量活病毒 (或細(xì)菌、蟲 , 以確保能滿足生產(chǎn)一批或一個(gè) 亞批產(chǎn)品。5 基礎(chǔ)種

39、子的鑒定對(duì)基礎(chǔ)種子應(yīng)進(jìn)行系統(tǒng)鑒定,一般應(yīng)進(jìn)行下列鑒定項(xiàng)目。5.1 含量測(cè)定 應(yīng)盡量采用通行方法,并應(yīng)確保在全部試驗(yàn)過程中采用相同的測(cè)定指標(biāo) (如半 數(shù)感染量、半數(shù)致死量等 。5.2 安全或毒力試驗(yàn)5.2.1 本試驗(yàn)主要考察基礎(chǔ)種子對(duì)本動(dòng)物的致病性, 為制定相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù), 并為試驗(yàn)設(shè)施、 生產(chǎn)設(shè)施、培養(yǎng)物滅活前或診斷試劑使用過程中應(yīng)采取的安全措施等提供依據(jù)。5.2.2 參照獸用生物制品實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)指導(dǎo)原則設(shè)計(jì)、實(shí)施安全試驗(yàn)。5.2.3 對(duì)于人工構(gòu)建的基因工程菌 (毒 株, 應(yīng)該按照 農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例 和 農(nóng) 業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)管理辦法有關(guān)規(guī)定進(jìn)行安全或穩(wěn)定性試驗(yàn)。5.3 免疫抑

40、制試驗(yàn)(如果適用 有證據(jù)表明疫苗毒(如雞傳染性法氏囊病病毒可能存在免 疫抑制作用時(shí),則應(yīng)按照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)(或通行方法進(jìn)行本試驗(yàn)。5.4 毒力返強(qiáng)試驗(yàn)(如果適用 參照獸用生物制品菌毒種毒力返強(qiáng)試驗(yàn)指導(dǎo)原則的要求 設(shè)計(jì)、實(shí)施本試驗(yàn)。5.5 免疫原性 (或最小免疫劑量 試驗(yàn) 活疫苗, 用不同劑量的菌 (毒、 蟲 種分別接種動(dòng)物; 滅活疫苗,用最高代次基礎(chǔ)種子制備疫苗菌(毒液,取不同含量的細(xì)菌(病毒懸液,按成品生 產(chǎn)工藝制備抗原含量不同的疫苗, 或用固定含量的細(xì)菌 (病毒 液制備疫苗后, 取不同劑量的疫苗, 分別接種不同組動(dòng)物;在接種后的適宜時(shí)間進(jìn)行攻毒或采用已經(jīng)證明與免疫攻毒方法具有平行性關(guān) 系的替代方

41、法進(jìn)行免疫效力檢驗(yàn),統(tǒng)計(jì)出使 90%免疫動(dòng)物獲得保護(hù)的細(xì)菌(病毒量就是最小免疫 量。如果疫苗使用對(duì)象包括多種動(dòng)物或多種日齡動(dòng)物,則應(yīng)針對(duì)各種靶動(dòng)物進(jìn)行免疫原性(最小免 疫劑量試驗(yàn)。5.6 純凈性檢驗(yàn) 按照中華人民共和國(guó)獸藥典中的有關(guān)方法進(jìn)行檢驗(yàn),必要時(shí)須自行建立 方法并加以驗(yàn)證。應(yīng)無細(xì)菌、霉菌、外源病毒污染;應(yīng)無雜菌污染;應(yīng)無支原體污染。對(duì)于禽用疫 苗毒種而言,除應(yīng)按照中華人民共和國(guó)獸藥典中的方法進(jìn)行外源病毒檢測(cè)外,還應(yīng)采用適宜方 法進(jìn)行禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒和雞傳染性貧血因子等外源病毒檢測(cè)。5.7 鑒別檢驗(yàn)5.7.1 應(yīng)采用適宜方法(如熒光抗體試驗(yàn)、毒種的血清中和試驗(yàn)、菌種的試管凝集試驗(yàn)、

42、菌種 的玻片凝集試驗(yàn)或菌種的生長(zhǎng)特性檢驗(yàn)鑒別疫苗株,并盡可能與相關(guān)毒株相區(qū)別。5.7.2 血清學(xué)特性鑒定,應(yīng)采用通行的分型方法。種特異性鑒定時(shí),應(yīng)用血清中和試驗(yàn);若進(jìn) 行進(jìn)一步的血清型或亞型鑒定時(shí),則用型或亞型特異性單克隆抗體進(jìn)行中和試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)或 用其他已知具有型或亞型特異性的試驗(yàn)進(jìn)行。5.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 確定基礎(chǔ)種子在特定保存條件下的保存期。6 種子批管理基本原則6.1 對(duì)原始種子,應(yīng)詳細(xì)說明其背景,如名稱、時(shí)間、地點(diǎn)、來源、代次、菌(毒、蟲株代 號(hào)和歷史等,并進(jìn)行有關(guān)特性鑒定。對(duì)于自行分離并致弱的弱毒菌(毒株原始種子,應(yīng)詳細(xì)報(bào)告 致弱株的選育方法和過程。對(duì)通過基因工程技術(shù)人工構(gòu)建的

43、菌(毒株原始種子,應(yīng)提供詳細(xì)的基 因操作方法和對(duì)工程株的系統(tǒng)鑒定報(bào)告。6.2 一批基礎(chǔ)種子接近全部用完時(shí),必須按規(guī)定方法重新制備培養(yǎng)物,并按照規(guī)定項(xiàng)目和方法 進(jìn)行系統(tǒng)鑒定合格后,方可作為新的一批基礎(chǔ)種子使用。6.3 對(duì)基礎(chǔ)種子批和生產(chǎn)種子批,應(yīng)詳細(xì)記錄代次、安瓿的存放位置、識(shí)別標(biāo)志、凍存日期和庫存量。應(yīng)將基礎(chǔ)種子批和生產(chǎn)種子批分別放置在生產(chǎn)區(qū)中相距較遠(yuǎn)的兩處、多個(gè)容器存放,避免種子 丟失。非生產(chǎn)用細(xì)菌(病毒、蟲應(yīng)嚴(yán)格與生產(chǎn)用細(xì)菌(病毒、蟲分開存放。為了容易區(qū)分,每 個(gè)基礎(chǔ)種子批要有一個(gè)指定代碼。6.4 一般不能用基礎(chǔ)毒種傳代 5代以上或基礎(chǔ)菌種傳代 10代以上制備疫苗。如果將這種代次 范圍之外

44、的基礎(chǔ)種子用于生產(chǎn),應(yīng)通過進(jìn)一步的試驗(yàn)加以證明。6.5 從生產(chǎn)種子批中取出的種子,增殖一次后獲得的病毒(細(xì)菌、蟲培養(yǎng)物,即應(yīng)用于制備 疫苗。用生產(chǎn)種子增殖獲得的病毒(細(xì)菌、蟲培養(yǎng)物,不得再回凍保存和再次用于生產(chǎn)。6.6 應(yīng)闡述基礎(chǔ)種子和生產(chǎn)種子的保存與使用方法, 包括在生產(chǎn)過程中如何確保所用種子不超 過批準(zhǔn)的最高代次等詳細(xì)情況。應(yīng)保存有足夠量的基礎(chǔ)種子,供有關(guān)部門進(jìn)行檢驗(yàn)用。附件五:獸用生物制品菌(毒、蟲種毒力返強(qiáng)試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則1 目的 為獸用活疫苗進(jìn)行菌(毒、蟲種的毒力返強(qiáng)試驗(yàn)提供指導(dǎo)。2 背景 獸藥注冊(cè)管理辦法中規(guī)定,在申請(qǐng)注冊(cè)活疫苗的申報(bào)資料中必須提交菌(毒、 蟲種的毒力返強(qiáng)試驗(yàn)報(bào)告。

45、毒力返強(qiáng)試驗(yàn)是評(píng)估疫苗的基礎(chǔ)種子經(jīng)靶動(dòng)物連續(xù)傳代后的毒力或遺 傳穩(wěn)定性,以確保疫苗接種動(dòng)物后不會(huì)導(dǎo)致毒力增強(qiáng)。3 毒力返強(qiáng)試驗(yàn)方法3.1 一般要求3.1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 應(yīng)根據(jù)菌(毒、蟲種的特點(diǎn)制定毒力返強(qiáng)試驗(yàn)的試驗(yàn)方案,包括試驗(yàn)動(dòng)物 的品種、日齡、數(shù)量,接種時(shí)間、途徑和接種量,傳代方法,觀察內(nèi)容和時(shí)間,微生物分離鑒定方 法,以及傳代后毒力返強(qiáng)程度的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。3.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物 試驗(yàn)所用動(dòng)物應(yīng)為 SPF 級(jí)(如雞或健康易感靶動(dòng)物。試驗(yàn)時(shí)動(dòng)物日齡應(yīng)對(duì) 被檢微生物最易感,動(dòng)物數(shù)量應(yīng)根據(jù)動(dòng)物種類而定,但每次傳代時(shí)一般應(yīng)使用 25頭(只 。在正 式試驗(yàn)前,應(yīng)測(cè)定試驗(yàn)動(dòng)物對(duì)被測(cè)試菌(毒、蟲種的敏感性,以

46、確保菌(毒、蟲種能在動(dòng)物體 內(nèi)正常增殖。3.1.3 傳代方法 在傳代過程中,應(yīng)根據(jù)菌(毒、蟲種在靶動(dòng)物體內(nèi)的增殖特點(diǎn),在適宜的 時(shí)間采集含菌(毒、蟲量最高的組織、分泌物或排泄物,經(jīng)適當(dāng)處理作為繼代接種物,以確保微 生物的重分離率和傳代的成功率。對(duì)于一些易水平傳播的微生物,也可以經(jīng)動(dòng)物直接接觸感染進(jìn)行 傳代。在每一次傳代過程中,必須采用適當(dāng)方法對(duì)采集的樣品進(jìn)行微生物鑒定和含量測(cè)定,以證實(shí) 傳代接種物中是否存在被檢微生物。 傳代過程中, 禁止將重分離的微生物在體外增殖后再進(jìn)行傳代。 3.1.4 接種劑量 在首次傳代試驗(yàn)時(shí),應(yīng)根據(jù)菌(毒、蟲種在試驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)的增殖特性,選 擇適宜的接種劑量(一般采用大

47、劑量進(jìn)行接種,以確保菌(毒、蟲種在試驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)充分增殖。 繼代時(shí),應(yīng)保證接種的分離材料中有足量的微生物;必要時(shí)可加大接種劑量或者對(duì)分離材料進(jìn)行適 當(dāng)濃縮。3.2 試驗(yàn)程序3.2.1 第一次接種 按預(yù)先制訂的返強(qiáng)試驗(yàn)方案,使用基礎(chǔ)種子的最低代次對(duì)第一組試驗(yàn)動(dòng)物 進(jìn)行接種,使其在靶動(dòng)物體內(nèi)適當(dāng)增殖。3.2.2 微生物的重分離 接種后的分離時(shí)間應(yīng)在靶動(dòng)物感染后菌(毒、蟲的增殖高峰期,要 采用接種動(dòng)物最適當(dāng)?shù)慕M織、分泌物或排泄物來分離微生物。3.2.3 分離物的鑒定 應(yīng)采用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)方法,鑒定分離物中是否存在被檢微生物。3.2.4 繼代 由前次接種動(dòng)物分離到的材料,按照與第一次傳代相同的途徑接種繼代動(dòng)

48、物。每 一次繼代后的病原重新分離與鑒定同第一次傳代。如采用接觸感染方式進(jìn)行繼代,應(yīng)將前次感染動(dòng) 物在其菌(毒、蟲的增殖高峰期轉(zhuǎn)移至新的隔離器(或動(dòng)物舍與易感靶動(dòng)物混合飼養(yǎng),以此進(jìn) 行接觸感染傳代。3.2.5 觀察 每一次繼代后應(yīng)在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間內(nèi)觀察接種動(dòng)物是否出現(xiàn)由于疫苗株毒力返強(qiáng)所導(dǎo) 致的臨床癥狀指標(biāo)和病理變化。3.2.6 傳代次數(shù) 在靶動(dòng)物體內(nèi)連續(xù)傳代次數(shù)一般應(yīng)不少于 5代(即首次接種后要進(jìn)行 4次繼 代 。3.2.7 最后一次傳代觀察時(shí)間 將重新分離的微生物接種最后一次傳代的試驗(yàn)動(dòng)物后,應(yīng)逐日 觀察至少 21日。3.2.8 微生物重分離失敗 在繼代過程中,如果適易的動(dòng)物組織或分泌物或排泄物

49、中不能重分 離到微生物,則應(yīng)適當(dāng)增加接種劑量或試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量,以提高重分離率。3.2.9 繼代試驗(yàn)失敗確證 如果經(jīng)進(jìn)一步試驗(yàn)確證繼代后不能重新分離到接種微生物,該毒力 返強(qiáng)試驗(yàn)結(jié)果可判成立。3.3 返強(qiáng)試驗(yàn)結(jié)果判定3.3.1 臨床癥狀及病理變化比較 根據(jù)菌(毒、蟲種對(duì)易感靶動(dòng)物的致病性,比較不同代次 接種動(dòng)物的臨床癥狀及病理變化,特別應(yīng)對(duì)最后一代傳代動(dòng)物與第一代傳代動(dòng)物的臨床癥狀和病理 變化進(jìn)行對(duì)比。3.3.2 病原學(xué)鑒定 必要時(shí),應(yīng)對(duì)最后一次傳代的分離物進(jìn)行表型和基因型鑒定,并與基礎(chǔ)種 菌(毒、蟲種進(jìn)行比較,以評(píng)估其遺傳穩(wěn)定性和毒力返強(qiáng)的可能性。附件六:獸用生物制品實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則1

50、 目的 為獸用生物制品實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)研究提供原則性指導(dǎo)。2 背景 獸用生物制品的安全性是考察其質(zhì)量的最重要指標(biāo)之一。 獸藥注冊(cè)辦法中對(duì)獸用 生物制品的實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行了詳細(xì)規(guī)定。3 基本要求3.1 實(shí)驗(yàn)室及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的生物安全條件 應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全標(biāo)準(zhǔn)。3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的要求 實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)中所用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)是普通級(jí)或清潔級(jí)易感動(dòng)物, 必要時(shí) 應(yīng)使用 SPF 級(jí)動(dòng)物。禽類制品的實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)多使用本動(dòng)物,其它制品的實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)中除使用靶動(dòng)物外,還 須用敏感的小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(如嚙齒類進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)中應(yīng)使用敏感性最高的品系。應(yīng)使用最小使用日齡的動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)。每批制品的實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)

51、中所用動(dòng)物應(yīng)不少于 10只(頭 ,來源困難或經(jīng)濟(jì)價(jià)值高的動(dòng)物應(yīng)不少于 5只(頭 ,魚、蝦應(yīng)不少于 50尾。3.3 對(duì)制品的要求 實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)中所用實(shí)驗(yàn)室制品的生產(chǎn)用菌(毒、蟲種、制品組成和 配方等,應(yīng)與規(guī)?；a(chǎn)的產(chǎn)品相同。試驗(yàn)性產(chǎn)品應(yīng)經(jīng)過必要的檢驗(yàn),且結(jié)果須符合要求。試驗(yàn)性 產(chǎn)品中主要成分的含量應(yīng)不低于規(guī)?；a(chǎn)時(shí)的出廠標(biāo)準(zhǔn)。3.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 在試驗(yàn)開始前,必須制定詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)方案,其內(nèi)容應(yīng)包括受試制品 的種類,試驗(yàn)開始和結(jié)束的日期,試驗(yàn)動(dòng)物的年齡、品種、性別等特征,制品的配方,對(duì)照組的設(shè) 置,每組動(dòng)物的數(shù)量,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來源、圈舍、試驗(yàn)管理和觀察方式,結(jié)果的判定方法及標(biāo)準(zhǔn)等。 4 實(shí)

52、驗(yàn)室安全試驗(yàn)的內(nèi)容和方法4.1 一次單劑量接種的安全試驗(yàn) 按照推薦的接種途徑, 用適宜日齡的靶動(dòng)物, 接種 1個(gè)劑量, 至少觀察 2周。評(píng)估指標(biāo)應(yīng)包括臨床癥狀、體溫、局部炎癥、組織病變等。對(duì)于可用于多種動(dòng)物的 生物制品,應(yīng)該用各種靶動(dòng)物進(jìn)行安全試驗(yàn)。4.2 單劑量重復(fù)接種安全試驗(yàn) 對(duì)可能進(jìn)行多次接種的生物制品,均須進(jìn)行該試驗(yàn)。按照 4.1項(xiàng)進(jìn)行,但在第 1次接種后 2周,以相同方法再接種一次,再次接種后應(yīng)繼續(xù)觀察至少 2周。 4.3 一次超劑量接種的安全試驗(yàn) 按照 4.1項(xiàng)進(jìn)行,但接種劑量為免疫劑量的數(shù)倍至一百倍不 等。通常情況下,滅活疫苗的安全試驗(yàn)劑量為使用劑量的 2倍,活疫苗的安全試驗(yàn)劑量

53、為使用劑量 的 10100倍。4.4 對(duì)懷孕動(dòng)物的安全性及對(duì)動(dòng)物生殖功能影響試驗(yàn) 對(duì)用于妊娠動(dòng)物的獸用生物制品, 應(yīng)使 用妊娠期動(dòng)物進(jìn)行安全試驗(yàn),考察該制品對(duì)妊娠、胎兒健康的影響。另外,有些病原可能導(dǎo)致生殖 系統(tǒng)的不可逆損傷,這類制品的安全試驗(yàn)中,應(yīng)對(duì)幼齡動(dòng)物接種后,一直觀察到產(chǎn)仔或產(chǎn)蛋,以考 察其對(duì)生殖功能的影響。4.5 對(duì)非靶動(dòng)物、非使用日齡動(dòng)物的安全試驗(yàn) 有些病原可感染多種動(dòng)物或多個(gè)日齡段的動(dòng) 物,這類制品的安全試驗(yàn)中,除應(yīng)考察制品對(duì)靶動(dòng)物和使用日齡動(dòng)物的安全性外,還應(yīng)對(duì)非使用對(duì) 象動(dòng)物和非使用日齡動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn),以考察對(duì)靶動(dòng)物群使用該制品后對(duì)非靶動(dòng)物群可能 引起的安全風(fēng)險(xiǎn)。4.

54、6 疫苗接種對(duì)靶動(dòng)物免疫學(xué)功能影響試驗(yàn) 有些病原可使動(dòng)物的免疫系統(tǒng)造成損害, 對(duì)預(yù)防 該類病的生物制品還應(yīng)進(jìn)行免疫抑制試驗(yàn),評(píng)估其制品是否存在免疫抑制現(xiàn)象。4.7 疫苗水平傳播試驗(yàn) 適用于某些毒力較強(qiáng)的活疫苗,評(píng)估使用該類疫苗免疫后,對(duì)周圍飼 養(yǎng)的同品種易感動(dòng)物的潛在危害性及對(duì)環(huán)境的污染,為正確使用疫苗提供科學(xué)依據(jù)。4.8 對(duì)靶動(dòng)物生產(chǎn)性能的影響試驗(yàn) 對(duì)用于肉用商品代經(jīng)濟(jì)動(dòng)物及產(chǎn)蛋雞的生物制品應(yīng)進(jìn)行 本項(xiàng)試驗(yàn);使用這類生物制品后,觀察記錄動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育、增重、飼料報(bào)酬、出欄率、產(chǎn)蛋雞的 產(chǎn)蛋率等,評(píng)估生物制品對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能的影響。4.9 基因工程產(chǎn)品的安全評(píng)價(jià) 對(duì)利用基因工程技術(shù)研制的獸用生物

55、制品, 應(yīng)按農(nóng)業(yè)部有關(guān)規(guī) 定進(jìn)行試驗(yàn),并履行安全評(píng)價(jià)手續(xù)。4.10 其它安全試驗(yàn) 用于制備獸用生物制品的一些非生物源性物質(zhì),如礦物油佐劑、鋁膠佐 劑等,用于食品動(dòng)物后,可能對(duì)人類的生命健康造成危害,這類制品的安全試驗(yàn)中應(yīng)包括靶動(dòng)物的 殘留試驗(yàn),為制定該制品的休藥期提供必要的支持性數(shù)據(jù)。4.11 相關(guān)說明 上述安全試驗(yàn)研究項(xiàng)目中, 4.1、 4.2及 4.3項(xiàng)的內(nèi)容在新制品研制中是必須要 做的,而 4.4、 4.5、 4.6、 4.7、 4.8、 4.9及 4.10項(xiàng)的內(nèi)容根據(jù)制品的種類、使用對(duì)象等不同,在新制 品研制中也應(yīng)部分或全部進(jìn)行。通常 4.3項(xiàng)內(nèi)容是制定生物制品試行規(guī)程成品安全檢驗(yàn)最常

56、用的方 法,應(yīng)有連續(xù) 35批實(shí)驗(yàn)室制品的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。注 大動(dòng)物系指牛、馬、騾、驢、駱駝等。中小動(dòng)物系指豬、羊、犬、狐、鹿、麝等。小動(dòng)物系指兔、貂、獺等。禽類系指雞、鴨、鵝、鴿等。附件七:獸用生物制品實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則1 目的 為獸用生物制品實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)研究提供原則性指導(dǎo)。2 背景 獸用生物制品的效力是考察其質(zhì)量的最重要指標(biāo)之一。 獸藥注冊(cè)辦法中對(duì)獸用生 物制品的實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行了詳細(xì)規(guī)定。3 基本要求3.1 實(shí)驗(yàn)室及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的生物安全條件 應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全標(biāo)準(zhǔn)。3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的要求 實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)中所用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)是普通級(jí)或清潔級(jí)易感動(dòng)物, 必要時(shí) 應(yīng)使用 SPF

57、級(jí)動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)應(yīng)使用靶動(dòng)物進(jìn)行。如果在規(guī)?；a(chǎn)的每批產(chǎn)品出廠時(shí)的效力檢驗(yàn)中使用小 型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(如嚙齒類動(dòng)物替代靶動(dòng)物進(jìn)行,則在實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)中除使用靶動(dòng)物以外,還應(yīng)使 用這種替代動(dòng)物進(jìn)行。每批制品的實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)中所用動(dòng)物應(yīng)不少于 10只(頭 ,來源困難或經(jīng)濟(jì)價(jià)值高的動(dòng)物應(yīng) 不少于 5只(頭 ,魚、蝦應(yīng)不少于 50尾。3.3 對(duì)制品的要求 實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)中所用制品的生產(chǎn)用菌 (毒、 蟲 種、 制品組成和配方等, 應(yīng)與規(guī)?；a(chǎn)的產(chǎn)品相同。試驗(yàn)性產(chǎn)品應(yīng)經(jīng)過必要的檢驗(yàn),且結(jié)果須符合要求。試驗(yàn)性產(chǎn)品中主 要成分的含量應(yīng)接近或低于產(chǎn)品規(guī)程中規(guī)定的最低標(biāo)準(zhǔn)。為了同時(shí)證明產(chǎn)品“規(guī)程”中所規(guī)定的基礎(chǔ)種子使用代次范圍的合理性,通常用處于最高代次 水平的病毒(或細(xì)菌懸液制備疫苗后,進(jìn)行效力試驗(yàn)。一旦試驗(yàn)結(jié)果證明最高代次水平的疫苗具 有令人滿意的免疫效果,則可認(rèn)為規(guī)定范圍內(nèi)的基礎(chǔ)種子均具有令人滿意的免疫原性。如果每批規(guī)模化生產(chǎn)的產(chǎn)品出廠時(shí)的“效力檢驗(yàn)”采取與參考疫苗對(duì)比的方法,則在實(shí)驗(yàn)室效 力試驗(yàn)中,除應(yīng)使用實(shí)驗(yàn)室制品進(jìn)行效力試驗(yàn)外,還應(yīng)用參考疫苗進(jìn)行系統(tǒng)的效力試驗(yàn),或提供有 關(guān)參考疫苗效力試驗(yàn)資料。3.4 對(duì)攻擊用強(qiáng)毒的要求 在多數(shù)實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)中可能會(huì)使用攻毒用強(qiáng)毒。 對(duì)已經(jīng)有國(guó)家標(biāo) 準(zhǔn)強(qiáng)毒株的,應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株,必要時(shí)增加使用當(dāng)時(shí)的流行株