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文檔簡介
1、蛋白質(zhì)的生物合成一、選擇題 (一) A 型題 1 蛋白質(zhì)生物合成 A 從 mRNA 的 3 ' 端向 5 ' 端進(jìn)行 B 由 N 端向 C 端進(jìn)行 C 由 C 端向 N 端進(jìn)行 D 由 28S-tRNA 指導(dǎo) E 由 5S-rRNA 指導(dǎo) 2 蛋白質(zhì)生物合成的延長階段不需要 A 轉(zhuǎn)肽酶 B GTP C EF-Tu 、 EF-Ts 、 EFG D mRNA E fMet-tRNA fMet 3 有關(guān)蛋白質(zhì)合成的敘述正確的是 A 真核生物先靠 S-D 序列使 mRNA 結(jié)合核糖體 B 真核生物帽子結(jié)合蛋白復(fù)合物( eIF -4F 復(fù)合物)在起始過程中發(fā)揮作用 C IF 比 eIF
2、種類多 D 原核生物和真核生物使用不同的起始密碼 E 原核生物有 TATAAT 作為起始序列,真核生物則是 TATA 4 關(guān)于氨基酸密碼子的描述錯(cuò)誤的是 A 密碼子有種屬特異性,所以不同生物合成不同的蛋白質(zhì) B 密碼子閱讀有方向性,從 5 ' 端向 3 ' 端進(jìn)行 C 一種氨基酸可有一組以上的密碼子 D 一組密碼子只代表一種氨基酸 E 密碼子第 3 位( 3 ' 端)堿基在決定摻入氨基酸的特異性方面重要性較小 5 遺傳密碼的簡并性是 A 蛋氨酸密碼可作起始密碼 B 一個(gè)密碼子可編碼多種氨基酸 C 多個(gè)密碼子可編碼同一種氨基酸 D 密碼子與反密碼子之間不嚴(yán)格配對 E 所有
3、生物可使用同一套密碼 6 遺傳密碼的擺動(dòng)性正確含義是 A 一個(gè)密碼子可以代表不同的氨基酸 B 密碼子與反密碼子可以任意配對 C 一種反密碼子能與第三位堿基不同的幾種密碼子配對 D 指核糖體沿著 mRNA 從 5 ' 端向 3 ' 端移動(dòng) E 熱運(yùn)動(dòng)所導(dǎo)致的 DNA 雙螺旋局部變性 7 一個(gè) tRNA 的反密碼子為 5 '- IGC-3 ' ,它可識(shí)別的密碼是 A GCA B GCG C CCG D ACG E UCG 8 信號(hào)肽識(shí)別顆粒( signal recognition particles , SRP )可識(shí)別 A RNA 聚合酶 B DNA 聚合酶 C
4、核小體 D 分泌蛋白的 N 端序列 E 多聚腺苷酸 9 下列關(guān)于多聚核糖體( polysome )敘述正確的是 A 是一種多順反子 B 是 mRNA 的前體 C 是 mRNA 與核糖體小亞基的聚合體 D 是核糖體大、小亞基的聚合體 E 是一組核糖體與一個(gè) mRNA 不同區(qū)段的結(jié)合物 10 關(guān)于蛋白質(zhì)生物合成的描述哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的 A 氨基酸必須活化成活性氨基酸 B 氨基酸的羧基被活化 C 20 種編碼氨基酸各自有相應(yīng)的密碼 D 活化的氨基酸靠相應(yīng)的 tRNA 搬運(yùn)到核糖體 E tRNA 的反密碼子與 mRNA 上的密碼子嚴(yán)格按堿基配對原則結(jié)合 11 核糖體結(jié)合位點(diǎn)( ribosomal bind
5、ing site , RBS ) A 也稱 Pribnow 盒 B 在原核生物 mRNA 上 C 真核生物轉(zhuǎn)錄起點(diǎn) D 由 Meselson-stahl 首先發(fā)現(xiàn) E 在 tRNA 分子上 12 翻譯延長的進(jìn)位 A 指翻譯起始復(fù)合物的生成 B 肽酰 -tRNA 進(jìn)入 P 位 C 由延長因子 EFG 帶領(lǐng),不需消耗能量 D 是下一位氨基酸的氨基酰 -tRNA 進(jìn)入核糖體的 A 位 E 多肽鏈離開核糖體 13 翻譯延長需要 A 氨基酰 -tRNA 轉(zhuǎn)移酶 B 磷酸化酶 C 氨基酸合成酶 D 肽鏈聚合酶 E 轉(zhuǎn)肽酶 14 蛋白質(zhì)生物合成中多肽鏈的氨基酸排列順序取決于 A 相應(yīng) tRNA 的專一性 B
6、 相應(yīng)氨基酰 -tRNA 合成酶的專一性 C 相應(yīng) tRNA 上的反密碼 D 相應(yīng) mRNA 中核苷酸排列順序 E 相應(yīng) rRNA 的專一性 15 肽鏈合成終止的原因是 A 翻譯到達(dá) mRNA 的盡頭 B 特異的 tRNA 識(shí)別終止密碼 C 釋放因子能識(shí)別終止密碼子并進(jìn)入 A 位 D 終止密碼子本身具有酯酶功能,可水解肽?;c tRNA 之間的酯鍵 E 終止密碼子部位有較大阻力,核糖體無法沿 mRNA 移動(dòng) 16 蛋白質(zhì)合成終止時(shí),使多肽鏈從核糖體上釋出的因素是 A 終止密碼子 B 轉(zhuǎn)肽酶的酯酶活性 C 釋放因子 D 核糖體解聚 E 延長因子 17 蛋白質(zhì)合成中,有關(guān)肽鏈延長敘述正確的是 A
7、核糖體向 mRNA5 ' 端移動(dòng)三個(gè)核苷酸距離 B 肽酰 -tRNA 轉(zhuǎn)位到核糖體的 A 位 C GTP 水解成 GDP 和 H 3 PO 4 以提供能量 D 空載的 tRNA 從 P 位進(jìn)入 A 位 E ATP 直接供能 18 多聚核糖體中每一核糖體 A 從 mRNA 的 3 ' 端向 5 ' 端前進(jìn) B 可合成多條多肽鏈 C 可合成一條多肽鏈 D 呈解離狀態(tài) E 可被放線菌酮抑制 19 氨基酸通過下列哪種化學(xué)鍵與 tRNA 結(jié)合 A 糖苷鍵 B 酯鍵 C 酰胺鍵 D 磷酸酯鍵 E 氫鍵 20 信號(hào)肽的作用是 A 保護(hù) N- 端的蛋氨酸殘基 B 引導(dǎo)分泌性蛋白進(jìn)入內(nèi)質(zhì)
8、網(wǎng)腔 C 保護(hù)蛋白質(zhì)不被水解 D 維護(hù)蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象 E 傳遞蛋白質(zhì)之間的信息 21 下列那一項(xiàng)是翻譯后加工 A 加 5 ' 端帽子結(jié)構(gòu) B 加 3 ' 端 poly ( A ) 尾 C 酶的激活 D 酶的變構(gòu) E 氨基酸殘基的糖基化 22 干擾素抑制蛋白質(zhì)生物合成是因?yàn)?A 活化蛋白激酶,而使 eIF-2 磷酸化 B 抑制肽鏈延長因子 C 阻礙氨基酰 -tRNA 與小亞基結(jié)合 D 抑制轉(zhuǎn)肽酶 E 使核糖體 60S 亞基失活 23 下列哪一種物質(zhì)抑制氨基酰 -tRNA 與小亞基結(jié)合 A 土霉素 B 氯霉素 C 紅霉素 D 鏈霉素 E 林可霉素 24 哺乳動(dòng)物細(xì)胞中蛋白質(zhì)生物合
9、成的主要部位在 A 細(xì)胞核 B 線粒體 C 核糖體 D 高爾基復(fù)合體 E 核仁 25 靶向輸送到細(xì)胞核的蛋白多肽鏈含有特異信號(hào)序列,下列敘述錯(cuò)誤的是 A 多肽鏈進(jìn)細(xì)胞核定位后不被切除 B 位于 N 末端 C 不同多肽鏈的特異信號(hào)序列無共同性 C 富含賴、精及脯氨酸 E 也稱為核定位序列 26 下列哪種物質(zhì)直接抑制真核生物核糖體轉(zhuǎn)肽酶 A 放線菌酮 B 四環(huán)素 C 土霉素 D 鏈霉素和卡那霉素 E 利福平 27 氯霉素可抑制原核生物的蛋白質(zhì)合成,其原因是 A 特異性的抑制肽鏈延長因子( EFT )的活性 B 與核糖體的大亞基結(jié)合,抑制轉(zhuǎn)肽酶的活性,而阻斷翻譯延長過程 C 活化一種蛋白激酶,從而影
10、響起始因子( IF )磷酸化 D 間接活化一種核酸內(nèi)切酶使 mRNA 降解 E 阻礙氨基酰 -tRNA 與核糖體小亞基結(jié)合 28 白喉毒素的作用是 A 抑制信號(hào)肽酶 B 與位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜表面的受體蛋白結(jié)合 C 使延長因子 -2 ( eEF-2 )發(fā)生 ADP 糖基化而失活,阻斷多肽鏈延長 D 加速肽酰 -tRNA 從 A 位移到 P 位,造成氨基酸缺失,從而生成無功能的蛋白質(zhì) E 通過抑制 GTP 和 fMet-tRNA fMet 在小亞基上的結(jié)合,抑制蛋白合成的起始 29 出現(xiàn)在蛋白質(zhì)分子中的氨基酸,下列哪一種沒有遺傳密碼 A 色氨酸 B 蛋氨酸 C 谷胺酰胺 D 脯氨酸 E 羥脯氨酸 30
11、在體內(nèi),氨基酸合成蛋白質(zhì)時(shí),其活化方式為 A 磷酸化 B 與蛋氨酸結(jié)合 C 生成氨基酰輔酶 A D 生成氨基酰 -tRNA E 與起始因子結(jié)合 31 不屬于蛋白質(zhì)合成后加工修飾的過程為 A 肽鏈 N 端修飾 B 亞基聚合 C 疏水脂鏈的共 價(jià) 連接 D 多肽鏈折疊為天然構(gòu)象的蛋白質(zhì) E 酶的化學(xué)修飾 (二) B 型題 A 進(jìn)位 B 成肽 C 轉(zhuǎn)位 D 終止 E 釋放 1 氨基酰 -tRNA 進(jìn)入核糖 A 位稱為 2 肽酰 -tRNA-mRNA 與核糖體位置的相互變更稱為 3 P 位上的肽?;c A 位上的氨基酰 -tRNA 的氨基形成肽鍵稱為 A 鏈霉素 B 氯霉素 C 林可霉素 D 嘌呤霉素
12、 E 白喉毒素 4 對真核及原核生物蛋白質(zhì)合成都有抑制作用的抗生素是 5 主要抑制真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的是 A 蛋白質(zhì) 6- 磷酸甘露糖基化 B 滯留信號(hào)序列 C 囊泡 D 分泌小泡 E 前體形式 6 靶向輸送至溶酶體信號(hào)是 7 靶向輸送至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)多肽鏈 C- 端含 8 質(zhì)膜蛋白質(zhì)的靶向輸送需要 A 信號(hào)肽 B 信號(hào)肽酶 C 信號(hào)肽識(shí)別顆粒 D 分泌性蛋白 E 對接蛋白 9 有堿性 N 端、疏水核心和加工區(qū)三個(gè)區(qū)域的是 10 屬于蛋白核酸復(fù)合體的是 A 肽鍵 B 酯鍵 C 氫鍵 D 磷酸二酯鍵 E 糖苷鍵 11 核苷酸之間的連接鍵 12 氨基酸之間的連接鍵 13 堿基與核糖之間的連接鍵 1
13、4 氨基酸與 tRNA 之間的連接鍵 A RNase 抑制因子 B 干擾素 C 嘌呤霉素 D 紅霉素 E 鏈霉素 15 抑制 RNase 活性的是 16 能誘導(dǎo)合成 2 ' -5 ' 寡聚腺苷酸 的是 17 與酪氨酰 - tRNA 結(jié)構(gòu)相似的是 (三) X 型題 1 參與蛋白質(zhì)合成的物質(zhì)是 A mRNA B GTP C 轉(zhuǎn)肽酶 D 核糖體 E 聚合酶 2 翻譯后加工包括 A 剪切 B 共價(jià)修飾 C 亞基聚合 D 加入輔基 E 水解修飾 3 蛋白質(zhì)合成后可靶向運(yùn)輸?shù)?A 留在胞液 B 線粒體 C 細(xì)胞核內(nèi) D 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) E 溶酶體 4 引起讀碼錯(cuò)誤的抗生素有 A 巴龍霉素 B 鏈霉
14、素 C 潮霉素 B D 新霉素 E 嘌呤霉素 5 真核生物的 hnRNA 要具有模板作用,必須進(jìn)行 A 剪接 B 首尾修飾 C 插入稀有堿基 D 切除內(nèi)含子 E 堿基甲基化 6 關(guān)于 S-D 序列的敘述,正確的是 A 也稱核糖體結(jié)合位點(diǎn) B 與 16S rRNA 3 ' 端 -UCCUCC- 互補(bǔ) C 堿基序列 -AGGAGG- 為核心 D 位于起始密碼上游 E 即起始序列 7 翻譯的準(zhǔn)確性與下列哪些因素有關(guān) A 氨基酰 -tRNA 合成酶對底物氨基酸和相應(yīng) tRNA 都有高度特異性 B 氨基酰 -tRNA 分子中 tRNA 的反密碼可通過堿基配對識(shí)別 mRNA 分子的遺傳密碼 C 氨
15、基酰 -tRNA 合成酶具有校正活性 D 延長因子 EFG 有轉(zhuǎn)肽酶活性 E 核糖體對氨基酰 -tRNA 的進(jìn)位有校正功能 8 關(guān)于分子伴侶 A 高溫應(yīng)激可誘導(dǎo)該蛋白合成增加 B 與分泌性蛋白同在 C 能加快多肽鏈折疊速度 D 增加功能性蛋白折疊產(chǎn)率 E 可促進(jìn)需折疊的多肽鏈折疊為天然構(gòu)象的蛋白質(zhì) 9 在蛋白質(zhì)生物合成中 A 20 種編碼氨基酸是原料 B tRNA 攜帶氨基酸 C mRNA 起模板作用 D rRNA 是合成的場所 E 氨基酰 -tRNA 合成酶識(shí)別并結(jié)合相應(yīng)的氨基酸和 tRNA 10 干擾素的作用是 A 調(diào)解細(xì)胞生長分化 B 激活免疫系統(tǒng) C 抗病毒 D 間接誘導(dǎo)核酸內(nèi)切酶 E
16、 誘導(dǎo)使 eIF-2 磷酸化的蛋白激酶活化 11 關(guān)于蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶 A 主要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)揮作用 B 促二硫鍵變構(gòu) C 胞液中活性高 D 催化錯(cuò)配的二硫鍵斷裂并形成正確二硫鍵 E 促蛋白質(zhì)變性 二、是非題 1 蛋白質(zhì)生物合成所需的能量都由 ATP 直接供給。 2 每種氨基酸只能有一種特定的 tRNA 與之對應(yīng)。 3 原核細(xì)胞新生肽鏈 N 端第一個(gè)氨基酸殘基為 fMet ,真核細(xì)胞新生肽鏈 N 端為 Met 。 4 一種 tRNA 只能識(shí)別一種密碼子。 5 每種生物都是有自己特有的一套遺傳密碼。 6 生物體的所有編碼蛋白質(zhì)的基因都是可以由 DNA 的核苷酸序列推導(dǎo)出蛋白質(zhì)氨基酸序列。 7 蛋白
17、質(zhì)生物合成中核糖體沿 mRNA 的 3 ' 5 ' 端移動(dòng)。 8 在大腸桿菌中,一種氨基酸只對應(yīng)于一種氨基酰 -tRNA 合成酶。 9 氨基酸活化時(shí),在氨基酰 -tRNA 合成酶的催化下,由 ATP 供能,消耗個(gè)高能磷酸鍵。 10 每種氨基酸都有兩種以上密碼子。 11 核糖體的活性中心“ A ”位和“ P ”位都主要在大亞基上。 12 AUG 既可作為 fMet-tRNA fMet 和 Met-tRNA i Met 相對應(yīng)的密碼子,又可作為肽鏈內(nèi)部 Met 的密碼子。 13 構(gòu)成密碼子和反密碼子的堿基都只是 A 、 U 、 C 、 G 。 14 真核生物帽子結(jié)合蛋白復(fù)合物( e
18、IF -4F 復(fù)合物)在起始過程中發(fā)揮作用。 15 核定位序列位于 N 末端。 16 白喉毒素的作用是使延長因子 -2 ( eEF-2 )發(fā)生 ADP 糖基化而失活,阻斷多肽鏈延長。 17 分子伴侶能加快多肽鏈折疊速度。 18 滯留信號(hào)是靶向輸送至溶酶體信號(hào)。 三、填空題 1 遺傳密碼共有 _ 個(gè),其中 _ 個(gè)為氨基酸編碼, AUG 既編碼多肽鏈中的 _ ,又作為多肽鏈合成的 _ 。肽鏈合成的終止密碼是 _ , _ , _ 。 2 蛋白質(zhì)的生物合成是以 _ 為模板,以 _ 為原料直接供體,以 _ 為合成楊所。 3 核糖體閱讀 mRNA 密碼子是從 _ 方向進(jìn)行的,肽鏈合成是從 _ 方向進(jìn)行的。
19、 4 蛋白質(zhì)生物合成終止需要 _ 因子,原核生物有 _ 種,真核生物有 _ 種。 5 原核生物的起始氨基酰 -tRNA 以 _ 表示,真核生物的起始氨基酰 -tRNA 以 _ _ 表示,延伸中的甲硫氨酰 -tRNA 以 _ 表示。 6 氨基酰 -tRNA 合成酶的專一性是指對 _ 和 _ 兩種底物都能高度特異識(shí)別;校正活性是 _ 的催化活性。 7 原核生物 mRNA 上的 S-D 序列又成為 _ ,緊接其后的小核苷酸序列可被 _ 辨認(rèn)結(jié)合。 8 蛋白質(zhì)合成后一級(jí)結(jié)構(gòu)的修飾包括 _ 和 _ 。 9 蛋白質(zhì)合成后空間結(jié)構(gòu)的修飾包括 _ 和 _ 。 10 參與多肽鏈折疊為天然功能構(gòu)象的蛋白質(zhì)有 _
20、, _ , _ 。分子伴侶包括 _ 和 _ 兩大類。 11 在形成氨基酰 -tRNA 時(shí),由氨基酸的 _ 基與 tRNA 3 ' 末端的 _ 基形成酯鍵。 12 肽鏈合成終止時(shí),由 _ 識(shí)別并結(jié)合進(jìn)入 A 位的 _ ,同時(shí)二者結(jié)合后觸發(fā)核糖體構(gòu)象改變,使 _ 酶 活性轉(zhuǎn)變?yōu)?_ 酶活性,水解酯鍵,釋放合成的肽鏈 。 13 蛋白質(zhì)生物合成是耗能過程,延長時(shí)每個(gè)氨基酸活化為氨基酰 -tRNA 消耗 _ 個(gè)高能鍵,進(jìn)位、轉(zhuǎn)位各消耗 _ 個(gè)高能鍵,為保持蛋白質(zhì)生物合成的高度保真性,任何步驟出現(xiàn)不正確連接都消耗能量而水解清除,因此 每增加一個(gè)肽鍵平均需要消耗由 GTP 或 ATP 提供的 _ 個(gè)
21、高能磷酸鍵。 14 蛋白質(zhì)中可進(jìn)行磷酸化修飾的氨基酸殘基主要為 _ , _ , _ 。 15 由許多核糖體連接到一個(gè) mRNA 分子上形成的復(fù)合物稱為 _ 。 16 原核生物的釋放因子有三種,其中 RF-1 識(shí)別終止密碼子 _ , _ ; RF-2 識(shí)別 _ , _ ;真核中的釋放因子只有 _ 一種。 四、名詞解釋 1 translation 2 codon 3 ORF 4 degeneracy 5 wobble base pairing 6 ribosomal cycle 7 registration 8 posttranslational modification 9 molecular
22、chaperon 10 signal sequence 11 signal peptide 12 NLS 13 S-D sequence 14 polysome 15 SRP 16 protein targeting 五、問答題 1 何謂遺傳密碼?有何特點(diǎn) ? 2 真核生物翻譯后修飾有哪些方式 ? 3 簡述氨基酸活化及相關(guān)酶的作用特點(diǎn)。 4 原核生物和真核生物翻譯過程有何異同 ? 5 為什么嘌呤霉素可抑制蛋白質(zhì)的生物合成 ? 6 干擾素干擾蛋白質(zhì)生物合成的機(jī)制是什么 ? 7 原核生物 mRNA 在核糖體小亞基上如何準(zhǔn)確定位 ? 8 簡述抗生素與毒素的種類及其作用機(jī)制。 9 簡述各種 RNA 在
23、蛋白質(zhì)生物合成中的功能。 10 試述蛋白質(zhì)生物合成過程的忠實(shí)性是如何保持的? 11 原核生物蛋白質(zhì)合成起始復(fù)合物有哪些成份組成?該復(fù)合物的形成過程。 12 簡述蛋白質(zhì)生物合成過程的延長過程。 參考答案 一、選擇題 (一) A 型題 1 B 2 E 3 B 4 A 5 C 6 C 7 A 8 D 9 E 10 E 11 B 12 D 13 E 14 D 15 C 16 B 17 C 18 C 19 B 20 B 21 E 22 A 23 A 24 C 25 B 26 A 27 B 28 C 29 E 30 D 31 E (二) B 型題 1 A 2 C 3 B 4 D 5 E 6 A 7 B 8
24、 C 9 A 10 C 11 D 12 A 13 E 14 B 15 A 16 B 17 C (三) X 型題 1 ABCD 2 BCDE 3 ABCDE 4 ABCD 5 ABD 6 ABCD 7 ABCE 8 ABDE 9 ABCE 10 ABCDE 11 AD 二、是非題 1 B 2 B 3 A 4 B 5 B 6 B 7 B 8 A 9 B 10 B 11 B 12 A 13 B 14 A 15 B 16 A 17 B 18 B 三、填空題 1 64 61 甲硫氨酸 起始信號(hào) UAA UAG UGA 2 RNA 氨基酰 -tRNA 核糖體 3 5 ' 3 ' N 端 C
25、 端 4 釋放因子 3 1 5 fMet-tRNA fMet Met-tRNA i Met Met-tRNA Met 6 氨基酸 tRNA 水解酯酶 7 核糖體結(jié)合位點(diǎn) 核糖體小亞基蛋白 rps-1 8 肽鏈水解 化學(xué)修飾 9 亞基聚合 輔基連接 10 分子伴侶 蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶 肽 - 脯氨酰順反異構(gòu)酶 核糖體結(jié)合性分子伴侶 非核糖體結(jié)合性分子伴侶 11 - 羧 羥 12 釋放因子 終止密碼子 轉(zhuǎn)肽 酯 13 2 1 5 14 絲氨酸 蘇氨酸 酪氨酸 15 多核糖體 16 UAA UAG UAA UGA eRF 四、名詞解釋 1 翻譯,即蛋白質(zhì)的生物合成。是細(xì)胞內(nèi)以 mRNA 為模板,按照
26、 mRNA 分子中由核苷酸組成的密碼信息合成蛋白質(zhì)的過程。其本質(zhì)是將 mRNA 分子中 4 種核苷酸序列編碼的遺傳信息(核酸語言),解讀為蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)中 20 種氨基酸的排列順序(蛋白質(zhì)語言)。 2 密碼子,在 mRNA 的開放閱讀框架區(qū),每三個(gè)相鄰的核苷酸為一組,代表一種氨基酸或肽鏈合成的其它信息,這種三聯(lián)體形式的核苷酸序列稱為密碼子。共 64 個(gè)密碼子,其閱讀方向是 5 ' 3 ' 。 3 開放讀碼框架,從 mRNA 5 ' 端 起始密碼子 AUG 到 3 ' 端終止密碼子之間的核苷酸序列。 4 簡并性,一種氨基酸可具有兩個(gè)或兩個(gè)以上的密碼子為其編碼,這一
27、特性稱為遺傳密碼的簡并性。為同一種氨基酸編碼的各密碼子稱為簡并密碼子,也稱同義密碼子。多數(shù)情況下,同義密碼子的頭兩位堿基相同,僅第三位堿基有差異。 5 擺動(dòng)配對, mRNA 密碼子的第 3 位堿基與 tRNA 反密碼子的第 1 位堿基之間常出現(xiàn)不嚴(yán)格遵守堿基互補(bǔ)配對規(guī)律的現(xiàn)象,稱為擺動(dòng)配對。 6 核糖體循環(huán),指肽鏈合成的延長階段經(jīng)進(jìn)位、成肽和轉(zhuǎn)位三個(gè)步驟而使氨基酸依次進(jìn)入核糖體并聚合成多肽鏈的過程。這一過程在核糖體上連續(xù)循環(huán)進(jìn)行直至終止稱為核糖體循環(huán)。每次核糖體循環(huán)肽鏈從 N 端向 C 端增加一個(gè)氨基酸殘基。廣義的核糖體循環(huán)是指翻譯的全過程。 7 注冊,也稱進(jìn)位,是指一個(gè)氨基酰 -tRNA 按
28、照 mRNA 模板的指令進(jìn)入并結(jié)合到核糖體 A 位的過程。 8 posttranslational modification 翻譯后修飾,新生多肽鏈不具備蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能,必須經(jīng)過復(fù)雜的加工過程才能轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂刑烊粯?gòu)象的功能蛋白質(zhì),這一加工過程稱為翻譯后修飾。包括多肽鏈折疊為天然的三維構(gòu)象及對肽鏈一級(jí)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)的修飾等。 9 molecular chaperon 分子伴侶,是細(xì)胞內(nèi)的一類可識(shí)別肽鏈的非天然構(gòu)象、促進(jìn)各功能域和整體蛋白質(zhì)正確折疊的保守蛋白質(zhì)。 10 signal sequence 信號(hào)序列,所有靶向輸送的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中都存在分選信號(hào),主要是 N 端特異氨基酸序列,可引導(dǎo)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)
29、移到細(xì)胞適當(dāng)靶部位的這類序列稱為信號(hào)序列。 11 signal peptide 信號(hào)肽,多數(shù)靶向輸送到溶酶體、質(zhì)膜或分泌到細(xì)胞外的蛋白質(zhì),其肽鏈的 N 端有一長度為 13-36 個(gè)氨基酸殘基的信號(hào)序列稱為信號(hào)肽。 12 NLS 核定位序列,所有靶向輸送到細(xì)胞核的蛋白質(zhì)其多肽鏈內(nèi)含有特異信號(hào)序列,稱為核定位序列。 NLS 是含 4-8 個(gè)氨基酸殘基的短序列,富含帶正電荷的賴氨酸、精氨酸和脯氨酸,可位于肽鏈的不同部位。 NLS 在蛋白質(zhì)進(jìn)核定位后不被切除。 13 S-D sequence S-D 序列,又成核糖體結(jié)合位點(diǎn)( RBS ),存在于原核生物 mRNA 起始 AUG 密碼上游約 8-13
30、個(gè)核苷酸部位,存在 4-9 個(gè)核苷酸的一致序列,富含嘌呤堿基,如 -AGGAGG- ,稱為 Shine-Dalgarno 序列,簡稱 S-D 序列。此與原核生物核糖體小亞基 16S-rRNA 3 ' 端富含嘧啶的短序列,如 -UCCUCC- 可配對結(jié)合,通過這種 RNA-RNA 相互作用, mRNA 序列上的起始 AUG 即可在核糖體小亞基上準(zhǔn)確定位而形成復(fù)合體。 14 polysome 多聚核糖體,是指多個(gè)核糖體結(jié)合在一條 mRNA 鏈上,同時(shí)進(jìn)行多肽鏈的合成(翻譯)所形成的聚合物。多聚核糖體的形成可以使蛋白質(zhì)合成以高速度、高效率進(jìn)行。 15 SRP 信號(hào)肽識(shí)別顆粒,由 6 個(gè)多肽亞
31、基和 1 分子 7S-RNA 組成的復(fù)合體。可同時(shí)與新生肽鏈的信號(hào)肽及核蛋白體結(jié)合,具有 GTP 酶活性,能引導(dǎo)新生肽鏈識(shí)別并結(jié)合到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上。 16 protein targeting 蛋白質(zhì)靶向輸送,蛋白質(zhì)合成后被定向輸送到其發(fā)揮作用的靶部位的過程。 五、問答題 1 何謂遺傳密碼?有何特點(diǎn) ? 答:遺傳密碼是存在于 mRNA 開放閱讀框架區(qū)的三聯(lián)體形式的核苷酸序列。由 A 、 G 、 C 、 U 四種堿基組成 64 個(gè)三聯(lián)體密碼子,其中 AUG 編碼甲硫氨酸和作為多肽鏈合成的起始信號(hào); UAA 、 UAG 、 UGA 作為多肽鏈合成的終止信號(hào);其余 61 個(gè)密碼分別編碼不同的氨基酸。 遺傳
32、密碼具有以下特點(diǎn):( 1 )方向性。密碼子及組成密碼子的各堿基在 mRNA 序列中的排列具有方向性,翻譯時(shí)的閱讀方向是 5 ' 3 ' ,即讀碼從 mRNA 的起始密碼子 AUG 開始,按 5 ' 3 ' 的方向逐一閱讀,直至終止密碼子。 mRNA 開放閱讀框架中 5 ' 3 ' 的核苷酸排列順序決定了蛋白質(zhì)多肽鏈氨基酸從 N 端到 C 端的排列順序。 ( 2 )連續(xù)性。 mRNA 序列上的各密碼子及密碼子的各堿基是連續(xù)排列的,密碼子及密碼子的各堿基之間沒有間隔,即具有無標(biāo)點(diǎn)性。翻譯時(shí)從起始密碼子 AUG 開始向 3 ' 端連續(xù)讀碼,每次
33、讀碼時(shí)每個(gè)堿基只讀一次,不重疊閱讀。 ( 3 )簡并性。一種氨基酸具有兩個(gè)或兩個(gè)以上的密碼子為其編碼的特性稱為遺傳密碼的簡并性。 64 個(gè)密碼子中,除甲硫氨酸和色氨酸只對應(yīng) 1 個(gè)密碼子外,其它氨基酸都有 2 、 3 、 4 或 6 個(gè)密碼子為之編碼。為同一種氨基酸編碼的各密碼子稱為簡并密碼子或同義密碼子。多數(shù)情況下,同義密碼子的頭兩位堿基相同,僅第三位堿基有差別。( 4 )通用性。除動(dòng)物細(xì)胞的線粒體和植物細(xì)胞的葉綠體外,幾乎生物界所有物種都使用同一套遺傳密碼即通用密碼。( 5 )擺動(dòng)性。 mRNA 密碼子的第 3 位堿基和 tRNA 反密碼子的第 1 位堿基之間不嚴(yán)格遵守堿基互補(bǔ)配對規(guī)律的現(xiàn)
34、象稱為擺動(dòng)配對。如 tRNA 反密碼子的第 1 位堿基若是 I ,可以和 mRNA 密碼子的第 3 位的 A 、 U 或 C 配對等。 2 真核生物翻譯后修飾有哪些方式 ? 答:新生多肽鏈不具備蛋白質(zhì)的生物活性,必須經(jīng)過復(fù)雜的加工修飾才能轉(zhuǎn)變?yōu)橛刑烊粯?gòu)象的功能蛋白質(zhì)。真核生物翻譯后修飾包括多肽鏈折疊為天然的三維構(gòu)象及對肽鏈一級(jí)結(jié)構(gòu)的修飾、空間結(jié)構(gòu)的修飾等。( 1 )多肽鏈折疊為天然構(gòu)象的蛋白質(zhì)。需要以下酶或蛋白質(zhì)因子的輔助:分子伴侶:識(shí)別肽鏈的非天然構(gòu)象,促進(jìn)各功能域和整體蛋白質(zhì)正確折疊;蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶:催化多肽鏈內(nèi)或肽鏈之間二硫鍵的正確形成或催化錯(cuò)配的二硫鍵斷裂并形成正確的二硫鍵,使蛋白
35、質(zhì)形成天然構(gòu)象;肽 - 脯氨酰順反異構(gòu)酶:是蛋白質(zhì)三維構(gòu)象形成的限速酶,在肽鏈合成需要形成順式構(gòu)型時(shí),可使多肽鏈在各脯氨酸彎折處形成準(zhǔn)確折疊。( 2 )蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的修飾主要是肽鍵水解和化學(xué)修飾。水解主要是切除肽鏈 N 端和 C 端的部分序列。此外,水解加工使某些無活性的蛋白前體經(jīng)蛋白酶水解生成有活性的蛋白質(zhì)、多肽或小分子活性肽類;化學(xué)修飾可對蛋白質(zhì)分子中的氨基酸殘基進(jìn)行多種化學(xué)修飾,包括糖基化、羥基化、甲基化、磷酸化、二硫鍵形成、親脂性修飾等。( 3 )空間結(jié)構(gòu)的修飾包括亞基聚合和輔基連接。具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)各亞基之間通過非共價(jià)鍵聚合形成寡聚體才能發(fā)揮作用;結(jié)合蛋白合成后需要結(jié)合相應(yīng)的輔
36、基才能成為天然功能的蛋白質(zhì)。 3 簡述氨基酸的活化及相關(guān)酶的作用特點(diǎn)。 答:氨基酸與特異 tRNA 結(jié)合形成氨基酰 -tRNA 的過程稱為氨基酸的活化。由氨基酰 -tRNA 合成酶催化。其反應(yīng)如下: 氨基酸 + ATP-E 氨基酰 -AMP-E + PPi 氨基酰 -AMP-E + tRNA 氨基酰 -tRNA + AMP + E 該酶對底物氨基酸和 tRNA 都有高度特異性。另外還具有較正活性,即可將反應(yīng)任一步驟中出現(xiàn)的錯(cuò)配加以改正。此酶對維持蛋白質(zhì)合成高度保真性是必不可少的 。 4 原核生物和真核生物翻譯過程有何異同 ? 翻 譯 原核生物 真核生物 相 同 1. 底物( 20 種編碼氨基酸
37、) 2. 搬運(yùn)氨基酸的工具( tRNA ) 3. 模板( mRNA ) 4. 合成場所(核蛋白體) 5. 摻入肽鏈前需氨基酸活化 6 . 化學(xué)鍵(肽鍵) 7. 過程(三個(gè)階段) 8. 聚合方向( N 端 C 端 ) 9. 產(chǎn)物(多肽鏈) 10. 通用一套遺傳 密碼 11. 需能量 12. 需酶和蛋白質(zhì)因子 13. 需無機(jī)離子 Mg 2+ 14 . 需翻譯后加工 15. 多聚核蛋白體現(xiàn)象 不 同 模板 mRNA 結(jié)構(gòu) 多順反子 mRNA ,有 S-D 序列, rpS-1 辨認(rèn)序列 單順反子 mRNA ,有 5' 帽子、 3'poly ( A ) 尾、編碼區(qū)和非編碼區(qū) 核蛋白體的組
38、成 三種 rRNA ( 16S 、 5S 、 23S ) 和 57 種蛋白質(zhì) 四種 rRNA ( 18S 、 5S 、 5.8S 、 28S ) 和 82 種蛋白質(zhì) 與轉(zhuǎn)錄的關(guān)系 轉(zhuǎn)錄和翻譯都在胞質(zhì)中, 同步進(jìn)行 轉(zhuǎn)錄在細(xì)胞核,翻譯在細(xì)胞質(zhì), 不同步進(jìn)行 起 始 起始氨基酰 tRNA fMet-tRNA fMet Met-tRNA i Met 起始因子 三種( IF-1 、 IF-2 、 IF-3 ) 10 種( eIF-1 、 2 、 2B 、 3 、 4A 、 4B 、 4E 、 4G 、 5 、 6 ) 翻譯起始復(fù)合 物形成時(shí)各成 份的結(jié)合順序 mRNA 先于 fMet-tRNA fMe
39、t 結(jié)合小亞基 mRNA 后于 Met-tRNA i Met 結(jié)合小亞基 mRNA 與小亞 基結(jié)合的機(jī)制 S-D 序列 / 16S- rRNA ( RNA-RNA ) 、 rpS-1 辨認(rèn)序列 /rpS-1 ( RNA- 蛋白質(zhì)) 涉及多種蛋白因子形成的復(fù)合物(如 帽子結(jié)合蛋白復(fù)合物 eIF -4F 復(fù)合 物,包括 4A 、 4E 、 4G 各組分) 能量消耗的 種類 GTP ATP 和 GTP 延長 延長因子 種類 EF-T ( T U ) EF-T ( T S ) EF-G eEF1- eEF1- eEF-2 功能 促進(jìn)氨基 酰 -tRNA 進(jìn)入 A 位, 結(jié)合并分 解 GTP 調(diào)節(jié)亞基
40、有轉(zhuǎn)位 酶活性, 促進(jìn)轉(zhuǎn) 位反應(yīng) 促進(jìn)氨基酰 -tRNA 進(jìn)入 A 位,結(jié)合 并分解 GTP ;相當(dāng) 于 EF-T ( T U ) 調(diào)節(jié)亞 基;相當(dāng) 于 EF-T ( T S ) 有轉(zhuǎn)位酶 活性,促進(jìn) 轉(zhuǎn)位反應(yīng); 相當(dāng)于 EF-G 卸載 tRNA 排出方式 進(jìn)入 E 位然后排出 直接從 P 位脫落 (核蛋白體無 E 位) 終 止 釋放因子 種類 RF-1 RF-2 RF-3 eRF 功能 識(shí)別 UAA 、 UAG ,誘 導(dǎo)轉(zhuǎn)肽酶 變?yōu)轷ッ?識(shí)別 UAA 、 UGA ,誘 導(dǎo)轉(zhuǎn)肽酶 變?yōu)轷ッ?介導(dǎo) RF-1 與 RF-2 的 作用;有 GTP 酶 活性 識(shí)別 UAA 、 UAG 、 UGA ;誘
41、導(dǎo)轉(zhuǎn)肽酶變?yōu)轷ッ?;?GTP 酶活性 翻譯后加工修飾 簡單,無蛋白質(zhì)的靶向運(yùn)輸 復(fù)雜,有蛋白質(zhì)的靶向運(yùn)輸 5 為什么嘌呤霉素可抑制蛋白質(zhì)的生物合成 ? 答:嘌呤霉素結(jié)構(gòu)與酪氨酰 -tRNA 相似,在翻譯中可取代某些氨基酰 -tRNA 而進(jìn)入核糖體的 A 位,但延長中的肽酰 - 嘌呤霉素容易從核糖體脫落,中斷肽鏈合成。 6 干擾素干擾蛋白質(zhì)生物合成的機(jī)制是什么 ? 答:干擾素是真核細(xì)胞感染病毒后分泌的一類具有抗病毒作用的蛋白質(zhì),可抑制病毒的繁殖。機(jī)制是:( 1 )干擾素在某些病毒 dsRNA 存在下,誘導(dǎo)特異蛋白激酶活化,此活化的蛋白激酶使真核 eIF-2 磷酸化而失活,從而抑制病毒蛋白質(zhì)合成。
42、( 2 )與 dsRNA 共同活化特殊的 2 ' -5 ' 寡聚腺苷酸合成酶,以 ATP 為原料合成 2 ' -5 ' 寡聚腺苷酸( 2 ' -5 ' A ), 2 ' -5 ' A 可活化 RNaseL ,后者使病毒 mRNA 發(fā)生降解從而阻斷病毒蛋白質(zhì)合成。 7 原核生物 mRNA 在核糖體小亞基上如何準(zhǔn)確定位 ? 答:原核生物 mRNA 在核糖體小亞基上準(zhǔn)確定位結(jié)合涉及兩種機(jī)制:( 1 )在各種 mRNA 起始 AUG 密碼上游約 8-13 個(gè)核苷酸部位,存在一段由 4-9 個(gè)核苷酸組成的一致序列,富含嘌呤堿基,如 -AGG
43、AGG- ,稱為 S-D 序列,又稱核糖體結(jié)合位點(diǎn)。此與原核生物核糖體小亞基 16S-rRNA3 ' 端富含嘧啶的短序列,如 -UCCUCC- 可配對結(jié)合,以促使 mRNA 與小亞基結(jié)合。( 2 ) mRNA 序列上緊接 S-D 序列后的小段核苷酸序列,可被核糖體小亞基蛋白 rpS-1 識(shí)別并結(jié)合。通過以上 RNA-RNA 、 RNA- 蛋白質(zhì)相互作用, mRNA 序列上的起始 AUG 即可在核糖體小亞基上準(zhǔn)確定位而形成復(fù)合體。 8 簡述抗生素與毒素的種類及其作用機(jī)制。 答: ( 1 )抗生素: 是一類由某些真菌、細(xì)菌等微生物產(chǎn)生的藥物,有抑制其它微生物生長或殺死其它微生物的能力,對宿
44、主無毒性的抗生素可用于預(yù)防和治療人、動(dòng)物和植物的感染性疾病。包括影響翻譯起始的抗生素和影響翻譯延長的抗生素(如干擾進(jìn)位的抗生素、引起讀碼錯(cuò)誤的抗生素、影響肽鍵形成的抗生素、影響轉(zhuǎn)位的抗生素)。 作用機(jī)制: 抗生素 作用位點(diǎn) 作用原理 應(yīng)用 伊短菌素 原核、真核 核蛋白體小亞基 阻礙翻譯起始復(fù)合物的形成 抗腫瘤藥 四環(huán)素、土霉素 原核核蛋白體小亞基 抑制氨基酰 -tRNA 與小亞基結(jié)合 抗菌藥 鏈霉素、新霉素、 巴龍霉素 原核核蛋白體小亞基 改變構(gòu)象引起讀碼錯(cuò)誤、抑制起始 抗菌藥 氯霉素、林可霉素、紅霉素 原核核蛋白體大亞基 抑制轉(zhuǎn)肽酶、阻斷肽鏈延長 抗菌藥 嘌呤霉素 原核、真核核蛋白體 使肽酰
45、基轉(zhuǎn)移到它的氨基上后脫落 抗腫瘤藥 放線菌酮 真核核蛋白體大亞基 抑制轉(zhuǎn)肽酶、阻斷肽鏈延長 醫(yī)學(xué)研究 夫西地酸、細(xì)球菌素 EF-G 抑制 EF-G 、阻止轉(zhuǎn)位 抗菌藥 大觀霉素 原核核蛋白體小亞基 阻止轉(zhuǎn)位 抗菌藥 ( 2 )毒素:包括 白喉毒素和蓖麻蛋白。 作用機(jī)制:白喉毒素作為一種修飾酶,可使 eEF-2 發(fā)生 ADP 糖基化共價(jià)修飾,生成 eEF-2 腺苷二磷酸核糖衍生物,使 eEF-2 失活。蓖麻蛋白可作用于真核生物核糖體大亞基的 28S rRNA ,催化其中特異腺苷酸發(fā)生脫嘌呤基反應(yīng),使 28S rRNA 降解,使核糖體大亞基失活。 9 簡述各種 RNA 在蛋白質(zhì)生物合成中的功能。 答: mRNA 是蛋白質(zhì)生物合成的直接模板,以三聯(lián)體密碼的方式將遺傳信息從核酸傳遞給蛋白質(zhì),轉(zhuǎn)變?yōu)榈鞍踪|(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)信息。 tRNA 是氨基酸的運(yùn)載工具,以氨基酰 -tRNA 的形式將底物氨基酸搬運(yùn)至核糖體上生成肽鏈。 rRNA 與核內(nèi)蛋白質(zhì)結(jié)合組成核糖體,作為蛋白質(zhì)生物合成的場所。 10 試述蛋白質(zhì)生物合成過程的忠實(shí)性是如何保持的。 答: ( 1 )氨基酸活化成為氨基酰 -tRNA 的過程由氨基酰 -tRNA 合成酶催化,該酶對底
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