化學(xué)化工學(xué)院畢業(yè)論文模板

1、 （空1行）目(空四格)錄（黑體三號字加粗 居中）（空1行）（以下內(nèi)容行間距離1.5倍行距）摘 要（宋體四號字） 1（小四號）引 言（宋體四號字） 11 實驗部分（宋體四號字）31.1 儀器與試劑（宋體小四號字）31.2 實驗方法（宋體小四號字）32 結(jié)果與討論（宋體四號字）32.1 吸收光譜（宋體小四號字）32.2 測定條件的優(yōu)化（宋體小四號字）42.3 分析方法特性（宋體小四號字）62.4共存物質(zhì)影響（宋體小四號字）72.5樣品分析（宋體小四號字）73 結(jié) 論（宋體四號字）8參考文獻（宋體四號字）8致 謝（宋體四號字）11酶催化動力學(xué)光度法測定腎上腺素（宋體三號字加粗，居中，1.5倍行距）

2、（空兩格）摘 要(黑體小四)：本文基于腎上腺素對血紅蛋白酶催化體系的抑制作用，建立了酶催化動力學(xué)光度法測定腎上腺素的新方法。本實驗從酸度、顯色劑濃度、過氧化氫濃度及血紅蛋白濃度等方面研究了體系的最佳條件及動力學(xué)行為，測定的線性范圍為4.5×10-71.4×10-5mol/L，方法檢出限為5.2×10-8mol/L。對濃度為9.0×10-6mol/L的鹽酸腎上腺素進行11次平行測定相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.5%。此方法可用于藥物中腎上腺素含量的測定，結(jié)果令人滿意。(楷體小四號字不加粗，1.5倍行距)（空兩格）關(guān)鍵詞(黑體小四)：腎上腺素；酶催化動力學(xué)光度法；血紅蛋

3、白(楷體小四號字不加粗)(空一行)Determination of Adrenaline by Enzymatic Catalytic Spectrophotometry (Times New Roman四號加黑，首英文字母大寫，介詞除外)Abstract(Times New Roman小四加粗)：A high sensitive and simple spectrophotometric method for the determination of adrenaline based on the inhibition of hemoglobin for the oxidation of H

4、2O2 with acid chrome blue K was developedThe percentage inhibition (I %) of system is calculated under the optimal experimental conditionsThe calibration curve is linear in the range of 4.5×10-71.4×10-5mol/L with the detection limit of 5.2×10-8mol/L The relative standard deviation of

5、this method is 3.5% at 9.0×10-6mol/L for 11 determinationsThis method can be used for the determination of adrenaline in pharmaceuticals with satisfactory results(Times New Roman小四不加黑，1.5倍行距)Key Words(Times New Roman小四加黑)：Adrenaline；Enzymatic catalytic spectrophotometry；Hemoglobin (Times New Ro

6、man小四不加粗，1.5倍行距，首英文字母大寫)引 言(宋體四號加粗，頂格）（引言內(nèi)容宋體小四號不加粗，所引文獻標(biāo)號按序排列）腎上腺素(AD) 為兒茶酚胺類物質(zhì)(CAs)，是一類非常重要的生理學(xué)神經(jīng)遞質(zhì)。它通過心血管的調(diào)解、新陳代謝、內(nèi)臟運動等來維持人體內(nèi)部動態(tài)平衡和對急性和慢性壓力的反饋1,2。兒茶酚胺類物質(zhì)是腎上腺髓質(zhì)、腎上腺能神經(jīng)元及腎上腺外嗜鉻體等合成和分泌的，這類物質(zhì)及代謝物的分泌、代謝的測定在基礎(chǔ)研究及臨床醫(yī)學(xué)中有著重要意義，由于這類激素或神經(jīng)遞質(zhì)在生物體中的重要作用，促使人們不斷改進和探索分離和檢測這類物質(zhì)及其代謝物。腎上腺素是腎上腺髓質(zhì)分泌的激素，一方面，它可使心血管收縮，心腦

7、活動加強，血壓急劇上升；另一方面，它是促進分解代謝的重要激素，能加強肝糖原分解，迅速升高血糖，加強機體應(yīng)付意外情況的能力。此外，它還具有促進白質(zhì)、氨基酸及脂肪分解，增強氣體代謝，升高體溫等作用3。在制藥學(xué)上，腎上腺素被廣泛地用來治療精神失常4、急性過敏、哮喘、支氣管哮喘、心臟緩搏、心搏停止、青光眼和用作止血劑5。通過檢測人體腎上腺素及其代謝產(chǎn)物的濃度，為藥物分析及臨床提供參考，因此，探索快速、方便、靈敏檢測腎上腺素的方法具有重要意義。 目前國內(nèi)、外測定腎上腺素的方法很多，主要有高效液相色譜法 6,7 、熒光光度法8-10、電化學(xué)分析法11、毛細(xì)管電泳法12,13、化學(xué)發(fā)光分析法14、分光光度法

8、15等。目前檢測AD各種方法各有其特點，如熒光法重現(xiàn)性較好，但檢測靈敏度不能滿足臨床診斷的要求；高效液相色譜法，方法穩(wěn)定，重復(fù)性好，且取樣方便，能較全面反映機體交感神經(jīng)系統(tǒng)活性，缺點在于回收率太低；液相化學(xué)發(fā)光分析法不需要大量的檢測試劑，而且，可把探頭小型化使整臺儀器便于攜帶，但由于靈敏度的影響，只能用于藥劑檢測中2。很多方法在靈敏度、特異度和檢測速度等方面還不能非常好地滿足臨床疾病診斷的需要?？傊琀PLC法仍是目前最為先進快捷的AD臨床和實驗室檢測法，但價格昂貴、操作較為復(fù)雜。而不需通過HPLC分離的熒光檢測法是一種非常先進的分析手段，但它也存在小劑量需要提純、檢測限太高等不足2。在分光光

9、度法測定法中未見酶催化動力學(xué)法測定腎上腺素的相關(guān)報道。動力學(xué)是利用混合物中各組分反應(yīng)速率的差異，通過檢測與反應(yīng)物速率成比例關(guān)系的吸光度來計算待測物質(zhì)的濃度。相對于其它方法，此法具有靈敏度高、反應(yīng)選擇性好、設(shè)備簡單、操作方便的特點，易于推廣。血紅蛋白( Hb) 具有和天然生物酶辣根過氧化物酶(HRP) 相同的鐵卟啉輔基和相似的空間結(jié)構(gòu)，因而具備了過氧化物酶的特性，并且具有穩(wěn)定、價廉的優(yōu)點16。在堿性介質(zhì)中，血紅蛋白對過氧化氫氧化酸性鉻藍K具有強烈的催化作用，而腎上腺素對該體系具有一定的抑制作用。據(jù)此建立了測定腎上腺素的高靈敏度分析方法。本實驗通過研究腎上腺素對體系的抑程度來實現(xiàn)對腎上腺素含量的測

10、定。此方法可用于藥物中腎上腺素含量的測定，結(jié)果令人滿意。1 實驗部分（一級標(biāo)題宋體四號加粗，1.5倍行距，頂格）1.1 儀器與試劑（二級標(biāo)題宋體小四號加粗，1.5倍行距，頂格）S-22PC型分光光度計（上海棱光技術(shù)有限公司）；pHS-3C型酸度計（上海理達儀器廠）；電子分析天平（北京賽多利斯天平有限公司）牛血紅蛋白（生化試劑；上海伯奧生物科學(xué)有限公司）：準(zhǔn)確稱取牛血紅蛋白0.3401g，用水溶解成5×10-5mol/L的儲備液；工作液：儲備液用水稀釋為5.0× 10-6mol/L，現(xiàn)配現(xiàn)用。酸性鉻藍K（北京化學(xué)試劑廠）：準(zhǔn)確稱取0.0587g，用水稀釋成1.0×1

11、0-3mol/L的儲備液；工作液：用水稀釋成1.0×10-4mol/L的工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。鹽酸腎上腺素標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取0.0494g的鹽酸腎上腺素，用水稀釋成50mL得到濃度為4.5×10-4mol/L的儲備液；工作液：用水稀釋成4.5×10-4mol/L，待用。H2O2：量取7.0mL用水稀釋成1.0×10-1mol/L的儲備液；量取10mL稀釋用水稀釋成1.0×10-3mol/L的工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。緩沖溶液：按一定比例配制pH分別為9.1、9.5、9.8、10.1、10.4、10.7、11.0的緩沖溶液，以待使用。所用試劑均為分析純，水均

12、為去離子水。1.2 實驗方法（二級標(biāo)題宋體小四號加粗，1.5倍行距，頂格）在10mL比色管中依次加入2.0mL的NH3-NH4Cl緩沖溶液，濃度1.0×10-4mol/L的酸性鉻藍K溶液，1.0×10-3mol/L的H2O2溶液，不同濃度的鹽酸腎上腺素標(biāo)準(zhǔn)溶液，5.0×10-6mol/L的牛血紅蛋白，用水定容。在室溫下放置15分鐘后，用1cm吸收皿，以水作參比，在546nm處測量吸光度。以不加牛血紅蛋白和腎上腺素的試劑溶液為空白A0，不加腎上腺素的試劑溶液吸光度A1，加鹽酸腎上腺素的試劑溶液吸光度A2，其計算抑制率I%= A2-A1/A0-A1用所得抑制率對鹽酸腎

13、上腺素的濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線。2 結(jié)果與討論（一級標(biāo)題宋體四號加粗，1.5倍行距，頂格）2.1 吸收光譜（二級標(biāo)題宋體小四號加粗，1.5倍行距，頂格）如圖1所示，最大吸收波長均為546nm，加入血紅蛋白后試劑溶液吸光度明顯降低，而加入鹽酸腎上腺素后體系吸光度降低減少，表明鹽酸腎上腺素對血紅蛋白催化過氧化氫氧化酸性鉻藍K的體系有強烈抑制作用。圖 1 體系的吸收光譜（宋體五號不加粗，居中）1 空白：pH=9.8的NH3-NH4Cl + 2.0×10-5mol/L酸性鉻藍K + 1.0×10-4mol/LH2O22 空白 + 1.8×10-6mol/L血紅蛋白3 空白 + 9

14、.0×10-6mol/L鹽酸腎上腺素 + 1.8×10-6mol/L血紅蛋白2.2 測定條件的優(yōu)化（二級標(biāo)題宋體小四號加粗，1.5倍行距，頂格） 酸度條件的影響（三級標(biāo)題仿宋體小四號，1.5倍行距，頂格）溶液酸度對酶促反應(yīng)有很大的影響，所以NH3-NH4Cl緩沖溶液的pH要嚴(yán)格控制。按實驗方法實驗了不同pH的緩沖溶液（pH在9.1到11.0之間）時溶液的吸光度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著pH的升高，鹽酸腎上腺素對體系的抑制作用逐漸減小，如圖2所示。其中pH =9.1與pH=9.5時加入牛血紅蛋白溶液褪色不明顯，不利于對體系的測定，pH=9.8時褪色明顯且鹽酸腎上腺素對體系的抑制作用較大，

15、體系基本恒定，實驗中選擇pH=9.8的NH3-NH4Cl緩沖溶液作為反應(yīng)介質(zhì)。 顯色劑濃度的影響（三級標(biāo)題仿宋體小四號，1.5倍行距，頂格）顯色劑濃度的大小對體系有著較大的影響，本實驗的顯色劑為酸性鉻藍K，按實驗方法僅改變酸性鉻藍K的用量，研究其濃度對測定的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨酸性鉻藍K濃度的增加，I%先增大再減小，在酸性鉻藍K的濃度為2.0×10-5mo/L時I% 達最大值，如圖3所示。因此，實驗選擇顯色劑的濃度為2.0×10-5mol/L。圖 2 酸度的影響2.0mLNH3-NH4Cl +2.0×10-5mol/L酸性鉻藍K+1.0×10-4mol/LH

16、2O2+9.0×10-6mol/L鹽酸腎上腺素 + 1.8×10-6mol/L血紅蛋白圖 3 顯色劑濃度的影響（宋體五號不加粗，居中）pH=9.8的NH3-NH4Cl +酸性鉻藍K+1.0×10-4mol/LH2O2+9.0×10-6mol/L鹽酸腎上腺素 + 1.8×10-6mol/L血紅蛋白 H2O2濃度的影響（三級標(biāo)題仿宋體小四號，1.5倍行距，頂格）H2O2在體系中是氧化劑，其濃度直接影響到試劑溶液的褪色效果，濃度過大過小都會對實驗測定產(chǎn)生不利影響。按實驗方法加入不同濃度的H2O2溶液，發(fā)現(xiàn)其濃度為6.0×10-57.0

17、15;10-5mol/L時顯色劑褪色效果顯著，I%出現(xiàn)最大值且基本恒定。實驗選擇H2O2溶液的濃度為7.0×10-5mol/L。 血紅蛋白濃度的影響（三級標(biāo)題仿宋體小四號，1.5倍行距，頂格）圖 4 Hb濃度的影響（宋體五號不加粗，居中）pH=9.8的NH3-NH4Cl +2.0×10-5mol/L酸性鉻藍K+1.0×10-4mol/lLH2O2+9.0×10-6mol/ L鹽酸腎上腺素 + 1.8×10-6mol/L血紅蛋白Hb在體系中為酶催化劑，它使過氧化氫氧化酸性鉻藍K的體系活化，加速顯色劑褪色。按實驗方法加入不同濃度的血紅蛋白，如圖4所

18、示，隨Hb濃度的增加鹽酸腎上腺素對體系的抑制作用先增大再逐漸減小，在其濃度為1.0×10-6mol/L時抑制率達最大且基本恒定。實驗選擇Hb的濃度為1.0×10-6mol/L。2.3 分析方法特性（二級標(biāo)題宋體小四號加粗，1.5倍行距，頂格）在確定的最佳實驗條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，鹽酸腎上腺素的濃度（C）在4.5×10-71.4×10-5mol/L范圍內(nèi)對該體系的抑制率（I%）有較好的線性關(guān)系。其線性回歸方程為： r為線性相關(guān)系數(shù)，n為實驗次數(shù)。方法檢出限，經(jīng)3Sb/K經(jīng)驗公式計算為 5.2×10-8mol/L，其中Sb為空白的標(biāo)準(zhǔn)偏差，K為線性矯

19、正斜率。對濃度為9.0×10-6mol/L的鹽酸腎上腺素進行11次平行測定相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.5%，表明該方法具有較好的重現(xiàn)性和精密度。將本法與其它測定方法進行比較（見表1），可見本法具有較高的靈敏度。表1 腎上腺素不同測定方法的比較（宋體五號不加粗，居中）測定方法檢出限C/(mol/L)線性范圍C/(mol/L)文獻流動注射熒光分法1 ×10-62.7×10-65.4×10-511離子色譜熒光檢測法1.6×10-71.6×10-71.0×10-517流注射分光光度法檢測3.7×10-62.7×10-53.

20、7×10-418高效液相色譜法4.5×10-99.0×10-94.5×10-619電化學(xué)分析法3.6×10-85.0×10-71.0×10-420毛細(xì)管電泳法5.0×10-81.0×10-71.0×10-512化學(xué)發(fā)光分析法7.0×10-92.0×10-81.0×10-514酶催化動力學(xué)光度法5.22×10-84.5×10-71.35×10-5本法2.4 共存物質(zhì)影響（二級標(biāo)題宋體小四號加粗，1.5倍行距，頂格）實驗考察了多種離子和物質(zhì)

21、對9.0×10-6mol/L的鹽酸腎上腺素測定的影響，在相對誤差不大于±5%的條件時，如表2所示大多數(shù)離子和物質(zhì)對體系不干擾，只有少數(shù)離子存在一定程度的干擾，如Cu2+、Mg2+等，可以用EDTA作掩蔽劑，以消除干擾。表2 共存物質(zhì)的影響（宋體五號不加粗，居中）共存物質(zhì)及離子允許倍數(shù)Cl- 、 K+ 、NO3-、 CO32- 、抗壞血酸1000Na+800Ca2+600OH-500Cu2+ 、 Mg 2+12.5 樣品分析（二級標(biāo)題宋體小四號加粗，1.5倍行距，頂格）對鹽酸腎上腺素注射液樣品進行分析測定，分別將上海禾豐制藥有限公司（生產(chǎn)批號為070901）及天津金耀氨基酸公

22、司（生產(chǎn)批號為0706071）生產(chǎn)的鹽酸腎上腺素注射液用水稀釋10倍后按實驗方法進行測定。同時進行加標(biāo)回收實驗，結(jié)果見表3，從表中看出，回收率為：96.7%102.3%。表3 樣品分析結(jié)果(n=5) （宋體五號不加粗，居中）樣品加標(biāo)量/(10-6mol/L)測定值/(10-6mol/L)RSD/%回收率/ %01.053.610709010.901.923.8196.72.703.803.91101.900.900.1107060711.352.291.81102.33.604.412.3297.23 結(jié) 論 （一級標(biāo)題宋體四號加粗，1.5倍行距，頂格）本實驗通過研究腎上腺素對體系的抑程度來實

23、現(xiàn)對腎上腺素含量的測定，建立了測定腎上腺素的高靈敏度分析方法。在波長為546nm處對體系反應(yīng)條件進行優(yōu)化，體系實驗的最佳條件酸度為pH=9.8。顯色劑的濃度為2.0×10-5mol/L，H2O2的濃度為7.0×10-5mol/L，血紅蛋白的濃度為1.0×10-6mol/L。經(jīng)過實驗大部分離子或物質(zhì)對此體系不產(chǎn)生干擾或干擾很小，結(jié)果令人滿意。此方法可用于藥物中腎上腺素含量的測定，此法將會是又一快捷、方便測定腎上腺素的方法。參考文獻(宋體四號加粗居中）（具體參考文獻是：中文楷體五號字不加粗，英文Times New Roman五號不加粗。兩端對齊，行距1.5倍。參考文獻

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