醫(yī)院病理科分子病理實(shí)驗(yàn)室實(shí)施方案_第1頁(yè)
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1、SEEPOO TECH*醫(yī)院病理科分子病理實(shí)驗(yàn)室推薦方案目錄第一部分 分子病理概述 3.1.1 分子病理診斷的應(yīng)用范圍 6.1.2 常用分子病理技術(shù) 7.1.3 FISH- 熒光原位雜交 7.1.4 部分 FISH 產(chǎn)品對(duì)比(廠家提供,僅供參考) 9.1.5 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 111.6 基因測(cè)序 12第二部分 分子病理實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與環(huán)境 13第三部分 病理科實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn) 14第四部分 分子病理常用檢測(cè)設(shè)備 161、熒光顯微鏡原位雜交圖像分析系統(tǒng) 162、Leica Bond-Max 全自動(dòng)免疫組化和原位雜交多功能染色機(jī) 203 、羅氏 LightCycler ? 480 模塊式高通量

2、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 系統(tǒng) 214、羅氏 BenchMark GX全自動(dòng)多功能組織病理檢測(cè)系統(tǒng) 225、Illumina HiSeq 2000高通量測(cè)序儀 236、NatureGene TermoBrite原位雜交儀 247、力康 HFsafe-1200 Class n Type A2 生物安全柜 268、 Neofuge1600 Healforce臺(tái)式高速冷凍大容量離心機(jī) 27第五部分 分子病理實(shí)驗(yàn)室推薦設(shè)備型號(hào)及預(yù)算 28方案一 初級(jí)配置方案 28方案二 專(zhuān)業(yè)性配置方案 29方案三 科研型配置方案 30第六部分 分子病理常用試劑及價(jià)格 30第七部分 分子病理經(jīng)濟(jì)效益分析 337.1熒光原位

3、雜交(FISH)檢測(cè)項(xiàng)目的經(jīng)濟(jì)價(jià)值 337.2 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 項(xiàng)目的經(jīng)濟(jì)價(jià)值 34第一部分 分子病理概述病理為醫(yī)之本 As is our pathology, so is our medicine18-19世紀(jì)器官病理學(xué)119世紀(jì)組織細(xì)胞病理學(xué)1!19世紀(jì)中葉臨床病理120世紀(jì)免疫組化1!20世紀(jì)分子病理早期尸檢尋找器官病變手術(shù)切除組織標(biāo)本病理檢測(cè)取活體病變組織做病檢提高病理診斷準(zhǔn)確性早期診斷、靶向治療病理學(xué)發(fā)展過(guò)程分子病理學(xué)中常用的分子生物學(xué)技術(shù)主要有核酸分子雜交、PCR相關(guān)技術(shù)、免疫熒光 化學(xué)、基因芯片以及DNA序列分析等。由于分子病理學(xué)的應(yīng)用,使得我們對(duì)疾病本質(zhì)的認(rèn)識(shí) 更加深化,

4、對(duì)于腫瘤的診斷和治療也取得很大的進(jìn)展。主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:1、腫瘤易感基因的檢測(cè):腫瘤遺傳相關(guān)的易感基因檢測(cè)對(duì)于腫瘤高危人群的篩檢具有實(shí)用價(jià)值,已明確的腫瘤易感基因及其相關(guān)腫瘤有Rb1(視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤)、WT1(腎母細(xì)胞瘤)等。除了檢測(cè)高危人群的易感基因外,有方法也應(yīng)用于正常人群腫瘤易感性檢測(cè),如檢測(cè)Ret基因突變用于診斷n型多發(fā)性?xún)?nèi)分泌腫瘤, 通過(guò)分析GST基因型以判斷個(gè)體暴露于致癌物時(shí)的致癌危險(xiǎn)性等。2、腫瘤相關(guān)病毒的檢測(cè):如HPV病毒與宮頸癌的發(fā)生有很大關(guān)系,通過(guò)對(duì) HPV病毒的檢測(cè)可起到預(yù)防和提早治療的作用。而當(dāng)前國(guó)際上診斷HPV感染以DNA檢測(cè)為主。3、腫瘤的早期診斷:K-ras

5、基因突變?cè)诮Y(jié)腸癌、胰腺癌和肺癌等腫瘤中發(fā)生率較高。應(yīng)用 細(xì)針穿刺活檢材料檢測(cè)胰腺癌的第12密碼子變突。應(yīng)用PCR-RFLP方法檢測(cè)結(jié)腸癌患者糞便中的Ras基因突變,其檢出率與瘤組織中相似,可用于高危人群的篩選。4、疑難腫瘤的診斷和分類(lèi):傳統(tǒng)的病理學(xué)診斷主要通過(guò)形態(tài)學(xué)和免疫表型來(lái)判斷淋巴細(xì)胞增生與淋巴細(xì)胞性腫瘤,但對(duì)對(duì)醫(yī)生的經(jīng)驗(yàn)要求較高,且難度較大。應(yīng)用RFLP分析免疫球蛋白或T細(xì)胞受體基因重排,具有鑒別診斷作用,且這種分子病理分型比免疫學(xué)分型更為準(zhǔn)確。對(duì)Bcr區(qū)基因重排的檢測(cè),可對(duì)慢性粒細(xì)胞性白血病和急性粒細(xì)胞性白血病進(jìn)行鑒別診斷。N-myc和C-myc擴(kuò)增和表達(dá)的檢測(cè),對(duì)鑒別神經(jīng)母細(xì)胞瘤和神

6、經(jīng)上皮瘤具有應(yīng)用價(jià)值,因前者N-myc明顯擴(kuò)增,而后者則為 C-myc明顯擴(kuò)增。5、腫瘤的預(yù)后監(jiān)測(cè):利用癌癥患者的全基因序列開(kāi)發(fā)出的個(gè)性化血液檢測(cè)方法有助于醫(yī)生調(diào)整癌癥患者的治療方案,可以監(jiān)測(cè)癌癥治療后的情況以及發(fā)現(xiàn)癌癥是否復(fù)發(fā)。6、為腫瘤個(gè)體化和預(yù)見(jiàn)性治療提供依據(jù):腫瘤在發(fā)生、發(fā)展的不同時(shí)期,可能涉及不同基因的不同變化形式,而這種變化與腫瘤臨床治療的敏感性密切相關(guān),如能在分子水平對(duì)腫瘤基因變化提供指標(biāo),對(duì)腫瘤的個(gè)體化和預(yù)見(jiàn)性治療具有指導(dǎo)意義。如在90%的胰腺癌、50%的結(jié)腸癌、30%的非小細(xì)胞肺癌中存在Ras基因的激活,50%左右的腫瘤有 P53基因不同形式的突變,這些基因的異常,使腫瘤對(duì)某

7、些放療或化療的方法具有抵抗性,如能從基因水平上改變異常基因的 狀態(tài),則可提高放、化療的敏感性。7、腫瘤的預(yù)后判斷:腫瘤基因的突變、擴(kuò)增及過(guò)表達(dá)等改變常與腫瘤的預(yù)后密切相關(guān)。如HER2基因擴(kuò)增與乳腺癌發(fā)生發(fā)展及臨床預(yù)后密切相關(guān),HER2的陽(yáng)性表達(dá)提示預(yù)后不良,可通過(guò)熒光原位雜交(FISH )技術(shù)進(jìn)行檢測(cè),配合術(shù)后治療,指導(dǎo)臨床用藥。組免織疫病病理理學(xué)學(xué)診診斷斷分(病理學(xué)診斷及鑒別診斷子病腫瘤“個(gè)體化”靶向治療+理學(xué)藥物療效的評(píng)價(jià)感診謝下載載斷臨床預(yù)后評(píng)估及預(yù)測(cè)1.1分子病理診斷的應(yīng)用范圍人類(lèi)遺傳病的基因診斷和產(chǎn)前診斷腫瘤分子靶向治療明確感染性疾病的病源體(細(xì)胞、真菌、病毒)多基因病研究組織器官移

8、植配型輔助病理診斷法醫(yī)學(xué)性別鑒定基礎(chǔ)研究通過(guò)PCR技術(shù)確認(rèn)Ig和TCR基因是否發(fā)生重排,判定淋巴造血系統(tǒng)疾病的良惡性。 FISH法檢測(cè)乳腺癌her-2基因是否發(fā)生擴(kuò)增,指導(dǎo)臨床靶向藥物(赫賽?。┲委煛?FISH法檢測(cè)滑膜肉瘤SYT基因是否發(fā)生易位,協(xié)助臨床診斷。通過(guò)對(duì)結(jié)直腸癌 KRAS基因的突變測(cè)序分析,指導(dǎo)靶向用藥(愛(ài)比妥) 。 HPV多亞型檢測(cè),提示宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。肺癌分子靶向治療 EGFR酪氨酸激酶抑制劑:吉非替尼 (gefitinib, 商品名Iressa)、埃羅替尼(Erlotinib, 商品名 Tarceva)檢測(cè) HER2 狀態(tài)的臨床價(jià)值胃癌靶向治療患者篩選、療效預(yù)測(cè)1.2 常

9、用分子病理技術(shù)免疫組織化學(xué)(IHC )技術(shù)檢測(cè)蛋白分子原位雜交 DNA , RNA熒光原位雜交(FISH)技術(shù)DNA , RNA多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR技術(shù)DNA , RNA熒光定量PCR DNA , RNADNA 測(cè)序技術(shù) DNA 突變生物芯片技術(shù)一DNA , RNA,蛋白質(zhì)等DNA 印跡( Southern blot )微衛(wèi)星不穩(wěn)定檢測(cè)( MSI )醫(yī)院病理科開(kāi)展分子病理實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,一般從實(shí)用出發(fā),二級(jí)醫(yī)院主要開(kāi)展熒光原位雜交(FISH)項(xiàng)目,三級(jí)醫(yī)院主要開(kāi)展熒光原位雜交(FISH )、熒光定量 PCR項(xiàng)目,有條件的三級(jí)醫(yī)院可以開(kāi)展 DNA 基因測(cè)序項(xiàng)目。1.3 FISH- 熒光原位雜交FISH

10、 技術(shù)是一種通過(guò)熒光標(biāo)記的 DNA 探針與細(xì)胞核內(nèi)的 DNA 靶序列雜交, 在熒光顯微鏡下 能原位顯示細(xì)胞核內(nèi)雜交信號(hào)的分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)。FISH 技術(shù)檢測(cè)基因擴(kuò)增的準(zhǔn)確性比其他檢測(cè)技術(shù)高,可以避免由于染色體的多體而呈現(xiàn)的假陽(yáng)性,被譽(yù)為“金標(biāo)準(zhǔn) ”。實(shí)驗(yàn)流程FISH 樣本的制備 - 探針的制備 - 探針標(biāo)記 -雜交 -(染色體顯帶) - 熒光顯微鏡檢測(cè) - 結(jié)果分 析 FISH 優(yōu)點(diǎn)1. 熒光探針商業(yè)化、采購(gòu)方便、保存安全。2. 實(shí)驗(yàn)周期短、特異性好、定位準(zhǔn)確。3. 可定位 1KB 的 DNA 序列,靈敏度高4. 一次染色可獲取 24 種不同顏色的染色體,對(duì)于隱匿性的缺失、異位診斷準(zhǔn)確。 F

11、ISH 技術(shù)在醫(yī)院的運(yùn)用一切與染色體相關(guān)的科室。特別是病理科、血液科、婦產(chǎn)科、生殖中心(產(chǎn)前診斷、植入前診 斷)等。目前應(yīng)用于臨床檢測(cè)的 FISH 基因探針有接近于一百種。 在美國(guó), FISH 探針已被 FDA 列為 “特 異性分析試劑 ”,不需批準(zhǔn)即可用于臨床醫(yī)學(xué)檢測(cè)。所以, FISH 檢測(cè)在國(guó)外應(yīng)用非常廣泛和迅速。 如 Vysis 、 Cytocell 等公司,其產(chǎn)品已遍布全球,但其價(jià)格較貴,嚴(yán)重阻礙了在我國(guó)國(guó)內(nèi)的推廣。 國(guó)內(nèi)廠家,如金菩嘉和廣州安必平,近年來(lái)發(fā)展迅速,品種覆蓋范圍較廣,且產(chǎn)品質(zhì)量保證、性?xún)r(jià) 比高。并且,更為有利的是,國(guó)內(nèi)公司供貨快速及時(shí)、售后服務(wù)好。由于國(guó)內(nèi)廠家的崛起,近

12、年來(lái) 國(guó)內(nèi)醫(yī)院開(kāi)展 FISH 檢測(cè)的速度大大加快。FISH 技術(shù)實(shí)驗(yàn)室基本要求 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境: 樣本準(zhǔn)備區(qū)、暗室( 10-15 平米左右) ; 實(shí)驗(yàn)設(shè)備: 熒光顯微鏡以及熒光成像分析系統(tǒng)、水浴鍋、原位雜交儀、冰箱、離心機(jī)、恒溫箱 辦公設(shè)備: 電腦、打印機(jī) 實(shí)驗(yàn)耗材:FISH探針,進(jìn)口如雅培、羅氏細(xì)胞類(lèi)探針:諸如血液病類(lèi),如白血病、淋巴瘤、骨髓瘤等。其次,產(chǎn)前診斷和產(chǎn)后篩查類(lèi); 實(shí)體腫瘤類(lèi)探針:病理科在檢測(cè)乳腺癌、子宮頸癌、膀胱癌、肺癌、宮頸癌、軟組織肉瘤、前 列腺癌、甲狀腺癌等方面。 技術(shù)人員:1人1.4部分FISH產(chǎn)品對(duì)比(廠家提供,僅供參考)、'、品牌比較廣州安必平金菩嘉雅培(Vys

13、is )探針?lè)N類(lèi)覆蓋70種腫瘤探針,品種齊全,覆蓋 了實(shí)體瘤及血液疾病。約40種,部分腫瘤沒(méi)有 覆蓋。覆蓋70種腫瘤探針,品種齊全, 覆蓋了實(shí)體瘤及血液疾病。探針質(zhì)量用多個(gè)克隆標(biāo)記探針,信號(hào)靈敏,背景 低,質(zhì)量與國(guó)外相當(dāng)。實(shí)體瘤探針質(zhì)量與國(guó)外 相當(dāng),但血液病探針信號(hào) 不佳。探針信號(hào)靈敏,背景低,質(zhì)量好。價(jià)格由于有自己的研發(fā)團(tuán)隊(duì),探針都為自 產(chǎn),成本較低,具有強(qiáng)大的價(jià)格競(jìng)爭(zhēng)力, 本公司的出現(xiàn)也打破了國(guó)內(nèi)公司一家 獨(dú)大的壟斷。價(jià)格比雅培低,但高于安 必平。由于異國(guó)操作,運(yùn)營(yíng)成本高,價(jià) 格高。操作便利性即用型探針:探針溶液已包含雜交液組 分,可直接點(diǎn)樣雜交,無(wú)需雜交前溶解 探針和混勻探針及雜交液,方

14、便操作和 減少岀錯(cuò)。探針與雜交液分開(kāi),雜交 前需在黑暗環(huán)境中混合 兩者,操作不變、容易出 錯(cuò)。探針與雜交液分開(kāi),雜交前需在 黑暗環(huán)境中混合兩者,操作不變、 容易岀錯(cuò)。輔助試劑配送FISH所需的常規(guī)試劑(蛋白酶 K或胃蛋白酶、NP-40、多聚甲醛、20XSSC等),節(jié)約客戶(hù)采購(gòu)時(shí)間及成本。搭配蛋白酶K 一起銷(xiāo)售。搭配蛋白酶K、NP-40等一起銷(xiāo) 售。熒光顯微系統(tǒng)配置從客戶(hù)岀發(fā),幫客戶(hù)選用性?xún)r(jià)比高的熒 光顯微鏡及圖像分析軟件,操作便利, 性?xún)r(jià)比高。滿(mǎn)足要求,但價(jià)格較高。滿(mǎn)足要求,但價(jià)格較高,且客戶(hù) 可能需自己配置系統(tǒng)。顯微鏡 明場(chǎng)觀察配相差功能,可鏡下仔細(xì)觀察蛋白酶消 化狀態(tài),對(duì)小體積樣本及珍貴樣

15、本處理 特別有效,避免消化不佳導(dǎo)致雜交結(jié)果 不好。不配相差功能。不配相差功能。標(biāo)配濾塊對(duì)新客戶(hù)標(biāo)配四種顏色的熒光濾塊(DAPI、綠、紅、青),可同時(shí)滿(mǎn)足只標(biāo)配三種顏色濾塊(DAPI、綠、紅),如需只標(biāo)配三種顏色濾塊(DAPI、綠、 紅);如需開(kāi)展產(chǎn)前診斷的話客實(shí)體瘤及產(chǎn)前診斷。開(kāi)展產(chǎn)前診斷的話客戶(hù) 還要額外購(gòu)買(mǎi)青色濾塊。戶(hù)還要額外購(gòu)買(mǎi)青色濾塊,且需 用到金色濾塊(容易岀現(xiàn)竄色), 濾塊配置要求太高。檢測(cè)靶標(biāo)因?yàn)闃?biāo)配了四種濾塊,可同時(shí)檢測(cè)三個(gè) 靶標(biāo)(綠紅青),臨床檢測(cè)效率高、能 降低試劑成本、且能應(yīng)用于多靶標(biāo)檢測(cè) 的科研課題。只有兩個(gè)靶標(biāo)的試劑(綠 紅),靶向選擇及組合受 限。有同時(shí)檢測(cè)三個(gè)靶標(biāo)

16、的試劑,但 因?yàn)椴皇菢?biāo)配,應(yīng)用受限。圖像分析軟 件有自主研發(fā)的圖像分析軟件, 降低客戶(hù) 采購(gòu)成本。外購(gòu)。外購(gòu)。品種設(shè)計(jì)因?yàn)樗刑结樁紴樽灾餮邪l(fā), 可為客戶(hù) 靈活設(shè)計(jì)產(chǎn)品探針組成,以便臨床、科 研充分使用及降低試劑成本探針不能根據(jù)客戶(hù)需求 進(jìn)行調(diào)整,可能存在試劑 成本較高的風(fēng)險(xiǎn)。探針不能根據(jù)客戶(hù)需求進(jìn)行調(diào) 整,可能存在試劑成本較高的風(fēng) 險(xiǎn)。特色產(chǎn)品能設(shè)計(jì)多個(gè)“二合一”探針組合;15種微缺失探針(用于流產(chǎn)原因篩查 及其他少見(jiàn)綜合癥);只有部分基因探針。不能根據(jù)客戶(hù)需求設(shè)計(jì)“二合一” 探針。國(guó)內(nèi)SFDA證書(shū)兩個(gè)產(chǎn)品取得注冊(cè)受理號(hào),即將取得注 冊(cè)證書(shū)。幾個(gè)產(chǎn)品取得注冊(cè)證書(shū)。兩個(gè)產(chǎn)品取得注冊(cè)證書(shū)。地理位

17、置位于廣州,華南地區(qū)客戶(hù)地理位置近, 送貨及服務(wù)及時(shí)到位。位于北京,華南地區(qū)服務(wù) 不便。位于國(guó)外,國(guó)內(nèi)雖有代理,但售 后服務(wù)及技術(shù)支持不能最快反 應(yīng)。平臺(tái)支持有多年其他產(chǎn)品的網(wǎng)絡(luò)支持,如病理科 中的液基細(xì)胞學(xué)平臺(tái),與客戶(hù)建立了多 年來(lái)的良好關(guān)系。產(chǎn)品單一,只有FISH試 劑,設(shè)備、人員投入高。有其他試劑,但病理科中只有 FISH,無(wú)其他平臺(tái)支持。售后服務(wù)借助于廣泛的液基細(xì)胞學(xué)網(wǎng)絡(luò)及合作 公司達(dá)安基因的全國(guó)網(wǎng)絡(luò),售后服務(wù)迅 速周到。售后服務(wù)網(wǎng)絡(luò)單一,售后 服務(wù)風(fēng)險(xiǎn)較高。售后服務(wù)網(wǎng)絡(luò)單一,售后服務(wù)風(fēng) 險(xiǎn)較高。優(yōu)勢(shì)資源與達(dá)安基因合資,充分利用全國(guó)廣泛的 銷(xiāo)售及技術(shù)支持資源。特殊資源有自己的學(xué)術(shù)核心期

18、刊 分子診斷與治 療,方便客戶(hù)課題研究。無(wú)無(wú)1.5 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù),是指在 PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí) 時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè) PCR 進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。臨床疾病診斷:各型肝炎、艾滋病、禽流感、結(jié)核、性病等傳染病診斷和療效評(píng)價(jià);地中海貧血、血友病、性 別發(fā)育異常、智力低下綜合癥、 胎兒畸形等優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè);腫瘤標(biāo)志物及瘤基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)腫瘤病診 斷;遺傳基因檢測(cè)實(shí)現(xiàn)遺傳病診斷。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 分子病理診斷應(yīng)用? 絕對(duì)定量( Absolute Quantification )> 病原體檢測(cè) (HiV,HBV, 結(jié)

19、核桿菌 ,H1N1 等)> 基因表達(dá)研究 ( 白血病融合基因表達(dá)檢測(cè))? 相對(duì)定量( Relative Quantification )> 腫瘤組織中的特定基因表達(dá) (EGFR,VEGFR,BRCA1&2,ERCC1&2,RRM1 )> 腫瘤 Bio-Marker 特定 miRNA 檢測(cè) 1900 多個(gè)試劑盒> CNV 研究 超過(guò) 160 萬(wàn)個(gè) TaqMan Copy Numer Assay> 藥物療效考核? 突變分型( Allelic Discrimination )> 基因突變分析 - 腫瘤個(gè)體化醫(yī)療> SNP 研究 2600 個(gè)藥

20、物代謝試劑盒 ,個(gè)體化醫(yī)療> 物種鑒定、菌株鑒定? 陰陽(yáng)性檢驗(yàn)( Plus/Minus with IPC )? 稀有突變檢測(cè)(早期腫瘤診斷:外周血痕量腫瘤細(xì)胞等熒光定量PCR顯著優(yōu)點(diǎn)(1)、可以進(jìn)行準(zhǔn)確的定量檢測(cè),可適用于基因診斷的各種疾??;(2)、定量范圍極寬,樣品無(wú)需做梯度稀釋?zhuān)唬?)、特異性更強(qiáng),克服了假陽(yáng)性的主要來(lái)源;(4 )、操作快速,無(wú)需 PCR 后處理;(5)、技術(shù)簡(jiǎn)單,易于學(xué)習(xí)和掌握;(6)、安全,對(duì)操作員和環(huán)境都無(wú)危害。(7)、易于進(jìn)行電腦化操作和數(shù)據(jù)管理,有利于醫(yī)院的現(xiàn)代化建設(shè)。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè)腫瘤的有關(guān)項(xiàng)目CEA mRNA 、 AFP mRNA 、uPA

21、mRNA 、CK19 mRNA 、CK20 mRNA 、 MDRI mRNA 。1.6 基因測(cè)序DNA 測(cè)序技術(shù)主要依據(jù) Sanger 的雙脫氧鏈終止法。以 DNA 單鏈為模板,在特定條件下,用特異的引物在測(cè)序級(jí) DNA 聚合酶的作用下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,不斷將 4 種脫氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3''- 羥基末端并使引物鏈得到延伸。將測(cè)序結(jié)果用 DNA sequencing analysis 5.1 軟件自動(dòng)分析原始測(cè)序數(shù)據(jù),獲取測(cè)序電泳圖和序列圖。 臨床基因測(cè)序檢測(cè)對(duì)病理科的形態(tài)診斷金標(biāo)準(zhǔn)含金量的提升和分子病理技術(shù)的開(kāi)發(fā)及經(jīng)濟(jì)效益改善有現(xiàn)實(shí)意義。 對(duì)于可疑

22、癌前病變患者可以明確其病變標(biāo)本是否真正含有候選基因的突變, 以 解除大量由免疫組化標(biāo)記癌基因陽(yáng)性患者的心理恐慌和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。 對(duì)癌癥家族有血緣關(guān)系的親屬檢 測(cè)相關(guān)癌基因突變或多態(tài)性,具有亞健康診斷和體檢意義。第二部分 分子病理實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與環(huán)境1、布局合理、實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域的劃分;2、水電、照明、通風(fēng)符合實(shí)驗(yàn)室基本要求;3、消防設(shè)施齊全、消防通道暢通;4、石蠟組織、 DNA 樣本的存放;5、實(shí)驗(yàn)室記錄、操作手冊(cè)等文件存放;6、實(shí)驗(yàn)室耗材、試劑的存放;7、安裝生物安全防護(hù)設(shè)施; 8、廢棄物的處置9、實(shí)驗(yàn)室的清潔與日常消毒、并有相關(guān)記錄 其中:PCR 實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求 明確分區(qū),一般分為4個(gè)工作區(qū); 各區(qū)獨(dú)立

23、,互不相通; 設(shè)置緩沖間,設(shè)置傳遞窗; 單一方向FISH 實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求:需要避光獨(dú)立的暗室,專(zhuān)門(mén)的熒光顯微鏡觀察室第三部分 病理科實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)1、衛(wèi)生部【 2009 】31 號(hào)文件病理科建設(shè)與管理指南(試行) 2、2006 年 6 月 1 日實(shí)施的醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法3、全國(guó)各省市的關(guān)于臨床病理專(zhuān)業(yè)質(zhì)量檢查及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)4、美國(guó) CAP 認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)5、歐洲 NordiQC 認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)6、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織制定并于 2003 年正式發(fā)布醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的管理標(biāo)準(zhǔn): ISO15189:2003 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專(zhuān)用要求 ,由國(guó)際實(shí)驗(yàn)室認(rèn) 可合作組織( ILAC )推薦執(zhí)行。適合臨床多學(xué)科實(shí)驗(yàn)室對(duì)檢

24、驗(yàn)前、中、后 全過(guò)程的管理。第四部分 分子病理常用檢測(cè)設(shè)備1、徠卡Leica熒光顯微鏡原位雜交圖像分析系統(tǒng)品牌/型號(hào)丄EICA DM 2500技術(shù)參數(shù)一、熒光顯微鏡部分1、配顯微鏡主機(jī)2、光學(xué)系統(tǒng):無(wú)限遠(yuǎn)校正光學(xué)系統(tǒng)。3、具有明場(chǎng)、熒光觀察功能。4、6 位物鏡轉(zhuǎn)換器。5、總放大倍數(shù): 50X-1000X 。6、* 三目觀察鏡筒,分光比例: 100%/0,50%/50%,0/100%7、透射光照明: 12V100W 鹵素?zé)簟?、底座帶濾片架和日光濾光片。9、* 單手操作樣夾 , 方便同時(shí)記錄。10 、*調(diào)焦與 X-Y 調(diào)節(jié)全對(duì)稱(chēng) , 實(shí)現(xiàn)無(wú)疲勞操作。11 、*調(diào)焦旋鈕高度可調(diào)12、*3 步聚焦

25、(粗/中/細(xì)),鈕距可調(diào) ,停焦可調(diào)。13 、*聚光鏡 :帶與物鏡放大倍數(shù)相匹配的孔鏡光欄彩色標(biāo)記, 方便聚光鏡調(diào)節(jié)14 、超硬鍍陶瓷載物臺(tái)15 、*載物臺(tái)調(diào)節(jié)左右手可以更換。16 、X-Y 移動(dòng)無(wú)暴露齒條。17 、配平場(chǎng)半復(fù)消色差物鏡: 1.25x (NA=0.04 ),平場(chǎng)半復(fù)消色差熒光物鏡 10x ( NA=0.30 ),平場(chǎng)復(fù)消色差熒光物鏡 63x (NA=1.30 ) oil,平場(chǎng)半復(fù)消色差熒光物鏡 100x ( NA=1.30 ) oil。18 、目鏡: 10X 寬視野目鏡,視野數(shù)為 25mm ;19 、熒光裝置: 5 位熒光濾塊轉(zhuǎn)換器,配紫外、藍(lán)色、綠色熒光激發(fā)。UV 激發(fā): 激

26、發(fā) 340-380nm; 阻擋 400nm; 發(fā)射: 425nm;Blue 激發(fā):激發(fā) 480/40nm; 阻擋 505nm; 發(fā)射: 527/30nm;Green 激發(fā):激發(fā) 546/12nm; 阻擋 565nm; 發(fā)射 : 600/40nm20 、外置熒光光源:外置金屬鹵化物光源,長(zhǎng)壽命,免調(diào)節(jié)工作時(shí)間2000 小時(shí)以上。光源通過(guò)光纖傳輸,無(wú)熱力傳輸。21 、*有熒光“零像素點(diǎn)漂移”技術(shù)。22 、*有光陷設(shè)計(jì)可以確保有很黑的背景:傾斜的發(fā)射光濾塊 ,吸收雜 光的黑色涂層 ,磨光表面和減少反射的涂層。23、配 1 x 接口二、數(shù)碼成像系統(tǒng)部分: 配高靈敏度雙速單色冷 CCD 數(shù)碼攝像頭參數(shù),

27、 半導(dǎo)體式制冷, -20 度。 2/3英寸 CCD,像素 1392 x 1040(1.4 Mpixel),像素大小 6.45x6.45um pixels ,感光面積 8.9 * 6.6mm 。三、細(xì)胞染色體核型及熒光原位雜交分析軟件1 、 CytoVision karyotyping 染色體核型及熒光原位雜交分析1.1、有完備的染色體圖象處理技術(shù),對(duì)染色體之間的重疊交叉和連接等都可用單鍵自動(dòng)分割或手 動(dòng)畫(huà)線分割,劃線切割時(shí)畫(huà)錯(cuò)可以任意后退回擦;1.2 、畫(huà)中軸線分離染色體時(shí),不同染色體自動(dòng)用不同顏色突出;1.3 、可對(duì)顯帶不夠清晰的染色體應(yīng)用不同的高斯數(shù)陣顯示格式使條帶明晰;1.4 、染色體放

28、大、縮小、旋轉(zhuǎn)、翻轉(zhuǎn)、鏡向翻轉(zhuǎn);1.5 、可自動(dòng)或人工干預(yù)識(shí)別著絲粒位置,可自動(dòng)或手動(dòng)將染色體拉直1.6 、可以創(chuàng)建用于自己染色體樣品的分類(lèi)體系以增加分類(lèi)的精確性,也可以對(duì)已有的分類(lèi)器進(jìn)行 訓(xùn)練,使之與分析對(duì)象更匹配1.7 、快速校正錯(cuò)放和未識(shí)別的染色體1.8 、可以編輯定義染色體標(biāo)準(zhǔn)模式圖1.9 、強(qiáng)大的 (CASEVIEW) 功能, 可對(duì)捕獲的中期相圖進(jìn)行分類(lèi)標(biāo)記, 可根據(jù)需要選擇不同的中期相 分別進(jìn)行核型分析、染色體數(shù)目直接計(jì)數(shù)和中期染色體直接標(biāo)記1 . 1 0 、強(qiáng)大的多細(xì)胞平行比較 (MULTICELL) 功能, 方便比較同一或不同玻片上的同一號(hào)染色體的差異1.11 、強(qiáng)大的主任管理

29、 (DIRECTOR REVIEW) 功能,方便和復(fù)查相關(guān)病例的核型結(jié)果;1.12 、可識(shí)別 G、R、Q、C、DAPI 的顯帶分型, G 帶有 300 、400 、550 、700 、850 條帶的分類(lèi) 標(biāo)準(zhǔn)、 R 帶有 400 、 550 條帶的標(biāo)準(zhǔn);1.13 、強(qiáng)大的實(shí)驗(yàn)室管理、質(zhì)量控制和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)功能,可追蹤染色體分析的數(shù)量,可對(duì)各種不同類(lèi) 型病例進(jìn)行分類(lèi)統(tǒng)計(jì)。2、CytoVision FISH熒光原位雜交分析模塊2.1、多通道顏色采集,不限數(shù)量2.2 、可以識(shí)別出 DAPI 和 PI 染色的染色體分帶細(xì)節(jié)2.3 、可對(duì) FISH 圖像的探針信號(hào)對(duì)比度調(diào)節(jié)2.4、可對(duì)部分選擇對(duì)目標(biāo)信號(hào)單獨(dú)

30、修飾2.5、有對(duì)信號(hào)的感興趣區(qū)采集功能2.6、可用于探針標(biāo)記和 G- 帶染色體比較2.7 、可計(jì)算 FISH 信號(hào)的強(qiáng)度面積距離等2.8、可測(cè)量P端長(zhǎng)度比(FLPTER)值2.9、可對(duì)中期 FISH 圖中的信號(hào)進(jìn)行定位2.10 、可對(duì)中期 FISH 圖進(jìn)行染色體分割排列2.11 、核型圖可顯示為反轉(zhuǎn)黑白條帶(與 G 帶帶紋匹配)2.12 、 FISH 核型圖可顯示為彩色熒光圖2.13 、彩色熒光信號(hào)可明確顯示位于哪條染色體具體什么位置2.14 、強(qiáng)大的捕獲中和鋪貨后圖像處理功能(除常規(guī) GAMMA 、對(duì)比度、銳化柔化、消除等等功 能外,還可以使用多種高斯數(shù)陣改變圖像顯示方式)2.15、可手工直

31、接對(duì)間期細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)標(biāo)記,然后自動(dòng)統(tǒng)計(jì)每一類(lèi)細(xì)胞的數(shù)量和百分比2.16、可在FISH圖像上添加文字和圖譜2.17、可與染色體標(biāo)準(zhǔn)模式圖或核型圖比較2.18、可與染色體核型圖出在一張報(bào)告上;2.19、Z軸分層采集:每種熒光素獨(dú)立設(shè)置不同參數(shù),分別進(jìn)行分層采集,然后自動(dòng)合彩色圖像,層間距根據(jù)細(xì)胞大小靈活設(shè)置,層數(shù)根據(jù)目標(biāo)厚度靈活設(shè)置,探針大小可靈活設(shè)置,克服了熒光信號(hào)不在同一焦平面上倒置部分信號(hào)虛化或缺失的問(wèn)題,使FISH信號(hào)點(diǎn)數(shù)清晰可數(shù),使FISH圖像漂亮美觀2.20、熒光點(diǎn)分類(lèi)計(jì)數(shù):自動(dòng)搜索間期細(xì)胞、定位間期細(xì)胞、自動(dòng)采集、統(tǒng)計(jì)每個(gè)間期細(xì)胞上不同熒光信號(hào)數(shù)量,統(tǒng)計(jì)融合信號(hào),統(tǒng)計(jì)不同類(lèi)細(xì)胞數(shù)量和

32、百分比,可在掃描捕獲中使用z軸分層采集3、原裝進(jìn)口 Dell電腦,Windows 7 控制系統(tǒng);22 ” LCD顯示屏。選配建議核型加熒光原位雜交一起購(gòu)買(mǎi)這樣對(duì)用戶(hù)老師使用范圍更廣,含蓋的面就比較全, 如細(xì)胞中期和間期的熒光原位雜交都可以觀察,而且精度就會(huì)很高。2、Leica Bond-Max全自動(dòng)免疫組化和原位雜交多功能染色機(jī)Bon d-Max 是一臺(tái)性能卓越的全自動(dòng)免疫組化染色機(jī),免疫組化的所有步驟-烤片、脫蠟、抗原修復(fù)、阻斷、標(biāo)記一炕、標(biāo)記二抗、顯色直到復(fù)染-都可以由Bond-Max 自動(dòng)完成,每個(gè)Bond-Max 有3個(gè)玻片盤(pán),同時(shí)最多可容納30張玻片,而每個(gè)玻片盤(pán)可獨(dú)立執(zhí)行不同程序3

33、、羅氏LightCycler ? 480模塊式高通量實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)超過(guò)10年的實(shí)時(shí)定量PCR系統(tǒng)與試劑研發(fā)的豐富經(jīng)驗(yàn),凝聚成今日業(yè)界的經(jīng)典之作。先進(jìn) Therma-BaseTM 熱循環(huán)技術(shù)和改良光路設(shè)計(jì)確保檢測(cè) 均一性,徹底消除邊緣效應(yīng)??梢赃M(jìn)行高分辨率熔解曲線分 析的模塊式高通量熒光定量 PCR系統(tǒng)。 配合LIMS系統(tǒng)及自動(dòng)進(jìn)樣機(jī) 械臂可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程控制和自動(dòng)化運(yùn)作。動(dòng)力學(xué)范圍廣,可檢測(cè)到100 -1010 個(gè)拷貝 DNA。準(zhǔn)確度高重復(fù)性高,CV V 0.15% 。高重復(fù)性,孔間溫度均一性可達(dá)±0.1 C高分辨率,輕松區(qū)分 1000與2000拷貝模板濃度差異。靈活 96孔、38

34、4孔熱循環(huán)模塊用戶(hù)自助更換。熒光染料和試劑完全開(kāi)放。 5個(gè)激發(fā)通道,6個(gè)檢測(cè)通道,支持多種檢測(cè)模式。可廣泛應(yīng)用于絕對(duì)定量、 相對(duì)定量、產(chǎn)物鑒定、終點(diǎn)法基因分型、熔解曲線基因分型、Micro RNA研究、DNA甲基化研究、HRM基因掃描等研究。高速反應(yīng)時(shí)間(40個(gè)循環(huán)):384孔V 40分鐘,96孔V 60分鐘。柔性自動(dòng)化全自動(dòng)多功4、羅氏 BenchMark GX能組織病理檢測(cè)系統(tǒng)IHC、ISH 和 FITC使IHC、ISH和FITC載片的所有制備步驟實(shí)現(xiàn)完全自動(dòng)化;可單獨(dú)或同步處理 檢測(cè)。靈活優(yōu)化臨床研究方案可選擇您自己的原抗體,也可選擇Ventana提供的即用型抗體可根據(jù)您的比容量/通量要

35、求選擇一個(gè)或多個(gè)BenchMark一觸式雙色方案染色自動(dòng)烤片一流技術(shù)自動(dòng)烤片自動(dòng)脫蠟自動(dòng)細(xì)胞調(diào)節(jié)自動(dòng)染色5、llluminaHiSeqHiSeq 2000 測(cè)序涉及生2000高通量測(cè)序儀物學(xué)各領(lǐng)域,包括DNA測(cè)序、RNA測(cè)序、宏基因組測(cè)序、甲基化測(cè)序、外顯子捕獲測(cè)序、ChlP-Seq 等。因此,HiSeq 2000 能夠?yàn)榛蛘{(diào)控分析、轉(zhuǎn)錄組分析、SNP位點(diǎn)、結(jié)構(gòu)變異分析和疾病分析等提供迅捷、龐大、準(zhǔn)確的信息數(shù)據(jù)。6、NatureGene TermoBrite 原位雜交儀一次可進(jìn)行12張切片的實(shí)驗(yàn)反應(yīng)艙密封禁閉,溫度適宜精確的溫控,溫室均勻一致三種固定運(yùn)行模式四十種自定義編輯程序數(shù)字鍵盤(pán)操作,

36、方便易行TermoBrite 是原位雜交領(lǐng)域的領(lǐng)航者, 其優(yōu)質(zhì)的性能在廣大原位雜交用戶(hù)中得 到好評(píng)。嚴(yán)格溫度控制溫差在設(shè)定溫度±1 C超強(qiáng)的溫度均一性不受切片數(shù)量影響理想的溫度控制簡(jiǎn)單程序設(shè)置40種使用者自定義的程序3種已設(shè)置運(yùn)行模式顯示屏隨時(shí)顯示實(shí)驗(yàn)條件,實(shí)驗(yàn)過(guò)程一目了然尺寸146mm >228mm >451mm重量8.5kg容量12張玻片功率240VAC1.6A處理時(shí)間可持續(xù)0-100小時(shí)溫度控制溫度范圍30-99 C環(huán)境溫度5-40 C7、力康 HFsafe-1200 Class H Type A2 生物安全柜Heal Force做為中國(guó)最早和最權(quán)威的生物安全柜品牌

37、之一,一直憑借優(yōu)異的產(chǎn)品品質(zhì)、良好的用戶(hù)口碑和專(zhuān)業(yè)的售后服務(wù)品質(zhì)深得全球100多個(gè)國(guó)家用戶(hù)的肯定,是中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)YY0569-2005 生物安全柜產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的主要起草單位。Heal Force品牌生物安全柜在中國(guó)各級(jí)疾病控制中心、醫(yī)院臨檢系統(tǒng)和科研院所系統(tǒng)是廣大科研工作者進(jìn)行生物安全研究的重要防護(hù)屏障。& Neofuge1600 Healforce臺(tái)式高速冷凍大容量離心機(jī)HEAL FORCE是中國(guó)唯一一家同時(shí)獲得 德國(guó)TUV ISO9001質(zhì)量管理體系認(rèn)證和歐盟 CE產(chǎn)品質(zhì)量認(rèn)證的離心機(jī)品牌,全系列產(chǎn)品 獲得中國(guó)SFDA認(rèn)證的品牌,是全球首家采用Stro ng-Drive ”驅(qū)

38、動(dòng)軸技術(shù)、真正掌握膨脹閥 反饋調(diào)節(jié)制冷技術(shù)以及離心機(jī)轉(zhuǎn)子硬質(zhì)陽(yáng)極 氧化處理工藝的離心機(jī)品牌,采用德國(guó)的工藝技術(shù),優(yōu)質(zhì)的售后服務(wù),多年的客戶(hù)好評(píng),保證了絕對(duì)的市場(chǎng)占有率。Heal Force Neofuge 15臺(tái)式高速離心機(jī)電魄忖砂最高轉(zhuǎn)速16000rpm最大容量4 X100ml最大離心力 24900 Xg驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)無(wú)碳刷變頻電機(jī)溫度控制范圍 10 °C-40 °C/-溫度控制精度 ±1 C時(shí)間設(shè)定9h59min 內(nèi)重量 79/58 Kg外形尺寸(長(zhǎng) 漑 X高)580 >520 X315mm第五部分分子病理實(shí)驗(yàn)室推薦型號(hào)及預(yù)算方案一初級(jí)配置方案序號(hào)設(shè)備品牌型號(hào)

39、單價(jià)數(shù)量金額備注01熒光顯微鏡成像分析系統(tǒng)奧林巴斯BX41 或者 NIKONEclipse 50i或者國(guó)產(chǎn)3900001390000 低端顯微鏡 國(guó)產(chǎn)CCD 熒光激發(fā)器 國(guó)產(chǎn)軟件02恒溫加熱平臺(tái)常州菲普DB-3A型650016500高溫變性及烤片用03電熱恒溫水槽常州菲普SHA-CA型11000111000洗滌用04電熱恒溫培養(yǎng)箱上海精宏DNP-9052型460014600雜交用05生物安全柜上海力康HF safe 900A22680012680006PCR擴(kuò)增儀Hema 9600 基因擴(kuò)增儀47000147000合計(jì)485900(適合二級(jí)醫(yī)院,標(biāo)本量少,常規(guī)檢測(cè),不涉及科研)方案二專(zhuān)業(yè)性配置

40、方案序號(hào)設(shè)備品牌型號(hào)單價(jià)數(shù)量金額備注01熒光顯微鏡成像分析系統(tǒng)德國(guó)LeicaDM250005700001570000 生物顯微鏡 雙速單色冷CCD 5位熒光濾塊 軟件 CytoVision karyotyp ing02原位雜交儀美國(guó) StatSpinThermobrite8900017900003臺(tái)式咼速離心機(jī)國(guó)產(chǎn)3200013200004實(shí)時(shí)熒光定量PCR凱杰Rotor-Gene Q 6plex360000136000005生物安全柜上海力康HFsafe-1200TE380001380001089000適合三級(jí)醫(yī)院病理科方案三科研型配置方案序號(hào)設(shè)備品牌型號(hào)單價(jià)數(shù)量金額備注01熒光顯微鏡成像分

41、析系統(tǒng)德國(guó)LeicaDM40007500001750000智能顯微鏡高端配置02原位雜交儀美國(guó) StatSpin Thermobrite8900018900003臺(tái)式咼速冷凍離心機(jī)國(guó)產(chǎn)4000014000004羅氏6800001680000最先進(jìn)的頭時(shí)熒光定量 PCRLightCycler ? 480PCR05生物安全柜上海力康HFsafe-1200TE3800013800006基因測(cè)序儀Illumi na HiSeq2000270萬(wàn)1選配1597000適合綜合性醫(yī)院病理科,承擔(dān)科研項(xiàng)目。第六部分分子病理常用試劑及價(jià)格序號(hào)名稱(chēng)規(guī)格單位生產(chǎn)廠家中標(biāo)價(jià)1丙肝病毒熒光定量檢測(cè)10人份盒中山大學(xué)達(dá)安基

42、因760.002結(jié)核桿菌DNA-PCR20T(定量)盒中山大學(xué)達(dá)安基因760.003乙肝病毒PCR熒光定量20T(定量)盒中山大學(xué)達(dá)安基因760.004乙肝病毒PCR熒光質(zhì)控低值300ul*7盒中山大學(xué)達(dá)安基因70.005BCR/ABL融合基因檢測(cè)試劑盒10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技4520.006EGFR基因擴(kuò)增檢測(cè)盒10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技7000.007EGFR基因突變檢測(cè)盒10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技4250.008HER-2基因擴(kuò)增檢測(cè)盒20人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技18000.009TOP2A基因異常檢測(cè)盒10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技7000.0010膀胱癌細(xì)胞染色體及基因異常10

43、人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技10540.0011子宮頸細(xì)胞TERC位點(diǎn)擴(kuò)增10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技3680.0012kras基因突變檢測(cè)盒10人份盒北京金菩嘉醫(yī)療科技11800.0013Vysis SS18 Break Apart FISH Probe Kit (CE)150ul+20ul包vysis12694.0014N-MYC SpectrumGreen (2p24)/CEP 2SpectrumOrange Probe150ul+20ul包vysis19231.0015EWSR1 (22q12) Dual Color, Break ApartRearrangement Probe150ul

44、+20ul包vysis12681.00161p36 / LSI 1q25 and LSI 19q13/19p13 DualColor Probe1000ul*2包vysis21023.0017IGH/MYC, CEP 8 Tri-color, Dual FusionTranslocation Probe150ul+20ul包vysis12925.0018IGH/MALT1 t(14;18)(q32;q21) Dual Color, DualFusion Translocation Probe , 20 uL150ul+20ul包vysis13124.0019IGH/CCND1 Dual Col

45、or, Dual FusionTranslocation Probe150ul+20ul包vysis12925.0020IGH/BCL2 Dual Color, Dual FusionTranslocation Probe (CE)200ul+200ul盒vysis12925.0021TaqMan預(yù)混試劑盒200R盒ABI美國(guó)生物應(yīng)用5170.00FISH技術(shù)其他試劑及耗材編號(hào)說(shuō)明編號(hào)說(shuō)明試劑1二甲苯(脫蠟)2無(wú)水乙醇(脫蠟脫水、老化)3蛋白酶K (組織切片消化)4胃蛋白酶(細(xì)胞滴片消化)520 XSSC (預(yù)處理及洗滌)620 XPBS(配制蛋白酶 K溶液、樣本處理)7SDS (配制蛋白酶K溶液)8NP-40 (雜交后洗滌)9聚乙二醇1500 (細(xì)胞保存液)10KCl (低滲液)11甲醇(固定液)12冰醋酸(固定液)13鹽酸(配胃蛋白酶溶液)14多聚甲醛(固定液)15NaOH (配多聚甲醛固定液)16MgCl 2 (配多聚甲醛固定液)17甲酰胺(洗脫液)18純化水或蒸餾水(配制溶液)耗材1防脫載玻片(經(jīng)多聚賴(lài)氨酸或硅膠處 理)2圓形玻璃染色缸3pH計(jì)及pH試紙(測(cè)量溫度)4蓋玻片(22mm X22mm )5鑷子6橡皮膠(封片用,牙膏狀無(wú)刺激氣味)7雜交盒(鋁盒或鐵盒,平底)8蓋玻片(24mm X50mm,玻片老

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