FHIT抑癌基因在乳腺癌組織中的表達(dá)缺失

1、FHIT抑癌基因在乳腺癌組織中的表達(dá)缺失作者：金春亭 李海軍 張林西 李玉珍 范婕 武欣 白美玲【摘要】 目的：探討FHIT基因蛋白在乳腺癌中的表達(dá)特點(diǎn)及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。方法：采用免疫組織化學(xué)SP法，檢測(cè)62例乳腺癌組織中FHIT蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果：乳腺癌組織中FHIT蛋白陽性表達(dá)率為54.84%，其表達(dá)缺失率為45.16%。FHIT蛋白在導(dǎo)管內(nèi)癌局部浸潤組的陰性表達(dá)率為30%，明顯低于浸潤性導(dǎo)管癌組（48.08%），但是沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；臨床期陰性表達(dá)率為38.30%，明顯低于期陰性表達(dá)率（66.67%）（P=0.055）。FHIT蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組表達(dá)缺失率為64.00%，顯著高

2、于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（32.43%）（P=0.014）。FHIT蛋白的表達(dá)缺失與患者年齡、癌的左右乳分布沒有顯著性差異。結(jié)論：乳腺癌組織中有FHIT蛋白的表達(dá)缺失，可能參與或促進(jìn)乳腺癌的形成。 【關(guān)鍵詞】 FHIT；乳腺癌；免疫組織化學(xué) 【ABSTRACT】 Objective: To investigate the expression characteristics of FHIT protein in breast carcinomas and its relationship with clinicopathological parameters. Methods: Expression

3、of FHIT protein in breast carcinoma tissues of 62 cases was detected by SP immunohistochemistry. Results: The positive rate of FHIT protein expression in breast carcinoma tissues was 54.84%, and about 45.16% cases lost FHIT expression. Negative rate of FHIT expression in early invasive ductal carcin

4、oma in situ group was obviously lower than that in invasive ductal carcinomas group (48.08%), but the difference wasnt significant. Also, loss of FHIT expression in stage was higher than that in stage (P=0.055). There was 64.00% breast carcinomas with lymph node metastasis lossing FHIT expression, t

5、he lossing rate was significantly higher than that in carcinomas without metastasis (P=0.014). FHIT expression had no relationship with patients age, distri bution of cancers in right or left breast. Conclusion: There was remarkable loss of FHIT protein expression in breast carcinomas. Loss of FHIT

6、expression may be involved in the carcinogenesis of breast or progression of breast carcinomas. 【KEY WORDS】 FHIT; Breast carcinoma; Immunohistochemistry 脆性組氨酸三聯(lián)體(Fragile histidine triad, FHIT)基因是位于染色體3p14.2上的一個(gè)候選抑癌基因，其改變主要見于上皮起源的人類惡性腫瘤。研究已發(fā)現(xiàn)FHIT基因在多種腫瘤15中均有改變且以缺失為主。為了明確FHIT蛋白表達(dá)缺失與乳腺癌患者的臨床病理參數(shù)的相關(guān)性及其可

7、能的預(yù)后，我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法對(duì)62例乳腺癌組織中FHIT蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行了檢測(cè)。 1 材料與方法 1.1 標(biāo)本來源 收集我院病理教研室2002.12004.4月乳腺癌術(shù)后送檢標(biāo)本62例，年齡2573歲，平均年齡50.89歲。臨床分期期16例，期31例，期10例，期5例。所有標(biāo)本均經(jīng)10%福爾馬林液固定，石蠟包埋，4連續(xù)切片，HE染色，資深病理學(xué)醫(yī)師重新光鏡下觀察確診。 1.2 免疫組織化學(xué)染色 采用SP法，主要步驟為：二甲苯脫蠟、梯度酒精脫水，3%雙氧水室溫處理10min，PBS緩沖液洗滌，專用微波爐進(jìn)行抗原修復(fù)，正常山羊血清37封閉、一抗4冰箱過夜，次日順序滴加二抗及三抗，DAB顯色

8、1015min，蘇木素復(fù)染胞核，脫水透明并用中性樹膠封片。同時(shí)以已知陽性切片作為陽性對(duì)照，用PBS代替一抗作陰性對(duì)照。所有試劑均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。光鏡下觀察切片，以胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒視為FHIT表達(dá)陽性細(xì)胞，以陽性細(xì)胞數(shù)所占比例>10%視為陽性表達(dá)。 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間比較采用2檢驗(yàn)。當(dāng)P<0.05時(shí)認(rèn)為差異具有顯著性。 2 結(jié)果 FHIT蛋白在乳腺癌細(xì)胞胞質(zhì)中表達(dá)，62例乳腺癌組織中有34例FHIT蛋白呈陽性表達(dá)，其陽性表達(dá)率為54.84%。但是在部分乳腺癌組織中呈陰性表達(dá)，其表達(dá)缺失率為45.16

9、%。FHIT蛋白在導(dǎo)管內(nèi)癌局部浸潤組的陰性表達(dá)率為30%，明顯低于浸潤性導(dǎo)管癌組（48.08%），但是沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；臨床期陰性表達(dá)率為38.30%，明顯低于期陰性表達(dá)率（66.67%）（P=0.055）。FHIT蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組表達(dá)缺失率為64.00%，顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（32.43%）（P=0.014）。FHIT蛋白的表達(dá)缺失與患者年齡、癌的左右乳分布沒有顯著性差異（P>0.05）（見表1）。2007年2月金春亭等：FHIT抑癌基因在乳腺癌組織中的表達(dá)缺失第1期2007年2月河北北方學(xué)院學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）第1期表1 FHIT基因的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 3 討論 199

10、6年Ohta等克隆了一種新的抑癌基因，cDNA序列長約1.1kb，此基因編碼的蛋白質(zhì)屬于三組氨酸家族(histidine triad family, HIT)，而且此基因易于斷裂，故命名為脆性組氨酸三聯(lián)體基因(fragile histidine triad, FHIT)，它定位于人類染色體3p14.2上。在正常情況下，F(xiàn)HIT基因表達(dá)于幾乎所有的正常人體組織，在人類組織中均有低水平的表達(dá)，以腎臟的表達(dá)水平最高6。它的作用主要為調(diào)控細(xì)胞周期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，其結(jié)構(gòu)和表達(dá)的異常見于包括乳腺癌在內(nèi)的多種類型腫瘤細(xì)胞株和原發(fā)癌組織7。脆弱位點(diǎn)發(fā)生斷裂，則會(huì)使包含脆弱位點(diǎn)的FHIT斷裂、失活，引起細(xì)胞基因

11、變異，最終會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的異常增生。 研究發(fā)現(xiàn)，人體多種腫瘤組織中FHIT蛋白表達(dá)存在頻繁地降低或丟失，與FHIT基因轉(zhuǎn)錄及缺失有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HIT蛋白陽性表達(dá)率為54.84%，與文獻(xiàn)1報(bào)道一致。說明有明顯的蛋白表達(dá)缺失。另有多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)約有50%的乳腺癌出現(xiàn)FHIT表達(dá)水平明顯降低8。FHIT基因表達(dá)缺失在從癌前病變至原位癌以至于浸潤癌的進(jìn)展過程中可能是一個(gè)重要步驟。本研究中FHIT蛋白在浸潤性導(dǎo)管癌組的陰性表達(dá)率（48.08%）高于導(dǎo)管內(nèi)癌局部浸潤組（30%），臨床期陰性表達(dá)率（66.67%）高于期陰性表達(dá)率（38.30%）。提示FHIT表達(dá)缺失可能發(fā)生在乳腺癌形成的早期，F(xiàn)HIT蛋白表

12、達(dá)缺失與乳腺癌的浸潤進(jìn)展有關(guān)9。 研究發(fā)現(xiàn)多種腫瘤組織中FHIT蛋白表達(dá)存在頻繁的降低或缺失，并與FHIT基因轉(zhuǎn)錄及缺失有關(guān)10，F(xiàn)HIT基因能降低或阻止種植在裸鼠的腫瘤細(xì)胞形成實(shí)體腫瘤11，提示FHIT基因?yàn)槎喾N腫瘤的候選抑制基因。本研究中FHIT蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組表達(dá)缺失率為64.00%，顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（32.43%），進(jìn)一步提示FHIT蛋白可能在乳腺癌的進(jìn)展和演化中起著重要的作用。FHIT在乳腺癌中的表達(dá)缺失與患者預(yù)后較差有關(guān)8。FHIT蛋白用免疫組化方法易于檢測(cè)，因此，它可能成為一種新的用于臨床監(jiān)測(cè)患者預(yù)后的分子指標(biāo)。 總之，F(xiàn)HIT蛋白在乳腺癌組織中表達(dá)缺失，可能參與乳腺癌

13、的早期形成及進(jìn)展，乳腺癌組織中FHIT蛋白表達(dá)水平的檢測(cè)對(duì)于乳腺癌患者的治療及估計(jì)預(yù)后具有一定的指導(dǎo)意義?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 1 Arun B, Kilic G, Yen C, et al. Loss of FHIT expression in breast cancer is correlated with poor prognostic markersJ. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2005,14(7):168116852 Nan KJ, Ruan ZP, Jing Z, et al. Expression of fragile histidine tr

14、iad in primary hepatocellular carcinoma and its relation with cell proliferation and apoptosisJ. World J Gastroenterol, 2005,11(2):2282313 Yuge T, Nibu K, Kondo K, et al. Loss of FHIT expression in squamous cell carcinoma and premalignant lesions of the larynxJ. Ann Otol Rhinol Laryngol, 2005,114(2)

15、:1271314 Zhao P, Liu W, Lu YL. Clinicopathological significance of FHIT protein expression in gastric adenocarcinoma patientsJ. World J Gastroenterol, 2005,11(36):573557385 Sarli L, Bottarelli L, Azzoni C, et al. Abnormal Fhit protein expression and high frequency of microsatellite instability in sp

16、oradic colorectal cancerJ. Eur J Cancer, 2004,40(10):158115886 Xiao GH, Jin F, KleinSzanto AJ, et al.The FHIT gene product is highly expressed in the cytoplasm of renal tubular epithelium and is downregulated in kidney cancersJ. Am J Pathol, 1997,151(6):154115477 Ohta M, Inoue H, Cotticelli MG, et a

17、l.The FHIT gene, spanning the chromosome 3p14.2 fragile site and renal carcinomaassociated t(3;8) breakpoint, is abnormal in digestive tract cancersJ. Cell, 1996,84(4):5875978 Ingvarsson S, Agnarsson BA, Sigbjornsdottir BI, et al. Reduced Fhit expression in sporadic and BRCA2linked breast carcinomasJ. Cancer Res, 1999,59(11):268226899 Guler G, Uner A, Guler N, et al.Concordant loss of fragile gene expression early in breast cancer developmentJ.