高效液相色檢驗(yàn)方法驗(yàn)證方案2總結(jié)

1、型高效液相色譜儀測定川芎含量檢驗(yàn)方法驗(yàn)證方案 文件編號(hào) S-YF-013（01）起 草 人 崔英南 日期 2012年08月26日審 核 人 日期 2012年08月31日批 準(zhǔn) 人 李立新 日期 2012年08月31日生效日期 2012年09月01日 驗(yàn)證項(xiàng)目申請(qǐng)單 文件編號(hào)：SMP.QA-YG-001-01再確認(rèn)項(xiàng)目用高效液相色譜儀測定川芎含量檢驗(yàn)方法驗(yàn)證 目的對(duì)已進(jìn)行設(shè)計(jì)、選型、安裝、運(yùn)行及系統(tǒng)適應(yīng)性測試設(shè)備確認(rèn)的高效液相色譜儀，通過選用生產(chǎn)品種（藥典）川芎進(jìn)行含量測定，驗(yàn)證其檢驗(yàn)方法準(zhǔn)確度、精密度、專屬性、線性、范圍、耐用性的正確性，證實(shí)該設(shè)備設(shè)計(jì)、選型是否符合藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測定的要求

2、，使檢驗(yàn)指標(biāo)具有可控性、科學(xué)性、準(zhǔn)確性，使設(shè)備達(dá)到設(shè)計(jì)要求及規(guī)定的技術(shù)指標(biāo)，把好質(zhì)量關(guān)，使合格產(chǎn)品能按GMP要求進(jìn)行放行。小組成員組 長： 組 員： 要求完成時(shí)間2012年09月09日提出部門：質(zhì)量保證部批準(zhǔn)部門：再確認(rèn)委員會(huì)簽字 年 月 日簽字 年 月 日備注驗(yàn)證項(xiàng)目計(jì)劃書 文件編號(hào)： SMP.QA-YG-001-02驗(yàn)證題目用高效液相色譜儀測定川芎含量檢驗(yàn)方法驗(yàn)證目的概要對(duì)已進(jìn)行設(shè)計(jì)、選型、安裝、運(yùn)行及系統(tǒng)適應(yīng)性測試設(shè)備確認(rèn)的高效液相色譜儀，通過選用生產(chǎn)品種（藥典）川芎進(jìn)行含量測定，驗(yàn)證其檢驗(yàn)方法準(zhǔn)確度、精密度、專屬性、線性、范圍、耐用性的正確性，證實(shí)該設(shè)備設(shè)計(jì)、選型是否符合藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中

3、含量測定的要求，使檢驗(yàn)指標(biāo)具有可控性、科學(xué)性、準(zhǔn)確性，使設(shè)備達(dá)到設(shè)計(jì)要求及規(guī)定的技術(shù)指標(biāo)，把好質(zhì)量關(guān)，使合格產(chǎn)品能按GMP要求進(jìn)行放行。再確認(rèn)小組成員組 長： 組 員： 驗(yàn)證方法用高效液相色譜儀測定含量檢驗(yàn)期待結(jié)果用已確認(rèn)的設(shè)備對(duì)生產(chǎn)品種進(jìn)行含量測定，驗(yàn)證檢驗(yàn)方法的準(zhǔn)確度、精密性等符合生產(chǎn)、質(zhì)量、GMP的規(guī)定，符合該設(shè)備的設(shè)計(jì)、選型能夠滿足檢驗(yàn)要求，所采用的方法達(dá)到相應(yīng)的檢測要求，達(dá)到測得指標(biāo)的科學(xué)、準(zhǔn)確性，已滿足控制產(chǎn)品質(zhì)量的需要。驗(yàn)證方式同步驗(yàn)證超過允許值的對(duì)應(yīng)措施1. 待系統(tǒng)穩(wěn)定后，重新檢測。2. 必要時(shí)，對(duì)有關(guān)設(shè)備重新處理和調(diào)整后，再測試，分析檢測結(jié)果以確定不合格原因。3. 若屬于設(shè)備

4、運(yùn)行方面的原因，必要時(shí)報(bào)再確認(rèn)委員會(huì)，調(diào)整設(shè)備運(yùn)行參數(shù)。驗(yàn)證實(shí)施時(shí)間2012年09月01日小組負(fù)責(zé)人 2012年08月31日起草責(zé)任者起草時(shí)間 2012年08月26日 審核責(zé)任者審核時(shí)間2012年08月31日批準(zhǔn)責(zé)任者批準(zhǔn)時(shí)間2012年08月31日驗(yàn)證方案審批表吉 SMP.QA-YG-001-03再確認(rèn)方案名稱用高效液相色譜儀測定川芎含量檢驗(yàn)方法驗(yàn)證再確認(rèn)方案編號(hào)S-YF-013（01）起草人崔英南 2012年08月26日審核人所在部門簽字審核意見日 期質(zhì)量管理部 年 月 日生產(chǎn)技術(shù)部 年 月 日設(shè)備動(dòng)力部 年 月 日飲片車間 年 月 日供銷部 年 月 日化驗(yàn)室 年 月 日 年 月 日 年 月

5、 日 年 月 日 年 月 日 年 月 日 年 月 日 年 月 日批 準(zhǔn) 人日 期 年 月 日批準(zhǔn)意見同意執(zhí)行日期 年 月 日目 錄1再確認(rèn)目的2再確認(rèn)范圍3再確認(rèn)責(zé)任4內(nèi)容4.1 概述4.2再確認(rèn)內(nèi)容再確認(rèn)小組 預(yù)確認(rèn) 安裝確認(rèn) 運(yùn)行確認(rèn) 性能確認(rèn) 結(jié)果分析與評(píng)價(jià)4.2.7 再確認(rèn)周期文件名稱用高效液相色譜儀測定川芎含量檢驗(yàn)方法驗(yàn)證文件編號(hào)S-YF-013-（01）起 草 人崔英南起草日期2012年08月26日審 核 人審核日期 年 月 日批 準(zhǔn) 人批準(zhǔn)日期 年 月 日?qǐng)?zhí)行日期 年 月 日頒發(fā)部門質(zhì)量管理部版 本 號(hào)01分發(fā)號(hào)分發(fā)部門質(zhì)管化驗(yàn)生產(chǎn)車間辦公財(cái)務(wù)供銷設(shè)備分發(fā)數(shù)量21110011目的

6、確認(rèn)經(jīng)設(shè)備確認(rèn)高效液相，按藥典檢驗(yàn)方法測定生產(chǎn)品種含量，驗(yàn)證其檢驗(yàn)結(jié)果科學(xué)性、準(zhǔn)確性、精密性等，滿足檢驗(yàn)結(jié)果正確性需要，有效控制產(chǎn)品質(zhì)量。提供必要的文件以證實(shí)本設(shè)備的操作與所預(yù)期的完全一致。根據(jù)本方案的驗(yàn)證，確認(rèn)按檢驗(yàn)操作規(guī)程操作，能有效的保持本設(shè)備于確認(rèn)狀態(tài)下，能穩(wěn)定地、恒定地達(dá)成其所預(yù)期的功能。范圍質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、檢驗(yàn)操作規(guī)程文件的匯集。驗(yàn)證設(shè)備用于含量測定檢驗(yàn)方法的準(zhǔn)確性在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)驗(yàn)證設(shè)備用于含量測定檢驗(yàn)方法的精密度可靠性驗(yàn)證設(shè)備用于含量測定檢驗(yàn)方法，在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與供試品中被測物嘗試直接呈正比關(guān)系的程度。驗(yàn)證設(shè)備用于含量測定檢驗(yàn)方法具有專屬性。驗(yàn)證設(shè)備用于含量測定檢驗(yàn)方法在達(dá)到一

7、定精密度、準(zhǔn)確度和線性時(shí)，其測定值高低限在可控范圍內(nèi)。驗(yàn)證設(shè)備用于含量測定檢驗(yàn)方法的耐用性。責(zé)任質(zhì)量管理部負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草，申請(qǐng)審批，驗(yàn)證過程的監(jiān)督、資料的存檔，再確認(rèn)方案的執(zhí)行及再確認(rèn)結(jié)果的評(píng)估?；?yàn)室負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)的操作，原始記錄、報(bào)告的填寫。驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的審核。內(nèi)容1 概述：本設(shè)備由P3000高壓輸液泵和UV3000可變波長紫外/可見分光檢測器組成。P3000高壓輸液泵是以CPLD技術(shù)為核心，由單片機(jī)控制的高精密輸液泵系統(tǒng)。它基于全數(shù)字的頻率發(fā)生系統(tǒng)、先進(jìn)的馬達(dá)驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)及友好的人機(jī)顯示頁面似的該設(shè)備的操作及控制很方便。先進(jìn)的泵頭及單項(xiàng)閥設(shè)計(jì)思路，融匯了當(dāng)今世界上最先進(jìn)的經(jīng)驗(yàn)，使得用戶

8、在各種使用條件下都可以保證輸液的精度及重復(fù)性指標(biāo)。UV3000紫外/可見波長檢測器是完整的高效液相色譜儀的一個(gè)重要的組成部分。該檢測器的設(shè)計(jì)以當(dāng)今最先進(jìn)的技術(shù)為先導(dǎo)，通過數(shù)字化的數(shù)據(jù)處理和控制，其基線噪聲和漂移降低到一個(gè)新的極限。由于采用了數(shù)字量輸出功能，該檢測器可以與計(jì)算機(jī)直接通過串行口相連而不需要任何數(shù)據(jù)采集單元。該設(shè)備已經(jīng)設(shè)計(jì)、安裝、運(yùn)行、性能確認(rèn)，并經(jīng)過計(jì)量校驗(yàn)，在有效期范圍內(nèi)。通過該設(shè)備用于生產(chǎn)品種川芎中阿魏酸的含量測定，驗(yàn)證該設(shè)備的準(zhǔn)確性、精密性、專屬性、線性、范圍、及耐用性是否符合要求。2驗(yàn)證內(nèi)容2.1驗(yàn)證小組：由廠驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)小組安排，成立P3000/U3000高效液相色譜儀驗(yàn)證小

9、組。組長： 張杰組員： 小組職務(wù)姓名所在部門職務(wù)組員設(shè)備動(dòng)力部設(shè)備管理員組員化驗(yàn)室主任組員質(zhì)量管理部質(zhì)量監(jiān)督員組員化驗(yàn)室化驗(yàn)員2.2 預(yù)確認(rèn)設(shè)備基本情況.1設(shè)備制造商及零件供應(yīng)商資料設(shè)備名稱：高效液相色譜儀編 號(hào)：021型 號(hào)：制 造 商：地 址：電 話：傳 真：聯(lián) 絡(luò) 人： 2.2.2設(shè)備的檔案資料文件名稱存放地點(diǎn)高效液相色譜儀質(zhì)量管理部一份產(chǎn)品保修單質(zhì)量管理部一份使用證明書質(zhì)量管理部一份合格證質(zhì)量管理部一份設(shè)備開箱驗(yàn)收單質(zhì)量管理部一份設(shè)備安裝調(diào)試驗(yàn)收單質(zhì)量管理部一份色譜工作站質(zhì)量管理部一份綜合性評(píng)價(jià)結(jié)果上述設(shè)備檔案材料符合GMP和生產(chǎn)工藝要求。檢查人檢查日期 年 月 日復(fù)核人復(fù)核日期年 月

10、 日2.3該設(shè)備是否滿足GMP及現(xiàn)行生產(chǎn)工藝要求的確認(rèn)2.3.1檢查并確認(rèn)設(shè)備組成的單體結(jié)構(gòu)應(yīng)完整，并且各單體結(jié)構(gòu)外觀應(yīng)無缺陷性損壞。設(shè)備單體結(jié)構(gòu)名稱有無缺陷損壞可變波長紫外/可見分光檢測器無缺陷損壞高壓輸液泵無缺陷損壞綜合性評(píng)價(jià)結(jié)果設(shè)備組成的單體結(jié)構(gòu)完整，并且各單體結(jié)構(gòu)外觀無缺陷性損壞。檢查人檢查日期年 月 日復(fù)核人復(fù)核日期年 月 日2.3.2檢查設(shè)備所有材質(zhì)制造應(yīng)符合生產(chǎn)工藝要求單體設(shè)備名稱要求材質(zhì)實(shí)際材質(zhì)可變波長紫外/可見分光檢測器不與藥物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)不銹鋼高壓輸液泵不與藥物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)不銹鋼綜合性評(píng)價(jià)結(jié)果設(shè)備所有材質(zhì)制造不與藥物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，符合藥品檢驗(yàn)要求。檢查人檢查日期年 月 日復(fù)

11、核人復(fù)核日期年 月 日2.4 設(shè)備確認(rèn)該設(shè)備已經(jīng)設(shè)備的設(shè)計(jì)、安裝、運(yùn)行、性能再確認(rèn)，同時(shí)該設(shè)備經(jīng)計(jì)量校驗(yàn)確認(rèn)，并在有效期范圍內(nèi)。2.5 人員、環(huán)境、試藥的確認(rèn)化驗(yàn)員已經(jīng)均經(jīng)過培訓(xùn)，熟悉方法及使用的儀器，環(huán)境濕度為56%，溫度為20均在合理范圍內(nèi)。對(duì)照品從國家生物檢定研究院購置，批號(hào)為 有效期為其它試劑為色譜純，水為純化水均符合試驗(yàn)要求。3 含量測定3.1準(zhǔn)確度驗(yàn)證準(zhǔn)確度系指用該方法測定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般用回收率（%）表示，準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測試。3.1.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-1%醋酸溶液（30：70）為流動(dòng)相；檢測波長為32

12、1nm。理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。流速：1.0ml/min；色譜柱規(guī)格：4.6×250mm；粒度：5m；進(jìn)樣量：10l。對(duì)照品溶液的制備 取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加70%甲醇制成每1ml含20g的溶液，即得。供試品溶液的制備 取本品粉末（過四號(hào)篩）約0. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法 可用上述已知純度的對(duì)照品做加樣回收測定，即于已知被測成分對(duì)照品，在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度的供試品進(jìn)行測定。分

13、別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10l，注入液相色譜儀，測定。同一濃度，用6個(gè)測定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，應(yīng)報(bào)告已知加入量的回收率（%），或測定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD%）。用實(shí)測值與供試品中含有量之差，除以加入對(duì)照品量計(jì)算回收率。公式：回收率%=（C-A）/B*100%式中A為供試品所含被測成分量；B為加入對(duì)照量；C為實(shí)測值。實(shí)測值公式：平均值X=Xi/n平均偏差=Xi-X/n平均相對(duì)偏差=平均偏差/平均值附圖：樣品與對(duì)照品峰面積見圖譜。加樣回收率考察取本品粉末6份，精密稱定，按照供試品方法制備，得到供試品溶液各50ml，各加入10ml對(duì)照品溶液，搖勻，得到待測溶液，濾過，進(jìn)樣

14、，計(jì)算峰面積，得到數(shù)據(jù)如下表：注意：在加樣回收試驗(yàn)中須注意對(duì)照品的加入量與供試品中被測成分含有量之和必須在標(biāo)準(zhǔn)曲線性范圍之內(nèi)；加入的對(duì)照品的量要適當(dāng)，過小則引起較大的相對(duì)誤差，過大則干擾成分相對(duì)減少，真實(shí)性差。表1 含量測定川芎加樣回收率試驗(yàn)表序號(hào)樣品稱量（g）樣品阿魏酸的含量（mg）對(duì)照品加入量（mg）實(shí)測值（mg）回收率（%）回收率的平均值（）RSD（%）10.50140.55150.20.7534100.95100.080.891320.52260.67940.20.878699.6030.51730.62080.20.819399.2540.52660.63190.20.8348101

15、.4550.53250.69230.20.889799.7060.51480.61780.20.816999.55檢測人： 檢測日期：結(jié)果評(píng)價(jià)：檢查人： 復(fù)核人： 日期： 年 月 日3.2精密度驗(yàn)證精密度系指在規(guī)定的測試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差，標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。同一濃度，用6個(gè)測定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。精密度包含重復(fù)性，中間精密度和重現(xiàn)性，其中重現(xiàn)性是在不同化驗(yàn)室不同時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，查看實(shí)驗(yàn)結(jié)果有沒有重現(xiàn)性，本公司只一個(gè)實(shí)驗(yàn)室此項(xiàng)略。3.2.1重復(fù)性（設(shè)操作人員A）在相同操作條件下，由同一個(gè)分析人員在較短的間隔時(shí)間內(nèi)測定所得結(jié)果的精密度

16、稱為重復(fù)性；3.2.1.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-1%醋酸溶液（30：70）為流動(dòng)相；檢測波長為321nm。理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。流速：1.0ml/min；色譜柱規(guī)格：4.6×250mm；粒度：5m；進(jìn)樣量：10l。對(duì)照品溶液的制備 取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加70%甲醇制成每1ml含20g的溶液，即得。供試品溶液的制備 取本品粉末（過四號(hào)篩）約0. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清

17、液，濾過，取續(xù)濾液，即得。3.2.1.4含量測定3.2.1.5計(jì)算 式中f為對(duì)照品的濃度除以對(duì)照品峰面積得到的值的平均值；AT為對(duì)照品峰面積；單位v*sec ；n為供試品的稀釋倍數(shù)；WT為供試品的稱量；單位g。3.2.1.5將計(jì)算的結(jié)果填入下表表2 含量測定阿魏酸重復(fù)性試驗(yàn)表序號(hào)樣品稱量（g）含量（g/g）含量的平均值（g/g）RSD（%）10.50140.100.121670.619120.52260.1330.51730.1240.52660.1250.53250.1360.51480.12檢測人： 檢測日期：結(jié)果評(píng)價(jià)：檢查人： 復(fù)核人： 日期： 年 月 日3.2.2中間精密度（換一時(shí)間，

18、換一操作人員，設(shè)操作人員為B）在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測定結(jié)果之間的精密度稱為中間精密度；同一濃度，用6個(gè)測定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。3.2.2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-1%醋酸溶液（30：70）為流動(dòng)相；檢測波長為321nm。理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。流速：1.0ml/min；色譜柱規(guī)格：4.6×250mm；粒度：5m；進(jìn)樣量：10l。3.2.2.2對(duì)照品溶液的制備 取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加70%甲醇制成每1ml含20g的溶液，即得。3.2.2.3供試品溶液的制備 取本品粉末（過四號(hào)篩）約

19、0. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。3.2.2.4含量測定3.2.2.5計(jì)算公式：式中f為對(duì)照品的濃度除以對(duì)照品峰面積得到的值的平均值；AT為對(duì)照品峰面積；單位v*sec ；n為供試品的稀釋倍數(shù)；WT為供試品的稱量；單位g。表3： 含量測定阿魏酸甲中間精密度試驗(yàn)表序號(hào)樣品稱量（g）含量（g/g）含量的平均值（g/g）RSD（%）操作員A10.50140.11980.12000.007420.50140.120330.50140.119640.

20、50140.121150.50140.118660.50140.12070.12510.0255操作員B10.51730.120620.51730.125930.51730.123740.51730.130150.51730.123860.51730.1263檢測人： 檢測日期：結(jié)果評(píng)價(jià)：檢查人： 復(fù)核人： 日期： 年 月 日3.3線性及線性范圍線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與供試品中被測物嘗試直接呈正比關(guān)系的程度。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測定線性關(guān)系?？捎靡毁A備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試品的方法進(jìn)行測定，至少制備5個(gè)濃度的供應(yīng)品，以測得的響應(yīng)信號(hào)作為被測物嘗試的函數(shù)作圖，觀察是否

21、呈線性，再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。必要時(shí)，響應(yīng)信號(hào)可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行線性回歸計(jì)算。數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程，相關(guān)系數(shù)和線性圖。范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性、測試方法適用的高低限嘗試或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果及要求確定。3.3.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-1%醋酸溶液（30：70）為流動(dòng)相；檢測波長為321nm。理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。流速：1.0ml/min；色譜柱規(guī)格：4.6×250mm；粒度：5m；進(jìn)樣量：10l。對(duì)照品溶液的制備 取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，置棕色量瓶

22、中，加70%甲醇制成每1ml含20g的溶液，即得。供試品溶液的制備 取本品粉末（過四號(hào)篩）約0. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。3.3.4含量測定3.3.5計(jì)算公式：式中f為對(duì)照品的濃度除以對(duì)照品峰面積得到的值的平均值；AT為對(duì)照品峰面積；單位v*sec ；n為供試品的稀釋倍數(shù)；WT為供試品的稱量；單位g。表4 川芎阿魏酸不同濃度的峰面積濃度（mg/ml）0.0050.010.030.050.07峰面積（v*sec）回歸方程y=2943320

23、0x相關(guān)系數(shù)R2=0.9999檢測人： 檢測日期：結(jié)果評(píng)價(jià)：檢查人： 復(fù)核人： 日期： 年 月 日3.4耐用性耐用性系指在測定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測定結(jié)果不受影響的承受程度，為使方法用于常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。開始研究分析方法時(shí)，就應(yīng)考慮其耐用性。液相色譜法中典型的變動(dòng)因素有：不同廠牌或批號(hào)的色譜柱、固定相，不同類型的擔(dān)體，柱溫，進(jìn)樣口和檢測器溫度等。經(jīng)試驗(yàn)，應(yīng)說明小的變動(dòng)能否通過設(shè)計(jì)的系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，以確保方法有效。本試驗(yàn)以流動(dòng)相的組成比例、同一規(guī)格的色譜柱為變動(dòng)因素，得出測定結(jié)果不受影響的程度，為使方法用于常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。3.4.1對(duì)照品溶液的制備 取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加

24、70%甲醇制成每1ml含20g的溶液，即得。3.4.2供試品溶液的制備 取本品粉末（過四號(hào)篩）約0. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。3.4.3色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；1、以甲醇-1%醋酸溶液（30：70）為流動(dòng)相；檢測波長為321nm。理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。流速：1.0ml/min；色譜柱規(guī)格：4.6×250mm；粒度：5m；進(jìn)樣量：10l。2、以甲醇-1%醋酸溶液（35：65）為

25、流動(dòng)相；檢測波長為321nm。色譜柱規(guī)格：4.6×250mm；粒度：5m；進(jìn)樣量：10l。3.4.4測定將數(shù)據(jù)整理，填入下表。表4 含量測定耐用性試驗(yàn)表保留時(shí)間分離度理論板數(shù)色譜條件1色譜條件2檢測人： 檢測日期：結(jié)果評(píng)價(jià)：檢查人： 復(fù)核人： 日期： 年 月 日3.5專屬性專屬性是指在其他成分可能存在下，采用的方法能正確測定出被測 的特性，以不含被測成分的供試品（除去含待測成分藥材或不含待測成分的模擬復(fù)方）試驗(yàn)說明方法的專屬性。色譜法，光譜法等應(yīng)附代表性圖譜，并標(biāo)明相關(guān)成分在圖中的位置，色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。必要時(shí)可采用二極管陣列檢測和質(zhì)譜檢測，進(jìn)行峰純度檢查。3.5.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-1%醋酸溶液（30：70）為流動(dòng)相；檢測波長為321nm。理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。流速：1.0ml/min；色譜柱規(guī)