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文檔簡介

1、本科實驗教學大綱一、課程基本信息課程名稱:生物分子基礎(chǔ)實驗I英文名稱:Biomolecular Basic Experiment Course-I課程號(代碼):501078040 (01/02)課程類別:校級公共課,基礎(chǔ)課,醫(yī)學必修課,實踐課學時:68 學分:4.0二、教學目的及要求醫(yī)學科學的發(fā)展是與組成醫(yī)學科學的各基礎(chǔ)學科的發(fā)展密不可分的?;A(chǔ)醫(yī)學的理論和技術(shù),為闡明疾病的發(fā)生和發(fā)展,尋找預防和治療疾病的有效途徑,提供相應的重要研究基礎(chǔ)。掌握和學習生物分子基礎(chǔ)實驗的實驗原理和實驗方法、實驗技能,可幫助學生更好地理解和掌握各基礎(chǔ)學科的基本知識和實驗操作技能。生物分子基礎(chǔ)實驗課程是醫(yī)學類的各專

2、業(yè)的基礎(chǔ)實驗課程,是一門實驗技術(shù)性課程,該課程主要面向全校醫(yī)學、生命科學及藥學、生物醫(yī)學工程等學科專業(yè)學生開設(shè)的基礎(chǔ)醫(yī)學公選課,是醫(yī)學各專業(yè)(預防醫(yī)學、臨床醫(yī)學、口腔醫(yī)學、基礎(chǔ)醫(yī)學、法醫(yī)學)學生的必修課,也是醫(yī)學留學生的必修課。生物分子基礎(chǔ)實驗課程內(nèi)容涉及醫(yī)學生物化學、醫(yī)學分子生物學、醫(yī)學免疫學等三門學科的實踐教學內(nèi)容,在學科上,涵蓋了細胞生物學、蛋白質(zhì)生物化學、分子生物學、結(jié)構(gòu)基因組學、功能基因組學、分子病毒學、免疫學等內(nèi)容。根據(jù)教學計劃和培養(yǎng)目標的要求,結(jié)合基礎(chǔ)醫(yī)學實驗教學的改革實際,我們編制了生物分子基礎(chǔ)實驗課程教學大綱。生物分子基礎(chǔ)實驗課程包括13個實驗教學內(nèi)容,課程的設(shè)置安排體現(xiàn)在實

3、驗操作技能及實驗安全意識培養(yǎng)的基礎(chǔ)內(nèi)容、學生綜合能力培養(yǎng)的綜合性實驗、創(chuàng)新能力培養(yǎng)的實驗設(shè)計討論課組成。學生通過課程教學內(nèi)容學習能夠達到實際運用和解決實際問題的能力、對實驗采用的原理、方法、步驟清晰明確、具備一定的創(chuàng)新能力,杜絕“飯來張口、衣來伸手”式的實驗學習方式。本課程實驗以生物分子類型(蛋白質(zhì)、基因及抗原、抗體等免疫分子)的實驗項目為主線,從蛋白質(zhì)的分離、純化以及抗原抗體反應、免疫分子復合物形成的實驗觀察入手,訓練學生的基本生物化學和醫(yī)學免疫學實驗技能,從基因克隆、重組與鑒定、表達等方面入手,訓練學生掌握分子生物學基本的實驗方法和實驗技能,使學生對分子生物學方法的應用和意義有具體而全面的

4、理解,在可能的情況下,同時提供多種實驗材料讓學生自行設(shè)計和準備實驗,培養(yǎng)其動手能力、獨立科研能力和科學、嚴謹、實事求是的學風以及認真負責、嚴肅有序的科學態(tài)度。三、教學內(nèi)容章節(jié)實驗名稱實驗內(nèi)容學時分配附注1實驗常用儀器設(shè)備原理操作、實驗室安全介紹1. 介紹實驗室規(guī)章制度;2. 實驗課程安排、實驗的基本要求;3. 實驗室的安全、衛(wèi)生要求*;4. 掌握常用實驗儀器設(shè)備的原理及操作*;5. 實驗報告的書寫要求*;6. 實驗室儀器參觀介紹。4*重點或*難點2激素對血糖濃度的影響1. 熟悉不同激素的作用,了解認識對升、降血糖的不同影響,以及血糖代謝的一些基本途徑;2. 掌握家兔實驗禁食時間、抽取血液樣品的

5、操作、注射激素等方法*;3. 掌握血糖的測定(吳憲-Foling法)*,本實驗的測定原理,影響測定的因素*,了解其它測定的方法;4. 掌握分光光度計操作、熟練運用濃度計算公式*。5*重點或*難點3血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素膜和聚丙烯酰胺凝膠電泳1. 掌握血清電泳的基本原理*;2. 掌握不同電泳介質(zhì)的電泳方法和操作*;3. 掌握血清樣品分離的蛋白質(zhì)染色*;4. 明確區(qū)分條帶的不同蛋白質(zhì)名稱及大致分子量*;5. 熟練聚丙烯酰胺凝膠電泳的制膠、點樣、染色、電泳過程*;6. 了解凝膠電泳的樣品稀釋液的作用。6*重點或*難點4免疫學實驗:沉淀反應和凝集反應1. 掌握沉淀反應和凝集反應原理*;2. 能夠區(qū)別沉淀

6、反應和凝集反應*;3. 掌握沉淀反應的雙向瓊脂擴散試驗、對流免疫電泳試驗過程及操作*;4. 掌握凝集反應的直接凝集反應、試管凝集反應;5. 熟練瓊脂糖凝膠鋪板、打孔操作*;6. 學會凝集效價的確定。5*重點或*難點5堿性磷酸酶AKP的分離純化及比活性與蛋白濃度測定1. 掌握蛋白質(zhì)提取的基本方法及操作*;2. 掌握酶的活性測定、蛋白質(zhì)濃度測定的方法及優(yōu)缺點*;3. 熟悉酶的總單位、蛋白質(zhì)總量及純化倍數(shù)、得率的計算*;4. 熟悉酶、蛋白質(zhì)的計算方法以及濃度公式的稀釋倍數(shù);5. 熟悉酶的提取條件、堿性磷酸酶的低溫提??;6. 熟悉配制有機溶劑濃度的計算;7. 掌握離心機的使用、分光光度計的使用*;6*

7、重點或*難點6AKP酶促反應動力學實驗(設(shè)計性實驗)1. 學生自主設(shè)計pH、溫度、底物濃度、抑制劑對酶促反應實驗*;2. 學生PPT講解所設(shè)計的實驗*;3. 根據(jù)設(shè)計操作實驗;4. 依據(jù)酶促反應繪制速度隨底物濃度的變化曲線、速度倒數(shù)與底物濃度倒數(shù)曲線*。6*重點或*難點7肝細胞染色體DNA提取1. 了解認識DNA提取的材料選擇,利用肝細胞提取的基本方法;2. 掌握核酸提取的基本步驟和方法,以及濃鹽法提取的實驗操作*;3. 掌握核酸的驗證方法(二本胺法)*;4. 熟悉核酸大分子的特征和實驗中所用化學試劑的使用原理*。5*重點或*難點8酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)1. 掌握ELISA實驗的基本原

8、理,以及測定的方法*;2. 掌握酶標儀的工作原理;3. 掌握實驗的操作步驟及每步操作的要領(lǐng)*;4. 熟悉包被、封閉、酶標記、酶標板*;5. 熟悉樣品結(jié)果的計算公式含義*;5*重點或*難點9DNA限制性內(nèi)切酶酶切酶譜分析1. 熟悉細菌等微生物的限制修飾系統(tǒng),限制酶的命名、種類;2. 掌握限制性內(nèi)切酶酶切體系及酶切條件與影響酶切反應的因素*;3. 熟悉酶切反應結(jié)果的檢測方法、Marker、條帶位置及分析*;4. 充分認識限制性內(nèi)切酶在實驗中的運用;5. 了解限制性內(nèi)切酶在基因工程和基因治療的應用;6*重點或*難點10質(zhì)粒DNA的提取1. 了解大腸桿菌培養(yǎng)、細菌的收集;2. 掌握不同提取質(zhì)粒DNA的

9、原理,小量提取質(zhì)粒DNA的實驗方法*;3. 掌握提取液溶液I、溶液II、溶液III的作用*;4. 充分認識操作中注意事項等因素對提取的影響*。5*重點或*難點11質(zhì)粒克隆DNA片段的PCR擴增1. 掌握PCR擴增的原理、反應體系、影響因素*;2. 熟悉PCR儀的工作原理、梯度PCR儀*;3. 熟悉擴增后產(chǎn)物的電泳檢測方法、步驟*;4. 熟悉PCR擴增的應用范圍。6*重點或*難點12學生實驗設(shè)計討論課(考核)1. 培養(yǎng)學生的自主學習能力和解決問題的能力、團隊協(xié)作的能力*;2. PPT講解、討論,提高學生在實驗動手操作基礎(chǔ)上的思辨能力和相互協(xié)作分析解決實際問題的能力*;3. 查閱和整理實驗原理、實

10、驗方法和實驗儀器與器材的資料、撰寫一份完整的實驗報告*;4. 設(shè)計的實驗運用范圍討論。5*重點或*難點13實驗理論考試及血清無機磷測定(實驗考試)1實驗理論閉卷考試,占考試成績50%*;2. 血清無機磷含量測定實驗報告書寫,20%*;3. 血清無機磷含量測定結(jié)果計算與表述(mg/dL),5%*;4. 實驗操作,主要包括移液、過濾、比色杯、分光光度計等過程或儀器操作,25%*;5. 本次實驗考試完全按照每個學期期末考試的規(guī)格和要求進行,實驗理論考試和血清無機磷測定的實驗報告均寫在答題紙上,除實驗操作每23人/組外,均獨立完成實驗理論考試和實驗報告撰寫。4*重點或*難點四、教 材1. 實驗指導書名

11、稱:生物化學與分子生物學實驗教程,主編:劉戟、曾凡才,出版單位:科學出版社,出版日期:2017年1月;2. 實驗參考書名稱:生物分子實驗教材第三版,主編:翟朝陽,楊魯川,出版單位:四川大學出版社,出版日期:2015年1月。五、主要參考資料1. 分子克隆實驗指南第二版,薩母布魯克(Sambrook, J.)著,黃培堂等譯,科學出版社, 2002;2. 現(xiàn)代分子生物學實驗技術(shù),中國協(xié)和醫(yī)科大學出版社(第二版),盧圣棟主編,1999;3. Current protocols in molecular Biology,Wiley Interscience, Ausudel FM, et al.,198

12、8。六、成績評定本課程為考核。成績評定(100分)由兩部分構(gòu)成,即平時成績(占70%)和考試成績(占30%)構(gòu)成。平時成績即每次實驗課程結(jié)束后,學生撰寫實驗報告成績,每次實驗課程的實驗報告以100分計算,生物分子基礎(chǔ)實驗I課程除第一次實驗儀器原理課程不撰寫實驗報告外,其余12次實驗課程每次實驗結(jié)束后,均要求撰寫一份書寫工整、格式規(guī)范、表達準確完整的實驗報告(最后一次實驗考試單獨作為考試成績計算),12次實驗課程的實驗報告平均分即為本課程平時成績(占期末成績70%);考試成績即實驗理論考試與實驗操作考試兩部分構(gòu)成(各占50%),以100分計算,實驗理論考試(閉卷)占50分,實驗操作考試(血清無機

13、磷測定的實驗操作與實驗報告)占50分,合計100分,并占期末成績30%,期末成績總分100分。15本科實驗教學大綱一、課程基本信息課程名稱:生物分子基礎(chǔ)實驗II英文名稱:Biomolecular Basic Experiment Course-II課程號(代碼):501079035 (02/04),501079035 (03/05)課程類別:校級公共課,基礎(chǔ)課,醫(yī)學必修課,實踐課學時:56 學分:3.5二、教學目的及要求醫(yī)學科學的發(fā)展是與組成醫(yī)學科學的各基礎(chǔ)學科的發(fā)展密不可分的?;A(chǔ)醫(yī)學的理論和技術(shù),為闡明疾病的發(fā)生和發(fā)展,尋找預防和治療疾病的有效途徑,提供相應的重要研究基礎(chǔ)。掌握和學習生物分

14、子基礎(chǔ)實驗的實驗原理和實驗方法、實驗技能,可幫助學生更好地理解和掌握各基礎(chǔ)學科的基本知識和實驗操作技能。生物分子基礎(chǔ)實驗課程是醫(yī)學類的各專業(yè)的基礎(chǔ)實驗課程,是一門實驗技術(shù)性課程,該課程主要面向全校醫(yī)學、生命科學及藥學、生物醫(yī)學工程等學科專業(yè)學生開設(shè)的基礎(chǔ)醫(yī)學公選課,是醫(yī)學各專業(yè)(預防醫(yī)學、臨床醫(yī)學、口腔醫(yī)學、基礎(chǔ)醫(yī)學、法醫(yī)學)學生的必修課,也是醫(yī)學留學生的必修課。生物分子基礎(chǔ)實驗課程內(nèi)容涉及醫(yī)學生物化學、醫(yī)學分子生物學、醫(yī)學免疫學等三門學科的實踐教學內(nèi)容,在學科上,涵蓋了細胞生物學、蛋白質(zhì)生物化學、分子生物學、結(jié)構(gòu)基因組學、功能基因組學、分子病毒學、免疫學等內(nèi)容。根據(jù)教學計劃和培養(yǎng)目標的要求,

15、結(jié)合基礎(chǔ)醫(yī)學實驗教學的改革實際,我們編制了生物分子基礎(chǔ)實驗課程教學大綱。生物分子基礎(chǔ)實驗課程包括11個實驗教學內(nèi)容,課程的設(shè)置安排體現(xiàn)在實驗操作技能及實驗安全意識培養(yǎng)的基礎(chǔ)內(nèi)容、學生綜合能力培養(yǎng)的綜合性實驗、創(chuàng)新能力培養(yǎng)的實驗設(shè)計討論課組成。學生通過課程教學內(nèi)容學習能夠達到實際運用和解決實際問題的能力、對實驗采用的原理、方法、步驟清晰明確、具備一定的創(chuàng)新能力,杜絕“飯來張口、衣來伸手”式的實驗學習方式。本課程實驗以生物分子類型(蛋白質(zhì)、基因及抗原、抗體等免疫分子)的實驗項目為主線,從蛋白質(zhì)的分離、純化以及抗原抗體反應、免疫分子復合物形成的實驗觀察入手,訓練學生的基本生物化學和醫(yī)學免疫學實驗技能

16、,從基因克隆、重組與鑒定、表達等方面入手,訓練學生掌握分子生物學基本的實驗方法和實驗技能,使學生對分子生物學方法的應用和意義有具體而全面的理解,在可能的情況下,同時提供多種實驗材料讓學生自行設(shè)計和準備實驗,培養(yǎng)其動手能力、獨立科研能力和科學、嚴謹、實事求是的學風以及認真負責、嚴肅有序的科學態(tài)度。三、教學內(nèi)容章節(jié)實驗名稱實驗內(nèi)容學時分配附注1實驗常用儀器設(shè)備原理操作、實驗室安全介紹1. 介紹實驗室規(guī)章制度;2. 實驗課程安排、實驗的基本要求;3. 實驗室的安全、衛(wèi)生要求*;4. 掌握常用實驗儀器設(shè)備的原理及操作*;5. 實驗報告的書寫要求*;6. 實驗室儀器參觀介紹。4*重點或*難點2激素對血糖

17、濃度的影響1 熟悉不同激素的作用,了解認識對升、降血糖的不同影響,以及血糖代謝的一些基本途徑;2 掌握家兔實驗禁食時間、抽取血液樣品的操作、注射激素等方法*;3 掌握血糖的測定(吳憲-Foling法)*,本實驗的測定原理,影響測定的因素*,了解其它測定的方法;4 掌握分光光度計操作、熟練運用濃度計算公式*。6*重點或*難點3血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素膜和聚丙烯酰胺凝膠電泳1. 掌握血清電泳的基本原理*;2. 掌握不同電泳介質(zhì)的電泳方法和操作*;3. 掌握血清樣品分離的蛋白質(zhì)染色*;4. 明確區(qū)分條帶的不同蛋白質(zhì)名稱及大致分子量*;5. 熟練聚丙烯酰胺凝膠電泳的制膠、點樣、染色、電泳過程*;6. 了解

18、凝膠電泳的樣品稀釋液的作用。6*重點或*難點4免疫學實驗:沉淀反應和凝集反應1. 掌握沉淀反應和凝集反應原理*;2. 能夠區(qū)別沉淀反應和凝集反應*;3. 掌握沉淀反應的雙向瓊脂擴散試驗、對流免疫電泳試驗過程及操作*;4. 掌握凝集反應的直接凝集反應、試管凝集反應;5. 熟練瓊脂糖凝膠鋪板、打孔操作*;6. 學會凝集效價的確定。5*重點或*難點5堿性磷酸酶AKP的分離純化及比活性與蛋白濃度測定1. 掌握蛋白質(zhì)提取的基本方法及操作*;2. 掌握酶的活性測定、蛋白質(zhì)濃度測定的方法及優(yōu)缺點*;3. 熟悉酶的總單位、蛋白質(zhì)總量及純化倍數(shù)、得率的計算*;4. 熟悉酶、蛋白質(zhì)的計算方法以及濃度公式的稀釋倍數(shù)

19、;5. 熟悉酶的提取條件、堿性磷酸酶的低溫提?。?. 熟悉配制有機溶劑濃度的計算;7. 掌握離心機的使用、分光光度計的使用*;6*重點或*難點6AKP酶促反應動力學實驗(設(shè)計性實驗)1. 學生自主設(shè)計pH、溫度、底物濃度、抑制劑對酶促反應實驗*;2. 學生PPT講解所設(shè)計的實驗*;3. 根據(jù)設(shè)計操作實驗;4. 依據(jù)酶促反應繪制速度隨底物濃度的變化曲線、速度倒數(shù)與底物濃度倒數(shù)曲線*。5*重點或*難點7肝細胞染色體DNA提取1. 了解認識DNA提取的材料選擇,利用肝細胞提取的基本方法;2. 掌握核酸提取的基本步驟和方法,以及濃鹽法提取的實驗操作*;3. 掌握核酸的驗證方法(二本胺法)*;4. 熟悉

20、核酸大分子的特征和實驗中所用化學試劑的使用原理*。5*重點或*難點8酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)1. 掌握ELISA實驗的基本原理,以及測定的方法*;2. 掌握酶標儀的工作原理;3. 掌握實驗的操作步驟及每步操作的要領(lǐng)*;4. 熟悉包被、封閉、酶標記、酶標板*;5. 熟悉樣品結(jié)果的計算公式含義*;5*重點或*難點9DNA限制性內(nèi)切酶酶切酶譜分析1. 熟悉細菌等微生物的限制修飾系統(tǒng),限制酶的命名、種類;2. 掌握限制性內(nèi)切酶酶切體系及酶切條件與影響酶切反應的因素*;3. 熟悉酶切反應結(jié)果的檢測方法、Marker、條帶位置及分析*;4. 充分認識限制性內(nèi)切酶在實驗中的運用;5. 了解限制性內(nèi)切酶

21、在基因工程和基因治療的應用;5*重點或*難點10學生實驗設(shè)計討論課(考核)1. 培養(yǎng)學生的自主學習能力和解決問題的能力、團隊協(xié)作的能力*;2. PPT講解、討論,提高學生在實驗動手操作基礎(chǔ)上的思辨能力和相互協(xié)作分析解決實際問題的能力*;3. 查閱和整理實驗原理、實驗方法和實驗儀器與器材的資料、撰寫一份完整的實驗報告*;4. 設(shè)計的實驗運用范圍討論。5*重點或*難點11實驗理論考試及血清無機磷測定(實驗考試)1實驗理論閉卷考試,占考試成績50%*;2. 血清無機磷含量測定實驗報告書寫,20%*;3. 血清無機磷含量測定結(jié)果計算與表述(mg/dL),5%*;4. 實驗操作,主要包括移液、過濾、比色

22、杯、分光光度計等過程或儀器操作,25%*;5. 本次實驗考試完全按照每個學期期末考試的規(guī)格和要求進行,實驗理論考試和血清無機磷測定的實驗報告均寫在答題紙上,除實驗操作每23人/組外,均獨立完成實驗理論考試和實驗報告撰寫。4*重點或*難點四、教材1. 實驗指導書名稱:生物化學與分子生物學實驗教程,主編:劉戟、曾凡才,出版單位:科學出版社,出版日期:2017年1月;2. 實驗參考書名稱:生物分子實驗教材第三版,主編:翟朝陽 楊魯川,出版單位:四川大學出版社,出版日期:2015年1月;五、主要參考資料1. 分子克隆實驗指南第二版,薩母布魯克(Sambrook, J.)著,黃培堂等譯,科學出版社, 2

23、002;2. 現(xiàn)代分子生物學實驗技術(shù),中國協(xié)和醫(yī)科大學出版社(第二版),盧圣棟主編,1999;3. Current protocols in molecular Biology,Wiley Interscience,Ausudel FM, et al.,1988。六、成績評定本課程為考核。成績評定(100分)由兩部分構(gòu)成,即平時成績(占70%)和考試成績(占30%)構(gòu)成。平時成績即每次實驗課程結(jié)束后,學生撰寫實驗報告成績,每次實驗課程的實驗報告以100分計算,生物分子基礎(chǔ)實驗I課程除第一次實驗儀器原理課程不撰寫實驗報告外,其余12次實驗課程每次實驗結(jié)束后,均要求撰寫一份書寫工整、格式規(guī)范、表達

24、準確完整的實驗報告(最后一次實驗考試單獨作為考試成績計算),12次實驗課程的實驗報告平均分即為本課程平時成績(占期末成績70&);考試成績即實驗理論考試與實驗操作考試兩部分構(gòu)成(各占50%),以100分計算,實驗理論考試(閉卷)占50分,實驗操作考試(血清無機磷測定的實驗操作與實驗報告)占50分,合計100分,并占期末成績30%,期末成績總分100分。本科實驗教學大綱一、課程基本信息課程名稱:生物分子基礎(chǔ)實驗III英文名稱:Biomolecular Basic Experiment Course-III課程號(代碼):501080030 (01/02)課程類別:校級公共課,基礎(chǔ)課,醫(yī)學必修課,

25、實踐課學時:48 學分:3.0二、教學目的及要求醫(yī)學科學的發(fā)展是與組成醫(yī)學科學的各基礎(chǔ)學科的發(fā)展密不可分的。基礎(chǔ)醫(yī)學的理論和技術(shù),為闡明疾病的發(fā)生和發(fā)展,尋找預防和治療疾病的有效途徑,提供相應的重要研究基礎(chǔ)。掌握和學習生物分子基礎(chǔ)實驗的實驗原理和實驗方法、實驗技能,可幫助學生更好地理解和掌握各基礎(chǔ)學科的基本知識和實驗操作技能。生物分子基礎(chǔ)實驗課程是醫(yī)學類的各專業(yè)的基礎(chǔ)實驗課程,是一門實驗技術(shù)性課程,該課程主要面向全校醫(yī)學、生命科學及藥學、生物醫(yī)學工程等學科專業(yè)學生開設(shè)的基礎(chǔ)醫(yī)學公選課,是醫(yī)學各專業(yè)(預防醫(yī)學、臨床醫(yī)學、口腔醫(yī)學、基礎(chǔ)醫(yī)學、法醫(yī)學)學生的必修課,也是醫(yī)學留學生的必修課。生物分子基

26、礎(chǔ)實驗課程內(nèi)容涉及醫(yī)學生物化學、醫(yī)學分子生物學、醫(yī)學免疫學等三門學科的實踐教學內(nèi)容,在學科上,涵蓋了細胞生物學、蛋白質(zhì)生物化學、分子生物學、結(jié)構(gòu)基因組學、功能基因組學、分子病毒學、免疫學等內(nèi)容。根據(jù)教學計劃和培養(yǎng)目標的要求,結(jié)合基礎(chǔ)醫(yī)學實驗教學的改革實際,我們編制了生物分子基礎(chǔ)實驗課程教學大綱。生物分子基礎(chǔ)實驗課程包括10個實驗教學內(nèi)容,課程的設(shè)置安排體現(xiàn)在實驗操作技能及實驗安全意識培養(yǎng)的基礎(chǔ)內(nèi)容、學生綜合能力培養(yǎng)的綜合性實驗、創(chuàng)新能力培養(yǎng)的實驗設(shè)計討論課組成。學生通過課程教學內(nèi)容學習能夠達到實際運用和解決實際問題的能力、對實驗采用的原理、方法、步驟清晰明確、具備一定的創(chuàng)新能力,杜絕“飯來張口

27、、衣來伸手”式的實驗學習方式。本課程實驗以生物分子類型(蛋白質(zhì)、基因及抗原、抗體等免疫分子)的實驗項目為主線,從蛋白質(zhì)的分離、純化以及抗原抗體反應、免疫分子復合物形成的實驗觀察入手,訓練學生的基本生物化學和醫(yī)學免疫學實驗技能,從基因克隆、重組與鑒定、表達等方面入手,訓練學生掌握分子生物學基本的實驗方法和實驗技能,使學生對分子生物學方法的應用和意義有具體而全面的理解,在可能的情況下,同時提供多種實驗材料讓學生自行設(shè)計和準備實驗,培養(yǎng)其動手能力、獨立科研能力和科學、嚴謹、實事求是的學風以及認真負責、嚴肅有序的科學態(tài)度。三、教學內(nèi)容章節(jié)實驗名稱實驗內(nèi)容學時分配附注1實驗常用儀器設(shè)備原理操作、實驗室安

28、全介紹1. 介紹實驗室規(guī)章制度;2. 實驗課程安排、實驗的基本要求;3. 實驗室的安全、衛(wèi)生要求*;4. 掌握常用實驗儀器設(shè)備的原理及操作*;5. 實驗報告的書寫要求*;6. 實驗室儀器參觀介紹。4*重點或*難點2激素對血糖濃度的影響5 熟悉不同激素的作用,了解認識對升、降血糖的不同影響,以及血糖代謝的一些基本途徑;6 掌握家兔實驗禁食時間、抽取血液樣品的操作、注射激素等方法*;7 掌握血糖的測定(吳憲-Foling法)*,本實驗的測定原理,影響測定的因素*,了解其它測定的方法;8 掌握分光光度計操作、熟練運用濃度計算公式*。5*重點或*難點3血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素膜和聚丙烯酰胺凝膠電泳1. 掌

29、握血清電泳的基本原理*;2. 掌握不同電泳介質(zhì)的電泳方法和操作*;3. 掌握血清樣品分離的蛋白質(zhì)染色*;4. 明確區(qū)分條帶的不同蛋白質(zhì)名稱及大致分子量*;5. 熟練聚丙烯酰胺凝膠電泳的制膠、點樣、染色、電泳過程*;6. 了解凝膠電泳的樣品稀釋液的作用。5*重點或*難點4免疫學實驗:沉淀反應和凝集反應1. 掌握沉淀反應和凝集反應原理*;2. 能夠區(qū)別沉淀反應和凝集反應*;3. 掌握沉淀反應的雙向瓊脂擴散試驗、對流免疫電泳試驗過程及操作*;4. 掌握凝集反應的直接凝集反應、試管凝集反應;5. 熟練瓊脂糖凝膠鋪板、打孔操作*;6. 學會凝集效價的確定。5*重點或*難點5堿性磷酸酶AKP的分離純化及比

30、活性與蛋白濃度測定1. 掌握蛋白質(zhì)提取的基本方法及操作*;2. 掌握酶的活性測定、蛋白質(zhì)濃度測定的方法及優(yōu)缺點*;3. 熟悉酶的總單位、蛋白質(zhì)總量及純化倍數(shù)、得率的計算*;4. 熟悉酶、蛋白質(zhì)的計算方法以及濃度公式的稀釋倍數(shù);5. 熟悉酶的提取條件、堿性磷酸酶的低溫提取;6. 熟悉配制有機溶劑濃度的計算;7. 掌握離心機的使用、分光光度計的使用*;5*重點或*難點6AKP酶促反應動力學實驗(設(shè)計性實驗)1. 學生自主設(shè)計pH、溫度、底物濃度、抑制劑對酶促反應實驗*;2. 學生PPT講解所設(shè)計的實驗*;3. 根據(jù)設(shè)計操作實驗;4. 依據(jù)酶促反應繪制速度隨底物濃度的變化曲線、速度倒數(shù)與底物濃度倒數(shù)

31、曲線*。5*重點或*難點7肝細胞染色體DNA提取1. 了解認識DNA提取的材料選擇,利用肝細胞提取的基本方法;2. 掌握核酸提取的基本步驟和方法,以及濃鹽法提取的實驗操作*;3. 掌握核酸的驗證方法(二本胺法)*;4. 熟悉核酸大分子的特征和實驗中所用化學試劑的使用原理*。5*重點或*難點8DNA限制性內(nèi)切酶酶切酶譜分析1. 熟悉細菌等微生物的限制修飾系統(tǒng),限制酶的命名、種類;2. 掌握限制性內(nèi)切酶酶切體系及酶切條件與影響酶切反應的因素*;3. 熟悉酶切反應結(jié)果的檢測方法、Marker、條帶位置及分析*;4. 充分認識限制性內(nèi)切酶在實驗中的運用;5. 了解限制性內(nèi)切酶在基因工程和基因治療的應用;5*重點或*難點9學生實驗設(shè)計討論課(考核)1. 培

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